本發(fā)明屬于保健食品領(lǐng)域，具體涉及一種青錢柳番石榴葉降糖茶及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
：糖尿病已成為當(dāng)前我國非傳染性慢性疾病中第3位主要疾病(心血管疾病、腫瘤、糖尿病)，是嚴(yán)重威脅我國人民健康的常見病多發(fā)病，給國民經(jīng)濟(jì)帶來沉重負(fù)擔(dān)，嚴(yán)重影響社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。其發(fā)病增長之速，涉及人群之廣，消耗衛(wèi)生資源之大，造成殘疾、死亡之多已達(dá)觸目驚心的地步。因此，預(yù)防和控制糖尿病是我國亟待解決的重大衛(wèi)生問題。糖尿病在中國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)里被稱為消渴癥，以多飲、多尿、多食及消瘦、疲乏、尿甜為主要特征，病變部位在肺、胃和腎?，F(xiàn)代學(xué)者多認(rèn)為消渴癥的基本病機(jī)為陰津虧耗、燥熱偏盛。并認(rèn)為，消渴癥日久，病情失控，則陰損及陽、熱灼虧血淤，而致氣陰兩傷，陰陽俱虛，絡(luò)脈淤阻，經(jīng)脈失養(yǎng)，氣血逆亂，臟腑器官受損而出現(xiàn)癰、眩暈、胸痹、耳聾、目盲、肢體麻疼、下肢壞疽、腎衰水腫、中風(fēng)昏迷等兼證。糖尿病病程緩慢，目前尚無治愈糖尿病的特效藥物，盡量用毒副作用小的天然植物控制血糖水平是治療糖尿病的關(guān)鍵。如中國專利申請cn102935186b公開了一種預(yù)防糖尿病的保健茶，由蒲公英15-25克，天冬10-20克，麥冬10-20克，玉米須5-15克，天花粉15-25克，敗醬草10-20克和荊芥3-6克共7種藥材組成。又如中國專利申請cn103157013b公開了一種治療糖尿病的藥茶，該藥茶由馬蘭5～10，車前5～10，建蘭15～20，盤龍參10～15，筆仔草20～25，瓜蔞10～15，番石榴干20～25共7種中藥組成。上述公開的保健茶均有較好治療糖尿病的療效，但均存在如下缺點：一是上述公開的保健茶均是采用開水沖泡的方式作為茶水飲用，無法更全面，更好地利用藥材中的功效成分，不能很好地被人體利用、吸收；二是上述保健茶組成成分復(fù)雜，質(zhì)量控制困難，制備程序冗長，不利于產(chǎn)品質(zhì)量及療效的穩(wěn)定性；三是上述保健茶均沒有涉及對藥效的深層次的科學(xué)詮釋。因此，有必要提供一種療效確切，組分簡單，成本低，降糖效果顯著的保健茶。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明旨在提供一種青錢柳番石榴葉降糖茶及其制備方法和用途。本發(fā)明采用超微粉技術(shù)制備得到一種降糖茶，其能夠更全面、更好地利用藥材中各種水溶性和非水溶性功效成份，使其更容易被人體利用、吸收，充分發(fā)揮其保健功效，且其成分簡單，制造工藝簡便，衛(wèi)生指標(biāo)易于控制，便于廣泛地推廣和應(yīng)用。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：一種青錢柳番石榴葉降糖茶，由青錢柳超微粉和番石榴葉超微粉按1:(0.4～9)的重量比組成。進(jìn)一步地，所述降糖茶由青錢柳超微粉和番石榴葉超微粉按1:(1～9)的重量比組成。進(jìn)一步地，所述降糖茶由青錢柳超微粉和番石榴葉超微粉按3:7的重量比組成。進(jìn)一步地，所述降糖茶由青錢柳超微粉和番石榴葉超微粉按1:1的重量比組成。進(jìn)一步地，所述青錢柳超微粉由以下步驟制得：取青錢柳嫩葉或葉芽，洗凈，萎凋，殺青，烘炒，揉捻，烘焙，經(jīng)超微粉碎，制成顆粒直徑在75μm以下的超微粉末，即得。進(jìn)一步地，所述番石榴葉超微粉由以下步驟制得：取番石榴葉，洗凈，萎凋，殺青，烘炒，揉捻，烘焙，經(jīng)超微粉碎，制成顆粒直徑在75μm以下的超微粉末，即得。相應(yīng)地，本發(fā)明還提供了一種制備上述的降糖茶的方法，包括以下步驟：a)取青錢柳嫩葉或葉芽，洗凈，萎凋，殺青，烘炒，揉捻，烘焙，經(jīng)超微粉碎，制成顆粒直徑在75μm以下的超微粉末，備用；b)取番石榴葉，洗凈，萎凋，殺青，烘炒，揉捻，烘焙，經(jīng)超微粉碎，制成顆粒直徑在75μm以下的超微粉末，備用；c)取上述青錢柳超微粉和番石榴葉超微粉按1:(0.4～9)的重量比混合，包裝，即得。除此之外，本發(fā)明還提供了上述的降糖茶在制備輔助治療ⅱ型糖尿病及其并發(fā)癥保健食品中的用途。如上所述的用途，所述降糖茶可降低血糖以及降低血液中糖化血清蛋白的含量。本發(fā)明具有以下優(yōu)點：1)本發(fā)明降糖茶由青錢柳和番石榴葉按一定的比例制成，成分簡單，降糖效果顯著，且其組成成分簡單，質(zhì)量易控制，制備工藝簡單，保證了產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性，同時對人體無毒害作用，無抗藥性，可長期服用。2)本發(fā)明采用超微粉技術(shù)制備得到一種降糖茶，使傳統(tǒng)的“喝茶”變?yōu)椤俺圆琛保軌蚋?、更好地利用藥材中各種水溶性和非水溶性功效成份，使其更容易被人體利用、吸收，充分發(fā)揮其保健功效。附圖說明圖1顯示了本發(fā)明不同比例青錢柳和番石榴葉組合對配方總皂苷總量的影響；圖2顯示了ⅰ型糖尿病小鼠給藥后血糖隨時間變化趨勢；圖3顯示了青錢柳對ⅰ型糖尿病小鼠肝細(xì)胞組織形態(tài)的影響；圖4顯示了青錢柳對ⅰ型糖尿病小鼠胰島細(xì)胞組織形態(tài)的影響；圖5顯示了不同劑量的青錢柳提取物對ⅱ型糖尿病大鼠血糖的影響；圖6顯示了不同劑量的青錢柳提取物對ⅱ型糖尿病大鼠脂代謝的影響；圖7顯示了不同劑量的青錢柳提取物對ⅱ型糖尿病大鼠糖化血清蛋白的影響。具體實施方式以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下實施例。本發(fā)明實施例1～3以及對比例1所述降糖茶原料配方實施例4、本發(fā)明降糖茶制備方法a)青錢柳預(yù)處理：s1、原葉采摘，挑選：選取色澤嫩綠、質(zhì)地肥厚、無病斑、無蟲害的葉芽或嫩葉，洗凈，除去葉表灰塵及微生物，瀝干水分，在通風(fēng)干燥處均勻攤開；s2、萎凋：自然萎凋3h，中間可上下翻動1次，至葉片已萎軟、失水率為8％即可；s3、殺青：將萎凋的青錢柳葉片烘炒殺青,使水分繼續(xù)散發(fā)，制止酶促反應(yīng)；s4、烘炒：將殺青后的葉片放進(jìn)炒鍋，炒鍋的斜度為35°，控溫在80℃連續(xù)翻炒4min，至葉片柔軟，握之成團(tuán)，手松不散，聞之清味消失，略顯清香；s5、揉捻：將烘炒原料放于揉板上，每鍋分3次用力均勻揉捻，揉捻5min；s6、烘焙：待果膠分解物形成緊結(jié)的條索狀后，用篩將葉條與細(xì)末分開，葉條放入70℃的鍋中快速翻炒，烘焙至手捻葉條細(xì)碎成粉、含水率低于6％，進(jìn)行超微粉碎，制成顆粒直徑在75μm以下的超微粉末；b)番石榴葉預(yù)處理：s1、原葉采摘，挑選：選取色澤嫩綠、質(zhì)地肥厚、無病斑、無蟲害的葉片，用水洗凈，除去葉表灰塵及微生物，瀝干水分；s2、燙青：置500ml水于電炒鍋，電炒鍋開至500w，水燒開后，將番石榴葉置于開水中，直到葉成黃綠色、臭青氣味消失、有淡淡的清香時出鍋，瀝干水分；s3、殺青：將燙青后的番石榴葉片再次置于電炒鍋進(jìn)行烘炒殺青，使水分繼續(xù)散發(fā)，制止酶促反應(yīng)；s4、烘焙：將殺青后的番石榴葉置于90℃烘箱，烘焙至手捻葉條細(xì)碎成粉、含水率低于6％，進(jìn)行超微粉碎，制成顆粒直徑在75μm以下的超微粉末；c)取上述青錢柳超微粉和番石榴葉超微粉混合，包裝，即得。實施例5α-糖苷酶的抑制試驗1.實驗方法：1.1提取濃縮以對比例1所述降糖茶為陽性對照組，取青錢柳和番石榴葉按10:0、7:3、5:5、3:7和0:10比例混合，取對比例1降糖茶和各比例樣品10g分別加入500ml蒸餾水，90℃水浴30min，抽濾，濾液旋蒸濃縮至10ml，保存待用。1.2稀釋將各比例濃縮液用pbs緩沖液稀釋如下表濃度，得各供試品。1.3酶活性的測定往各供試品中加入分別加入100μl酶液，37℃恒溫15min，加入預(yù)熱底物(pnpg/pnpb)50μl，37℃恒溫15min，加入終止劑0.2mol/lna2co380μl，酶標(biāo)儀測吸光度值。1.4總苷含量的測定1.4.1柱層析：d101大孔樹脂，中性氧化鋁裝柱，依次用70％乙醇、水洗柱；精密加入0.5ml供試品溶液，25ml水洗柱，棄洗脫液；再用25ml70％乙醇洗脫皂苷，收集洗脫液于蒸發(fā)皿中，水浴揮干。1.4.2顯色測定：向上述已揮干的蒸發(fā)皿中精密加入0.2ml5％的香草醛冰乙酸溶液，溶解殘渣；再加0.8ml高氯酸，混勻；移入5ml帶塞刻度離心管中，60℃水浴10min；冰浴冷卻后，精密加入5.0ml冰乙酸，搖勻后，用酶標(biāo)儀在560nm波長處測定吸光度值；以外標(biāo)法定量。結(jié)果見圖1。圖1顯示，當(dāng)青錢柳：番石榴葉為3:7時，配方中的總皂苷含量最高。1.5計算各配方組以濃度對抑制率作圖，得到回歸方程，計算各配方組抑制率為50％時所對應(yīng)的濃度，結(jié)果見表1。表1對α-糖苷酶具有50％抑制率時各青錢柳-番石榴葉配方濃度注：對α-糖苷酶抑制作用越強(qiáng)，即抑制率為50％(半數(shù)抑制率)時所需的濃度越低，降糖效果越好。由表1可知，番石榴葉對α-糖苷酶抑制作用比青錢柳要強(qiáng)，但單純番石榴葉口感差。另從表1可以明顯看出，青錢柳和番石榴葉組合使用具有顯著抑制α-糖苷酶的作用，其中以1：(1～9)的比例組合抑制效果較好，尤其是當(dāng)青錢柳和番石榴葉比例為3:7時抑制效果最佳，并且，與兩者單獨使用相比，聯(lián)合使用用量更少，抑制作用更顯著。需要指出的是，對比例1為中國專利申請cn105211434a所述降糖茶，與本發(fā)明相比，配方增加了鮮雪蓮果、玉米須、貢菊花、馬齒莧、陳皮、低聚果糖，控制對比例1的總量與本發(fā)明實施例一致，結(jié)果顯示，對比例1的降糖效果與本發(fā)明相比，有較明顯的下降。這一點是發(fā)明人意想不到的。實施例6青錢柳對ⅰ型糖尿病小鼠的作用研究一、青錢柳對ⅰ型糖尿病小鼠血糖的影響1實驗方法：1.1造模取15只雄性小鼠作為正常對照組不造模，其他已適應(yīng)性喂養(yǎng)的雄性小鼠禁食12h后，腹腔注射stz130mg/kg，正常對照組腹腔注射檸檬酸緩沖液。注射stz后正常喂食，并適當(dāng)補(bǔ)充10％葡萄糖水。兩周后，小鼠禁食12h，剪尾取血，血糖儀測空腹血糖，選擇空腹血糖≥11.1mmol/l的小鼠為ⅰ型糖尿病小鼠。1.2動物分組給藥將已成模小鼠分成3組：模型組，陽性藥組(二甲雙胍馬來酸羅格列酮片，葛蘭素史克)，青錢柳組，每組15只，各組動物灌胃給藥，每天灌胃一次，連續(xù)給藥21天。另正常對照組不給藥，正常喂養(yǎng)。各組每7天末測一次空腹血糖，觀察各組血糖變化。1.3注射胰島素給藥實驗從模型組中取6只ⅰ型糖尿病小鼠，禁食12h后測定空腹血糖。測完空腹血糖后，每只小鼠分別皮下注射0.2ml門冬胰島素30注射液(諾和諾德)，注射胰島素5min后喂食，5h后測量小鼠血糖值。1.4組織的he染色乙醚麻醉小鼠，剖腹，鈍性摘除胰腺，剪取小部分肝臟，用15％中性甲醛溶液固定胰腺和肝臟，每組分別隨機(jī)選5例胰腺和肝臟標(biāo)本,石蠟包埋切片，作he染色，光鏡下觀察并攝片。2.實驗結(jié)果試驗結(jié)果如圖2所示，灌胃青錢柳小鼠空腹血糖在給藥7天后明顯低于模型組；而在給藥14天后各組小鼠的空腹血糖值又反彈到原有水平，并一直持續(xù)到給藥結(jié)束血糖都沒有再降下來，與模型組血糖比較有差異但無統(tǒng)計學(xué)意義；而陽性藥組從一開始給藥之后血糖值就沒有明顯下降跡象，陽性藥組和模型組血糖比較有差異但無統(tǒng)計學(xué)意義，由此看來陽性藥對ⅰ型糖尿病小鼠并無降糖作用，試驗結(jié)果如圖1所示。研究二、注射胰島素對ⅰ型糖尿病小鼠血糖的影響從表2中可以看到，注射胰島素5h后小鼠血糖全部降下來，而對比上圖，灌胃陽性藥小鼠血糖并無明顯變化，提示小鼠是絕對胰島素依賴型的糖尿病小鼠，只能通過注射胰島素來降血糖。表2注射胰島素后ⅰ型糖尿病小鼠血糖的變化(mmol/l)編號空腹血糖注射胰島素5h后血糖128.22.7220.61.2320.81.8428.01.2516.61.2630.73.1研究三、青錢柳對ⅰ型糖尿病小鼠肝臟組織形態(tài)的影響腹腔注射stz誘導(dǎo)ⅰ型糖尿病小鼠動物模型，注射胰島素驗證模型，分別灌胃模型小鼠陽性藥(二甲雙胍馬來酸羅格列酮)和青錢柳水提液，觀察正常小鼠和各給藥組小鼠肝臟、胰腺組織結(jié)構(gòu)，結(jié)果如圖3～4所示。圖3顯示：正常對照組(a)：肝臟、胰腺組織結(jié)構(gòu)形態(tài)：小鼠肝臟結(jié)構(gòu)完整、清晰；肝細(xì)胞排列規(guī)則，在中央靜脈周圍呈放射狀分布；肝血竇無異常變化，結(jié)構(gòu)清晰；胞漿均勻，形態(tài)正常。模型組(b)：小鼠肝細(xì)胞排列紊亂，肝細(xì)胞明顯脂肪變性，胞核和胞漿分離；陽性藥組(c)：小鼠肝小葉界限相對清晰，肝細(xì)胞脂肪變性減少，肝細(xì)胞排列較規(guī)則；青錢柳水提液組(d)：小鼠肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，肝細(xì)胞脂肪變性明顯減少，肝細(xì)胞排列規(guī)則，在中央靜脈周圍呈放射狀分布，胞漿較均勻，形態(tài)正常。圖4顯示：正常對照組(a)：視野中胰島和外分泌腺之間界限清楚，胰島形態(tài)完整規(guī)則，胰島內(nèi)細(xì)胞排列緊密且分布均勻，數(shù)目較多。模型組(b)：視野中胰島和外分泌腺之間界限相對模糊，胰島萎縮，形態(tài)不規(guī)則，部分胰島細(xì)胞胞漿和胞核分離，有空泡變性。陽性藥組(c)：視野中胰島和外分泌腺之間界限較清楚，胰島形態(tài)完整規(guī)則，胰島內(nèi)細(xì)胞排列緊密，空泡變性明顯減少。青錢柳水提液組(d)：視野中胰島和外分泌腺之間界限清楚，胰島形態(tài)完整規(guī)則，胰島內(nèi)細(xì)胞分布均勻，數(shù)目較多。由此可看出，陽性藥組和青錢柳水提液能改善絕對胰島素依賴型ⅰ型糖尿病小鼠肝臟組織形態(tài)和胰島細(xì)胞形態(tài)，說明青錢柳水提液對肝臟和胰臟組織有一定保護(hù)作用。實施例7、青錢柳對ⅱ型糖尿病大鼠的作用1.實驗方法：1.1造模取12只雄性大鼠作為正常對照組不造模，其他大鼠喂高脂飼料(含基礎(chǔ)飼料74.5％，膽固醇1％，蛋黃粉5％，蔗糖10％，豬油9％，膽酸鈉0.5％；廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心)一個月后，禁食12h，腹腔注射stz40mg/kg，正常對照組腹腔注射檸檬酸緩沖液。注射stz后適當(dāng)補(bǔ)充10％葡萄糖水。兩周后，大鼠禁食12h，剪尾取血，血糖儀測空腹血糖，選擇空腹血糖≥11.1mmol/l的大鼠為ⅱ型糖尿病大鼠。2.動物分組給藥將已成模大鼠分成3組：模型組，陽性藥組(二甲雙胍馬來酸羅格列酮片，葛蘭素史克)，青錢柳組，每組15只。各組動物灌胃給藥，每天一次，喂食普通飼料。連續(xù)給藥3個月。正常對照組不給藥，正常喂養(yǎng)。各組每7天末測一次空腹血糖及體重。各組每月月末眼眶采血，血糖儀測定血糖，酮胺氧化酶法測定各組大鼠的糖化血清蛋白(gsp)值，并將全血離心取血清，將血清送值醫(yī)院測量血脂相關(guān)指標(biāo)。3.統(tǒng)計方法各項指標(biāo)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，兩組均數(shù)間差異的顯著性檢驗采用t檢驗法。以高脂飼料與腹腔注射stz誘導(dǎo)ⅱ型糖尿病大鼠動物模型，分別灌胃模型小鼠陽性藥(二甲雙胍馬來酸羅格列酮)和不同劑量青錢柳水提液，統(tǒng)計正常大鼠和各給藥組大鼠空腹血糖變化、脂代謝指標(biāo)和糖化血清蛋白，結(jié)果如圖5～7所示，圖7中△模型組與空白組比較，△△p<0.01；▲與模型組比較，▲p<0.05，▲▲p<0.01。結(jié)果顯示，青錢柳水提液能降低ⅱ型糖尿病大鼠空腹血糖，使動脈粥樣硬化(as)的危險因子(總膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白)和糖化血清蛋白含量降低，提示青錢柳水提液對糖脂代謝具有一定調(diào)節(jié)作用，降糖效果顯著。當(dāng)前第1頁12