本發(fā)明涉及一種能防治哺乳仔豬流行性腹瀉(ped)的母豬高免飼料及其制備方法。
背景技術(shù):
:豬流行性腹瀉(porcineepidemicdiarrhea,ped)是由豬流行性腹瀉病毒(porcineepidemicdiarrheavirus,pedv)引起的豬的一種急性、高度接觸性腸道傳染病,可發(fā)生于各種年齡豬,但以對(duì)哺乳仔豬的危害最為嚴(yán)重。臨床上以腹瀉、嘔吐和脫水為主要特征,哺乳仔豬一旦發(fā)病往往導(dǎo)致高死亡率甚至引起哺乳仔豬100%的死亡,豬場損失十分嚴(yán)重。該病1971年在英國首次報(bào)道,1978年被確定為是由一種冠狀病毒引起的疾病。我國于1980年首次分離到pedv,以后多地均有ped發(fā)生的報(bào)道,流行范圍不斷擴(kuò)大。2010年以來,我國豬流行性腹瀉的危害一直比較嚴(yán)重。為有效防控ped的發(fā)生,我國于1995年開始用豬流行性腹瀉病毒(pedv)和豬傳染性胃腸炎病毒(porcinetransmissiblegastroenteritisvirus,tgev)二聯(lián)滅活苗或弱毒苗進(jìn)行ped與tge的聯(lián)合預(yù)防,并取得一定效果。但是從2006年初開始,pedv疫苗的免疫效果越來越差,免疫過的豬群照常爆發(fā)ped。從2010年起,全國大部分地區(qū)的豬場開始大規(guī)模爆發(fā)ped。但自2006年開始,腹瀉滅活苗和弱毒苗廣泛使用的豬場也暴發(fā)了嚴(yán)重的腹瀉,給我國的養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的損失。經(jīng)調(diào)查2013年未免疫場的發(fā)病率低于免疫場,無論是否免疫均無法阻止ped的發(fā)生,表明ped疫苗的免疫已無法避免ped的發(fā)生。說明隨著pedv從一個(gè)國家或地區(qū)傳播到另一個(gè)國家或地區(qū),在長期流行的過程中,病毒為更好地適應(yīng)所在地區(qū)的環(huán)境差異,會(huì)隨所處條件的改變而發(fā)生變異。同時(shí)自2006年起中國各豬場大規(guī)模爆發(fā)了高致病性藍(lán)耳,由于近年來幾乎所有的豬場均為藍(lán)耳病陽性豬場,且藍(lán)耳病具有明確的免疫抑制作用,故豬場使用流行性腹瀉病毒疫苗的的保護(hù)作用相當(dāng)有限。特異性的蛋黃抗體是一種易得、價(jià)廉和高效的疫病防控手段,已在獸醫(yī)臨床得到了廣泛應(yīng)用。潘孝成等(2016)“養(yǎng)豬”,2016(3),p119-120)利用pedv疫苗免疫蛋雞,給初生哺乳仔豬灌服高免蛋黃液,然后用pedv攻毒,發(fā)現(xiàn)經(jīng)一次灌服,可以降低哺乳仔豬死亡率50%,二次灌服則可以降低哺乳仔豬死亡率83.3%,在三個(gè)豬場的應(yīng)用也得到了相似的結(jié)論。說明pedv免疫的蛋雞可以獲得高效價(jià)的抗體,口服抗體能有效治理與預(yù)防pedv引起的哺乳仔豬腹瀉與死亡。同時(shí)說明二次灌服的效果好于單次灌服。如果為保證更好的效果,需要二次甚至多次灌服高免抗體,但是給每頭初生仔豬多次灌服則費(fèi)時(shí)費(fèi)力且應(yīng)激很大,而且不能保證每個(gè)工人能確保每頭仔豬都得到足夠的抗體,容易發(fā)生漏服的情況,導(dǎo)致預(yù)防與治療效果難以穩(wěn)定有效。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是:提供一種能防治哺乳仔豬流行性腹瀉(ped)的母豬高免飼料及其制備方法,本發(fā)明飼料中含有抗pedv高免蛋黃粉,使用本發(fā)明飼料既可以避免各豬場因普遍的藍(lán)耳病等免疫抑制性疾病導(dǎo)致母豬對(duì)pedv疫苗的免疫失敗;也可以避免哺乳仔豬因多次灌服抗pedv高免蛋黃液導(dǎo)致的高強(qiáng)度勞動(dòng)、對(duì)哺乳仔豬的應(yīng)激及因人工疏忽導(dǎo)致的漏服風(fēng)險(xiǎn),最大限度地省時(shí)省力地預(yù)防哺乳仔豬ped的發(fā)生。本發(fā)明提供的技術(shù)方案是:一種抗pedv高免蛋黃粉,在抗pedv蛋黃液中添加海藻酸鈉和黃芪多糖,經(jīng)噴霧干燥而成。所述的抗pedv高免蛋黃粉,相對(duì)于蛋黃抗體效價(jià)高于1∶32時(shí)收集的蛋黃液或全蛋液,其中添加0.5~5%海藻酸鈉,0.5~10%黃芪多糖。所述的抗pedv高免蛋黃粉,用生理鹽水將所述蛋黃液或全蛋液按1∶1~2進(jìn)行稀釋。本發(fā)明還提供一種制備如權(quán)利要求1所述的抗pedv高免蛋黃粉的方法,其特征在于:取pedv株的細(xì)胞培養(yǎng)物作為免疫原,免疫蛋雞,收集產(chǎn)生了抗體的雞蛋,取其蛋黃液或全蛋液,加入0.5~5%海藻酸鈉,0.5~10%黃芪多糖,勻漿,經(jīng)噴霧干燥制成抗pedv高免蛋黃粉。上述的方法,所述噴霧干燥的條件是進(jìn)口溫度不高于200℃,出口溫度不高于80℃。上述的方法中,取其蛋黃液或全蛋液后,用生理鹽水將蛋黃液或全蛋液按1∶1~2稀釋。本發(fā)明還提供一種用于防治pedv引起的流行性腹瀉的飼料,在懷孕與哺乳母豬的飼料中添加上述的抗pedv高免蛋黃粉。所述的飼料,優(yōu)選地,在飼料中添加0.05%-5%(重量)的所述的抗pedv高免蛋黃粉。所述飼料是胎期懷孕母豬高免飼料,優(yōu)選地,其配方為:按重量份計(jì),玉米,600-700公斤,豆粕150-200公斤,懷孕母豬料專用濃縮料200公斤,抗pedv高免蛋黃粉0.5-50公斤,合計(jì)1000公斤。。所述飼料是哺乳期母豬高免飼料,優(yōu)選地,其配方為,按重量份計(jì),玉米,600-700公斤,豆粕150-200公斤,哺乳母豬料專用濃縮料200公斤,抗pedv高免蛋黃粉0.5-50公斤,合計(jì)1000公斤。本發(fā)明具有以下有益效果:本發(fā)明利用已經(jīng)成熟的抗pedv高免蛋黃液,加入0.5~5%的海藻酸鈉等保護(hù)劑及0.5~10%黃芪多糖作為免疫增強(qiáng)劑混合均勻,經(jīng)噴霧干燥制備成高免蛋黃粉,按一定的比例添加于懷孕與哺乳母豬的飼料中,制備成防治pedv引起的流行性腹瀉的專用飼料。懷孕母豬采食后,抗體通過母豬胎盤進(jìn)入仔豬胚胎體內(nèi)對(duì)胎兒起保護(hù)作用;哺乳母豬采食后含高免蛋黃粉的飼料,抗體可以通過母豬乳腺組織進(jìn)入母乳內(nèi),哺乳仔豬通過采食母乳可以獲得持續(xù)不斷的抗pedv的抗體,使得乳豬出生后自動(dòng)可獲得對(duì)pedv的免疫能力,從而保護(hù)哺乳仔豬ped的發(fā)生。既可以避免各豬場因普遍的藍(lán)耳病等免疫抑制性疾病導(dǎo)致母豬對(duì)pedv疫苗的免疫失??;也可以避免哺乳仔豬因多次灌服抗pedv高免蛋黃液導(dǎo)致的高強(qiáng)度勞動(dòng)、對(duì)哺乳仔豬的應(yīng)激及因人工疏忽導(dǎo)致的漏服風(fēng)險(xiǎn),最大限度地省時(shí)省力地預(yù)防哺乳仔豬ped的發(fā)生。具體實(shí)施方式下面通過具體實(shí)施方式的詳細(xì)描述來進(jìn)一步闡明本發(fā)明,但并不是對(duì)本發(fā)明的限制,僅僅作示例說明。一、防治哺乳仔豬流行性腹瀉的母豬高免飼料的制備方法1、抗pedv高免蛋黃粉的制備:取pedv株的細(xì)胞培養(yǎng)物(tcid50為10~6.25/0.1ml)作為免疫原,免疫140~180日齡的來航母雞或其它品種蛋雞,選用弗氏完全佐劑等免疫佐劑,免疫原和佐劑的比例為1:0.5~2,免疫方式為胸部肌肉多點(diǎn)注射,免疫劑量為0.5~1.5ml/次,免疫次數(shù)為3~8次,每次免疫間隔為2周。二免后2周開始收集雞蛋測蛋黃液抗體效價(jià)。蛋黃抗體效價(jià)高于1∶32時(shí),收集雞蛋,用生理鹽水將蛋黃液(或全蛋液)按1∶1~2稀釋(重量比),加入0.5~5%海藻酸鈉,0.5~10%黃芪多糖(重量比),勻漿,經(jīng)噴霧干燥(進(jìn)口溫度不高于200℃,出口溫度不高于80℃)制成抗pedv高免蛋黃粉。2、攻胎期懷孕母豬高免飼料的制備方法:按重量份計(jì),玉米,600-700公斤,豆粕150-200公斤,懷孕母豬料專用濃縮料(市售,例如:穗生多20%懷孕母豬專用濃縮料)200公斤,抗pedv高免蛋黃粉0.5-50公斤,合計(jì)1000公斤。3、哺乳期母豬高免飼料的制備方法:按重量份計(jì),玉米,600-700公斤,豆粕150-200公斤,哺乳母豬料專用濃縮料(市售,例如:穗生多20%哺乳母豬專用濃縮料)200公斤,抗pedv高免蛋黃粉0.5-50公斤,合計(jì)1000公斤。二、飼喂方法:1、攻胎期懷孕母豬(懷孕80日齡~產(chǎn)仔)飼喂攻胎期懷孕母豬高免飼料,經(jīng)產(chǎn)母豬及初產(chǎn)母豬均,根據(jù)體況及季節(jié),懷孕母豬飼喂2-6公斤/頭.每天。2、哺乳母豬飼喂量:母豬產(chǎn)仔飼喂哺乳期母豬高免飼料,母豬產(chǎn)仔當(dāng)天不喂,產(chǎn)后第二天1-3公斤,以后每天增加0.5-1公斤到第8天,每天早晚兩頓,之后自由采食,每天三頓,早晚為主,斷奶前二天每天喂3-6公斤,每天飼喂2~4次。三、人工感染試驗(yàn):選取經(jīng)產(chǎn)2-3胎懷孕期約80天的懷孕母豬(長*大母豬)180頭,隨機(jī)分為2組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)30頭母豬。試驗(yàn)組在懷孕85天開始按本專利方法飼喂攻胎期懷孕母豬高免飼料及哺乳期母豬高免飼料,直至哺乳結(jié)束。對(duì)照組飼喂的普通的懷孕母豬料與哺乳母豬料(不含抗ped高免蛋黃抗體的飼料)。試驗(yàn)組與對(duì)照組仔豬出生后1小時(shí)內(nèi)每頭仔豬口服5ml的pedvsd株第8代vero細(xì)胞培養(yǎng)物,觀察乳豬腹瀉情況,具體請(qǐng)見表1。表1:懷孕母豬高免飼料及哺乳期母豬高免飼料對(duì)哺乳仔豬腹瀉的影響。分組母豬數(shù)(頭)產(chǎn)活仔數(shù)(頭)初生活仔均重(公斤)10日齡內(nèi)仔豬腹瀉率(%)出生后7天內(nèi)仔豬死亡率(%)母豬產(chǎn)程(小時(shí))對(duì)照組908821.301001004.5試驗(yàn)組909461.48003.5四、豬場應(yīng)用試驗(yàn):選取廣東江門市某豬場、茂名某豬場、河南鶴壁某豬場,經(jīng)詢問得知哺乳仔豬近期均有流行性腹瀉的發(fā)病史,經(jīng)豬流行性腹瀉病毒(pedv)的抗原快速檢測試劑盒檢測結(jié)果呈陽性。每個(gè)豬場各選取300頭懷孕母豬作為試驗(yàn),隨機(jī)分為2組,各150頭,分別為試驗(yàn)組與對(duì)照組,試驗(yàn)組在懷孕85天開始按本發(fā)明方法飼喂攻胎期懷孕母豬高免飼料及哺乳期飼喂哺乳期母豬高免飼料,直至哺乳結(jié)束。對(duì)照組的母豬作為對(duì)照組按正常的飼喂方法飼喂。結(jié)果見表2。表2:懷孕母豬高免飼料及哺乳期母豬高免飼料對(duì)哺乳仔豬腹瀉的影響。豬場初生活仔均重(kg)10日齡內(nèi)仔豬死亡率(%)21日齡斷奶仔豬存活率(%)母豬產(chǎn)程(小時(shí))江門某豬場對(duì)照組1.3883.510.44.6試驗(yàn)組1.502.596.53.3茂名某豬場對(duì)照組1.2976.411.94.2試驗(yàn)組1.461.098.63.0鶴壁某豬場對(duì)照組1.3586.68.84.3試驗(yàn)組1.54099.22.9本發(fā)明通過母豬采食含抗pedv特異性蛋黃抗體的懷孕母豬高免飼料及哺乳期母豬高免飼料,為有效解決當(dāng)前ped對(duì)養(yǎng)豬生產(chǎn)的危害提供了一種可行的新手段。懷孕母豬采食抗體后,抗體通過子宮胎盤進(jìn)入仔豬胎兒體內(nèi),可以中和病毒,防治仔豬出生后流行性腹瀉的發(fā)生。哺乳母豬采食后乳汁中獲得外源性抗體,哺乳仔豬通過吸允乳汁獲得抗體,可以預(yù)防與治療流行性腹瀉的發(fā)生,從而有效控制豬場流行性腹瀉的發(fā)生。同時(shí)通過在母豬飼料中添加免疫增強(qiáng)劑黃芪多糖,能進(jìn)一步提高母豬的免疫能力。因此通過本發(fā)明方法可以避免了因藍(lán)耳病等免疫抑制性疾病引起的ped的免疫失敗,也可以節(jié)省因給每頭哺乳仔豬多次灌服高免蛋黃液所需要的大量人力物力,也能減少因人為因素導(dǎo)致的漏免漏服及有效減少因頻繁灌服對(duì)哺乳仔豬的應(yīng)激,從而從源頭有效控制一個(gè)豬場流行性腹瀉的發(fā)生。攻毒試驗(yàn)及田間應(yīng)用證明本發(fā)明是一種可行有效的具有創(chuàng)新性的預(yù)防哺乳仔豬ped腹瀉發(fā)生的新方法。當(dāng)前第1頁12