本發(fā)明涉及益生菌，尤其是涉及一種能增加腸道內有益菌的比例并能增強人體免疫力的用于調節(jié)腸道菌群及增強免疫力的乳酸菌組合物及其制備方法。
背景技術：
人體的健康與腸道內的益生菌群結構息息相關。腸道菌群在長期的進化過程中，通過個體的適應和自然選擇，菌群中不同種類之間，菌群與宿主之間，菌群、宿主與環(huán)境之間，始終處于動態(tài)平衡狀態(tài)中，形成一個互相依存，相互制約的系統(tǒng)，因此，人體在正常情況下，菌群結構相對穩(wěn)定，對宿主表現(xiàn)為不致病。有研究指出，體魄強健的人腸道內有益菌的比例達到70％，普通人則是25％，便秘人群減少到15％，而癌癥病人腸道內的益生菌的比例只有10％。腸道益生菌群是腸道防御屏障的重要組成部分，益生菌群對人的健康十分重要。但是，由于機體衰老、環(huán)境污染、飲食改變、濫用抗生素等原因，往往使人體腸道微生態(tài)系統(tǒng)受到破壞，引起腸道菌群失調，嚴重影響身體的免疫系統(tǒng)機能，造成免疫功能低下，導致菌群易位，誘發(fā)內源感染，造成機體病變，從而引發(fā)多種疾病，如肝硬化、膽結石、動脈硬化、冠心病、心肌梗塞、腦動脈硬化、腦中風等。
技術實現(xiàn)要素：
為克服現(xiàn)有技術的缺點，本發(fā)明目的在于提供一種能增加腸道內有益菌的比例并能增強人體免疫力的用于調節(jié)腸道菌群及增強免疫力的乳酸菌組合物及其制備方法。
本發(fā)明通過以下技術措施實現(xiàn)的，一種用于調節(jié)腸道菌群及增強免疫力的乳酸菌組合物，包括乳酸菌組合核，所述乳酸菌組合核外包裹有包被層；所述包被層包括重量份數的成份：低聚異麥芽糖30～50、蛋白物質30～50、硝酸纖維素5～10、有機酸根稀土鹽0.5～1；所述乳酸菌組合核由如下重量份數的菌株組成：乳雙歧桿菌30～40、羅伊氏乳桿菌20～30、鼠李糖乳桿菌10～20、嬰兒雙歧桿菌10～20。
作為一種優(yōu)選方式，所述乳酸菌組合物中乳雙歧桿菌的含量為107～109cuf/g、羅伊氏乳桿菌的含量為106～108cuf/g、鼠李糖乳桿菌的含量為106～107cuf/g、嬰兒雙歧桿菌的含量為106～107cuf/g。
作為一種優(yōu)選方式，所述乳酸菌組合核中乳雙歧桿菌、羅伊氏乳桿菌、鼠李糖乳桿菌和嬰兒雙歧桿菌分別經過耐豬膽鹽、耐酸篩選的，能耐0.3％的豬膽鹽及pH為2.5的酸性環(huán)境。
作為一種優(yōu)選方式，所述羅伊氏乳桿菌為GL-104菌株，中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏號M209138。
作為一種優(yōu)選方式，所述蛋白物質為酪蛋白和乳鐵蛋白層，其中酪蛋白和乳鐵蛋白的重量比為1-5：1-5。
作為一種優(yōu)選方式，所述有機酸根稀土鹽由甲酸、乙酸、丁酸、戊酸、異辛酸、馬來酸、富馬酸或酒石酸的鈉鹽與硝酸鈰反應制得的甲酸鈰、乙酸鈰、丁酸鈰、戊酸鈰、異辛酸鈰、馬來酸鈰、富馬酸鈰或酒石酸鈰。
本發(fā)明還一種用于調節(jié)腸道菌群及增強免疫力的乳酸菌組合物的制備方法，包括如下步驟：
(1)將乳雙歧桿菌、羅伊氏乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、嬰兒雙歧桿菌分別以1ml/100ml的接種量接種至培養(yǎng)基中，在35℃～45℃下，培養(yǎng)12～24h，得到活化的乳桿菌菌種；
(2)將活化的四種菌種以重量份數：乳雙歧桿菌30～40、羅伊氏乳桿菌20～30、鼠李糖乳桿菌10～20、嬰兒雙歧桿菌10～20混合后，再將混合菌種以1ml/100ml的接種量接種至培養(yǎng)液中，在35℃～45℃下，培養(yǎng)10～12h后，離心取沉淀，在4℃～10℃下保溫6～10h后，均質，得到組合菌；
(3)將重量份數的：低聚異麥芽糖30～50、蛋白物質30～50、硝酸纖維素5～10、有機酸根稀土鹽0.5～1加水充分混合成包被液，將組合菌加入包被液混和均勻；
(4)將混和均勻的液體滴加到氯化鈣溶液中固化，過濾后真空凍干12h得到乳酸菌組合物。
作為一種優(yōu)選方式，所述乳酸菌組合物中乳雙歧桿菌的含量為107～109cuf/g、羅伊氏乳桿菌的含量為106～108cuf/g、鼠李糖乳桿菌的含量為106～107cuf/g、嬰兒雙歧桿菌的含量為106～107cuf/g。
作為一種優(yōu)選方式，所述乳雙歧桿菌、羅伊氏乳桿菌、鼠李糖乳桿菌和嬰兒雙歧桿菌在活化前分別經過耐豬膽鹽、耐酸篩選的，能耐0.3％的豬膽鹽及pH為2.5的酸性環(huán)境。
作為一種優(yōu)選方式，所述羅伊氏乳桿菌為GL-104菌株，中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏號M209138。
作為一種優(yōu)選方式，所述蛋白物質為酪蛋白和乳鐵蛋白層，其中酪蛋白和乳鐵蛋白的重量比為1-5：1-5。
本發(fā)明具有能增加人腸道內有益菌的比例，使人體腸道菌群微生態(tài)系統(tǒng)得到有效修復，進而增強人體免疫的作用。
具體實施方式
下面結合實施例對本發(fā)明作進一步詳細說明。
實施例1
(1)菌種活化
篩選出耐0.3％豬膽鹽、耐PH為2.5的酸性環(huán)境的乳雙歧桿菌、羅伊氏乳桿菌(羅伊氏乳桿菌為GL-104菌株，中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏號M209138)、鼠李糖乳桿菌和嬰兒雙歧桿菌，將篩選出的四種菌分別以1ml/100ml的接種量接種至MRS培養(yǎng)基中，在45℃下，培養(yǎng)12h，得到活化的乳桿菌菌種；
其中，MRS培養(yǎng)基的配方為：在1000mL蒸餾水中加入10g蛋白胨、8g牛肉浸粉、20g葡萄糖、4g酵母浸膏、0.05g四水硫酸錳、1mL吐溫80、2g磷酸氫二鉀、5g乙酸鈉、0.2g硫酸鎂、2g檸檬酸二銨；
(2)制備組合菌
將活化的四種菌種以重量份數：乳雙歧桿菌30g、羅伊氏乳桿菌20g、鼠李糖乳桿菌10g、嬰兒雙歧桿菌10g混合后，再將混合菌種以1ml/100ml的接種量接種至培養(yǎng)液中，在45℃下，培養(yǎng)10h后，以6000r/min，在5℃下，離心15min，取沉淀物，在4℃下保溫6h后，均質，得到組合菌；
(3)制備包被組合菌
將以下重量的：低聚異麥芽糖30g、酪蛋白15g、乳鐵蛋白15g、硝酸纖維素5g、乙酸鈰1g加水1000ml充分混合成包被液，將組合菌加入包被液混和均勻；
(4)制備乳酸菌組合物
將混和均勻的液體滴加到氯化鈣溶液中固化，過濾后真空凍干12h得到乳酸菌組合物。在乳酸菌組合物中乳雙歧桿菌的含量為107～109cuf/g、羅伊氏乳桿菌的含量為106～108cuf/g、鼠李糖乳桿菌的含量為106～107cuf/g、嬰兒雙歧桿菌的含量為106～107cuf/g。
實施例2
篩選出耐0.3％豬膽鹽、耐PH為2.5的酸性環(huán)境的乳雙歧桿菌、羅伊氏乳桿菌(羅伊氏乳桿菌為GL-104菌株，中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏號M209138)、鼠李糖乳桿菌和嬰兒雙歧桿菌，將篩選出的四種菌分別以1ml/100ml的接種量接種至MRS培養(yǎng)基中，在35℃下，培養(yǎng)24h，得到活化的乳桿菌菌種；
其中，MRS培養(yǎng)基的配方為：在1000mL蒸餾水中加入10g蛋白胨、8g牛肉浸粉、20g葡萄糖、5g酵母浸膏、0.06g四水硫酸錳、1mL吐溫80、2g磷酸氫二鉀、5g乙酸鈉、0.2g硫酸鎂、2g檸檬酸二銨；
(2)制備組合菌
將活化的四種菌種以重量份數：乳雙歧桿菌40g、羅伊氏乳桿菌30g、鼠李糖乳桿菌20g、嬰兒雙歧桿菌20g混合后，再將混合菌種以1ml/100ml的接種量接種至培養(yǎng)液中，在35℃下，培養(yǎng)12h后，以4500r/min，在10℃下，離心20min，取沉淀物，在10℃下保溫10h后，均質，得到組合菌；
(3)制備包被組合菌
將以下重量的：低聚異麥芽糖50g、酪蛋白35g、乳鐵蛋白35g、硝酸纖維素10g、甲酸鈰0.5克加水1000ml充分混合成包被液，將組合菌加入包被液混和均勻；
(4)制備乳酸菌組合物
將混和均勻的液體滴加到氯化鈣溶液中固化，過濾后真空凍干12h得到乳酸菌組合物。在乳酸菌組合物中乳雙歧桿菌的含量為107～109cuf/g、羅伊氏乳桿菌的含量為106～108cuf/g、鼠李糖乳桿菌的含量為106～107cuf/g、嬰兒雙歧桿菌的含量為106～107cuf/g。
實施例3
篩選出耐0.3％豬膽鹽、耐PH為2.5的酸性環(huán)境的乳雙歧桿菌、羅伊氏乳桿菌(羅伊氏乳桿菌為GL-104菌株，中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏號M209138)、鼠李糖乳桿菌和嬰兒雙歧桿菌，將篩選出的四種菌分別以1ml/100ml的接種量接種至MRS培養(yǎng)基中，在42℃下，培養(yǎng)13h，得到活化的乳桿菌菌種；
其中，MRS培養(yǎng)基的配方為：在1000mL蒸餾水中加入10g蛋白胨、8g牛肉浸粉、20g葡萄糖、4g酵母浸膏、0.05g四水硫酸錳、1mL吐溫80、2g磷酸氫二鉀、5g乙酸鈉、0.2g硫酸鎂、2g檸檬酸二銨；
(2)制備組合菌
將活化的四種菌種以重量份數：乳雙歧桿菌35g、羅伊氏乳桿菌23g、鼠李糖乳桿菌15g、嬰兒雙歧桿菌15g混合后，再將混合菌種以1ml/100ml的接種量接種至培養(yǎng)液中，在42℃下，培養(yǎng)11h后，以7000r/min，在5℃下，離心10min，取沉淀物，在4℃下保溫10h后，均質，得到組合菌；
(3)制備包被組合菌
將重量份數的：低聚異麥芽糖35g、酪蛋白20g、乳鐵蛋白20g、硝酸纖維素6g、酒石酸鈰1g加水1000ml充分混合成包被液，將組合菌加入包被液混和均勻；
(4)制備乳酸菌組合物凍干粉
將混和均勻的液體滴加到氯化鈣溶液中固化，過濾后真空凍干12h得到乳酸菌組合物凍干粉。在乳酸菌組合物凍干粉中乳雙歧桿菌的含量為107～109cuf/g、羅伊氏乳桿菌的含量為106～108cuf/g、鼠李糖乳桿菌的含量為106～107cuf/g、嬰兒雙歧桿菌的含量為106～107cuf/g。
本發(fā)明是在各種菌系的有效配合下，并在有機酸根稀土鹽為主的包被物的包被下，使中有益菌能在通過胃液時也不會失活，并在到達腸道后能快速均衡地增值，從而在人體在食用上述產品后能快速增加人腸道內有益菌的比例，使人體腸道菌群微生態(tài)系統(tǒng)得到有效修復，進而增強人體免疫。
以上是對本發(fā)明用于調節(jié)腸道菌群及增強免疫力的乳酸菌組合物及其制備方法進行了闡述，用于幫助理解本發(fā)明，但本發(fā)明的實施方式并不受上述實施例的限制，任何未背離本發(fā)明原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護范圍之內。