本發(fā)明涉及一種保健食品的制備方法，尤其涉及一種靈芝破壁孢子粉的制備方法。
背景技術(shù)：
免疫力是機(jī)體自身的防御機(jī)制，是人體識(shí)別和消滅外來侵入的任何異物（病毒、細(xì)菌等），處理衰老、損傷、死亡、變性的自身細(xì)胞的能力。人體免疫系統(tǒng)功能主要表現(xiàn)為三個(gè)方面：1）防御功能：機(jī)體排斥外來抗原性異物，抵抗感染。當(dāng)防御功能過高時(shí)，會(huì)出現(xiàn)過敏反應(yīng)，過低則會(huì)患免疫缺陷癥；2）穩(wěn)定功能；機(jī)體免疫系統(tǒng)維持內(nèi)環(huán)境相對穩(wěn)定，及時(shí)清除體內(nèi)損傷、衰老、變性的血細(xì)胞和抗原—抗體復(fù)合物，而對自身成分保持免疫耐受；3）免疫監(jiān)視作用：機(jī)體免疫系統(tǒng)及時(shí)識(shí)別、清除體內(nèi)突變、畸變和病毒干擾細(xì)胞的一種生理保護(hù)作用。人體的免疫力大多取決于遺傳基因，但是外界環(huán)境如飲食、睡眠、運(yùn)動(dòng)、壓力等也會(huì)影響身體的免疫系統(tǒng)機(jī)能。免疫力低下的人易被細(xì)菌、病毒、真菌等微生物感染或易患疾病，因此提高免疫力能提高人類抵抗各種病毒、細(xì)菌的防疫能力，增強(qiáng)對各種疾病的自然治愈力。人體有許多免疫組織和器官，如胸腺、淋巴、脾臟、白細(xì)胞等來對抗侵入人體的病原。人體免疫力的高低受多種因素影響，其中營養(yǎng)因素起著十分重要的作用，它是維持人體正常免疫功能和健康的物質(zhì)基礎(chǔ)。機(jī)體營養(yǎng)不良將會(huì)導(dǎo)致免疫系統(tǒng)功能受損，使機(jī)體對病原的抵抗力下降，從而有利于感染的發(fā)生和發(fā)展。通過均衡營養(yǎng)來改善人體的免疫狀況，增強(qiáng)對疾病的抵抗能力，對預(yù)防疾病的發(fā)生有十分重要的意義。
現(xiàn)代社會(huì)發(fā)展迅速，人們生活工作壓力不斷增加，氣候環(huán)境等因素不斷惡化更加劇了人們免疫力的負(fù)擔(dān)。免疫力低下成為現(xiàn)下社會(huì)的一個(gè)普遍性問題。一份南京市不同職業(yè)人群健康狀況的調(diào)查顯示，南京市區(qū)18-60歲1987名對象中，免疫力低下者占42.98%，男性占22.04%，女性占20.94%。孟雪萍自行設(shè)計(jì)健康狀況調(diào)查問卷，對1191名高校教師進(jìn)行調(diào)查，其中符合WHO健康標(biāo)準(zhǔn)265人，占22.25%。免疫力低下828人，占69.52%，以31-50歲為高發(fā)年齡段，主要癥狀為注意力不集中、疲勞、頭痛或頭暈等。WHO一項(xiàng)全球性調(diào)查結(jié)果表明，全世界真正健康的人僅占5%，75%的人處于健康和患病之間的過度狀態(tài)。日本國立公共衛(wèi)生院最近在政府的支持下，進(jìn)行了一次有史以來規(guī)模最大的有關(guān)疲勞的專題調(diào)查研究，在5000余名15-65歲人士中，表示感到“非常疲勞”的竟高達(dá)60%，其中因工作量大，家務(wù)重、精神緊張的占44%，還有36%說不出原因。由此可見，免疫力低下已成為一個(gè)全球性的健康問題，提高免疫力刻不容緩。
現(xiàn)在人們的生活和工作壓力都很大，這種壓力會(huì)使人體產(chǎn)生一種抑制因子。這種抑制因子會(huì)直接影響到免疫細(xì)胞的正常工作，當(dāng)人體免疫功能失調(diào)，或者免疫系統(tǒng)不健全時(shí)，下列問題就會(huì)反復(fù)發(fā)作；感冒、扁桃體炎、哮喘、支氣管炎、肺炎、腹瀉等，所以千萬不可小覷。目前市場上已有多種增強(qiáng)免疫力的保健食品獲國家批準(zhǔn)，這些產(chǎn)品采用的原料既有枸杞子提取物、當(dāng)歸提取物、牛膝提取物、黃芪提取物等植物原料，也有維生素C、維生素B6、維生素B12、牛初乳粉、復(fù)合氨基酸粉、乳清蛋白、?；撬岬确侵参镌系?；產(chǎn)品劑型包括膠囊劑、片劑、顆粒劑、飲料等。雖然市場上銷售的劑型和原料種類繁多，但是隨著如今免疫力低下的人群逐年增加，現(xiàn)有的具有增強(qiáng)免疫力功能的保健食品遠(yuǎn)不能滿足免疫力低下人群的需求，因此增強(qiáng)免疫力的保健食品有很大的發(fā)展空間。
免疫系統(tǒng)的作用，主要是識(shí)別“非己”，排斥“非己”。它主要有三大功能：第一是防止病原微生物（細(xì)菌和病毒等）侵入機(jī)體，減少疾病的發(fā)生。第二是消滅機(jī)體內(nèi)的“異己分子”，醫(yī)學(xué)上稱為免疫監(jiān)視。第三是自穩(wěn)作用，能清除體內(nèi)的垃圾，保持體內(nèi)環(huán)境的清潔平衡。免疫力低下就會(huì)加重機(jī)體的消耗，所以一般有體重減輕，營養(yǎng)不良、精神萎靡、疲乏無力、食欲降低、睡眠障礙等表現(xiàn)。長此以往會(huì)導(dǎo)致身體和智力發(fā)育不良，易誘發(fā)重大疾病。因此提高免疫力十分重要。
靈芝被歷代醫(yī)家視為滋補(bǔ)強(qiáng)壯、扶正固本、延年益壽之珍品。靈芝中富含的活性成分具有多種免疫調(diào)節(jié)作用。靈芝孢子粉為靈芝子實(shí)體成長過程中散發(fā)的孢子聚集而成，與母體靈芝相比含有更多的活性物質(zhì)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的：提供一種靈芝破壁孢子粉的制備方法，以靈芝破壁孢子粉為原料，原料安全性高，功效確切，具有增強(qiáng)免疫力功能。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是：
一種靈芝破壁孢子粉的制備方法，該方法至少包括如下步驟：
步驟1：將靈芝破壁孢子粉過篩，得細(xì)粉，備用。
步驟2：按配方稱量靈芝破壁孢子粉細(xì)粉，待用。
步驟3：將靈芝破壁孢子粉細(xì)粉裝袋。
步驟4：將裝袋后的靈芝破壁孢子粉細(xì)粉外包裝。
步驟5：由質(zhì)檢員進(jìn)行成品檢驗(yàn)。
步驟6：檢驗(yàn)合格后入庫。
上述的靈芝破壁孢子粉的制備方法，其中，在所述的步驟1中，所述的靈芝破壁孢子粉過80目篩。
上述的靈芝破壁孢子粉的制備方法，其中，在所述的步驟3中，裝袋的靈芝破壁孢子粉細(xì)粉為1g/袋。
上述的靈芝破壁孢子粉的制備方法，其中，在所述的步驟1至步驟3中，靈芝破壁孢子粉在潔凈度為三十萬級(jí)的潔凈衛(wèi)生區(qū)內(nèi)制備。
本發(fā)明能有效提高服用者的免疫功能，適用于免疫力低下人群，生物利用度高，服用、攜帶方便，投入市場后潛力巨大，具有良好的市場前景。
附圖說明
圖1是本發(fā)明一種靈芝破壁孢子粉的制備方法的流程圖。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合附圖進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)施例。
請參見附圖1所示，一種靈芝破壁孢子粉的制備方法，該方法至少包括如下步驟：
步驟1：將靈芝破壁孢子粉過篩，得細(xì)粉，備用。
步驟2：按配方稱量靈芝破壁孢子粉細(xì)粉，待用。
步驟3：將靈芝破壁孢子粉細(xì)粉裝袋，內(nèi)包裝材料符合GB/T 21302包裝用復(fù)合膜、袋通則的規(guī)定。
步驟4：將裝袋后的靈芝破壁孢子粉細(xì)粉外包裝，外包裝材料符合 GB/T 6543運(yùn)輸包裝用單瓦楞紙箱和雙瓦楞紙箱的規(guī)定。
步驟5：由質(zhì)檢員進(jìn)行成品檢驗(yàn)。
步驟6：檢驗(yàn)合格后方可入庫。
在所述的步驟1中，所述的靈芝破壁孢子粉過80目篩。
在所述的步驟3中，裝袋的靈芝破壁孢子粉細(xì)粉為1g/袋。
在所述的步驟1至步驟3中，靈芝破壁孢子粉在潔凈度為三十萬級(jí)的潔凈衛(wèi)生區(qū)內(nèi)制備。
本發(fā)明標(biāo)志性成分為：粗多糖。以靈芝破壁孢子粉為原料，同時(shí)參考《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》中的“功效成分和特征成分檢測項(xiàng)目表”，故確定粗多糖為本發(fā)明的標(biāo)志性成分。
本發(fā)明選用粉劑作為產(chǎn)品劑型。本發(fā)明以靈芝破壁孢子粉為原料，因原料為固體粉末，故宜制成固體制劑。其中粉劑工藝較簡單，易生產(chǎn)，成本低，劑量容易控制，運(yùn)輸攜帶方便。因此，選用粉劑作為本發(fā)明的劑型。
靈芝孢子是靈芝（Ganoderma lucidum karst.）的生殖細(xì)胞，它濃縮聚集有靈芝的全部生物活性成分，靈芝孢子含有大量的有機(jī)鍺、多糖和三萜類，這3種天然營養(yǎng)素已被證實(shí)能有效地增強(qiáng)人體免疫能力和調(diào)節(jié)身體各部分機(jī)能，具有抑制腫瘤、抗病毒、保腎護(hù)肝、降糖降脂和延緩衰老等功效。靈芝在《本草綱目》中列為上品，其子實(shí)體、菌絲、孢子均可食用。靈芝孢子有兩層耐酸耐堿的堅(jiān)硬壁狀結(jié)構(gòu)，經(jīng)過破壁的靈芝孢子更利于人體的吸收利用。現(xiàn)代研究證實(shí)，破壁靈芝孢子粉對機(jī)體免疫功能具有良好的調(diào)節(jié)作用。
靈芝破壁孢子粉對小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究：實(shí)驗(yàn)選用健康昆明種雄性小鼠240只，體重18-22g，分為6大組，每大組40只，第1、2大組小鼠進(jìn)行細(xì)胞免疫功能檢測，包括ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)；第3大組，進(jìn)行體液免疫功能檢測，包括抗體生成細(xì)胞數(shù)測定和血清溶血素測定；第4、5大組進(jìn)行巨噬細(xì)胞吞噬功能測定，包括腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和碳廓清實(shí)驗(yàn)；第6大組進(jìn)行NK細(xì)胞活性測定。根據(jù)人口服推薦用量，每大組小鼠均設(shè)高、中、低劑量組，劑量分別為600、300、150mg/kg?BW(相當(dāng)于人體推薦量的20、10、5倍)，另設(shè)一個(gè)陰性對照組，每個(gè)劑量組10只動(dòng)物。以蒸餾水為溶劑將樣品配制成30.0、15.0、7.5mg/ml濃度溶液，按0.2ml/10g?BW 的體積給予相應(yīng)劑量組動(dòng)物灌胃，陰性對照組予以等體積的蒸餾水，每天灌胃1次，連續(xù)灌胃30天。觀察受試物對小鼠細(xì)胞免疫、體液免疫、巨噬細(xì)胞等功能的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：各劑量組小鼠的脾淋巴細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)化能力明顯高于陰性對照組，且差異顯著（p<0.01或p<0.05），表明該受試物具有促進(jìn)小鼠的淋巴細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)化的作用；高、低劑量組小鼠的左右耳片重量差值明顯高于陰性對照組，且差異顯著（p<0.01或p<0.05），表明該受試物具有促進(jìn)小鼠的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的作用；高、中劑量組小鼠的溶血空斑數(shù)明顯高于陰性對照組，且差異顯著（p<0.01或p<0.05）,表明該受試物具有促進(jìn)小鼠的抗體生成細(xì)胞增殖的作用；高劑量組抗體積數(shù)明顯高于陰性對照組，且差異顯著（p<0.05），表明該受試物具有提高小鼠血清溶血素水平的作用；各劑量組小鼠的腹腔巨噬細(xì)胞對雞紅細(xì)胞的吞噬指數(shù)均顯著大于陰性對照組，且差異顯著（p<0.05），表明該受試物可以增強(qiáng)小鼠的腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能；各劑量組小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn)的吞噬指數(shù)均顯著大于陰性對照組，且差異顯著（p<0.01），表明該受試物具有促進(jìn)小鼠的單核-巨噬細(xì)胞碳廓清功能的作用。上述結(jié)果表明，靈芝破壁孢子粉對小鼠的細(xì)胞免疫功能、體液免疫功能和巨噬細(xì)胞的吞噬功能都有明顯的促進(jìn)作用。提示：靈芝破壁孢子粉具有增強(qiáng)免疫力的功能。
靈芝破壁孢子粉對小鼠免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究：實(shí)驗(yàn)選用清潔級(jí)小白鼠，雄性，隨機(jī)分為4組，設(shè)3個(gè)劑量組，即低、中、高（0.25、0.5和1.5g/kg）劑量組；同時(shí)設(shè)蒸餾水對照組。各組動(dòng)物經(jīng)口灌胃1次/天，連續(xù)進(jìn)行30天。進(jìn)行血清血溶素測定、抗體生成細(xì)胞檢測、遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)、脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)、碳廓清實(shí)驗(yàn)、巨噬細(xì)胞吞噬能力測定、NK細(xì)胞活性測定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：中、高劑量組溶血空斑數(shù)和抗體積數(shù)均顯著高于蒸餾水對照組，且差異顯著（p<0.05）；中、高劑量組ConA誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖能力明顯高于蒸餾水對照組，且差異顯著（p<0.05）；高劑量組小鼠的耳腫脹度明顯高于蒸餾水對照組，且差異顯著（p<0.05）；中、高劑量組與蒸餾水對照組相比，碳廓清能力明顯增強(qiáng)，且差異顯著（p<0.05）；中、高劑量組與蒸餾水對照組相比，巨噬細(xì)胞吞噬率和吞噬指數(shù)均顯著升高，且差異顯著（p<0.05）；中、高劑量組與蒸餾水對照組相比，NK細(xì)胞活性也明顯增強(qiáng)，且差異顯著（p<0.05）。上述結(jié)果表明，靈芝破壁孢子粉對小鼠的體液免疫功能、細(xì)胞免疫功能、巨噬細(xì)胞的吞噬功能和NK細(xì)胞活性都有明顯的促進(jìn)作用。提示：靈芝破壁孢子粉具有增強(qiáng)免疫力功能。
靈芝破壁孢子粉對小鼠免疫功能影響的研究：實(shí)驗(yàn)取健康雄性小鼠40只，體重18-22g，將小鼠按體重隨機(jī)分為低、中、高（33.3、333.3、1000mg/kg?bw）3個(gè)劑量組和1個(gè)對照組，每組10只，每日經(jīng)口灌胃，灌胃容積為20ml/kg?bw，對照組灌雙蒸水，連續(xù)進(jìn)行15天。進(jìn)行遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)、血清溶血素測定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：各劑量組小鼠耳廓腫脹度明顯大于對照組，中、高劑量組有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p<0.01）；各劑量組小鼠的血清半數(shù)溶血值均高于對照組，中、高劑量組有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p<0.05，p<0.01）。以上結(jié)果表明，靈芝破壁孢子粉具有提高機(jī)體免疫力的作用。
靈芝破壁孢子粉對小鼠免疫功能影響的研究：實(shí)驗(yàn)選取清潔級(jí)雌性小鼠，體重18-22g，分為6個(gè)劑量組（83、167、250、333、500、1500mg/kg）和一個(gè)對照組，連續(xù)灌胃30天，進(jìn)行增強(qiáng)免疫力相關(guān)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示；與對照組相比，167、250、333、500、1500mg/kg劑量組均能提高脾淋巴細(xì)胞的增殖能力和小鼠左后足趾部厚度差值，且差異顯著（p<0.05）；與對照組相比，250mg/kg 劑量組能顯著提高小鼠血清溶血素抗體積數(shù)值，且差異顯著（p<0.05）；與對照組相比，167、250、333、500、1500mg/kg劑量組均能提高小鼠溶血空斑數(shù)，且差異顯著（p<0.05）；與對照組相比，500mg/kg 劑量組能提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的吞噬率，且差異顯著（p<0.05）；與對照組相比，250、333、500、1500mg/kg劑量組均能提高NK細(xì)胞活性，且差異顯著（p<0.05）。以上結(jié)果表明，靈芝破壁孢子粉具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力作用。
對增強(qiáng)免疫力的破壁靈芝孢子粉保健膠囊（以靈芝為主要原料，輔以維生素C的保健食品）進(jìn)行試驗(yàn)評價(jià)，選用SPF級(jí)雄性Balb/c小鼠，進(jìn)行增強(qiáng)免疫力功能評價(jià)實(shí)驗(yàn)。試驗(yàn)設(shè)333mg/（kg?bw）、667 mg/（kg?bw）、1000 mg/（kg?bw）組（分別相當(dāng)于人體推薦量的10,20,30倍）及對照組，進(jìn)行增強(qiáng)免疫力相關(guān)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：對小鼠體重的影響，三個(gè)劑量組中期體重和結(jié)束體重與對照組比較，均無顯著性差異（p＞0.05）；對小鼠臟器/體重比值的影響，各劑量分別與對照組相比，其脾臟/體重比值、胸腺/體重比均無顯著差異（p＞0.05）；對小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（DTH）的影響，高劑量組足跖腫脹度高于對照組有顯著差異（p＜0.05）；ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)（MTT法）中，中、高劑量組光密度差值高于對照組有顯著差異（p＜0.01）；對小鼠抗體生成細(xì)胞的影響，高劑量組與對照組相比，其抗體生成細(xì)胞數(shù)增多有顯著性差異（p＜0.01）；對小鼠NK細(xì)胞活性的影響，中、高劑量組分別與對照組相比，其NK細(xì)胞活性率顯著提高均有顯著性差異（p＜0.01）。據(jù)以上結(jié)果可知破壁靈芝孢子粉保健膠囊具有增強(qiáng)免疫力的功效。提示靈芝破壁孢子粉具有增強(qiáng)免疫力的功能。
綜上所述，靈芝破壁孢子粉能夠通過增強(qiáng)體液免疫功能、細(xì)胞免疫功能、巨噬細(xì)胞的吞噬功能和NK細(xì)胞活性來提高機(jī)體免疫力。靈芝在《可用于保健食品的真菌菌種名單》中，藥典規(guī)定靈芝的用量為6-12g/d，本產(chǎn)品靈芝破壁孢子粉推薦日服用量是2g，是安全有效服用劑量。
綜上所述，本發(fā)明能有效提高服用者的免疫功能，適用于免疫力低下人群，生物利用度高，服用、攜帶方便，投入市場后潛力巨大，具有良好的市場前景。
以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，并非因此限制本發(fā)明的專利范圍，凡是利用本發(fā)明說明書內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)變換，或直接或間接運(yùn)用附屬在其他相關(guān)產(chǎn)品的技術(shù)領(lǐng)域，均同理包括在本發(fā)明的專利保護(hù)范圍內(nèi)。