本發(fā)明涉及一種牡丹花瓣乳酸菌飲料的制備方法，特別是一種植物乳桿菌發(fā)酵鳳丹牡丹花瓣茶飲料的制法。
背景技術(shù)：
牡丹，為毛茛科芍藥屬植物，是我國(guó)的國(guó)花，具有很高的觀賞價(jià)值和藥用價(jià)值。作為我國(guó)的傳統(tǒng)名花，牡丹花產(chǎn)品尚未形成規(guī)模，附加值較低。因此，應(yīng)加大深加工技術(shù)，將短期性的效益提高。目前市面上有牡丹花茶、牡丹花醋、牡丹花酸奶、以及牡丹花餅和花粉等，但沒(méi)有直接用乳酸菌發(fā)酵牡丹花的飲料。
鳳丹牡丹花花瓣，2013年國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委公布，只有鳳丹牡丹花可以作為食品供人們長(zhǎng)期食用。鳳丹牡丹花花瓣中含有：牡丹多糖、牡丹酚、氨基酸、維生素、牡丹皂甙、甾醇、角鯊烯、植物蛋白、核酸類、黃酮類、酶類等多類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，具有良好的食用價(jià)值。
綠茶茶葉營(yíng)養(yǎng)成分豐富，富含多種蛋白質(zhì)、氨基酸、生物堿、咖啡堿、茶多酚、茶多糖、茶色素和多種維牛素及礦物質(zhì)，不僅具有提神、消除疲勞、生津止渴等功效，而且還具有抑菌、消炎、降低血壓、血脂和血糖、抗衰老、抗輻射、抗癌等療效。
茶多酚，是茶葉中多羥基酚類化合物的復(fù)合物，是茶葉中具有保健功能的主要成分，茶多酚的抗氧化作用遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于洋甘菊、薄荷葉等植物多酚。茶多酚具有抗氧化性、抑菌性和抗突變作用等多種生物活性。茶多酚的抗氧化能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于維生素。
活性乳酸菌飲料，是一種以新鮮牛乳或乳粉、植物蛋白粉、糖類或果蔬汁為原料，經(jīng)乳酸菌發(fā)酵培養(yǎng)，然后稀釋得到的產(chǎn)品。此類飲料口味相對(duì)于普通乳飲料更加的清爽，飲料中含有大量的活性乳酸菌，可以在腸道內(nèi)抑制有害菌的生長(zhǎng)。目前人們對(duì)于食品的保健功能越來(lái)越重視，運(yùn)用功能性原料生產(chǎn)飲料成為目前飲料市場(chǎng)的一種趨勢(shì)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種植物乳桿菌發(fā)酵鳳丹牡丹花瓣茶飲料的制法，通過(guò)植物乳桿菌的發(fā)酵作用，將鳳丹牡丹花和綠茶中的營(yíng)養(yǎng)成分充分溶出，得到一種風(fēng)味、口感以及營(yíng)養(yǎng)等都優(yōu)于普通的發(fā)酵飲料和牡丹花飲料，提高性乳酸菌飲料的附加值，滿足廣大消費(fèi)者的需求，為牡丹花花瓣和茶葉的深加工開(kāi)辟新途徑。
為了實(shí)現(xiàn)解決上述技術(shù)問(wèn)題的目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案：
一種植物乳桿菌發(fā)酵鳳丹牡丹花瓣茶飲料的制法，包括將鳳丹牡丹花和綠茶茶葉浸提后加入果葡糖漿，菌種馴化、接種、發(fā)酵和冷卻工序，最后得到牡丹花活性乳酸菌飲料；未明確說(shuō)明的含量和比例，均為質(zhì)量含量和比例；具體步驟如下：
（1）、牡丹花茶液的制備
步驟一、選取新鮮無(wú)霉變的鳳丹牡丹花花瓣與去離子水進(jìn)行混合，料水質(zhì)量比為1：40，在60～70℃下水浴浸提15-25min，并不斷攪拌，浸提液經(jīng)冷卻后過(guò)濾，最后得到的濾液即為牡丹花浸提液；
步驟二、稱取干燥無(wú)霉變綠茶茶葉與去離子水混合，料水質(zhì)量比為1:15，在70-90℃下水浴浸提30min，浸提液冷卻過(guò)濾，得到的茶葉浸提液與牡丹花浸提液混合，混合比為1:1，即為牡丹花茶浸提液，25℃以下溫度冷藏備用；
步驟三、在混合浸提液中加入占浸提液質(zhì)量1%-6%的果葡糖漿，攪拌均勻后加入0.35%的檸檬酸護(hù)色，得到牡丹花茶原液；更具體的，所述的果葡糖漿的質(zhì)量濃度是95%；
加入的果葡糖漿，技術(shù)目的是為植物乳桿菌提供所需的碳源；
步驟四、將上述步驟三的牡丹花茶原液分裝后放入高壓滅菌鍋中，115-121℃15-30min，然后取出冷卻至室溫，得到牡丹花茶液。
（2）、菌種的馴化
步驟一、另取新鮮無(wú)霉變的鳳丹牡丹花花瓣和與去離子水混合，此時(shí)的料水質(zhì)量比為1：20，在65℃下水浴浸提20min，冷卻過(guò)濾得到浸提液a；稱取綠茶茶葉與去離子水混合，料水質(zhì)量比為1：10，在80℃下水浴浸提20min，冷卻過(guò)濾得到浸提液b；兩種浸提液混合，混合質(zhì)量比1:1，再加入占混合液質(zhì)量6%的果葡糖漿，得到牡丹花茶漿液；獲得的牡丹花茶漿液與脫脂乳按不同的質(zhì)量百分比混合制備五份不同的培養(yǎng)基，五份培養(yǎng)基的原料比例分別是：牡丹花茶漿液50%，脫脂乳50%；牡丹花茶漿液60%，脫脂乳40%；牡丹花茶漿液70%，脫脂乳30%；牡丹花漿液80%，脫脂乳20%；牡丹花茶漿液90%，脫脂乳10%；
具體的，浸提液a的的制備條件為：在65℃~80℃下，將鳳丹牡丹花花瓣和去離子水的混合液浸提20min；然后在低于30℃下過(guò)濾后，即得到浸提液a。
具體的，浸提液b的的制備條件為：在65℃~80℃下，將綠茶茶葉和去離子水的混合液浸提20min；然后在低于30℃下過(guò)濾后，即得到浸提液b。
所述的脫脂乳，是指純牛奶的脫脂后的產(chǎn)物。
步驟二、將植物乳桿菌菌種依次從低濃度到高濃度的牡丹花茶漿培養(yǎng)基中接種馴化；過(guò)程如下：
植物乳桿菌活化：將保存在斜面上的植物乳桿菌在無(wú)菌條件下接種到mrs培養(yǎng)基中，在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至菌種濃度達(dá)到108-109cfu/ml時(shí)，完成活化；
馴化階段1：牡丹花茶漿液50%，脫脂乳50%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入活化好的菌種，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑1；
馴化階段2：牡丹花茶漿液60%，脫脂乳40%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入發(fā)酵劑1，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑2；
馴化階段3：牡丹花茶漿液70%，脫脂乳30%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入發(fā)酵劑2，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑3；
馴化階段4：牡丹花茶漿液80%，脫脂乳20%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入發(fā)酵劑3，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑4；
馴化階段5：牡丹花茶漿液90%，脫脂乳10%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入發(fā)酵劑4，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑5；
取100%的牡丹花茶漿液，將發(fā)酵劑5接種其中，在37±5℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24±6h，菌種濃度達(dá)到6×108cfu/ml以上，馴化完成；即得到在高濃度牡丹花茶漿中具有良好發(fā)酵能力的馴化發(fā)酵劑；
所述的高濃度的牡丹花茶漿培養(yǎng)基，是指牡丹花茶漿培養(yǎng)基中的牡丹花茶漿液相對(duì)含量較高的牡丹花茶漿培養(yǎng)基；
菌種馴化時(shí)的接種量都為3%；
所述的mrs培養(yǎng)基，即為現(xiàn)有技術(shù)的一種適合各種乳桿菌生長(zhǎng)的通用培養(yǎng)基。例如mrs培養(yǎng)基，質(zhì)量配比成分可以為：蛋白胨1%，牛肉膏1%，酵母膏0.5%，葡萄糖2%，乙酸鈉0.5%，檸檬酸氫二銨0.2%，吐溫80為0.1%，硫酸錳0.02%，硫酸鎂0.02%，其余為水。
（3）、接種、發(fā)酵制備牡丹花茶飲料
步驟一、取上述馴化發(fā)酵劑，接種于牡丹花茶液中，馴化發(fā)酵劑接種量為牡丹花茶液體積的1%-5%，混合均勻得到牡丹花茶培養(yǎng)液；
為植物乳桿菌提供碳源的是果葡糖漿，由于果葡糖漿在40℃以下時(shí)具有冷甜特性，甜度隨溫度的降低而升高，由于果糖的存在，具有清香、爽口的感覺(jué)。
步驟二、將步驟一中的牡丹花茶培養(yǎng)液進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵溫度為32-42℃，發(fā)酵時(shí)間為12-48h，得到乳酸菌發(fā)酵牡丹花茶液；
步驟三、將步驟二中得到的乳酸菌發(fā)酵牡丹花茶液冷卻均質(zhì)后無(wú)菌灌裝，放置于2-6℃冰箱中冷藏，得到最終的牡丹花茶飲料。
更具體的，所述的均質(zhì)條件為：步驟二中得到的乳酸菌發(fā)酵牡丹花茶液冷卻至15-20℃，15-25mｐa均質(zhì)。
本專利涉及的鳳丹牡丹花花瓣一般是上午采摘，采摘后放在通風(fēng)、避光處風(fēng)干。綠茶茶葉市面上可購(gòu)買。
本專利未明確說(shuō)明的含量和比例，均為質(zhì)量含量和比例。
這些技術(shù)方案，包括改進(jìn)的技術(shù)方案以及進(jìn)一步改進(jìn)的技術(shù)方案也可以互相組合或者結(jié)合，從而達(dá)到更好的技術(shù)效果。
通過(guò)采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明采用篩選出的植物乳桿菌進(jìn)行發(fā)酵處理，制得的牡丹花茶飲料與發(fā)酵茶飲料相似口感清爽，可以增強(qiáng)機(jī)體的免疫力、抗衰老、抗癌、降血壓、降血脂、排毒養(yǎng)顏以及改善腸胃功能等。而且制備方法簡(jiǎn)單，發(fā)展前景良好。
本發(fā)明通過(guò)對(duì)鳳丹牡丹花花瓣和茶葉浸提液的發(fā)酵，可使乳酸菌飲料的營(yíng)養(yǎng)成分更加豐富，相對(duì)于市面上的乳酸菌飲料，該產(chǎn)品中還含有牡丹花花瓣和茶葉中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如牡丹多糖、牡丹酚、咖啡堿、茶多酚、氨基酸、多種維牛素及礦物質(zhì)等；對(duì)比于市面上的茶飲料，本產(chǎn)品中還具有大量的活性乳酸菌與牡丹花的香味。賦予活性乳酸菌飲料了保健功能，同時(shí)提高了飲料附加值，迎合了多元化的飲料市場(chǎng)。
本發(fā)明通過(guò)確定牡丹花花瓣與水的質(zhì)量比，茶葉與水的質(zhì)量比，混合浸提液比，果葡糖漿添加量、接種量、發(fā)酵時(shí)間和發(fā)酵溫度等因素，輔以乳酸菌發(fā)酵牡丹花飲料的制作配方；還進(jìn)行了產(chǎn)品品質(zhì)的分析，對(duì)發(fā)酵液的ph、酸度、褐變程度，乳酸菌總數(shù)等指標(biāo)進(jìn)行了檢測(cè)，以便對(duì)飲料的品質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步評(píng)定，生產(chǎn)出高品質(zhì)的活性乳酸菌飲料。
通過(guò)本方法制得的牡丹花茶飲料，色澤黃綠，口感細(xì)膩，酸甜適中，改善了原有牡丹花液苦澀的口味。既具有牡丹花特有的香味、綠茶的清爽口味，又帶有乳酸的酸味，能夠滿足廣大消費(fèi)者對(duì)飲料口味和營(yíng)養(yǎng)的追求，為牡丹花資源的利用以及乳酸菌飲料新產(chǎn)品研發(fā)開(kāi)辟了新的途徑。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合和實(shí)施例對(duì)本專利進(jìn)一步解釋說(shuō)明。但本專利的保護(hù)范圍不限于具體的實(shí)施方式。
實(shí)施例1
本專利的一種牡丹花活性乳酸菌飲料的制備方法，通過(guò)對(duì)鳳丹牡丹花花瓣和綠茶茶葉的浸提處理，加入果葡糖漿、檸檬酸，滅菌后接入植物乳桿菌，培養(yǎng)發(fā)酵后得到牡丹花活性乳酸菌飲料。
（1）、牡丹花茶液的制備
步驟一、選取新鮮無(wú)霉變的鳳丹牡丹花花瓣與去離子水進(jìn)行混合，料水質(zhì)量比為1：40，在60℃下水浴浸提15min，并不斷攪拌，浸提液經(jīng)冷卻后過(guò)濾，最后得到的濾液即為牡丹花浸提液。
步驟二、稱取干燥無(wú)霉變綠茶茶葉與去離子水混合，料水比為1:15，在80℃下水浴浸提30min，浸提液冷卻過(guò)濾，得到的茶葉浸提液與牡丹花浸提液混合，混合比為1:1，即為牡丹花茶浸提液，25℃以下溫度冷藏備用。
步驟三、在混合浸提液中加入占浸提液質(zhì)量1%的果葡糖漿，攪拌均勻后加入0.35%的檸檬酸護(hù)色，得到牡丹花茶原液；
步驟四、將上述步驟三的牡丹花茶原液分裝后放入高壓滅菌鍋中，115℃15min，然后取出冷卻至室溫，得到牡丹花茶液。
（2）、菌種的馴化
步驟一、另取新鮮無(wú)霉變的鳳丹牡丹花花瓣和與去離子水混合，此時(shí)的料水質(zhì)量比為1：20，在65℃下水浴浸提20min，浸提液冷卻過(guò)濾得到浸提液1；稱取綠茶茶葉與去離子水混合，料水質(zhì)量比為1：10，在80℃下水浴浸提20min，浸提液冷卻過(guò)濾得到浸提液2；兩種浸提液混合，混合質(zhì)量比1:1，再加入占混合液質(zhì)量6%的果葡糖漿，得到牡丹花茶漿液；獲得的牡丹花茶漿液與脫脂乳按不同的質(zhì)量百分比混合制備五份不同的培養(yǎng)基，五份培養(yǎng)基的原料比例分別是：牡丹花茶漿液50%，脫脂乳50%；牡丹花茶漿液60%，脫脂乳40%；牡丹花茶漿液70%，脫脂乳30%；牡丹花漿液80%，脫脂乳20%；牡丹花茶漿液90%，脫脂乳10%；
步驟二、將植物乳桿菌菌種依次從低濃度到高濃度的牡丹花茶漿培養(yǎng)基中接種馴化。過(guò)程如下：
植物乳桿菌活化：將保存在斜面上的植物乳桿菌在無(wú)菌條件下接種到mrs培養(yǎng)基中，在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至菌種濃度達(dá)到108-109cfu/ml時(shí)，完成活化；
馴化階段1：牡丹花茶漿液50%，脫脂乳50%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入活化好的菌種，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑1；
馴化階段2：牡丹花茶漿液60%，脫脂乳40%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入發(fā)酵劑1，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑2；
馴化階段3：牡丹花茶漿液70%，脫脂乳30%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入發(fā)酵劑2，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑3；
馴化階段4：牡丹花茶漿液80%，脫脂乳20%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入發(fā)酵劑3，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑4；
馴化階段5：牡丹花茶漿液90%，脫脂乳10%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入發(fā)酵劑4，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑5；
取100%的牡丹花茶漿液，將上述發(fā)酵劑5接種其中，在37℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，此時(shí)的菌種濃度達(dá)到了6×108cfu/ml，馴化完成。即得到在高濃度牡丹花茶漿中具有良好發(fā)酵能力的馴化發(fā)酵劑。
（3）、接種、發(fā)酵制備牡丹花茶飲料
步驟一、取上述發(fā)酵劑，接種于牡丹花茶液中，發(fā)酵劑接種量為牡丹花茶液體積的1%，混合均勻得到牡丹花茶培養(yǎng)液；
步驟二、將步驟一中的牡丹花茶培養(yǎng)液進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵溫度為32℃，發(fā)酵時(shí)間為12h，得到乳酸菌發(fā)酵牡丹花茶液。
步驟三、將步驟二中得到的乳酸菌發(fā)酵牡丹花茶液冷卻至15℃，15-25mpa均質(zhì)后無(wú)菌灌裝，放置于2-6℃冰箱中冷藏，得到最終的牡丹花茶飲料。
得到的產(chǎn)品性能和口感:外觀顏色：淡綠色；組織狀態(tài)：良好；營(yíng)養(yǎng)物：牡丹多糖、牡丹酚、咖啡堿、茶多酚、氨基酸、多種維牛素及礦物質(zhì)等；酸甜度：微酸；口感：清爽，輕微的苦味，淡淡的花香；植物乳桿菌存活性：106-108cfu/ml。
實(shí)施例2
牡丹花活性乳酸菌飲料的制備方法，通過(guò)對(duì)鳳丹牡丹花花瓣和綠茶茶葉的浸提處理，加入果葡糖漿、檸檬酸，滅菌后接入植物乳桿菌，培養(yǎng)發(fā)酵后得到牡丹花活性乳酸菌飲料。
（1）、牡丹花茶液的制備
步驟一、選取新鮮無(wú)霉變的鳳丹牡丹花花瓣與去離子水進(jìn)行混合，料水質(zhì)量比為1：40，在65℃下水浴浸提20min，并不斷攪拌，浸提液經(jīng)冷卻后過(guò)濾，最后得到的濾液即為牡丹花浸提液。
步驟二、稱取干燥無(wú)霉變綠茶茶葉與去離子水混合，料水比為1:15，在80℃下水浴浸提30min，浸提液冷卻過(guò)濾，得到的茶葉浸提液與牡丹花浸提液混合，混合比為1:1，即為牡丹花茶浸提液，25℃以下溫度冷藏備用。
步驟三、在混合浸提液中加入占浸提液質(zhì)量3%的果葡糖漿，攪拌均勻后加入0.35%的檸檬酸護(hù)色，得到牡丹花茶原液。
步驟四、將上述步驟三的牡丹花茶原液分裝后放入高壓滅菌鍋中，118℃18min，然后取出冷卻至室溫，得到牡丹花茶液。
（2）、菌種的馴化
步驟一、另取新鮮無(wú)霉變的鳳丹牡丹花花瓣和與去離子水混合，此時(shí)的料水質(zhì)量比為1：20，在65℃下水浴浸提20min，浸提液冷卻過(guò)濾得到浸提液1；稱取綠茶茶葉與去離子水混合，料水質(zhì)量比為1：10，在80℃下水浴浸提20min，浸提液冷卻過(guò)濾得到浸提液2；兩種浸提液混合，混合質(zhì)量比1:1，再加入占混合液質(zhì)量6%的果葡糖漿，得到牡丹花茶漿液；獲得的牡丹花茶漿液與脫脂乳按不同的質(zhì)量百分比混合制備五份不同的培養(yǎng)基，五份培養(yǎng)基的原料質(zhì)量比例分別是：牡丹花茶漿液50%，脫脂乳50%；牡丹花茶漿液60%，脫脂乳40%；牡丹花茶漿液70%，脫脂乳30%；牡丹花漿液80%，脫脂乳20%；牡丹花茶漿液90%，脫脂乳10%。
步驟二、將植物乳桿菌菌種依次從低濃度到高濃度的牡丹花茶漿培養(yǎng)基中接種馴化。過(guò)程如下：
植物乳桿菌活化：將保存在斜面上的植物乳桿菌在無(wú)菌條件下接種到mrs培養(yǎng)基中，在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至菌種濃度達(dá)到108-109cfu/ml時(shí)，完成活化；
馴化階段1：牡丹花茶漿液50%，脫脂乳50%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入活化好的菌種，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑1；
馴化階段2：牡丹花茶漿液60%，脫脂乳40%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入發(fā)酵劑1，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑2；
馴化階段3：牡丹花茶漿液70%，脫脂乳30%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入發(fā)酵劑2，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑3；
馴化階段4：牡丹花茶漿液80%，脫脂乳20%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入發(fā)酵劑3，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑4；
馴化階段5：牡丹花茶漿液90%，脫脂乳10%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入發(fā)酵劑4，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑5；
取100%的牡丹花茶漿液，將上述發(fā)酵劑5接種其中，在37℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，此時(shí)的菌種濃度達(dá)到了6×108cfu/ml，馴化完成。即得到在高濃度牡丹花茶漿中具有良好發(fā)酵能力的馴化發(fā)酵劑。
（3）、接種、發(fā)酵制備牡丹花茶飲料
步驟一、取上述馴化發(fā)酵劑，接種于牡丹花茶液中，馴化發(fā)酵劑接種量為牡丹花茶液體積的3%，混合均勻得到牡丹花茶培養(yǎng)液；
步驟二、將步驟一中的牡丹花茶培養(yǎng)液進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵溫度為37℃，發(fā)酵時(shí)間為24h，得到乳酸菌發(fā)酵牡丹花茶液。
步驟三、將步驟二中得到的乳酸菌發(fā)酵牡丹花茶液冷卻至18℃，15-25mpa均質(zhì)后無(wú)菌灌裝，放置于2-6℃冰箱中冷藏，得到最終的牡丹花茶飲料。
得到的產(chǎn)品性能和口感:外觀顏色：黃綠色；組織狀態(tài)：良好；營(yíng)養(yǎng)物：牡丹多糖、牡丹酚、咖啡堿、茶多酚、氨基酸、多種維牛素及礦物質(zhì)等；酸甜度：較酸；口感：清爽，輕微的苦味，淡淡的花香；植物乳桿菌存活性：107-109cfu/ml。
實(shí)施例三
牡丹花活性乳酸菌飲料的制備方法，通過(guò)對(duì)鳳丹牡丹花花瓣和綠茶茶葉的浸提處理，加入果葡糖漿、檸檬酸，滅菌后接入植物乳桿菌，培養(yǎng)發(fā)酵后得到牡丹花活性乳酸菌飲料。
（1）、牡丹花茶液的制備
步驟一、選取新鮮無(wú)霉變的鳳丹牡丹花花瓣與去離子水進(jìn)行混合，料水質(zhì)量比為1：40，在70℃下水浴浸提25min，并不斷攪拌，浸提液經(jīng)冷卻后過(guò)濾，最后得到的濾液即為牡丹花浸提液。
步驟二、稱取干燥無(wú)霉變綠茶茶葉與去離子水混合，料水比為1:15，在80℃下水浴浸提30min，浸提液冷卻過(guò)濾，得到的茶葉浸提液與牡丹花浸提液混合，混合比為1:1，即為牡丹花茶浸提液，25℃以下溫度冷藏備用。
步驟三、在混合浸提液中加入占浸提液質(zhì)量6%的果葡糖漿，攪拌均勻后加入0.35%的檸檬酸護(hù)色，得到牡丹花茶原液；步驟四、將上述步驟三的牡丹花茶原液分裝后放入高壓滅菌鍋中，121℃30min，然后取出冷卻至室溫，得到牡丹花茶液。
（2）、菌種的馴化
步驟一、另取新鮮無(wú)霉變的鳳丹牡丹花花瓣和與去離子水混合，此時(shí)的料水質(zhì)量比為1：20，在65℃下水浴浸提20min，浸提液冷卻過(guò)濾得到浸提液1；稱取綠茶茶葉與去離子水混合，料水質(zhì)量比為1：10，在80℃下水浴浸提20min，浸提液冷卻過(guò)濾得到浸提液2；兩種浸提液混合，混合質(zhì)量比1:1，再加入占混合液質(zhì)量6%的果葡糖漿，得到牡丹花茶漿液；獲得的牡丹花茶漿液與脫脂乳按不同的質(zhì)量百分比混合制備五份不同的培養(yǎng)基，五份培養(yǎng)基的原料比例分別是：牡丹花茶漿液50%，脫脂乳50%；牡丹花茶漿液60%，脫脂乳40%；牡丹花茶漿液70%，脫脂乳30%；牡丹花漿液80%，脫脂乳20%；牡丹花茶漿液90%，脫脂乳10%；
步驟二、將植物乳桿菌菌種依次從低濃度到高濃度的牡丹花茶漿培養(yǎng)基中接種馴化。過(guò)程如下：
植物乳桿菌活化：將保存在斜面上的植物乳桿菌在無(wú)菌條件下接種到mrs培養(yǎng)基中，在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至菌種濃度達(dá)到108-109cfu/ml時(shí)，完成活化；
馴化階段1：牡丹花茶漿液50%，脫脂乳50%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入活化好的菌種，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑1；
馴化階段2：牡丹花茶漿液60%，脫脂乳40%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入發(fā)酵劑1，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑2；
馴化階段3：牡丹花茶漿液70%，脫脂乳30%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入發(fā)酵劑2，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑3；
馴化階段4：牡丹花茶漿液80%，脫脂乳20%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入發(fā)酵劑3，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑4；
馴化階段5：牡丹花茶漿液90%，脫脂乳10%，100℃滅菌15min，冷卻至40±5℃，接入發(fā)酵劑4，37±5℃下馴化培養(yǎng)24±6h得到發(fā)酵劑5；
取100%的牡丹花茶漿液，將上述發(fā)酵劑5接種其中，在37℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，此時(shí)的菌種濃度達(dá)到了6×108cfu/ml，馴化完成。即得到在高濃度牡丹花茶漿中具有良好發(fā)酵能力的馴化發(fā)酵劑。
（3）、接種、發(fā)酵制備牡丹花茶飲料
步驟一、取上述馴化發(fā)酵劑，接種于牡丹花茶液中，馴化發(fā)酵劑接種量為牡丹花茶液體積的5%，混合均勻得到牡丹花茶培養(yǎng)液；
步驟二、將步驟一中的牡丹花茶培養(yǎng)液進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵溫度為42℃，發(fā)酵時(shí)間為48h，得到乳酸菌發(fā)酵牡丹花茶液。
步驟三、將步驟二中得到的乳酸菌發(fā)酵牡丹花茶液冷卻至20℃，15-25mpa均質(zhì)后無(wú)菌灌裝，放置于2-6℃冰箱中冷藏，得到最終的牡丹花茶飲料。
得到的產(chǎn)品性能和口感:外觀顏色：黃綠色；組織狀態(tài)：良好；營(yíng)養(yǎng)物：牡丹多糖、牡丹酚、咖啡堿、茶多酚、氨基酸、多種維牛素及礦物質(zhì)等；酸甜度：比例恰當(dāng)；口感：清爽，輕微的苦味，淡淡的花香；植物乳桿菌存活性：107-109cfu/ml。
對(duì)比例1：不添加0.35%的檸檬酸，其他同實(shí)施例2。
得到的產(chǎn)品性能和口感:外觀顏色：褐色；組織狀態(tài)：一般；營(yíng)養(yǎng)物：牡丹多糖、牡丹酚、咖啡堿、茶多酚、氨基酸、多種維牛素及礦物質(zhì)等；酸甜度：較酸；口感：清爽，輕微的苦味，淡淡的花香；植物乳桿菌存活性：106-108cfu/ml。三周后產(chǎn)品的組織狀態(tài)、外觀等方面有所下降。
對(duì)比例2:鳳丹牡丹花花瓣和茶葉的浸提液與復(fù)原乳各占一半，分別加入果葡糖漿、檸檬酸，滅菌后在復(fù)原乳中接入植物乳桿菌，培養(yǎng)發(fā)酵后，加入浸提液混合得到的飲料。其他同實(shí)例2。
得到的產(chǎn)品性能和口感:外觀顏色：米黃色；組織狀態(tài)：一般；營(yíng)養(yǎng)物：牡丹多糖、牡丹酚、咖啡堿、茶多酚、氨基酸、多種維牛素及礦物質(zhì)等；酸甜度：較酸；口感：不夠清爽，較苦，淡淡的花香；植物乳桿菌存活性：107-1010cfu/ml。
對(duì)比例3:鳳丹牡丹花花瓣和茶葉的的浸提液與復(fù)原乳各占一半，混合加入果葡糖漿、檸檬酸，滅菌后接入植物乳桿菌，培養(yǎng)發(fā)酵，其他同實(shí)例2。
得到的產(chǎn)品性能和口感:外觀顏色：米黃色；組織狀態(tài)：一般；營(yíng)養(yǎng)物：牡丹多糖、牡丹酚、咖啡堿、茶多酚、氨基酸、多種維牛素及礦物質(zhì)等；酸甜度：較酸；口感：不夠清爽，輕微的苦味，淡淡的花香；植物乳桿菌存活性：107-1010cfu/ml。