本發(fā)明涉及酵素領域，具體講涉及一種解酒護肝酵素及其制備方法。

背景技術(shù)：

酵素俗稱“酶”，是一種具有催化活性的蛋白質(zhì)。無論動物還是植物，一切生物的活動都需要酶的參與，人體也不例外，每天所攝取食物的消化吸收、體內(nèi)各器官的運作、細胞的新陳代謝等都需要酶的活動，可見，酶對人體的健康有重要影響；

現(xiàn)代研究表明，酵素是生命現(xiàn)象中各種生理功能的總表現(xiàn)，疾病與體內(nèi)代謝酵素的保有量以及特定酵素缺乏有直接關(guān)系。酵素治病是通過調(diào)節(jié)人體代謝平衡，均衡營養(yǎng)，改善體內(nèi)環(huán)境，從而提高機體免疫力，激發(fā)人體自愈功能與生命活力來達到防病治病的目的。

酒精中毒俗稱醉酒，是指患者一次飲大量酒精(乙醇)后發(fā)生的機體機能異常狀態(tài)，對神經(jīng)系統(tǒng)和肝臟傷害最嚴重。醫(yī)學上將其分為急性中毒和慢性中毒兩種，前者可在短時間內(nèi)給患者帶來較大傷害，甚至可以直接或間接導致死亡。后者給患者帶來的是累積性傷害，如酒精依賴、精神障礙、酒精性肝損傷及誘發(fā)某些癌癥(口腔癌、舌癌、食管癌、肝癌)等，可見醉酒對人體的傷害不容小覷。

其中，酒精性肝損傷是指長期大量飲酒或含有酒精的飲料造成的肝臟疾患，20世紀90年代以前酒精性肝病(alcoholic liverdisease)是發(fā)達國家常見的肝臟疾病，經(jīng)常飲酒可導致脂肪肝，可加快脂肪性肝炎、肝纖維化及肝硬化的進程。酒精會導致多器官損傷，其中以肝臟損傷尤為顯著，其發(fā)病機制復雜，較為公認的是氧化應激可能是酒精性肝損傷的驅(qū)動力[6－9]。臨床上采用傳統(tǒng)抗氧化劑維生素A和維生素E治療酒精性肝損傷，但療效不佳。因此酒精性肝損傷的防治已成為醫(yī)學上的一個重要研究課題。

隨著社會的進步和人們生活水平的提高，人們的健康意識日益增強，崇尚天然、養(yǎng)生、安全的健康生活方式逐步成為社會的潮流，而酵素液作為一種天然、養(yǎng)生，無污染的健康飲品，已成為備受矚目的保健品之一；因此，需要提供一種解酒護肝酵素。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

為了克服現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明提供一種解酒護肝酵素及其制備方法，不僅可以補調(diào)節(jié)人體生命活動，還具有解酒護肝的功效。

本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)：

一種解酒護肝酵素，其改進之處在于，按重量份計，其包括：葛根80-90、綠茶50-70、甘草50-100、紅棗50-150、枸杞70-80、輔助糖60-70、益生菌10-20和酶1-8。

優(yōu)選的，按重量份計，其包括：葛根83、綠茶53、甘草77、紅棗63、枸杞73、輔助糖64、益生菌14和酶3。

優(yōu)選的，按重量份計，其包括：葛根85、綠茶61、甘草92、紅棗86、枸杞76、輔助糖67、益生菌15和酶4。

優(yōu)選的，所述輔助糖為從綿白糖、紅糖、砂糖或蜂蜜中選取一種。

優(yōu)選的，所述益生菌為從羅伊氏桿菌、保加利亞乳酸桿菌、乳雙歧桿菌、嗜熱鏈球菌、凝結(jié)牙孢乳酸菌或紅曲菌中選取一種或兩種。

優(yōu)選的，所述酶為從蔗糖酶、膠原酶、木聚糖酶、透明質(zhì)酸酶、溶菌酶或花青素酶中選取一種或兩種。

一種如權(quán)利要求1所述的解酒護肝酵素的制備方法，該法包括以下步驟：

(1)原料制備：用0.9％食鹽水對葛根、綠茶、甘草、紅棗和枸杞分別浸泡5-10min，粉碎和混合；

(2)酶解：在混勻的原料中加入酶，控制酶解溫度在35-45℃，酶解pH在5.0-6.5，酶解6-9小時得到酶解液；

(3)制備發(fā)酵液：于密閉容器中，加入輔助糖和益生菌密封發(fā)酵；

(4)制備酵素液：將上述發(fā)酵液密封靜置。

優(yōu)選的，所述步驟(3)中，發(fā)酵溫度為34-41℃，發(fā)酵時間為100-150天。

優(yōu)選的，所述的密封容器為帶有水封蓋的陶罐、瓷壇或瓦壇。

優(yōu)選的，所述步驟(4)中，發(fā)酵液密封靜置之前要對其進行過濾去渣，過濾裝置為雙端進出料板框式過濾機。

葛根：《本草綱目》載，葛根具清熱祛火，生津止渴，解酒醒脾等作用?！肚Ы鸱健费浴爸尉谱聿恍选薄８鸶侵袊鴤鹘y(tǒng)醫(yī)學最具代表性的解酒藥物之一?，F(xiàn)代科學研究證明葛根富含蛋白質(zhì)、氨基酸、葛根素和人體所需的鐵、鈣、硒等微量元素，改善酒精引起的新陳代謝異常，增強和提高機體抗病能力。

綠茶中含有茶多酚、咖啡堿、葉綠素、兒茶素等成分，具有降低血脂、助消化，養(yǎng)肝護肝，且其中的咖啡堿具有利尿的作用，可以使體內(nèi)的酒精迅速排出體外。

甘草的主要功效為補脾益氣、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛、調(diào)和諸藥，其中的調(diào)和作用可以調(diào)和酒精對人體的危害。

紅棗可以健脾養(yǎng)胃，補氣養(yǎng)血，緩和藥性的作用，而且藥理研究發(fā)現(xiàn)，紅棗能促進白細胞的形成，降低血清膽固醇，提高血清蛋白，保護肝臟；

枸杞具有滋陰補腎、美白養(yǎng)顏、養(yǎng)肝明目的功效，枸杞中含有的甜菜堿，可以抑制脂肪在肝細胞中內(nèi)的沉積，促進肝細胞的再生，具有保護肝臟的作用。

益生菌可以增強腸道抵抗力，維持菌群平衡，加強腸道粘膜屏障，維持酸性環(huán)境，從而抑制致病菌的繁殖，抑制部分腸道疾病。

與最接近的現(xiàn)有技術(shù)相比，本申請還具有如下有益效果：

(1)本發(fā)明提供的一種解酒護肝酵素，不僅可以調(diào)節(jié)人體機能活動，而且具有解酒護肝的功效，起到綜合調(diào)理養(yǎng)生的效果。

(2)本發(fā)明采用雙端進出料板框式過濾機，通過密封板、上液管、下液管、安裝座以及過濾板等的配合，提高了啤酒發(fā)酵液的過濾效率，在上液管的兩端分別設置有出液口和進液口；在下液管的兩端分別設置有出液口和進液口，使用一段時間后，可以改變過濾的方向，防止一直使用過濾板一面過濾容易造成堵塞的問題，提高了過濾板的過濾效果。減少了液體走短路的幾率，提高了整個設備的利用率，降低了生產(chǎn)成本。

(3)本發(fā)明的制備方法簡單，無添加劑，安全可靠。

附圖說明

圖1為本發(fā)明所用的雙端進出料板框式過濾機的結(jié)構(gòu)示意圖；其中，1—密封板，2—上液管，3—下液管，4—出液口，5—進液口，6—安裝座，7—過濾板。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步詳細說明：

實施例1

1)原料準備：

葛根80綠茶50甘草50紅棗50枸杞70綿白糖60紅曲菌10蔗糖酶1。

2)制備方法如下：

(1)原料制備：用0.9％食鹽水對葛根、綠茶、甘草、紅棗和枸杞分別浸泡5min，粉碎和混合；

(2)酶解：在混勻的原料中加入蔗糖酶進行酶解，控制酶解溫度在35℃，酶解pH在5.0，酶解6小時得到酶解液；

(3)制備發(fā)酵液：將所述酶解液置于密閉容器中，加入綿白糖和紅曲菌，混合均勻，于34℃下密封發(fā)酵100天，然后得到發(fā)酵液；

(4)制備酵素液：將上述發(fā)酵液沉降、過濾去渣，密封靜置3天，得到酵素液。

實施例2

1)原料準備：

葛根83綠茶53甘草77紅棗63枸杞73紅糖64乳雙歧桿菌14膠原酶3。

2)制備方法如下：

(1)原料制備：用0.9％食鹽水對葛根、綠茶、甘草、紅棗和枸杞分別浸泡7min，粉碎和混合；

(2)酶解：在混勻的原料中加入膠原酶進行酶解，控制酶解溫度在40℃，酶解pH在5.4，酶解7.5小時得到酶解液；

(3)制備發(fā)酵液：將所述酶解液置于密閉容器中，加入紅糖和乳雙歧桿菌，混合均勻，于37℃下密封發(fā)酵129天，然后得到發(fā)酵液；

(4)制備酵素液：將上述發(fā)酵液沉降、過濾去渣，密封靜置4天，得到酵素液。

實施例3

1)原料準備：

葛根85綠茶61甘草92紅棗86枸杞76砂糖67保加利亞乳酸桿菌15透明質(zhì)酶+木聚糖酶4。

2)制備方法如下：

(1)原料制備：用0.9％食鹽水隊葛根、綠茶、甘草、紅棗和枸杞分別浸泡8min，粉碎和混合；

(2)酶解：在混勻的原料中加入透明質(zhì)酶和木聚糖酶進行酶解，控制酶解溫度在43℃，酶解pH在6.1，酶解9小時得到酶解液；

(3)制備發(fā)酵液：將所述酶解液置于密閉容器中，加入砂糖和保加利亞乳酸桿菌，混合均勻，于39℃下密封發(fā)酵148天，然后得到發(fā)酵液；

(4)制備酵素液：將上述發(fā)酵液沉降、過濾去渣，密封靜置4天，得到酵素液。

實施例4

1)原料準備：

葛根90綠茶70甘草100紅棗150枸杞80蜂蜜70羅伊氏桿菌+保加利亞乳酸桿菌20花青素酶+溶菌酶8。

2)制備方法如下：

(1)原料制備：用0.9％食鹽水對葛根、綠茶、甘草、紅棗和枸杞分別浸泡10min，粉碎和混合；

(2)酶解：在混勻的原料中加入花青素酶和溶菌酶進行酶解，控制酶解溫度在45℃，酶解pH在6.5，酶解11小時得到酶解液；

(3)制備發(fā)酵液：將所述酶解液置于密閉容器中，加入蜂蜜、羅伊氏桿菌和保加利亞乳酸桿菌，混合均勻，于41℃下密封發(fā)酵150天，然后得到發(fā)酵液；

(4)制備酵素液：將上述發(fā)酵液沉降、過濾去渣，密封靜置5天，得到酵素液。

本發(fā)明中，和其它輔助糖原料相比，以蜂蜜作為輔助糖制備的酵素不容易有酒的味道，制得的酵素口感更醇正，且能更好的抑制發(fā)酵過程中有害霉菌的產(chǎn)生。

本發(fā)明所述的密封容器為帶有水封蓋的陶罐、瓷壇或瓦壇；為防止漏氣，水封蓋的密封水要保持充足。

本發(fā)明過濾步驟使用的過濾機為雙端進出料板框式過濾機，如圖1，所述雙端進出料板框式過濾機包括密封板1、上液管2、下液管3、安裝座6以及過濾板7，所述的密封板1為兩塊且平行相對放置；所述的上液管2和下液管3均垂直貫穿兩塊密封板1，且分別靠近密封板1的頂部和底部；在上液管2的兩端分別設置有出液口4和進液口5；在下液管3的兩端分別設置有出液口4和進液口5；所述的安裝座6為多個，且間隔安裝在上液管2和下液管3外表面，所述的過濾板7為多塊，且兩端分別安裝在液管2外表面的安裝座6和下液管3外表面的安裝座6上；每兩塊過濾板7之間形成過濾通道8，該過濾通道8與上液管2或下液管3交錯連通。本發(fā)明所采用的雙端進出料板框式過濾機，通過密封板1、上液管2、下液管3、安裝座6以及過濾板7等的配合，提高發(fā)酵液的過濾效率，在上液管2的兩端分別設置有出液口4和進液口5；在下液管3的兩端分別設置有出液口4和進液口5，使用一段時間后，可以改變過濾的方向，防止一直使用過濾板7一面過濾容易造成堵塞的問題，提高了過濾板7的過濾效果。減少了液體走短路的幾率，提高了整個設備的利用率，降低了生產(chǎn)成本。使用時，可以上液管2的進液口5打開出液口4關(guān)閉，下液管3的出液口4打開進液口5關(guān)閉，待濾液從進液口5進入，經(jīng)過過濾板7的過濾進入下液管3，然后從出液口4流出進入下一道工序。使用一段時間后，可以調(diào)轉(zhuǎn)方向，下液管3的進液口5打開出液口4關(guān)閉，上液管2的出液口4打開進液口5關(guān)閉，待濾液從進液口5進入，經(jīng)過過濾板7的過濾進入上液管2，然后從出液口4流出進入下一道工序。

所述的過濾板7可以采用細孔網(wǎng)過濾，但是這種網(wǎng)制作難度大，而且一旦堵塞難以清理，因此作為優(yōu)選的方式是所述的過濾板7為由透水紙板制作而成，不僅過濾效果好，而且取材方便，便于更換。

表1：實施例1-4酵素原料組成

本發(fā)明提供的酵素不僅可以調(diào)節(jié)人體機能活動，例如調(diào)理內(nèi)分泌、調(diào)節(jié)新陳代謝、維持體內(nèi)正常環(huán)境、平衡身體酸堿度的作用等，還具有解酒養(yǎng)肝的功效。

下面以小鼠為實驗對象，進一步說明本發(fā)明實施例1-4提供的解酒護肝酵素對肝臟的保護功效。

1材料與方法

1材料與試劑

(1)SPF級昆明小鼠60只，雄性，由三峽大學實驗動物中心提供[湖北省實驗動物質(zhì)量合格證：SCXK(鄂2011－0061]；

(2)實施例1-4所述解酒護肝酵素；

(3)丙二醛(MDA)、三酰甘油(TG)、還原性谷胱甘肽(GSH)試劑盒、乙醇脫氫酶(ADH)、乙醛脫氫酶(ALDH)標準品及組織測定試劑盒購自南京建成生物工程公司；

(4)乙醇及其他主要試劑均為國產(chǎn)分析純，由三峽大學醫(yī)學院腫瘤微環(huán)境與免疫治療湖北省重點實驗室提供。

1.2

儀器與設備MIKRO120高速離心機(德國Zentrifogen公司)；DL－600S型三用恒溫水箱(上海精宏實驗設備有限公司)；組織切片機HM340E(德國Microm公司)；CS－Ⅵ型攤片烤片機(孝感市宏業(yè)醫(yī)用儀器有限公司)；包埋機EG1150H，多功能顯微鏡NPS60(德國Leica公司)。

1.3方法

1.3.1

動物模型的建立及分組：將小鼠分為6組，組1、組2、組3、組4、模型組和空白對照組，每組12只。將小鼠禁食12h后，組1-4分別灌胃本發(fā)明實施例1-4所述的解酒護肝酵素10ml，模型組和空白對照組分別灌胃等量的蒸餾水。30min后，組1-4和模型組灌胃42％的酒精8ml，空白對照組灌胃等量的蒸餾水，連續(xù)灌胃60d。實驗期間每2天稱1次體質(zhì)量，根據(jù)體質(zhì)量變化調(diào)整灌胃劑量。

1.3.2樣品處理

實驗結(jié)束后將小鼠禁食12h，眼球取血，離心后取血清，待測其生化指標天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)的活性。將小鼠頸椎脫臼處死后，取出小鼠肝臟：(1)肝臟稱質(zhì)量計算臟體系數(shù)；(2)取小塊肝組織勻漿，進行MDA、TG、GSH、ADH及ALDH水平測定；(3)取部分肝組織進行病理組織學檢查，取出動物肝臟觀察形態(tài)學變化，立即用10％甲醛溶液固定，常規(guī)石蠟包埋，6μm切片，普通蘇木素－伊紅(HE)染色，光鏡下觀察，以肝細胞變性及壞死作為觀察指標。

1.4統(tǒng)計學處理

采用SPSS18.0軟件進行數(shù)據(jù)處理，計量資料以x±s表示，組間比較采用方差分析，進一步兩兩比較采用SNK檢驗，以P＜0.0為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

模型構(gòu)建情況：與空白對照組比較、模型組血清AST、ALT，肝組織MDA、TG、GSH、ADH，ALDH等指標差異有統(tǒng)計學意義，說明酒精性肝損傷小鼠模型構(gòu)建成功，見表2～3。

表2：本發(fā)明實施例1-4所述酵素酵素對各組小鼠血清AST、ALT的活性及肝指數(shù)的影響

a：P＜0.05，b：P＜0.01，與模型組比較。

上述實驗數(shù)據(jù)表明：各組小鼠血清AST、ALT的活性及肝指數(shù)變化中，組3和組4的AST、ALT的活性明顯低于模型組(P＜0.01)，組1-4的肝指數(shù)低于模型組(P＜0.05)。

表3：解酒護肝酵素對各組小鼠ADH、ALDH活性及TG、GSH、MDA水平的影響

a：P＜0.05，b：P＜0.01，與模型組比較。

上述實驗數(shù)據(jù)表明：各組小鼠肝組織ADH、ALDH的活性及TG、GSH、MDA水平變化各組肝組織的ADH、ALDH活性及GSH水平明顯高于模型組(P＜0.05)，TG、MDA水平低于模型組(P＜0.05)。

以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非對其限制，盡管參照上述實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明，所屬領域的普通技術(shù)人員依然可以對本發(fā)明的具體實施方式進行修改或者等同替換，這些未脫離本發(fā)明精神和范圍的任何修改或者等同替換，均在申請待批的本發(fā)明的權(quán)利要求保護范圍之內(nèi)。