本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種芡實(shí)殼提取物及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

芡實(shí)又稱(chēng)又名水流黃、雞頭果等，睡蓮科一年生大型水生草本植物，分布于東亞、南亞及東南亞等溫帶及亞熱帶地區(qū)，我國(guó)多產(chǎn)于湖北、湖南、江西、安徽等地。芡實(shí)是傳統(tǒng)食品也是良好的中藥材，《本草綱目》記載：芡實(shí)止渴益腎。治小便不禁，遺精，帶下。被列入我國(guó)衛(wèi)生部首批公布的“藥食兼用”植物名錄。

芡實(shí)殼是芡實(shí)果仁外的堅(jiān)韌外殼，關(guān)于芡實(shí)殼的研究較少。通過(guò)文獻(xiàn)查閱，公開(kāi)號(hào)為cn105147781a的中國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)了“一種以芡實(shí)殼提取物為主要成分的抑炎抗敏制劑及其應(yīng)用”，該專(zhuān)利涉及一種將通過(guò)純水或不同濃度乙醇提取的芡實(shí)殼提取物加入蜂巢水提液\維生素c，三種成分按一定配比混合后，得到一種以芡種殼提取物為主要成分的抑炎抗敏制劑，其具有緩解皮膚炎癥尤其是過(guò)敏性皮炎的作用。公開(kāi)號(hào)為cn105713419a的中國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)了“一種高純度芡實(shí)殼天然染料的制備方法及其染色方法”，該專(zhuān)利涉及一種將超臨界萃取后的芡實(shí)殼提取物通過(guò)萃取獲得高純度芡實(shí)殼天然染料。公開(kāi)號(hào)為cn104489147a的中國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)了“一種芡實(shí)茶及其制備方法”，該專(zhuān)利涉及一種將含水的芡實(shí)殼通過(guò)氣爆后粉碎后的芡實(shí)殼炒制，獲得一種降血脂降血糖的芡實(shí)茶。生產(chǎn)中通過(guò)芡實(shí)脫殼機(jī)可以完成芡實(shí)脫殼，但大量的芡實(shí)殼成為芡實(shí)加工企業(yè)負(fù)擔(dān)，大多被直接丟棄。目前關(guān)于芡實(shí)殼有效成分提取制備及生物活性研究國(guó)內(nèi)外幾乎空白。對(duì)芡實(shí)殼資源進(jìn)行開(kāi)發(fā)利用，提取其功效成分研究其生物活性并應(yīng)用是亟待解決的問(wèn)題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種芡實(shí)殼提取物及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)特定方法提取芡實(shí)殼提取物，制備得到的芡實(shí)殼提取物具有良好的抗氧化活性及抑菌效果，可應(yīng)用于食品及保健品領(lǐng)域。

本發(fā)明所提供的技術(shù)方案如下：

一種芡實(shí)殼提取物的制備方法，包括以下步驟：

1)對(duì)芡實(shí)殼進(jìn)行酶解，得到酶解混合物；

2)將步驟1)得到的酶解混合物直接進(jìn)行閃式提取，得到提取液；

3)將步驟2)得到的提取液依次經(jīng)抽濾、加熱濃縮和冷凍干燥，得到芡實(shí)殼提取物。

具體的，步驟2)中，閃式提取的提取液為水或體積分?jǐn)?shù)在80％以下的乙醇水溶液。

具體的，步驟1)中：以纖維素酶的水溶液對(duì)芡實(shí)殼進(jìn)行酶解，纖維素酶與芡實(shí)殼的質(zhì)量比為0.8～1.2％，酶解時(shí)間為90～150min，酶解溫度為40～50℃，酶解液ph值為4.0～5.0。

具體的，步驟2)中：閃式提取的提取電壓為80～120v，閃式提取的提取時(shí)間2～3min，閃式提取兩次。

就本發(fā)明所提供的芡實(shí)殼提取物的制備方法而言：其針對(duì)芡實(shí)殼細(xì)胞壁的主要成分是纖維素，機(jī)械破碎法難以將所有細(xì)胞進(jìn)行破碎，從而利用酶解處理，使細(xì)胞壁軟化、膨脹和崩潰，改變其通透性，提高細(xì)胞內(nèi)容物的溶出；進(jìn)而在酶解后保留所有產(chǎn)物，再與閃式提取聯(lián)用，在常溫下進(jìn)行快速高效的提取，以酶法與物理方法相結(jié)合，充分提高了芡實(shí)殼提取物有效成分的提取率和種類(lèi)。而通過(guò)本發(fā)明所提供的芡實(shí)殼提取物的制備方法制備得到的芡實(shí)殼提取物具有明顯的抗氧化清除自由基的作用。同時(shí)，該芡實(shí)殼提取物對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、腐敗西瓦氏菌、熱殺索絲菌、乳酸菌等具有顯著的抑菌作用。該芡實(shí)殼提取物作為天然的抗氧化、抑菌物質(zhì)，在安全、有效、低毒的天然食品添加劑中的具有很好的應(yīng)用前景。

本發(fā)明還提供了根據(jù)本發(fā)明所提供的制備方法制備得到的芡實(shí)殼提取物。

本發(fā)明所提供的芡實(shí)殼提取物具有明顯的抗氧化清除自由基的作用。同時(shí)，該芡實(shí)殼提取物對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、腐敗西瓦氏菌、熱殺索絲菌、乳酸菌等具有顯著的抑菌作用。該芡實(shí)殼提取物作為天然的抗氧化、抑菌物質(zhì)，在安全、有效、低毒的天然食品添加劑中的具有很好的應(yīng)用前景。

本發(fā)明還提供了本發(fā)明所提供的芡實(shí)殼提取物的應(yīng)用，其作為抗氧化劑。

具體的，用于清除dpph自由基、清除abts自由基。

本發(fā)明所提供的芡實(shí)殼提取物具有明顯的抗氧化清除自由基的作用，該芡實(shí)殼提取物作為天然的抗氧化、抑菌物質(zhì)，在安全、有效、低毒的天然食品添加劑中的具有很好的應(yīng)用前景。

本發(fā)明還提供了本發(fā)明所提供的芡實(shí)殼提取物的另一種應(yīng)用，其作為抑菌劑。

具體的，用于抑制金黃色葡萄球菌、腐敗西瓦氏菌、熱殺索絲菌和/或乳酸菌。

本發(fā)明所提供的芡實(shí)殼提取物對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、腐敗西瓦氏菌、熱殺索絲菌、乳酸菌等具有顯著的抑菌作用。該芡實(shí)殼提取物作為天然的抗氧化、抑菌物質(zhì)，在安全、有效、低毒的天然食品添加劑中的具有很好的應(yīng)用前景。

附圖說(shuō)明

圖1是本發(fā)明所提供的芡實(shí)殼醇提物對(duì)菜籽油的抗氧化效果。

圖2是本發(fā)明所提供的芡實(shí)殼水提物對(duì)菜籽油抗氧化效果。

圖3冷藏過(guò)程中鴨肉感官分值的變化。

圖4冷藏過(guò)程中鴨肉菌落總數(shù)的變化。

圖5冷藏過(guò)程中鴨肉揮發(fā)性鹽基氮(tvb-n)的變化。

具體實(shí)施方式

以下對(duì)本發(fā)明的原理和特征進(jìn)行描述，所舉實(shí)施例只用于解釋本發(fā)明，并非用于限定本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1：

芡實(shí)殼提取物的制備：

1、芡實(shí)殼提取物1制備

1)以纖維素酶的水溶液對(duì)芡實(shí)殼進(jìn)行酶解，纖維素酶與芡實(shí)殼的質(zhì)量比為1.0％，酶解時(shí)間為120min，酶解溫度為45℃，酶解液ph值為4.5，得到酶解混合物；

2)將步驟1)得到的酶解混合物直接進(jìn)行閃式提取，閃式提取的提取液為70％乙醇，閃式提取的提取電壓為100v，閃式提取的提取時(shí)間2min，閃式提取兩次；

3)將步驟2)得到的提取液依次經(jīng)抽濾、加熱濃縮和冷凍干燥，得到芡實(shí)殼提取物1。

2、芡實(shí)殼提取物2制備

1)以纖維素酶的水溶液對(duì)芡實(shí)殼進(jìn)行酶解，纖維素酶與芡實(shí)殼的質(zhì)量比為1.0％，酶解時(shí)間為120min，酶解溫度為45℃，酶解液ph值為4.5，得到酶解混合物；

2)將步驟1)得到的酶解混合物直接進(jìn)行閃式提取，閃式提取的提取液為水，閃式提取的提取電壓為100v，閃式提取的提取時(shí)間2min，閃式提取兩次；

3)將步驟2)得到的提取液依次經(jīng)抽濾、加熱濃縮和冷凍干燥，得到芡實(shí)殼提取物2。

3、盧丁標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制

在50ml的容量瓶中準(zhǔn)確配0.30mg/ml的蘆丁溶液。準(zhǔn)確吸取該蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml、6.0ml、7.0ml、8.0ml分別置于25ml容量瓶中，各容量瓶中加入無(wú)水乙醇至12.5ml，再分別加入5％nano2水溶液0.7ml，搖勻后靜置5min；加入10％al(no3)水溶液0.7ml，搖勻，靜置6min；再分別加入lmol/lnaoh水溶液5ml，加入無(wú)水乙醇至25ml，靜置10min后于用可見(jiàn)分光光度計(jì)510nm處測(cè)量吸光度，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)回歸方程。

4、樣品中黃酮含量的測(cè)定

準(zhǔn)確吸取1.0ml樣品于25ml容量瓶?jī)?nèi)，加入無(wú)水乙醇11.5ml，搖勻；分別加入5％nano20.7ml，搖勻放置5min后，加入10％al(no3)3溶液0.7ml，搖勻，靜置6min后，分別再加入1mol/lnaoh5ml，用無(wú)水乙醇定容至刻度，搖勻，靜置10min后，無(wú)水乙醇做空白，紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)510nm處測(cè)吸光值。代入標(biāo)曲方程計(jì)算黃酮濃度。

按此工藝提取的芡實(shí)殼醇提物中黃酮含量為26.90％，芡實(shí)殼水提物中黃酮含量為20.88％。

實(shí)施例2：

芡實(shí)殼提取物體外抗氧化活性測(cè)定

實(shí)驗(yàn)材料：

樣品：本抑菌試驗(yàn)的芡實(shí)殼提取物(醇提物、水提物)由實(shí)施例1制備

試劑：1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(dpph)、2,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(abts)、過(guò)硫酸鉀、無(wú)水甲醇、鹽酸、過(guò)氧化氫、三氯甲烷、還原鐵粉、氯化亞鐵、硫氰酸鉀均購(gòu)于國(guó)藥集團(tuán)公司。

器材：a360紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，翱藝儀器上海有限公司；電子分析天平，奧豪斯國(guó)際貿(mào)易上海有限公司；電熱鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科技有限公司。

試驗(yàn)方法：

1、dpph自由基清除率的測(cè)定

取提取物溶解經(jīng)調(diào)節(jié)至合適濃度后，取50μl溶液加入0.7ml的100μmol/ldpph溶液中，充分混勻，在室溫避光保存30min后在517nm處測(cè)定吸光度，平行3次，以甲醇為空白對(duì)照。提取物清除dpph自由基的能力按下式計(jì)算：dpph自由基清除率(％)＝[1-(ai-aj)/a0]×100。式中，a0為50μl甲醇與0.7ml100μmol/ldpph溶液的混合液在517nm處的吸光度值；ai為50μl樣品溶液與0.7ml100μmol/ldpph溶液的混合液在517nm處的吸光度值；aj為50μl樣品溶液與0.7ml甲醇的混合液在517nm處的吸光度值。根據(jù)系列濃度下的抑制率，計(jì)算dpph自由基清除率為50％時(shí)的樣品濃度，即半數(shù)抑制濃度(ic50)值。

陽(yáng)性藥：取陽(yáng)性對(duì)照vc，按上述方法測(cè)定其ic50值。

2、abts自由基清除能力的測(cè)定

將7mmol/labts水溶液與2.45mmol/l過(guò)硫酸鉀水溶液(終濃度)混合后在室溫條件下避光放置12－16h，形成abts·+自由基儲(chǔ)備液。將此工作液與無(wú)水乙醇按照1∶50(v/v)的比例混合，在734nm下調(diào)其吸光度為0.700±0.020，得到abts·+混合液，于30℃下預(yù)熱備用。樣品提取液經(jīng)調(diào)節(jié)含量至合適濃度后，取50μl加入1mlabts·+混合液中混合均勻，室溫下避光靜置30min后于波長(zhǎng)734nm下測(cè)其吸光值，以甲醇作為空白。以trolox為標(biāo)準(zhǔn)品，建立以trolox濃度(x,μg/ml)為橫坐標(biāo)、吸光值(y)為縱坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，其回歸方程為y＝-0.0032x+0.6751，r2＝0.9991。提取物對(duì)abts自由基清除能力以每100g樣品中所含trolox當(dāng)量來(lái)表示(mgte/100gfw)。測(cè)定重復(fù)3次。

3、芡實(shí)殼提取物對(duì)油脂抗氧化活性的測(cè)定

采用schaal烘箱法，取50g油樣，放入100ml燒杯中，敞口，按一定量加入芡實(shí)殼70％醇提物樣液，添加量分別為0.01mg/ml、0.05mg/ml、0.1％mg/ml，混合均勻，將油樣放入60±0.5℃恒溫箱中強(qiáng)化保存，每隔24h攪拌一次，并交換它們?cè)诤銣叵渲械奈恢?，定?0、2、4、6、8、10、12d)測(cè)定油樣的過(guò)氧化值(pov)。過(guò)氧化值的測(cè)定按gb/t5009.37－2003測(cè)定比色法。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

由表1、表2可以看出，兩種提取物均有將強(qiáng)的dpph自由基清除能力，ic50均小于0.2mg/ml，與陽(yáng)性對(duì)照vc的ic50值接近，芡實(shí)殼醇提物清除能力強(qiáng)于水提物。兩種提取物具有將強(qiáng)的abts自由基清除能力，分別為相當(dāng)于每克樣中含有水溶性vc(trolox)1.4208±0.0614g、1.4146±0.0065g。

表1芡實(shí)殼提取物清除dpph自由基ic50值

表2芡實(shí)殼提取物對(duì)abts自由基清除能力

由圖1可知，添加芡實(shí)殼醇提物和bha的菜籽油pov值從第一天開(kāi)始明顯低于空白組(p<0.05)。添加0.1％bha的菜籽油組pov值明顯低于其他添加組(p<0.05)，而添加了0.01％芡實(shí)殼醇提物、0.1％芡實(shí)殼醇提物以及的0.01％bha菜籽油pov值差異不明顯(p<0.05)。芡實(shí)殼醇提物對(duì)菜籽油有一定的抗氧化作用，但效果不如0.1％bha。

由圖2可知，添加芡實(shí)殼水提物和bha的菜籽油pov值從第一天開(kāi)始明顯低于空白組(p<0.05)。添加0.1％bha的菜籽油組pov值明顯低于其他添加組(p<0.05)，而添加0.1％芡實(shí)殼水提物的菜籽油在第四天第五天明顯高于添加0.01％芡實(shí)殼是水提物的菜籽油的pov值(p<0.05)，第六天第七天則不明顯(p>0.05)，添加了0.01％芡實(shí)殼水提物的菜籽油與添加了0.01％bha的菜籽油在第六天前pov值無(wú)明顯差異(p>0.05)。芡實(shí)殼水提物對(duì)菜籽油有一定的抗氧化作用，但效果不如0.1％bha。

實(shí)施例3

芡實(shí)殼提取物抑菌活性測(cè)定

實(shí)驗(yàn)材料：

樣品：本抑菌試驗(yàn)的芡實(shí)殼提取物(醇提物、水提物)由實(shí)施例1制備

供試菌種：金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、假單胞菌、熱殺索絲菌、腐敗希瓦式菌、乳酸菌。

試劑：營(yíng)養(yǎng)瓊脂、假單胞選擇性培養(yǎng)基、熱殺索絲選擇性培養(yǎng)基

器材：芬蘭bioscreen全自動(dòng)分析儀，上海謂載商貿(mào)發(fā)展有限公司；漩渦儀，上海書(shū)俊儀器設(shè)備有限公司；sw-cj-2fd型雙人單面凈化工作臺(tái)，蘇州凈化設(shè)備有限公司；lrh-100c型低溫培養(yǎng)箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司；dhp-9082型電熱恒溫培養(yǎng)箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司；dnp-9082型電熱恒溫培養(yǎng)箱，上海精宏試驗(yàn)設(shè)備有限公司；fsh-2a可調(diào)高速勻漿機(jī)，金壇市醫(yī)療儀器廠(chǎng)；手提式蒸汽不銹鋼消毒器(滅菌鍋)，海三申醫(yī)療器械有限公司；cp214(c)型電子天平，奧豪斯儀器(上海)有限公司。

試驗(yàn)方法：

1、抑菌圈實(shí)驗(yàn)

分別稱(chēng)芡實(shí)殼醇提物和水提物粉末2g，將兩種粉末溶于10ml的無(wú)菌水中，配置成一定濃度為的樣液。

將已滅菌的瓊脂培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿內(nèi)，每皿15ml(下層)待其凝固；將已滅菌的5ml培養(yǎng)基冷卻到50℃左右混入100μl試驗(yàn)菌(菌懸液濃度為10⁵—10⁶cfu/ml，實(shí)驗(yàn)菌為金黃色葡萄球假單胞、大腸桿菌、假單胞菌、熱索殺絲、腐敗希瓦式菌，乳酸菌，將混有菌的培養(yǎng)基加到已凝固的培養(yǎng)基上層待其凝固；在已凝固的培養(yǎng)基表面上垂直放入牛津杯，輕輕加壓，使其與培養(yǎng)基接觸無(wú)空隙；在牛津杯內(nèi)加入200μl50mg/ml經(jīng)0.22μm無(wú)菌濾頭處理的樣液，勿使其外溢，無(wú)菌水做空白；加完樣品后在37℃或30℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)12-24h，觀察結(jié)果，抑菌圈直徑測(cè)量?jī)x量取直徑。

2、最小抑菌濃度實(shí)驗(yàn)方法

分別稱(chēng)取芡實(shí)殼提取物粉末各0.8g，將兩種粉末溶于2ml的溶劑中(10％dmso溶液)。制成一定梯度的稀釋液(200mg/ml、100mg/ml、50mg/ml、25mg/ml、12.5mg/ml、6.25mg/ml、3.125mg/ml)。在對(duì)應(yīng)的mh固體培養(yǎng)平板中分別添加不同濃度稀釋液各0.1ml，再分別添加各菌懸液0.1ml，均勻涂布滿(mǎn)整個(gè)平皿，蓋上皿蓋，待其稍干后倒置于適宜溫度的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)以不長(zhǎng)菌的最低樣液濃度為最小抑菌濃度。本次試驗(yàn)利用麥?zhǔn)媳葷岱ǖ贸鱿鄬?duì)應(yīng)菌的濃度約為10⁵-10⁶cfu/ml，試驗(yàn)以含10％dmso的無(wú)菌水為空白對(duì)照，聚耐氨酸和苯甲酸鈉為陽(yáng)性對(duì)照。實(shí)驗(yàn)菌為金黃色葡萄球假單胞、大腸桿菌、假單胞菌、熱索殺絲、腐敗西瓦式菌，乳酸菌)，涂布完后在37℃或30℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24-48h，觀察結(jié)果。

3、芡實(shí)殼提取物對(duì)冷鮮鴨肉保鮮效果

將芡實(shí)殼醇提物、水提物和ε-聚賴(lài)氨酸分別溶于無(wú)菌水中，制成25mg/ml的樣品溶液各1000ml。ε-聚賴(lài)氨酸做陽(yáng)性對(duì)照，無(wú)菌水做空白對(duì)照。

將新鮮宰殺后的鴨肉冷卻到分割溫度后，將鴨肉切割好后分4組，每組200g分別用芡實(shí)殼提取物、聚賴(lài)氨酸和蒸餾水對(duì)鴨肉浸泡10分鐘后氣調(diào)包裝(50％co2+50％n2)后放4℃的冰箱冷藏，評(píng)價(jià)指標(biāo)為感官評(píng)定、菌落總數(shù)、t-vbn，每隔ld(第0、1、3、5、7天)進(jìn)行一次指標(biāo)測(cè)定，其中菌落總數(shù)測(cè)到10⁶后不再測(cè)定。

1)感官評(píng)定

以肌肉色澤、表皮色澤、氣味、彈性、組織狀態(tài)、出水為評(píng)價(jià)指標(biāo)，按gb/t22210-2008中規(guī)定的專(zhuān)門(mén)的感官評(píng)定人員對(duì)冷鮮鴨肉進(jìn)行感官評(píng)價(jià)。

表3冷鮮鴨肉的感官指標(biāo)

2)菌落總數(shù)

按gb4789.2-2010《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)：菌落總數(shù)測(cè)定》方法行測(cè)定菌落總數(shù)。

3)t-vbn

揮發(fā)性鹽基氮(tvb-n值)測(cè)定，具體按gb/t5009.44-2003《肉與肉制品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法》進(jìn)行。

數(shù)據(jù)計(jì)算：

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

表3兩種提取物種六種菌的抑菌圈直徑單位:mm

注a：對(duì)照組(10％dmso溶液)抑菌圈為0，未列出；

注b：—-未形成抑菌圈。

由表3可以看出，芡實(shí)殼醇提物、水提物對(duì)大腸桿菌無(wú)抑菌效果，但對(duì)金黃色葡萄球菌、假單胞菌、腐敗希瓦氏菌、熱殺索絲菌均有明顯抑菌效果，其抑菌圈直徑在20～40mm之間，對(duì)腐敗西瓦氏菌的抑菌圈直徑最大，分別可達(dá)38.32±0.59和34.52±0.63，整體來(lái)講，醇提物的抑菌效果要強(qiáng)于水提物。

表4兩種提取物對(duì)四種菌的最小抑菌濃度(單位：mg/ml)

注：++-表示在200mg/ml時(shí)與空白組菌落數(shù)無(wú)差別；

+-表示在200mg/ml時(shí)僅有少量菌。

由表4可以看出，芡實(shí)殼醇提物的最小抑菌濃度要低于水提物，醇提物對(duì)金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度為12.5mg/ml，濃度低于陽(yáng)性對(duì)照ε-聚賴(lài)氨酸，但高于陽(yáng)性對(duì)照nision。對(duì)腐敗西瓦氏菌的抑菌濃度為50mg/ml，對(duì)假單胞菌的大于200mg/ml，效果均弱于陽(yáng)性對(duì)照聚賴(lài)氨酸和nision。

由圖3可以看出，冷鮮鴨肉的感官評(píng)價(jià)主要關(guān)注其顏色、氣味、彈性、組織形態(tài)，以及是否出水。根據(jù)感官評(píng)價(jià)可以看出空白組在第三天已經(jīng)低于6分，第五天已經(jīng)有明顯異味，而到第五天芡實(shí)殼醇提物、芡實(shí)殼水提物組氣味才有輕度不快，但第七天芡實(shí)殼水提取組與空白組感官情況已無(wú)差別(p>0.05)，而芡實(shí)殼醇提物組稍有異味ε-聚賴(lài)氨酸組則感官仍在6分以上。

菌落總數(shù)對(duì)于評(píng)價(jià)鴨肉產(chǎn)品品質(zhì)及貨架期有重要意義，由圖4可以看出，隨著貯藏天數(shù)的增加，鴨肉菌落總數(shù)增加。當(dāng)菌落總數(shù)超過(guò)10⁷cfu/g，說(shuō)明鴨肉已經(jīng)變質(zhì)，由圖4可以看空白組在第四天變質(zhì)，而芡實(shí)殼醇提物、芡實(shí)殼水提物組在第一天后其菌落總數(shù)均低于空白組(p<0.05)，高于陽(yáng)性對(duì)照組ε-聚賴(lài)氨酸(p<0.05)，且芡實(shí)殼醇提物與ε-聚賴(lài)氨酸組在第七天其菌落總數(shù)依然小于10⁷cfu/g。

tvb-n值是測(cè)定鴨肉產(chǎn)品品質(zhì)及貨架期的重要指標(biāo)，由圖5可以看出隨著貯藏時(shí)間的增長(zhǎng)，tvb-n值逐漸升高。其中芡實(shí)殼醇提物、芡實(shí)殼水提物組在整個(gè)貯藏期間tvb-n值均低于空白組，高于陽(yáng)性對(duì)照ε-聚賴(lài)氨酸組(p<0.05)。

由上述結(jié)果可以判斷出芡實(shí)殼醇提物、芡實(shí)殼水提物對(duì)冷鮮鴨肉具有一定的保鮮效果，兩種提取物可以延長(zhǎng)冷鮮鴨肉貨架期1～2天。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。