本發(fā)明屬于生物飼料技術(shù)領(lǐng)域,涉及一種用于動(dòng)物疾病預(yù)防和治療的特異性卵黃抗體制劑配方及制備方法。
背景技術(shù):
由于抗生素的使用而導(dǎo)致的藥物殘留,已成為制約我國(guó)水產(chǎn)產(chǎn)品國(guó)際市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力的一個(gè)主要問題。IgY(卵黃抗體)具有無毒、無殘留、不產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn),發(fā)展前景備受矚目。此外IgY制備成本低、產(chǎn)出率高、提純簡(jiǎn)便快捷,并具有耐熱、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),已經(jīng)被廣泛地制成產(chǎn)品來進(jìn)行動(dòng)物疾病的預(yù)防和治療。例如用制成的IgY制劑來喂食海參,防治海參腐皮綜合征等。
當(dāng)前的IgY產(chǎn)品大都為凍干粉或片狀、膏狀制劑,但是凍干粉以及片狀、膏狀制劑的制備工藝復(fù)雜,成本較高,而且有效成分在制備提純的過程中會(huì)有較大損失?;谝陨峡紤],我們直接將含特異性卵黃抗體的特異性帶殼全蛋與超微粉碎的沸石粉結(jié)合,制成飼料添加劑,不但解決了有效成分損失的問題而且制備工藝大為簡(jiǎn)化,節(jié)約大量能源,生產(chǎn)成本大為降低。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
發(fā)明人從節(jié)約成本出發(fā),認(rèn)真考慮了特性性卵黃抗體的提純制備方法,并從中吸取寶貴的經(jīng)驗(yàn),利用超微粉碎的沸石粉與特異性帶殼全蛋直接混合的方法,使產(chǎn)品不但在功能上完全滿足要求,而且節(jié)省了卵黃抗體提純過程中需要消耗的大量能量,降低了生產(chǎn)成本。
本發(fā)明所述的一種特異性卵黃抗體制劑,按照質(zhì)量比,由下述組分組成:
所述的超微粉碎沸石粉在超微粉碎時(shí),使用的助劑為碳酸鈉或碳酸氫鈉,助劑用量為1%-8%(w/w),超微粉碎時(shí)間為3min-15min。
特異性帶殼全蛋和超微粉碎沸石粉的質(zhì)量配比為1:4-3:1。
所述的一種特異性卵黃抗體制劑的制備方法,包括如下步驟:(1)將沸石粉粉超微粉碎后,過60-200目篩子備用;
(2)將高免蛋清洗后,帶殼打入容器中,攪拌;
(3)將特異性帶殼全蛋液攪拌到體積膨脹,顏色變淺,呈濃稠狀;(4)添加山梨酸鉀、丙酸鈣,攪拌均勻;
(5)將過篩后的沸石粉載體加入蛋黃液中,攪拌至均勻,形成軟硬適中的團(tuán)狀固體;
(6)用制粒機(jī)制成軟顆粒;
(7)室溫下晾干;
(8)二次粉碎過篩;
(9)制成飼料添加劑。
與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果在于:
本發(fā)明從IgY發(fā)揮最佳效果以及節(jié)約能源降低成本的目的出發(fā),改變了傳統(tǒng)的制備IgY產(chǎn)品的方法,不再將IgY制成凍干粉或者提純以后當(dāng)做飼料添加劑加入到飼料當(dāng)中。而是直接將含有富含特異性IgY的特異性帶殼全蛋液與超微粉碎的沸石粉進(jìn)行混合加工,這樣不但減少了在分離、提純以及凍干過程中IgY的損失,而且還簡(jiǎn)化了生產(chǎn)工藝,本產(chǎn)品很重要的一點(diǎn)就是,天然的沸石粉載體解決了以往卵黃抗體生產(chǎn)提純過程中需要大量消耗能源的難題,極大的降低了成本。
表1 各種方法生產(chǎn)IgY制劑綜合比較
從表1可以看出,在不考慮人工成本及設(shè)備折舊等因素的情況下,本方法前期投入的設(shè)備成本最低,單位能耗降到了原來的1/5甚至更多,節(jié)能效果顯著,而且生產(chǎn)過程簡(jiǎn)單,生產(chǎn)方式靈活,制約因素較少,具有很強(qiáng)的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。
附圖說明
圖1是低成本生產(chǎn)特異性卵黃抗體制劑的流程圖;
圖2是普通沸石粉掃描電鏡照片;
圖3是超微粉碎沸石粉掃描電鏡照片;
圖4是標(biāo)準(zhǔn)IgY曲線;
圖5是不同時(shí)期IgY制劑的吸光值。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合技術(shù)方案詳細(xì)敘述本發(fā)明的具體實(shí)施例。
實(shí)施例1
將沸石粉粗粉進(jìn)行超微粉碎,超微粉碎時(shí)加入助劑,使用的助劑為碳酸鈉,助劑用量為5%(w/w),粉碎時(shí)間10min。
通過掃描電鏡照片進(jìn)行對(duì)比,可以發(fā)現(xiàn)沸石粉經(jīng)過超微粉碎后,其表面孔隙更多,表面積變得更大,相應(yīng)的其結(jié)合吸附能力更強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)表明,相對(duì)于普通沸石粉,采用超微粉碎處理后的沸石粉載體吸附能力可增加30%-90%。
實(shí)施例2
將沸石粉經(jīng)過超微粉碎處理后,過100目篩子,稱取300g備用;將經(jīng)過注射滅活黃海希瓦氏菌免疫后的高免蛋,去殼,取200g打入容器中,攪拌;將蛋黃液攪拌到體積膨脹,顏色變淺,呈濃稠狀;添加0.5g山梨酸鉀、1.5g丙酸鈣,攪拌均勻;將過篩后的沸石粉加入到特異性帶殼全蛋液中,攪拌至均勻,形成軟硬度適中的團(tuán)塊狀固體;然后用制粒機(jī)制成直徑3mm軟顆粒;室溫下晾干;用粉碎機(jī)粉碎后過100目篩子,包裝;制成飼料添加劑。
實(shí)施例3
將沸石粉經(jīng)過超微粉碎處理后,過60目篩子,稱取500g備用;將經(jīng)過注射滅活燦爛弧菌免疫后的高免蛋,去殼,取350g打入容器中,攪拌;將帶殼全蛋液攪拌到體積膨脹,顏色變淺,呈濃稠狀;添加1.5g山梨酸鉀、4.5g丙酸鈣,攪拌均勻;將過篩后的沸石粉加入到帶殼全蛋液中,攪拌至均勻,形成軟硬度適中的團(tuán)塊狀固體;然后用制粒機(jī)制成直徑3mm軟顆粒;室溫下晾干;用粉碎機(jī)粉碎后過100目篩子,包裝;制成飼料添加劑。
實(shí)施例4
IgY含量檢測(cè)
稱取制得的IgY制劑1g,加30ml包被液,超聲波震蕩15min,稀釋100倍后,每孔加100ul包被96孔酶標(biāo)板,4℃過夜。用洗滌液洗滌酶標(biāo)板3次,每孔加100ul封閉液,37℃溫育2h后甩干、洗滌3次,再向各孔加兔抗雞IgG-HRP100ul,37℃反應(yīng)lh;洗滌液洗滌各孔5次,每孔加100ul TMB底物緩沖液,室溫下顯色20min,每孔加50ul 2M硫酸終止反應(yīng),用酶標(biāo)儀測(cè)OD450/630nm。然后與標(biāo)準(zhǔn)IgY曲線對(duì)比,算出不同時(shí)期樣品里的特異性IgY含量。
由圖4可以看出,本產(chǎn)品在半年內(nèi)特異性IgY含量并無明顯降低并維持在較高的狀態(tài),說明本產(chǎn)品可在較長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)持續(xù)有效。