本發(fā)明涉及一種對胃粘膜具有輔助保護作用的鎖陽飲料及其制備方法,屬于食品飲料技術領域。
背景技術:
隨著我國經濟社會發(fā)展,國民飲食習慣和結構也在不斷變化。生活節(jié)奏的變快和各種競爭壓力加劇了人們不規(guī)律飲食、暴飲暴食、頻繁飲酒、大量飲酒和重口味麻辣飲食等行為,使胃腸道功能紊亂,引起消化不良,直接誘發(fā)和導致了胃粘膜損傷。胃粘膜對胃具有特殊的保護作用,但很脆弱,環(huán)境因素、飲食、藥物、吸煙、酗酒、細菌感染、情緒變化等,都可對其造成傷害。胃粘膜的損傷與自我修復始終處于動態(tài)平衡,如此胃才能正常運作。一旦外界給予胃的負擔過重或刺激過強,動態(tài)平衡就會被打破,胃粘膜受損,很難再恢復如初,隨之而來的就是一系列胃部不適的癥狀,常見的有上腹部不適或疼痛、惡心、嘔吐、腹瀉、食欲不振等。人類的胃到了一定時間就會分泌胃酸,如果飲食不規(guī)律,分泌出來的胃酸沒有食物可以消化,就會侵蝕胃粘膜。短時間還能支撐,時間長了就會誘發(fā)胃病。情緒過于緊張、情緒低落,憂愁、悲哀、焦慮、氣憤等不良情緒,也會導致胃腸道粘膜缺血,抽煙、喝酒等不良的生活習慣也會使胃粘膜受損。隨著國民對保健養(yǎng)生的重視,對胃粘膜有保護作用的保健飲料研發(fā)備受關注。
鎖陽又名不老藥,是鎖陽科植物的干燥肉質莖,性甘溫。鎖陽是蒙醫(yī)常用藥,具補腎、助陽、益精、潤腸之功效。鎖陽主要含有多糖和黃酮類有機成分。近年來對鎖陽多糖的藥理作用主要集中在其抗氧化、延緩衰老及對內分泌及免疫功能的影響方面的研究。目前,尚未出現(xiàn)以鎖陽和弱堿性溫泉水為主要原料,具有胃粘膜輔助保護和改善胃腸道功能的飲料。
技術實現(xiàn)要素:
本發(fā)明所要解決的技術問題是克服現(xiàn)有技術和產品不足,提供一種鎖陽飲料及制備方法,利用本發(fā)明配方和工藝制備的鎖陽飲料具有胃粘膜輔助保護作用,改善胃腸道功能,對大量飲酒造成的胃粘膜損傷具有預防保護作用,經常飲用可有效避免酒精性、藥物性胃粘膜損傷,預防保護作用明顯。
本發(fā)明解決上述技術問題的技術方案如下:
一種鎖陽飲料,各組分質量濃度組成如下:鎖陽提取物2-20g/l,甜味劑10-100g/l,余量為弱堿性溫泉水。
而且,所述甜味劑可以是蔗糖、木糖醇、安賽蜜、果糖的任一一種或任選二種搭配使用。
而且,所述的鎖陽飲料,各組分質量濃度組成如下:鎖陽提取物10g/l,安賽蜜1g/l,木糖醇10g/l,余量為弱堿性溫泉水。
而且,所述的一種鎖陽飲料的制備方法,其特征在于:按照以下步驟制備:
(1)鎖陽提取液的制備:取鎖陽飲片進行粉碎,過20-60目篩,得鎖陽粗粉;然后鎖陽粗粉與弱堿性溫泉水按照1:20-1:50的料液比進行混勻,混勻后加入到底部鋪有麥飯石顆粒的提取罐中,然后加熱至70—100℃,提取0.5-1.5小時后,趁熱過濾至離心罐,經第一次離心后的液體為第一次提取液;然后向提取罐中的鎖陽藥渣加入弱堿性溫泉水進行第二次提取,弱堿性溫泉水的加入量為第一次加入弱堿性溫泉水體積的50%-80%,然后加熱至70—100℃,提取0.5-1.5小時,趁熱過濾至離心罐,經第二次離心后的液體為第二次提取液;將第一次提取液和第二次提取液混勻后既得鎖陽提取液;麥飯石顆?;厥諅溆?;鎖陽提取液冷卻后,取單位體積的鎖陽提取液進行濃縮,干燥,測定和計算鎖陽提取液的質量濃度,做好登記備用;
(2)調配:根據(jù)生產需要調配鎖陽飲料的體積,并按照權利要求1-3任一一項權利要求所述的鎖陽飲料配方,計算所需鎖陽提取液的體積和加入甜味劑的質量;然后將甜味劑用弱堿性溫泉水溶解,并加入到鎖陽提取液中,用弱堿性溫泉水定容;
(3)將上述調配好的混合溶液,進行殺菌、灌裝、包裝、檢驗即得鎖陽飲料成品。
而且,所述的一種鎖陽飲料的制備方法,按照以下步驟制備:
(1)鎖陽提取液的制備:取鎖陽飲片進行粉碎,過40目篩,得鎖陽粗粉;然后鎖陽粗粉與弱堿性溫泉水按照1:25的料液比進行混勻,混勻后加入到底部鋪有麥飯石顆粒的提取罐中,然后加熱至80℃,提取1小時,趁熱過濾至離心罐,經第一次離心后的液體為第一次提取液;然后向提取罐中鎖陽藥渣中加入弱堿性溫泉水進行第二次提取,弱堿性溫泉水的加入量為第一次提取時加入弱堿性溫泉水體積的60%,然后加熱至80℃,提取1小時,趁熱過濾至離心罐,經第二次離心后的液體為第二次提取液;將第一次提取液和第二次提取液混勻,得到鎖陽提取液;麥飯石顆粒回收備用;鎖陽提取液冷卻后,取單位體積的鎖陽提取液進行濃縮,干燥,測定和計算鎖陽提取液的質量濃度,做好登記備用;
(2)調配:根據(jù)生產需要調配鎖陽飲料的體積,并按照權利要求3所述的配方,計算所需鎖陽提取液的體積和加入木糖醇、安賽蜜的質量;然后分別用弱堿性溫泉水溶解,并加入到鎖陽提取液中,用弱堿性溫泉水定容;
(3)將上述調配好的混合溶液,進行殺菌、灌裝、包裝、檢驗即得鎖陽飲料成品。
所述所述麥飯石顆粒的加入量為弱堿性溫泉水質量的0.5-3%。
而且,所述弱堿性溫泉水來源于內蒙古自治區(qū)赤峰市敖漢旗四家子鎮(zhèn)熱水湯,又稱敖漢溫泉水;敖漢溫泉水ph值7.1-7.9,偏硅酸含量25-126.5mg/l,鋰、鍶含量分別0.2-1.2和0.2-1.2mg/l,屬于弱堿性醫(yī)療礦泉水。
本發(fā)明鎖陽飲料根據(jù)實際需要也可以加入防腐劑、酸味劑、增香劑等食品添加劑,以滿足不同實用人群的需要。
本發(fā)明的優(yōu)點和積極效果:
(1)本發(fā)明主要以鎖陽飲片和弱堿性溫泉水為原料,制得一種鎖陽飲料,通過溶出鎖陽的有效成分與弱堿性溫泉水協(xié)同作用,發(fā)揮輔助保護胃黏膜的功效,改善胃腸道環(huán)境。由于鎖陽溶出的有效成分溶解于弱堿性溫泉水中,對保護胃黏膜的功效優(yōu)于片劑、丸劑或膠囊。
(2)本發(fā)明制備工藝成本低廉、制備工藝綠色環(huán)保,適合規(guī)?;a。現(xiàn)有技術中,為了使鎖陽提取的有效成分充分溶出,提取溶劑多是采用一定質量濃度的乙醇溶液進行提取,并對提取液進行濃縮和回收(除去)乙醇;或者以純凈水為提取溶劑,濃縮除去純凈水再用溫泉水調配這些提取工藝與弱堿性溫泉水提取比較,工藝步驟繁瑣,成本較高,不利于工業(yè)化生產;利用弱堿性溫泉水作為提取溶劑不僅能夠能促進黃酮類、多糖類、鞣質等有機成分的溶出,而且簡化了除去提取液中乙醇的工藝步驟,還使鎖陽飲料從提取至調配灌裝,其ph值始終保持在一定的區(qū)間范圍,質量穩(wěn)定。直接用弱堿性溫泉水進行提取較純凈水提取有三個突出的優(yōu)勢。其一,弱堿性溫泉水更有利于保持提取液的ph值,保障了口感和穩(wěn)定性。其二,純凈水的制備需要增添設備,消耗人力物力,不夠節(jié)約。其三,純凈水提取液呈中性,還需除去純凈水后加入弱堿性溫泉水進行調配,增加了額外的兩道制備步驟,提高了工藝成本。
(3)本發(fā)明在鎖陽提取液提取過程中向提取罐中加入了麥飯石顆粒,加入麥飯石顆粒的主要作用如下:
a、由于麥飯石顆粒重量大,在提取過程中會沉入提取罐底,在攪拌的過程中麥飯石顆??删鶆蚍植荚谔崛」薜?,避免貼壁糊鍋,保證均勻受熱;麥飯石顆粒大小選擇范圍為6-20目。
b、麥飯石具有雙重的吸附性:一方面是因為它以硅酸鹽為主,具有很好的吸附性;另一方面由于麥飯石多含高嶺石等黏土礦物,是多孔性海綿狀特殊結構,有強烈的靜電引力,在水中對重金屬離子和致害毒素有很強的吸附力,可清除水中的汞、鉛、鎘、砷、氟等重金屬及氯化物、氰化物、殘余農藥、三甲烷等有害物質,吸附率是同等表面積活性炭的20000倍。麥飯石對重金屬、大腸桿菌的吸附率達96%以上;麥飯石具有雙重的吸附性,可以吸附鎖陽提取液中的細小顆粒物質,改善鎖陽提取液的口感。
c、麥飯石可以提高取鎖陽提取液中微量元素含量。麥飯石溶于水時可溶出鉀、鈉、鈣、鎂、硅、猛、鈦、磷等人體所必需的20多種微量元素;同時具有雙向調節(jié)水ph值功能。為了保證鎖陽提取液中微量元素含量穩(wěn)定在一定范圍內,所述麥飯石顆粒的加入量為弱堿性溫泉水質量的0.5-3%,即可滿足提取要求。
(4)本發(fā)明所用弱堿性溫泉水來源于內蒙古自治區(qū)赤峰市敖漢旗四家子鎮(zhèn)熱水湯,稱敖漢溫泉水。經內蒙古自治區(qū)產品質量檢驗研究院(camf2015050023)和中科通標檢驗檢測技術服務有限公司(camf2014050257)檢測,敖漢溫泉水符合國家飲用天然礦泉水檢驗各項標準(gb/t8538-2008),敖漢溫泉水ph值7.1-7.9,偏硅酸含量25-126.5mg/l,鋰、鍶含量分別0.2-1.2和0.2-1.2mg/l,屬于弱堿性醫(yī)療礦泉水。
(5)鎖陽飲料對慢性萎縮性胃炎模型大鼠的作用實驗結果表明:鎖陽飲料組血清丙二醛(mda)含量較模型組有明顯的降低,說明鎖陽飲料較好的抑制了血清mda的升高,其抑制mda升高的作用與胃康靈膠囊相等。從機理角度說明了鎖陽飲料具有降低胃粘膜的攻擊因子mda含量,減少自由基損傷胃粘膜,引起組織損傷和功能障礙。鎖陽飲料組血清sod含量均高于其他3組。鎖陽飲料血清超氧化物歧化酶(sod)含量較模型組和空白組提升明顯,增強了機體對自由基的清除能力。結果說明鎖陽飲料能較好的保護胃粘膜,其清除機體自由基作用明顯優(yōu)于胃康靈膠囊。從胃粘膜損傷面積計數(shù)評價看,鎖陽飲料能夠明顯抑制胃部潰瘍面的形成。
(6)誘導型環(huán)氧化酶-2(cox-2)為催化花生四烯酸合成前列腺素e2(pge2)的關鍵酶。cox-2是催化花生四烯酸轉化為前列腺素的關鍵酶,誘導各種損傷性化學、物理和生物因子激活磷脂酶a2水解細胞膜磷脂,生成花生四烯酸,并催化加氧生成前列腺素。pge2是炎癥反應中最主要的炎癥介質之一,能夠促進興奮性氨基酸介導細胞毒性,增加氧自由基的生成和no毒性效應,加重胃粘膜的損傷。鎖陽飲料組血清cox-2和pge2含量顯著低于模型組,低于胃康靈組,與空白組無差別。說明鎖陽飲料阻斷了大鼠體內cox-2的產生和表達,抑制了胃粘膜損傷因子pge2的產生,減輕了氧自由基和其他毒性效應,對胃粘膜啟到保護作用,免于炎癥因子和刺激因子的攻擊。
(7)鎖陽飲料對無水乙醇引起大鼠胃粘膜損傷的保護作用實驗結果表明:各組平均得分情況:空白組1分、模型組7分、鎖陽飲料組5.86分、胃康靈(陽性對照)組5.71分。從模型組胃粘膜脫落和出血看出無水乙醇對胃粘膜損傷嚴重,提示大量飲酒可直接導致胃出血、胃粘膜損傷,鎖陽飲料對大量飲酒造成的胃粘膜損傷具有一定的預防保護作用。
附圖說明
圖1為慢性萎縮性胃炎模型組1號大鼠胃粘膜損傷情況;
圖2為慢性萎縮性胃炎空白組9號大鼠胃粘膜損傷情況;
圖3為空白組無水乙醇引起大鼠胃粘膜損傷情況;
圖4為模型組無水乙醇引起大鼠胃粘膜損傷情況;
圖5為鎖陽飲料組無水乙醇引起大鼠胃粘膜損傷情況;
圖6為胃康靈(陽性對照)組無水乙醇引起大鼠胃粘膜損傷情況。
具體實施方式
下面結合實施例,對本發(fā)明的原理和特征進行描述,但本發(fā)明的實施方式不限于此,不能以下述實施例來限定本發(fā)明的保護范圍。
下述實施實例中所使用的實驗方法如無特殊說明,均為常規(guī)方法;所使用的材料、試劑等,如無特殊說明,均可從商業(yè)途徑得到。
實施例1
一種鎖陽飲料,各組分質量濃度組成如下:鎖陽提取物20g/l,蔗糖50g/l,余量為弱堿性溫泉水。
本實施例中若需制備100l鎖陽飲料,各種物質的添加量為:鎖陽提取物2kg,蔗糖5kg,余量為弱堿性溫泉水。
本實施例中所述鎖陽飲料的制備方法,按照以下步驟制備:
(1)鎖陽提取液的制備:取6kg鎖陽飲片進行粉碎,過60目篩,得到鎖陽粗粉;然后鎖陽粗粉與弱堿性溫泉水按1:10的料液比進行混勻,混勻后加入到底部鋪有麥飯石顆粒的提取罐中,加熱至70℃,提取1.5小時,趁熱過濾至離心罐,經第一次離心后的液體為第一次提取液;然后向提取罐中的鎖陽藥渣加入弱堿性溫泉水進行第二次提取,弱堿性溫泉水的加入量為第一次提取時加入弱堿性溫泉水體積的80%,提取罐加熱至70℃,提取1.5小時,趁熱過濾至離心罐,經第二次離心后的液體為第二次提取液;將第一次提取液和第二次提取液混勻后既得鎖陽提取液;麥飯石顆?;厥諅溆?;鎖陽提取液冷卻后,取單位體積的鎖陽提取液進行濃縮,干燥,測得鎖陽提取液的質量濃度為23.5g/l,做好登記備用;因為提取罐內設有過濾網,因此鎖陽提取料液趁熱過濾至離心罐時,鎖陽藥渣被過濾網截留到提取罐中;
(2)調配:本實施例中若需制備100l鎖陽飲料,按照本實施例的配方,計算所需鎖陽提取液的體積為85.1l;然后將稱量好的5kg蔗糖用弱堿性溫泉水溶解,并加入到鎖陽提取液中,用弱堿性溫泉水定容至100l;
(3)將上述調配好的混合溶液,進行殺菌、灌裝、包裝、檢驗即得鎖陽飲料成品。進行殺菌、灌裝、包裝、檢驗的的相關步驟和流程按照食品飲料相關的國家標準處理即可。
上述步驟(1)中,鎖陽提取液冷卻后測定鎖陽提取液的質量濃度為23.5g/l,鎖陽提取液的總體積為102.8l,每1000g鎖陽飲片提取的鎖陽提取物質量為402.8g,即鎖陽提取物的提取得率為40.28%,取出鎖陽提取液85.1l進行調配使用,余下的鎖陽提取液備用。
上述步驟(1)中所述麥飯石顆粒的加入量為弱堿性溫泉水質量的0.5%。
本實施例中,所述弱堿性溫泉水來源于內蒙古自治區(qū)赤峰市敖漢旗四家子鎮(zhèn)熱水湯,又稱敖漢溫泉水;敖漢溫泉水ph值7.1-7.9,偏硅酸含量25-126.5mg/l,鋰、鍶含量分別0.2-1.2和0.2-1.2mg/l,屬于弱堿性醫(yī)療礦泉水。
實施例2
一種鎖陽飲料,各組分質量濃度組成如下:鎖陽提取物2g/l,果糖40g/l,余量為弱堿性溫泉水。
本實施例中若需制備100l鎖陽飲料,各種物質的添加量為:鎖陽提取物0.2kg,果糖4kg,余量為弱堿性溫泉水。
本實施例中所述鎖陽飲料的制備方法,按照以下步驟制備:
(1)鎖陽提取液的制備:取0.6kg鎖陽飲片進行粉碎,過20目篩,既得鎖陽粗粉;然后鎖陽粗粉與弱堿性溫泉水按照1:50的料液比進行混勻,加入到底部鋪有麥飯石的提取罐中,加熱至90℃,提取0.5小時后,趁熱過濾至離心罐,經第一次離心后的液體為第一次提取液;然后向提取罐中的鎖陽藥渣加入弱堿性溫泉水進行第二次提取,弱堿性溫泉水的加入量為第一次提取時加入弱堿性溫泉水體積的50%,溫度加熱至90℃,提取0.5小時,趁熱過濾至離心罐,經第二次離心后的液體為第二次提取液;將第一次提取液和第二次提取液混勻后既得鎖陽提取液;麥飯石顆?;厥諅溆?;鎖陽提取液冷卻后,取單位體積的鎖陽提取液進行濃縮,干燥,測得鎖陽提取液的質量濃度為5.9g/l,做好登記備用;
(2)調配:本實施例中若需制備100l鎖陽飲料,按照本實施例的配方,計算所需鎖陽提取液的體積為33.9l;然后將稱量好的4kg果糖用弱堿性溫泉水溶解,并加入到鎖陽提取液中,用弱堿性溫泉水定容至100l;
(3)將上述調配好的混合溶液,進行殺菌、灌裝、包裝、檢驗即得鎖陽飲料成品。進行殺菌、灌裝、包裝、檢驗的相關步驟和流程按照食品飲料相關的國家標準處理即可。
上述步驟(1)中,鎖陽提取液冷卻后測定鎖陽提取液的質量濃度為5.9g/l,鎖陽提取液的總體積為43.4l,每1000g鎖陽飲片提取的鎖陽提取物質量為426.8g,即鎖陽提取物的提取得率為42.68%,取出鎖陽提取液33.9l進行調配使用,余下的鎖陽提取液備用。
上述步驟(1)中,所述麥飯石顆粒的加入量為弱堿性溫泉水質量的3%。
本實施例中,所述弱堿性溫泉水來源于內蒙古自治區(qū)赤峰市敖漢旗四家子鎮(zhèn)熱水湯,又稱敖漢溫泉水;敖漢溫泉水ph值7.1-7.9,偏硅酸含量25-126.5mg/l,鋰、鍶含量分別0.2-1.2和0.2-1.2mg/l,屬于弱堿性醫(yī)療礦泉水。
實施例3
一種鎖陽飲料,各組分質量濃度組成如下:鎖陽提取物10g/l,安賽蜜1g/l,木糖醇10g/l,余量為弱堿性溫泉水。
安賽蜜是一種食品添加劑,是化學品,類似于糖精,易溶于水,增加食品甜味的,沒有營養(yǎng),口感好,無熱量,具有在人體內不代謝、不吸收(是中老年人、肥胖病人、糖尿病患者理想的甜味劑),是當前世界上第四代合成甜味劑。它和其它甜味劑混合使用能產生很強的協(xié)同效應,一般濃度下可增加甜度30%~50%。
本實施例中若需制備100l鎖陽飲料,各種物質的添加量為:鎖陽提取物1kg,果糖1kg,安賽蜜0.1kg,余量為弱堿性溫泉水。
本實施例中所述鎖陽飲料的制備方法,按照以下步驟制備:
(1)鎖陽提取液的制備:取3kg鎖陽飲片進行粉碎,過40目篩,既得鎖陽粗粉;然后鎖陽粗粉與弱堿性溫泉水按照1:25的料液比進行混勻,加入到底部鋪有麥飯石的提取罐中,加熱至80℃,提取1小時后,趁熱過濾至離心罐,經第一次離心后的液體為第一次提取液;然后向提取罐中的鎖陽藥渣加入弱堿性溫泉水進行第二次提取,弱堿性溫泉水的加入量為第一次提取時加入弱堿性溫泉水體積的60%,加熱至80℃,提取1小時,趁熱過濾至離心罐,經第二次離心后的液體為第二次提取液;將第一次提取液和第二次提取液混勻后既得鎖陽提取液;麥飯石顆?;厥諅溆?;鎖陽提取液冷卻后,取單位體積的鎖陽提取液進行濃縮,干燥,測得鎖陽提取液的質量濃度為11.03g/l,做好登記備用;
(2)調配:本實施例中若需制備100l鎖陽飲料,按照本實施例的配方,計算所需鎖陽提取液的體積為90.66l;然后將稱量好的1kg木糖醇和0.1kg安賽蜜分別用弱堿性溫泉水溶解,并加入到鎖陽提取液中,用弱堿性溫泉水定容至100l;
(3)將上述調配好的混合溶液,進行殺菌、灌裝、包裝、檢驗即得鎖陽飲料成品。進行殺菌、灌裝、包裝、檢驗的相關步驟和流程按照食品飲料相關的國家標準處理即可。
上述步驟(1)中,鎖陽提取液冷卻后測定鎖陽提取液的質量濃度為11.03g/l,鎖陽提取液的總體積為117.4l,每1000g鎖陽飲片提取的鎖陽提取物質量為431.5g,即鎖陽提取物的提取得率為43.15%,取出鎖陽提取液90.66l進行調配使用,余下的鎖陽提取液備用。
上述步驟(1)中所述麥飯石顆粒的加入量為弱堿性溫泉水質量的1%。
本實施例中,所述弱堿性溫泉水來源于內蒙古自治區(qū)赤峰市敖漢旗四家子鎮(zhèn)熱水湯,又稱敖漢溫泉水;敖漢溫泉水ph值7.1-7.9,偏硅酸含量25-126.5mg/l,鋰、鍶含量分別0.2-1.2和0.2-1.2mg/l,屬于弱堿性醫(yī)療礦泉水。
藥效學實驗
利用本發(fā)明工藝制備鎖陽飲料,通過鎖陽飲料對慢性萎縮性胃炎模型大鼠和急性胃粘膜損傷大鼠的胃粘膜輔助保護作用研究,評價其保健作用。
實驗材料與設備
實驗動物:sd大鼠。
造模試劑:阿司匹林腸溶片、95%乙醇、無水乙醇。
治療試劑:鎖陽飲料(鎖陽提取物質量濃度為20g/l)、胃康靈膠囊溶液(除去膠囊衣配制成86.7mg/ml的溶液)、蒸餾水。
檢測試劑:丙二醛(mda)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(e-el-0060c)、大鼠胞外超氧化物歧化酶(sod3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(e-el-r1426c)、大鼠前列腺素內過氧化物酶(ptgs1/cox-2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(e-el-r0792c)、前列腺素e2(pge2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(e-el-0034c)。
儀器設備:微型高速離心機c2500-r-230v、電熱恒溫培養(yǎng)箱icv-450、全自動酶標儀multiskanmk3。
、鎖陽飲料對慢性萎縮性胃炎模型大鼠的作用
1.1實驗動物分組
取體重220~250g的sd大鼠30只,隨機分為空白組8只、模型組8只、鎖陽飲料7只、胃康靈(陽性對照)組7只。
實驗方法
1.2.1大鼠慢性萎縮性胃炎模型復制
模型組、鎖陽飲料組、胃康靈組sd大鼠均灌胃由阿司匹林片配制的2%水楊酸鈉與30%乙醇混合溶液,2ml/次/天,每次灌胃造模前后1h禁食禁水,連續(xù)造模三周。造模3周后單日禁食不禁水,雙日自由進食、進水,并繼續(xù)用2%水楊酸鈉與30%乙醇混合溶液灌胃造模持續(xù)3周??瞻捉M按以上方法用蒸餾水灌胃模擬造模。造模第6周末,從模型組和空白組分別隨機取1只大鼠觀察胃粘膜損傷程度及萎縮情況,判斷造模是否成功。
如圖1、圖2所示,通過觀察,模型組1號與空白組9號大鼠比較,胃粘膜損傷明顯,胃粘膜潰瘍清晰可見,胃部萎縮明顯,不易攤開,判定造模成功。
治療方案
對慢性萎縮性胃炎模型大鼠的治療干預,具體每組的治療方案分別為:
空白組:灌胃蒸餾水治療,按5ml/kg體積灌胃。
模型組:灌胃蒸餾水治療,按5ml/kg體積灌胃。
鎖陽飲料:按實驗動物與人體表面積比等效劑量換算,鎖陽飲料(20g/l)按5ml/kg體積灌胃。
胃康靈(陽性對照)組:胃康靈膠囊(86.7mg/ml)按5ml/kg體積灌胃。
上述各組大鼠每天灌胃干預一次,其他條件一樣,連續(xù)灌胃干預14天。
檢測指標
對慢性萎縮性胃炎模型大鼠胃粘膜損傷面積進行計數(shù)評價,并對血清sod、mda、cox-2、pge2含量進行測定。sod和mda可間接反映自由基代謝水平。當胃粘膜損傷時表現(xiàn)為sod活性降低,mda的含量升高。cox-2和pge2是炎癥狀態(tài)下受促炎介質誘導,呈表達增高趨勢。當胃粘膜損傷時表現(xiàn)為血清cox-2和pge2含量升高。
丙二醛(mda)是胃粘膜的攻擊因子之一,它的含量反映機體脂質過氧化的速率及強度,可間接反映組織受自由基損傷的程度。機理是:氧自由基攻擊細胞膜中的不飽和脂肪酸,產生mda,破壞細胞膜的完整化増加細胞膜的通透性,誘導炎癥介質的產生,引起組織損傷和功能障礙。評判標準是觀察鎖陽飲料能否抑制胃粘膜損傷大鼠血清中mda的升高。
超氧化物歧化酶(sod)是胃粘膜的保護因子之一,其活力的高低間接反映機體清除自由基的能力,在生命體的自我保護系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)中起重要的作用。機理是:在胃粘膜損傷過程中會大量產生氧自由基,sod通過清除過多的自由基,減輕氧自由基對胃粘膜的損傷。評判標準是觀察鎖陽飲料能否增加胃粘膜損傷大鼠血清中sod含量。
胃粘膜損傷時,花生四烯酸在cox-2的催化下,合成pge2,最后產生系列炎癥介質,提示機體受到炎癥因子攻擊。如果所用藥物具有抗炎或保護刺激作用,可使cox-2和pge2有效降低。
實驗結果
從表1中可以看出:鎖陽飲料組血清mda含量較模型組有明顯的降低,說明鎖陽飲料較好的抑制了血清mda的升高,其抑制mda升高的作用與胃康靈膠囊相等。從機理角度說明了鎖陽飲料具有降低胃粘膜的攻擊因子mda含量,減少自由基損傷胃粘膜,引起組織損傷和功能障礙。
鎖陽飲料組血清sod含量均高于其他3組。鎖陽飲料血清sod含量較模型組和空白組提升明顯,增強了機體對自由基的清除能力。結果說明鎖陽飲料能較好的保護胃粘膜,其清除機體自由基作用明顯優(yōu)于胃康靈膠囊。從胃粘膜損傷面積計數(shù)評價看,鎖陽飲料能夠明顯抑制胃部潰瘍面的形成。
鎖陽飲料組血清cox-2和pge2含量顯著低于模型組,低于胃康靈組,與空白組無差別。說明鎖陽飲料阻斷了大鼠體內cox-2的產生和表達,抑制了胃粘膜損傷因子pge2的產生,減輕了氧自由基和其他毒性效應,對胃粘膜啟到了保護作用,免于炎癥因子和刺激因子的攻擊。
表1鎖陽飲料對慢性萎縮性胃炎模型大鼠的作用的實驗結果
2、鎖陽飲料對無水乙醇引起大鼠胃粘膜損傷的保護作用
2.1實驗動物分組
取體重220~250g的sd大鼠30只,隨機分為空白組8只、模型組8只、鎖陽飲料組7只、胃康靈(陽性對照)組7只。
2.2實驗方法
(1)提前預防給藥一周
空白組:灌胃蒸餾水治療,按5ml/kg體積灌胃。
模型組:灌胃蒸餾水治療,按5ml/kg體積灌胃。
鎖陽飲料組:將鎖陽飲料用量折算到大鼠灌胃劑量,按5ml/kg體積灌胃。
胃康靈(陽性對照)組:灌胃胃康靈治療,按5ml/kg體積灌胃。
各組大鼠每天灌胃給藥一次,其他條件一樣,連續(xù)給藥7天。
(2)大鼠急性胃粘膜損傷模型復制
第七天預防給藥2h后,對模型組、鎖陽飲料、陽性對照組以3ml/kg劑量灌胃無水乙醇,空白組灌胃蒸餾水,1h后處死大鼠,觀察胃粘膜損傷程度,并進行計分評價。
(3)計分評價標準:
—胃粘膜未損傷,不見血管充血和出血:1分
—胃粘膜損傷面積小于1/3,部分充血:2—3分
—胃粘膜損傷面積達1/2,充血或部分出血,部分胃粘膜脫落:4—5分
—胃粘膜損傷面積超過2/3,出血充血嚴重,胃粘膜脫落明顯:6—7分
2.3實驗結果
2.3.1空白組胃粘膜損傷評價
從圖3可以看出,空白組:胃粘膜未損傷,不見血管充血和出血,得分情況如表2所示。
2.3.2模型組胃粘膜損傷評價
從圖4可以看出,模型組:胃粘膜損傷嚴重,出血和胃粘膜脫落明顯,得分情況如表3所示。
2.3.3鎖陽飲料組胃粘膜損傷評價
從圖5可以看出,鎖陽飲料組:胃粘膜損傷嚴重2只,出血明顯3只,部分出血和充血2只,得分情況如表4所示。
2.3.4胃康靈(陽性對照)組胃粘膜損傷評價
從圖6可以看出,胃康靈(陽性對照)組:胃粘膜損傷嚴重3只,部分出血和充血4只,得分情況如表5所示。
2.4實驗結論
各組平均得分情況:空白組1分、模型組7分、鎖陽飲料組5.86分、胃康靈(陽性對照)組5.71分。從模型組胃粘膜脫落和出血看出無水乙醇對胃粘膜損傷嚴重,提示大量飲酒可直接導致胃出血、胃粘膜損傷。鎖陽飲料和胃康靈(陽性對照)對大量飲酒造成的胃粘膜損傷均具有一定的預防保護作用。
3、提取溶劑對鎖陽提取率的影響
3.1實驗材料
無水乙醇:分析純,北京化學試劑廠生產;
實驗儀器:天平。
3.2實驗方法
3.2.1實驗指標的測定
鎖陽提取物得率:取單位體積的鎖陽提取液進行濃縮,干燥(可按照gb/t12143.7直接干燥法測定),測定并計算出鎖陽提取液中的干物含量m,并測量鎖陽提取液的總體積v,通過加入鎖陽飲片的質量m,計算鎖陽提取物得率n。計算公式為:
鎖陽提取物得率n=(m×v)/m×100%;
鎖陽提取液質量濃度=n×m/v;
鎖陽提取液中鎖陽提取物質量=m×v。
3.2.2提取工藝
3.2.2.1醇提法
提取工藝為:取鎖陽1000g,將鎖陽粉碎過40目篩,得到鎖陽粗粉;將鎖陽粗粉與純凈水調配的濃度為60%乙醇溶液按照1:25的料液比,置于小型提取罐中,然后加熱至90℃,提取1個小時后,進行第一次過濾離心得第一次鎖陽提取液;然后鎖陽藥渣中加入純凈水調配的濃度為60%乙醇溶液進行混勻,純凈水調配的濃度為60%乙醇溶液加入量為第一次提取時加入量的60%,加熱至80℃,提取1小時;將第一次提取液和第二次提取液混勻后既得鎖陽提取液;鎖陽提取液冷卻后,取單位體積的鎖陽提取液進行濃縮,干燥,測定和計算鎖陽提取液的質量濃度和鎖陽提取物得率。
3.2.2.1純凈水提法:
提取工藝為:取與3.2.2.1同批次的鎖陽1000g,將鎖陽粉碎過40目篩,得到鎖陽粗粉;將鎖陽粗粉與純凈水按照1:25的料液比,置于小型提取罐中,然后加熱至90℃,提取1個小時后,進行第一次離心得第一次鎖陽提取液;然后向鎖陽藥渣中加入純凈水進行混勻,純凈水加入量為第一次提取時加入量的60%,加熱至80℃,提取1小時;將第一次提取液和第二次提取液混勻后既得鎖陽提取液;鎖陽提取液冷卻后,取單位體積的鎖陽提取液進行濃縮,干燥,測定和計算鎖陽提取液的質量濃度和鎖陽提取物得率。
3.2.2.3弱堿性溫泉水提法:
提取工藝為:取與3.2.2.1同批次的鎖陽1000g,將鎖陽粉碎過40目篩,得到鎖陽粗粉;將鎖陽粗粉與弱堿性溫泉水按照1:25的料液比,置于小型提取罐中,然后加熱至90℃,提取1個小時后,進行第一次離心得第一次鎖陽提取液;然后向鎖陽藥渣中加入弱堿性溫泉水進行混勻,弱堿性溫泉水加入量為第一次提取時加入量的60%,加熱至80℃,提取1小時;將第一次提取液和第二次提取液混勻后既得鎖陽提取液;鎖陽提取液冷卻后,取單位體積的鎖陽提取液進行濃縮,干燥,測定和計算鎖陽提取液的質量濃度和鎖陽提取物得率。
3.3實驗結論
實驗結果如表6所示:以弱堿性溫泉水作為提取溶劑,鎖陽提取物得率重量要稍大于以純凈水提取液;以弱堿性溫泉水作為提取,鎖陽提取物重量要稍小于乙醇提取液。以純凈水為提取溶劑,純凈水的獲得需經過一系列的除雜、沉淀、過濾、凈化等處理工藝,而以乙醇溶劑做為提取溶劑,后期需要對提取溶劑中乙醇進行回收,成本過高;因此以純凈水或乙醇溶劑做為提取溶劑,提取工藝過于復雜,且提取成本過高,不利于工業(yè)化生產;因此選定弱堿性溫泉水作為提取溶劑。弱堿性溫泉水做為提取溶劑能夠有效促進鎖陽有效成分的溶出,提高有效成分的提取得率;而且工藝步驟簡便,還使鎖陽飲料從提取至調配灌裝,其ph值始終保持在一定的區(qū)間范圍,質量穩(wěn)定。