本發(fā)明屬于動(dòng)物保健用品，具體就是一種雛雞使用的含益生菌的雛雞保健劑。
背景技術(shù)：
：：益生菌(probiotics)是一種可通過改變腸道菌群平衡而對(duì)動(dòng)物施加有利影響的活微生物飼料添加劑，其產(chǎn)品稱為微生態(tài)制劑，是根據(jù)微生態(tài)學(xué)基本原理研制，用于調(diào)節(jié)機(jī)體的微生態(tài)環(huán)境。益生菌的作用特點(diǎn)是形成生物保護(hù)膜防止致病菌入侵；產(chǎn)生乳酸或醋酸、過氧化氫、細(xì)菌素和類似抗菌素的物質(zhì)，并以此來抑制病原菌的生長；調(diào)整宿主免疫反應(yīng)；改善消化道細(xì)菌代謝并降低糞中有害酶的活性；減少細(xì)菌易位的發(fā)生率等，因此益生菌具有加強(qiáng)腸道微生物區(qū)系的屏障功能或增進(jìn)非特異性免疫功能，調(diào)節(jié)特異性免疫功能，增強(qiáng)抗病力和體質(zhì)，防止病菌感染，提高飼料利用率和動(dòng)物生長率的功能。目前，益生菌已廣泛應(yīng)用于嬰兒奶粉、兒童食品、果汁飲料和谷類等食品中，醫(yī)藥以及畜牧水產(chǎn)業(yè)，創(chuàng)造了巨大的價(jià)值；而針對(duì)禽類生長特點(diǎn)選取哪些種類益生菌、它們的比例，以及制備與包被技術(shù)成為研究熱點(diǎn)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是根據(jù)雛雞的生長發(fā)育特點(diǎn)，提供一種配比合科學(xué)、維持和促進(jìn)雛雞消化道內(nèi)穩(wěn)態(tài)，利于雛雞的生長發(fā)育、提高的雛雞的免疫能力的含益生菌的雛雞保健劑及生產(chǎn)方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是以下述方式實(shí)現(xiàn)的：一種含益生菌的雛雞保健劑：由以下益生菌組份和重量百分?jǐn)?shù)量組成：乳桿菌類：嗜酸乳桿菌lh1f25～35干酪乳桿菌lc2w15～25、纖維二糖乳桿菌fhhmb12610～20；芽孢桿菌類：蠟樣芽孢桿菌xhj-2-610～20、地衣芽孢桿菌d15～15；酵母菌類：產(chǎn)朊假絲酵母bkm-y745～15；活菌數(shù)≥80億/克。此菌種組合及數(shù)量配比為根據(jù)雛雞消化道內(nèi)環(huán)境特點(diǎn)，為維持和促進(jìn)消化道內(nèi)穩(wěn)態(tài)，經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)、中試及萬只雞田間實(shí)驗(yàn)獲得，效果較理想。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，如隨意改變菌種或配比會(huì)給雞生產(chǎn)產(chǎn)生嚴(yán)重的后果，如提高芽孢桿菌數(shù)量至40％，1日齡雛雞連續(xù)服用3天就會(huì)導(dǎo)致腹瀉，臨床表現(xiàn)為下痢，抗生素治療效果不佳，其原因主要是雛雞腸道芽孢桿菌過高會(huì)引起菌群紊亂，消化能力降低，從而引起腹瀉；如降低嗜酸乳桿菌lh1f的含量至10％，則益生菌制劑的效果明顯降低，不能為雛雞尤其是小雞階段提供優(yōu)勢菌群，不能起到促生長和預(yù)防疾病的作用。上述雛雞使用的含益生菌的雛雞保健劑的生產(chǎn)方法，包括以下步驟：a、分別取嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、纖維二糖乳桿菌、蠟樣芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌及酵母菌種子；b、分別將上述益生菌種子活化；冷凍益生菌種子活化培養(yǎng)參數(shù)：乳桿菌類選用mrs肉湯培養(yǎng)基100ml，ph值調(diào)至6.0，37℃厭氧培養(yǎng)乳酸菌16～20小時(shí)，芽孢桿菌選用myp肉湯培養(yǎng)基100ml，ph值調(diào)至7.0～7.2，37℃厭氧培養(yǎng)芽孢桿菌16～20小時(shí)，酵母菌選用馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基100ml，37℃培養(yǎng)酵母菌16～20小時(shí)。c、將活化的益生菌種子培養(yǎng)；將活化的益生菌進(jìn)行種子培養(yǎng)，種子培養(yǎng)參數(shù)：乳酸菌選用mrs肉湯培養(yǎng)基1l，ph值調(diào)至6.0，37℃厭氧培養(yǎng)乳酸菌16～20小時(shí)，芽孢桿菌選用myp肉湯培養(yǎng)基1l，ph值調(diào)至7.0～7.2，37℃厭氧培養(yǎng)芽孢桿菌16～20小時(shí)，酵母菌選用馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基1l，37℃培養(yǎng)酵母菌16～20小時(shí)。d、分別進(jìn)行100升體系培養(yǎng)；二級(jí)液體擴(kuò)大培養(yǎng)后，將芽孢桿菌、酵母菌和乳酸菌分別再進(jìn)行100升體系培養(yǎng)，培養(yǎng)參數(shù)：乳酸菌選用mrs肉湯培養(yǎng)基100l，ph值調(diào)至6.0，37℃厭氧培養(yǎng)乳酸菌12～16小時(shí)，芽孢桿菌選用myp肉湯培養(yǎng)基1l，ph值調(diào)至7.0～7.2，37℃厭氧培養(yǎng)芽孢桿菌12～16小時(shí)，酵母菌選用馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基1l，37℃培養(yǎng)酵母菌20小時(shí)12～16小時(shí)。e、將培養(yǎng)好的益生菌混合；100升體系擴(kuò)大培養(yǎng)后，將芽孢桿菌、酵母菌和乳酸菌按以下百分比配比混合：乳酸菌65％，芽孢桿菌25％，酵母菌10％；具體為乳酸菌包括嗜酸乳桿菌30％、干酪乳桿菌20％、纖維二糖乳桿菌15％，芽孢桿菌包括蠟樣芽孢桿菌15％、地衣芽孢桿菌10％。f、將d步驟中按百分比配制的混合益生菌包被；將1.5％海藻酸鈉水溶液與混合益生菌液按體積比為1:5的均勻混合得海藻酸鈉菌液混合液：用玻璃注射器將海藻酸鈉菌液混合液注射入1.5％cacl2溶液中,形成海藻酸鈣微球,去掉上清液,分別用0.1％2-環(huán)已胺基乙磺酸,1.1％cacl2溶液洗滌去除未包被的細(xì)菌,去掉上清液，剩余混合物再與0.1％殼聚糖溶液按1:5體積比比例充分混合，形成的微囊再次用0.1％2-環(huán)已胺基乙磺酸,1.1％cacl2,0.85％nacl溶液洗滌再次去除未包被的細(xì)菌。g、將包被好的益生菌干燥。將包被好的益生菌干燥是指：噴霧干燥，控制進(jìn)風(fēng)溫度為140-160℃，排風(fēng)溫度65-70℃，得到益生菌微囊。通過上述方法制得的益生菌微囊制劑是粉劑。由于包被過程，含有微量殼聚糖，活菌數(shù)≥80億/克。本發(fā)明的積極效果是：本發(fā)明制得的益生菌微囊制劑，含有芽孢桿菌、酵母菌、乳酸菌及殼聚糖，各組分按比例配合，好氧型和厭氧型并存，性質(zhì)穩(wěn)定，功能廣泛。具有如下優(yōu)點(diǎn)：1、酵母菌制造厭氧環(huán)境：酵母菌作為好氧菌，在進(jìn)入動(dòng)物腸道后消耗氧氣，制造厭氧環(huán)境，促進(jìn)厭氧微生物(腸道有益微生物)生長發(fā)育，抑制好氧微生物(大腸桿菌等有害菌)；提供優(yōu)勢微生物營養(yǎng)：本發(fā)明提供的禽用益生菌制劑含有豐富的有益細(xì)菌如芽孢桿菌、酵母菌、乳酸菌，以及細(xì)菌的有益代謝產(chǎn)物如b族維生素、生物小肽、未知促長因子、殼聚糖、多糖、酵母細(xì)胞壁等營養(yǎng)。這些有益物質(zhì)和活菌能夠提高雛雞存活率，促進(jìn)免疫系統(tǒng)發(fā)育和成熟，促進(jìn)腸道有益菌群的定植和繁殖、從而加快機(jī)體生理代謝、促進(jìn)生長、增強(qiáng)抗病能力、提高飼料利用率和雞的生產(chǎn)性能。純天然發(fā)酵而成，無毒無殘留，對(duì)環(huán)境無不良影響，可作為動(dòng)物保健類制劑，促生長和預(yù)防疾病。2、本發(fā)明提供的復(fù)合益生菌可促進(jìn)雞對(duì)飼料的消化吸收，改善雞的糞便排泄，減少有害氣體對(duì)動(dòng)物和環(huán)境的毒害。3、使用方法簡便易行：直接投喂到料槽供動(dòng)物食用或添加到全價(jià)料中混合均勻使用。4、本品經(jīng)包被和干燥處理，耐胃酸和腸液能力強(qiáng)，有效提高了進(jìn)入腸道定植的活菌數(shù)量，保存期較長，常溫在一年以上。具體實(shí)施方式：下面結(jié)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明：實(shí)施一1、取益生菌種子：嗜酸乳桿菌，干酪乳桿菌，纖維二糖乳桿菌，蠟樣芽孢桿菌，地衣芽孢桿菌，酵母菌。2、生產(chǎn)工藝a益生菌種子活化b一級(jí)益生菌種子培養(yǎng)c二級(jí)益生菌種子培養(yǎng)d100升體系培養(yǎng)e包被f品質(zhì)檢驗(yàn)g干燥3、培養(yǎng)方法將保存的各菌種先進(jìn)行一級(jí)液體擴(kuò)大培養(yǎng)及二級(jí)液體擴(kuò)大培養(yǎng)后，將芽孢桿菌、酵母菌和乳酸菌分別再進(jìn)行100升體系培養(yǎng)乳酸菌選用mrs肉湯培養(yǎng)基，芽孢桿菌選用myp肉湯培養(yǎng)基，酵母菌選用馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基；100升體系擴(kuò)大培養(yǎng)后，將芽孢桿菌、酵母菌和乳酸菌按以下重量百分比配比混合：乳酸菌65％，芽孢桿菌25％，酵母菌10％。具體各菌百分?jǐn)?shù)量嗜酸乳桿菌30、干酪乳桿菌20、纖維二糖乳桿菌15、蠟樣芽孢桿菌15、地衣芽孢桿菌10及酵母菌10。mrs肉湯增菌培養(yǎng)(1000ml體系)：蛋白胨10克，酵母浸膏5克，牛肉膏10克，葡萄糖20克，醋酸鈉5克，磷酸氫二鉀2克，枸櫞酸三氨2克，硫酸錳0.5克，硫酸鎂0.2克，加雙蒸水溶解至1000ml，ph值調(diào)至6.0，37℃厭氧培養(yǎng)乳酸菌18小時(shí)。myp肉湯增菌培養(yǎng)(1000ml體系)：蛋白胨10克，牛肉膏1克，氯化鈉10克，d-甘露醇10克，酚紅0.025克，卵黃液(20％)100ml，多粘菌素100000iu，加雙蒸水溶解至1000ml，ph值調(diào)至7.0～7.2，37℃厭氧培養(yǎng)芽孢桿菌20小時(shí)。馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)(1000ml體系)：去皮馬鈴薯200克，葡萄糖20克，蒸餾水1000ml。先將馬鈴薯切成小塊，放入鍋中，加水1000ml，煮沸30min。用紗布濾去馬鈴薯殘?jiān)Ａ赳R鈴薯濾液，加入葡萄糖，溶解后，加水定容至1000ml。37℃培養(yǎng)酵母菌20小時(shí)。4、包被技術(shù)：將1.5％海藻酸鈉與培養(yǎng)好的菌液按1:5體積比均勻混合，用帶4號(hào)針頭玻璃注射器將海藻酸鈉菌液混合液注射入1.5％cacl2溶液中,形成海藻酸鈣微球,去掉上清液,分別用0.1％2-環(huán)已胺基乙磺酸、1.1％cacl2()溶液洗滌去除未包被的細(xì)菌,去掉上清液。再與0.1％殼聚糖溶液充分混合,形成的微囊再次用0.1％2-環(huán)已胺基乙磺酸,1.1％cacl2,0.85％nacl溶液洗滌去除未包被的細(xì)菌，去掉上清液。5、干燥采用噴霧干燥，控制進(jìn)風(fēng)溫度為140-160℃，排風(fēng)溫度65-70℃，得到益生菌微囊。通過上述方法制得的益生菌微囊制劑是粉劑。由于包被過程，含有微量殼聚糖。通過上述方法制備的復(fù)合益生菌制劑活菌數(shù)≥80億/克。本發(fā)明制得的含益生菌的雛雞保健劑在實(shí)際雛雞應(yīng)用后，血液中t、b細(xì)胞數(shù)量，igg、igm、iga含量；胸腺、法氏囊和脾臟t細(xì)胞，igg、igm、iga抗體生成細(xì)胞數(shù)量均較未飼喂益生菌的對(duì)照雛雞不同程度增加，其中血清igm、iga含量和免疫器官igm、iga抗體生成細(xì)胞數(shù)量于飼喂后7天達(dá)到高峰，血清igg含量和免疫器官igg抗體生成細(xì)胞數(shù)量于飼喂后10天達(dá)到高峰見表1-表10。表明雛雞飼喂益生菌后，其外周血液和免疫器官體液免疫和細(xì)胞免疫均增強(qiáng)。表1雛雞應(yīng)用益生菌后外周血液b細(xì)胞數(shù)量變化table1changeofnumberofbcellsinperipheralbloodofprobioticalchicks(％)注：字母不同者表示差異顯著，大寫字母代表p<0.01，小寫字母代表p<0.05，無標(biāo)記或字母相同者表示不顯著p>0.05。表2雛雞應(yīng)用益生菌后血清igg、igm、iga含量的變化table2changeofthecontentofigsinserumofprobioticalchicks(單位unit：492nmod)表3雛雞應(yīng)用益生菌后外周血液t細(xì)胞數(shù)量變化table3changeofnumberoftcellsinperipheralbloodofprobioticalchicks(％)雛雞應(yīng)用益生菌后4～10天，其外周血液b細(xì)胞數(shù)量較相應(yīng)對(duì)照雛雞明顯增加(p<0.05或p<0.01)(表1)。雛雞應(yīng)用益生菌后，其血液igg、igm、iga含量均不同程度高于對(duì)照雛雞，其中益生菌組igg含量較對(duì)照雛雞于7～18天差異明顯(p<0.05或p<0.01)；igm、iga含量于4～10天差異明顯(p<0.05或p<0.01)(表2)。雛雞應(yīng)用益生菌后，其血液t細(xì)胞數(shù)量均不同程度高于對(duì)照雛雞，于4～10天差異明顯(p<0.05或p<0.01)(表3)。表4雛雞應(yīng)用益生菌后法氏囊igg、igm、iga生成細(xì)胞數(shù)量變化table4changeofnumberofigscellsinbursaoffabriciusofprobioticalchicks(單位unit：103/mm2)表5雛雞應(yīng)用益生菌后脾臟紅髓igg、igm、iga抗體生成細(xì)胞數(shù)量變化table5changeofnumberofigg、igm、igaantibody-producingcellsinredpulpofspleenofprobioticalchicks(單位unit：103/mm2)雛雞應(yīng)用益生菌后，其法氏囊淋巴濾泡皮質(zhì)和髓質(zhì)igg、igm、iga抗體生成細(xì)胞數(shù)量均不同程度高于對(duì)照雛雞，其中igg于7～18天差異明顯(p<0.05或p<0.01)，igm于4～10天差異明顯(p<0.05或p<0.01)，皮質(zhì)和髓質(zhì)iga分別于7～10和7天差異明顯(p<0.05或p<0.01)(表4)。雛雞應(yīng)用益生菌后，其脾臟紅髓igg、igm、iga抗體生成細(xì)胞數(shù)量均不同程度高于對(duì)照雛雞，其中益生菌ⅰ組igg抗體生成細(xì)胞數(shù)量較對(duì)照組于7～18天差異明顯(p<0.05或p<0.01)；igm、iga抗體生成細(xì)胞數(shù)量于4～10天差異明顯(p<0.05或p<0.01)；益生菌ⅱ組igg抗體生成細(xì)胞數(shù)量于第10天較對(duì)照組差異顯著(p<0.05)，igm、iga抗體生成細(xì)胞數(shù)量于第7天較對(duì)照雛雞明顯增加(p<0.05)(表5)。表6雛雞應(yīng)用益生菌后脾臟動(dòng)脈周圍鞘igg、igm、iga抗體生成細(xì)胞數(shù)量變化table6changeofnumberofigsproducingcellsinplsofspleenofprobioticalchicks(單位unit：103/mm2)注pls：為periarteriallymphaticsheath的縮寫,表示動(dòng)脈周圍淋巴鞘表7雛雞應(yīng)用益生菌后脾臟淋巴小結(jié)igg、igm、iga生成細(xì)胞數(shù)量變化table7changeofthenumberofigsproducingcellsinlympoidnoduleofspleenofprobioticalchicks(單位unit：103/mm2)雛雞應(yīng)用益生菌后，其脾臟動(dòng)脈周圍鞘igg、igm、iga抗體生成細(xì)胞數(shù)量均不同程度高于對(duì)照雛雞(表6)。雛雞應(yīng)用益生菌后，其脾臟淋巴小結(jié)igg、igm、iga抗體生成細(xì)胞數(shù)量均不同程度高于對(duì)照雛雞(表7)。表8雛雞應(yīng)用益生菌后胸腺t細(xì)胞百分?jǐn)?shù)變化table8changeofpercentageoftcellsinthymusofprobioticalchicks(％)表9雛雞應(yīng)用益生菌后胸腺t細(xì)胞數(shù)量變化table9changeofnumberoftcellsinthymusoftheprobioticalchicks(單位unit：103/mm2)雛雞應(yīng)用益生菌后18天內(nèi)，其胸腺t細(xì)胞百分?jǐn)?shù)均不同程度高于對(duì)照雛雞，其中4～10天差異明顯(p<0.05或p<0.01)(表8)。雛雞應(yīng)用益生菌后，其胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)t細(xì)胞數(shù)量均不同程度高于對(duì)照雛雞，于4～10天差異明顯(p<0.05或p<0.01)表9表明益生菌促進(jìn)雛雞中樞免疫器官t淋巴細(xì)胞的發(fā)育，說明益生菌有調(diào)節(jié)免疫功能的作用。當(dāng)前第1頁12當(dāng)前第1頁12