(一)
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種高營養(yǎng)健康藕粉的加工方法，屬于食品加工領(lǐng)域。(二)
背景技術(shù)：
：蓮藕微甜而脆，生熟兼食，是我國重要的多年生水生蔬菜，同時也是一種觀賞性和食用性兼?zhèn)涞闹参铩Ｅ悍凼沁x用優(yōu)質(zhì)蓮藕經(jīng)清洗、粉碎、提取分離、脫水、干燥等加工工藝過程精制而成的蓮藕淀粉。藕粉易被人體消化吸收，有良好的滋補保健作用。近年來農(nóng)作物因富集作用在生產(chǎn)加工，或貯藏運輸過程中受到重金屬的污染，導(dǎo)致食品中有毒重金屬含量超標(biāo)，嚴(yán)重威脅人體健康。其中，蓮藕對鎘離子有較強(qiáng)的富集作用，且由于鎘帶有較高的正電性，易與細(xì)胞壁上負(fù)電荷基團(tuán)結(jié)合和形成磷酸鹽、碳酸鹽等沉淀。鎘離子主要集中于藕的根部，也即食用部分。蓮藕中多酚含量較高，可以延長人體內(nèi)抗氧化劑作用時間，并可以促進(jìn)血管舒張，降低炎癥反應(yīng)和降低血凝塊形成，從而起到預(yù)防心血管病的作用。中國專利申請?zhí)枮?01610137070.0的發(fā)明公布了一種蓮藕粉及其制備方法。其技術(shù)方案要點是制備一種蓮藕粉，包括以下組分：藕粉、蛋白粉、菊粉、酵母粉劑、賴氨酸、蛋氨酸。本法和其有明顯區(qū)別，本法對藕粉脫除重金屬，避免重金屬超標(biāo)可能帶來的食品安全問題，同時添加荷葉堿，與多酚類物質(zhì)起協(xié)同作用，有效提高產(chǎn)品營養(yǎng)價值，保持良好的口感與獨特的風(fēng)味。中國專利申請?zhí)枮?01510376722.1的發(fā)明公布了一種速食藕粉及制備方法。其產(chǎn)品主要包括以下成分：干藕淀粉、白砂糖、環(huán)己基氨基磺酸鈉、水不溶性葡聚糖、復(fù)合磷酸鹽、有機(jī)酸、山梨酸鉀。該專利采用多種食品添加劑，蓮藕的營養(yǎng)價值以及消費者身體健康會受到一定影響。本法和其有明顯區(qū)別，本法加工所得藕粉產(chǎn)品未大量添加食品添加劑，且采用公認(rèn)安全的食品級微生物乳酸菌進(jìn)行脫除重金屬處理，不僅保持蓮藕原有營養(yǎng)價值，脫重金屬操作更提升了其綜合價值。此外，本法添加同源生物活性堿，有效保護(hù)藕中的多酚類物質(zhì)。本法工藝流程完整，綜合考慮到蓮藕護(hù)色、乳酸菌脫鎘、無機(jī)陶瓷膜微濾及膜清洗等關(guān)鍵工藝，且添加生物活性堿提高營養(yǎng)價值，適合高效率大規(guī)模生產(chǎn)，且可達(dá)到商業(yè)無菌之良好效果。所得產(chǎn)品是營養(yǎng)高、無公害、色香味俱全、適宜消費者需求的高營養(yǎng)健康藕粉產(chǎn)品。(三)技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明目的是提供一種高營養(yǎng)健康藕粉的加工方法。為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種藕粉的加工方法，包括：(1)原料挑選：對蓮藕原料進(jìn)行挑選，挑選出無蟲害、損傷、病變、異味且色澤正常的原料；(2)清洗去皮：將相鄰藕節(jié)間2～3cm去除后，將蓮藕原料通過去皮清洗機(jī)處理；(3)切片：將去皮后的蓮藕原料迅速送入切片機(jī)，避免與空氣接觸使其氧化變色，根據(jù)需求調(diào)整切片機(jī)設(shè)置進(jìn)行切片；(4)護(hù)色浸泡：將蓮藕片置于浸泡池浸泡3-5小時，浸泡液組分配比為：水1l，檸檬酸1-4g，鉀明礬2-8g，控制ph值在3.8以下，浸泡液以浸沒蓮藕為宜；(5)原料磨漿：將護(hù)色浸泡處理后的藕片投入磨漿機(jī)內(nèi)加水?dāng)嚢杵扑?，所得藕漿過60-120目篩，得到藕漿；(6)添加荷葉堿：將荷葉堿添加至藕漿中，添加質(zhì)量配比為荷葉堿：藕漿＝10-40：100；荷葉堿可有效保護(hù)蓮藕中的多酚成分，且可發(fā)揮降脂保健之功效；(7)高壓脈沖電場處理：將步驟(6)所得藕漿進(jìn)行高壓脈沖電場處理，電場強(qiáng)度為20～40kv/cm，脈沖寬度為2～4μs，脈沖頻率為200～400hz，藕漿流速為1～2ml/s，處理時間為200～400個脈沖數(shù)，處理溫度為25～35℃；(8)超聲處理：將高壓脈沖電場處理后的藕漿在超聲頻率20～40khz、溫度25～35℃下，進(jìn)行超聲處理10～20min，經(jīng)處理后，重金屬鎘以離子形式存在于藕漿中；(9)添加復(fù)配菌劑：在超聲處理后的藕漿中添加復(fù)配菌劑，所述復(fù)配菌劑是植物乳桿菌和保加利亞乳桿菌粉劑的混合物，其中植物乳桿菌和保加利亞乳桿菌粉劑的質(zhì)量比為1:15～1:20，復(fù)配菌劑總添加量為藕漿重量的1-5％，將其充分混合均勻，保持藕漿溫度為20-40℃，培養(yǎng)6-24h，植物乳桿菌和保加利亞乳桿菌可有效吸附藕漿中的重金屬鎘離子；(10)無機(jī)陶瓷膜微濾：將經(jīng)步驟(9)處理后的藕漿輸入無機(jī)陶瓷膜微濾系統(tǒng)，進(jìn)行微濾，得到目標(biāo)產(chǎn)品發(fā)酵液；(11)噴霧干燥：將步驟(10)得到的目標(biāo)產(chǎn)品發(fā)酵液進(jìn)行噴霧干燥，得到藕粉；(12)稱重袋裝：稱取所得藕粉添加至包裝袋中，包裝袋打印賞味期限；(13)微波殺菌：將裝好的樣品袋口折疊，單層擺放于微波爐中殺菌；(14)封口、金檢。本發(fā)明步驟(3)中，可根據(jù)需求調(diào)整切片機(jī)設(shè)置進(jìn)行切片，一般，薄片厚度2-3mm，直徑3-4.5cm；中片厚度7-8mm，直徑5-6cm；斜切片厚0.9-1.2cm，寬6.0cm以上，長度12-14cm，克重60g±5g。本發(fā)明步驟(10)中，優(yōu)選微濾操作的參數(shù)設(shè)置為：操作壓力為0.15mpa，操作溫度為25℃，膜管孔徑選用0.45μm，其滲透通量為0.7tm-2h-1，截流率為95％，過濾液為目標(biāo)產(chǎn)品發(fā)酵液。此參數(shù)組合可最大限度的將菌體與藕漿分離，又能保證較高的滲透通量，減少了菌體在設(shè)備內(nèi)循環(huán)的時間，進(jìn)而提高了設(shè)備運行效率。本發(fā)明在步驟(10)中將添加乳酸菌的藕漿通過無機(jī)陶瓷膜微濾系統(tǒng)微濾后，需對無機(jī)陶瓷膜微濾系統(tǒng)進(jìn)行清洗，具體清洗方法為：原料罐中加入35l左右的45～50℃的軟化水，沖洗膜裝置2～3次，每次約10min，確認(rèn)系統(tǒng)中殘料已沖洗干凈為止。隨后采用膜連續(xù)兩步化學(xué)清洗，以除去不被水溶解，但可被酸液或堿液溶解的物質(zhì)。先用第一種清洗劑在0.15mpa操作壓力下，25℃恒溫清洗一段時間，加入軟化水沖洗至中性，再用第二種清洗劑重復(fù)上面過程。具體清洗配比為：第一次：1％naclo(15min)+1.5％sds(15min)，第二次：2％naoh(10min)+1％hno3(20min)。本發(fā)明步驟(11)中，優(yōu)選噴霧干燥按照如下實施：將步驟(10)得到的發(fā)酵液配制成初始含水率在20-40％的懸浮液；用控制系統(tǒng)調(diào)節(jié)進(jìn)風(fēng)溫度至190℃，出風(fēng)溫度至80℃，且溫度保持恒定；調(diào)節(jié)壓縮空氣壓力至0.25mpa；調(diào)節(jié)蠕動頻率使進(jìn)樣速率為7.2ml/s，設(shè)置離心噴頭轉(zhuǎn)速25000r/min，開始進(jìn)料，進(jìn)行噴霧干燥，得到藕粉。本發(fā)明步驟(13)中，微波殺菌的具體參數(shù)優(yōu)選為：微波頻率2200mhz～2600mhz，優(yōu)選2450mhz；輸出功率600w～1000w，優(yōu)選800w；滅菌時間10s～100s，優(yōu)選50s。本發(fā)明步驟(14)中，所述的封口、金檢優(yōu)選按照如下操作：打開折疊袋口，調(diào)整合適的封口時間和熱合時間過金檢機(jī)，fe1.5mm，sus2.5mm不得通過。本發(fā)明制得的藕粉產(chǎn)品可置于4℃低溫環(huán)境中保藏，此溫度下，包裝袋中微生物總數(shù)維持在相對穩(wěn)定的水平。運輸環(huán)節(jié)也應(yīng)采用冷鏈運輸。本發(fā)明優(yōu)選所述藕粉的加工方法由步驟(1)～(14)組成。本發(fā)明的有效效果主要體現(xiàn)在：1.本發(fā)明首先采用高壓脈沖電場處理與超聲處理使蓮藕中的鎘以離子形式存在于溶液中，隨后添加植物乳桿菌和保加利亞乳桿菌組成的復(fù)配菌劑以結(jié)合鎘離子，最后采用無機(jī)陶瓷膜微濾除去結(jié)合了鎘離子的復(fù)配菌劑，得到重金屬含量少的藕粉。首先，高壓脈沖電場處理通過電的穿孔崩解作用，使蛋白質(zhì)分子鏈打開，從而破壞鎘離子與蛋白質(zhì)的結(jié)合鍵，促進(jìn)鎘離子溶解；超聲波作用可直接作用于淀粉顆粒內(nèi)部，改變顆粒結(jié)構(gòu)，破壞蛋白質(zhì)的二硫鍵，促進(jìn)鎘離子溶解到去離子水中。其次，乳酸菌具有清除食品中重金屬的作用。乳酸菌可依靠細(xì)胞表面吸附作用將未經(jīng)代謝的游離重金屬離子通過正負(fù)電荷結(jié)合到細(xì)胞壁表面。乳酸菌細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)擁有大量帶負(fù)電荷的官能團(tuán)，能夠有效結(jié)合金屬陽離子。乳酸菌代謝產(chǎn)生的乳酸所形成的酸性環(huán)境對重金屬絡(luò)合物具有增溶作用，乳酸菌代謝形成的多糖、多肽和核酸等大分子物質(zhì)表面帶有coo-、hpo4-和oh-等基團(tuán)，可與金屬離子發(fā)生靜電吸附作用。另外，在菌種選擇方面，以乳酸菌的鎘吸附、鎘耐受、抗氧化為評價指標(biāo)對菌株進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)保加利亞乳桿菌和植物乳桿菌復(fù)配所得發(fā)酵液相比于兩者單獨使用具有更好的脫鎘效果。最后，陶瓷微濾膜偶聯(lián)生化反應(yīng)器可以充分發(fā)揮陶瓷膜膜通量穩(wěn)定的優(yōu)點，同時可以彌補離心分離對菌體損傷較大、易使其分布在上清液中、不利于進(jìn)一步分離的不足，能夠減小對菌體損傷，提高分離率，耗時短，節(jié)省能源。綜上，本發(fā)明首先采用高壓脈沖電場處理與超聲處理使蓮藕中的鎘以離子形式存在于溶液中，可使復(fù)配菌劑很好的發(fā)揮作用；通過乳酸菌吸附產(chǎn)品中重金屬，最后用無機(jī)陶瓷膜微濾除去結(jié)合了鎘離子的復(fù)配菌劑。整體思路完善，不僅考慮到脫除重金屬的需求，同時前期處理和后期過濾可保證脫除重金屬的作用得到最大發(fā)揮。2.本發(fā)明添加荷葉堿成分，增加產(chǎn)品營養(yǎng)成分的同時，與蓮藕中含有的多酚類物質(zhì)協(xié)同發(fā)揮作用，具有很好的抗氧化作用，且將藕淀粉轉(zhuǎn)化為慢消化淀粉，營養(yǎng)價值高。研究表明，蓮藕中含有豐富的多酚。荷葉堿是荷葉中的一種阿樸啡型生物堿，為荷葉中的主要降脂活性成分，有降血脂、抗自由基、抑制高膽固醇血癥和動脈硬化等藥療、食療功效。與其他生物活性堿相比，荷葉堿與藕粉原料來源相同，相溶性良好。實驗表明，多酚、荷葉堿的混合物對dpph自由基、abts+的清除能力強(qiáng)于單獨多酚或荷葉堿的清除能力。多酚、荷葉堿兩者混合物保護(hù)bsa蛋白氧化的作用呈明顯協(xié)同增效作用。此外，有研究表明多酚等對淀粉的消化吸收速度有明顯的影響。多酚通過氫鍵相互作用與高直鏈淀粉形成復(fù)合物，導(dǎo)致淀粉結(jié)晶結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，淀粉顆粒變大；與多酚復(fù)合的高直鏈淀粉具備慢消化特性，只能引起溫和的血糖反應(yīng)。多酚與淀粉的復(fù)合作用對多糖或多酚的影響是相互的。一方面通過與多糖復(fù)合，多酚的穩(wěn)定性得到了提升，同時其生物利用率、抗氧化性等均與其游離時有明顯差異；另一方面與多酚的復(fù)合使多糖的流變學(xué)、消化特性等發(fā)生明顯改變。本發(fā)明添加濃度為20％的荷葉堿，首先可發(fā)揮荷葉堿自身功效，其次荷葉堿可與多酚類物質(zhì)形成協(xié)同增效作用，且清除保護(hù)作用均高于二者單獨作用。荷葉與藕粉原料源自同一植物，更易與藕粉有效融合。多酚類物質(zhì)通過與荷葉堿的協(xié)同作用得到良好保護(hù)，進(jìn)而更好降低或抑制淀粉的消化吸收速度，使其轉(zhuǎn)化為慢消化淀粉或抗性淀粉。綜上，本發(fā)明首先對蓮藕處理使鎘以離子形式存在于溶液中，添加植物乳桿菌和保加利亞乳桿菌組成的復(fù)配粉劑以結(jié)合鎘離子，采用無機(jī)陶瓷膜微濾除去乳酸菌，得到脫鎘藕粉。其次添加適宜濃度荷葉堿，與含量豐富的多酚類物質(zhì)發(fā)揮協(xié)同作用，抑制淀粉消化速度，降低產(chǎn)品血糖指數(shù)。本發(fā)明中的藕粉產(chǎn)品營養(yǎng)價值豐富，品質(zhì)細(xì)膩，口感良好，是一款高營養(yǎng)健康藕粉。(四)附圖說明圖1是藕粉的傳統(tǒng)加工工藝流程圖；圖2是本發(fā)明藕粉的加工工藝流程圖。(五)具體實施方式下面以具體實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于此：實施例1(1)原料挑選：對蓮藕原料進(jìn)行挑選，挑選出無蟲害、損傷、病變、異味，且色澤正常的原料。(2)清洗去皮：由作業(yè)員用菜刀去除蓮藕結(jié)，要求將相鄰藕節(jié)中2～3cm處去除。后將蓮藕原料通過去皮清洗機(jī)，處理量約為600kg/h。(3)切片：將去皮后蓮藕原料迅速送入切片機(jī)，避免與空氣接觸使其氧化變色。根據(jù)需求調(diào)整切片機(jī)設(shè)置，薄片厚度2-3mm，直徑3-4.5cm；中片厚度7-8mm，直徑5-6cm；斜切片厚0.9-1.2cm，寬6.0cm以上，長度12-14cm，克重60g±5g。(4)護(hù)色浸泡：將蓮藕片置于浸泡池浸泡4小時。浸泡液配比為：水1l，檸檬酸2‰，鉀明礬4‰，ph值為3.8以下。浸泡液以浸沒蓮藕為宜。(5)原料磨漿：將護(hù)色處理后的藕片投入磨漿機(jī)內(nèi)加水?dāng)嚢杵扑?，所得藕漿過100目篩，篩網(wǎng)中的藕泥加水混勻，重復(fù)過篩三次。(6)添加荷葉堿：將濃度為20％的荷葉堿添加至藕漿中，添加配比為20g荷葉堿，1000g藕漿。荷葉堿可有效保護(hù)蓮藕中的多酚成分，且可發(fā)揮降脂保健之功效。(7)高壓脈沖電場處理：將所得藕漿進(jìn)行高壓脈沖電場處理，電場強(qiáng)度為30kv/cm，脈沖寬度為3μs，脈沖頻率為250hz，懸濁液流速為1ml/s，處理時間為350個脈沖數(shù)，處理溫度為25℃。(8)超聲處理：將高壓脈沖電場處理后的藕漿懸濁液在超聲頻率20～40khz，25～35℃下，進(jìn)行超聲處理10～20min。經(jīng)處理后，重金屬鎘以離子形式存在于藕漿中。(9)添加乳酸菌：在藕漿中添加植物乳桿菌和保加利亞乳桿菌復(fù)配粉劑，質(zhì)量比為1:15，菌株粉劑總添加量為藕漿重量的3％(v/v)。保持藕漿溫度為37℃，培養(yǎng)12h。將其充分混合均勻。乳酸菌可有效吸附藕漿中的重金屬鎘離子。(10)無機(jī)陶瓷膜微濾：將添加乳酸菌的藕漿輸入無機(jī)陶瓷膜微濾系統(tǒng)，進(jìn)行微濾后。操作壓力為0.15mpa，操作溫度為25℃，膜管孔徑選用0.45μm，其滲透通量為0.7tm-2h-1，截流率為95％，過濾液為目標(biāo)產(chǎn)品。此參數(shù)組合可最大限度的將菌體與藕漿分離，又能保證較高的滲透通量，減少了菌體在設(shè)備內(nèi)循環(huán)的時間，進(jìn)而提高了設(shè)備運行效率。(11)微濾膜清洗：在0.15mpa壓力下過濾發(fā)酵液。待發(fā)酵液的膜通量達(dá)到穩(wěn)定后，采用冷凝管進(jìn)行恒溫25℃操作。原料罐中加入35l左右的45～50℃的軟化水，沖洗膜裝置2～3次，每次約10min，確認(rèn)系統(tǒng)中殘料已沖洗干凈為止。采用膜連續(xù)兩步化學(xué)清洗。先用第一種清洗劑在0.15mpa操作壓力下，25℃恒溫清洗一段時間，加入軟化水沖洗至中性，再用第二種清洗劑重復(fù)上面過程。具體清洗配比為：第一次：1％naclo(15min)+1.5％sds(15min)，第二次：2％naoh(10min)+1％hno3(20min)。(12)噴霧干燥：檢查噴霧干燥塔系統(tǒng)氣密性，配置初始含水率在35％的藕粉懸浮液；開啟風(fēng)機(jī)和電加熱，用熱空氣預(yù)熱整個系統(tǒng)；用控制系統(tǒng)調(diào)節(jié)進(jìn)風(fēng)溫度至190℃，出風(fēng)溫度至80℃，且溫度保持恒定；調(diào)節(jié)壓縮空氣壓力至0.25mpa；打開蠕動泵調(diào)節(jié)蠕動頻率使進(jìn)樣速率為7.2ml/s，設(shè)置離心噴頭轉(zhuǎn)速25000r/min，開始進(jìn)料，進(jìn)行噴霧干燥，得到藕粉。(13)稱重袋裝：稱取所得藕粉100g，添加至300×220mm包裝袋中。包裝袋打印賞味期限：180天。(14)微波殺菌：將裝好的樣品袋口折疊，單層擺放于微波爐中殺菌。具體參數(shù)為：微波頻率2450mhz，輸出功率800w，滅菌時間50s。為避免二次污染將塑料袋口折疊。殺菌后取出時如有袋口被沖開的應(yīng)隨即折疊，待封口時再打開折疊。(15)封口、金檢：打開折疊袋口，調(diào)整合適的封口時間和熱合時間，封口線寬度0.5～0.8cm，封口線的上端離袋口的距離＜1.5cm。過金檢機(jī)，fe1.5mm，sus2.5mm不得通過。(16)冷藏：將產(chǎn)品置于4℃低溫環(huán)境中保藏，此溫度下，包裝袋中微生物總數(shù)維持在相對穩(wěn)定的水平。運輸環(huán)節(jié)也應(yīng)采用冷鏈運輸。實施例2將實施例1中的步驟(9)中的粉劑添加量改為藕漿重量的1％。其他同實施例1。實施例3將實施例1中的步驟(9)中的粉劑添加量改為藕漿重量的5％。其他同實施例1。實施例4將實施例1中的步驟(9)中在藕漿中添加植物乳桿菌和保加利亞乳桿菌復(fù)配粉劑，質(zhì)量比改為1:20。其他同實施例1。對比例1將實施例1中的步驟(9)中的植物乳桿菌和保加利亞乳桿菌復(fù)配粉劑改為植物乳桿菌粉劑，粉劑添加量為藕漿重量的3％。其他同實施例1。對比例2將實施例1中的步驟(9)中的植物乳桿菌和保加利亞乳桿菌復(fù)配粉劑改為保加利亞乳桿菌粉劑，粉劑添加量為藕漿重量的3％。其他同實施例1。實施例5：鎘移除率的測定按照國標(biāo)gb5009.15-2014方法測定鎘的含量。其中試樣消解采用微波消解法消解。鎘移除率按下式計算：其中，c1為經(jīng)本法處理前藕粉中鎘含量，單位為mg/kg；c2為經(jīng)本法處理后藕粉中鎘含量，單位為mg/kg。分別取實施例1-4、對比例1、對比例2中處理前的蓮藕原料和處理后的藕粉產(chǎn)品進(jìn)行實驗，結(jié)果見表1.表1由實施例1-4、對比例1和對比例2的鎘移除率數(shù)據(jù)對比可知，本發(fā)明采用植物乳桿菌和保加利亞乳桿菌復(fù)配菌劑的鎘去除效果相比于單獨使用植物乳桿菌和保加利亞乳桿菌要好得多，即植物乳桿菌和保加利亞乳桿菌復(fù)配使用具有協(xié)同作用。實施例6：蓮藕多酚和荷葉堿的協(xié)同抗氧化作用1.荷葉堿溶液的制備荷葉堿(純度≥90％)購自上海麥克林生化科技有限公司。配制10ml濃度為100μg/ml的荷葉堿溶液作1號待測樣品液備用。2.蓮藕多酚的提取及蓮藕多酚溶液的制備制備酸性甲醇溶液：將95％的甲醇溶液與1mol/lhci按4:1的體積比例混合均勻。具體配制200ml混合溶液。在5℃下保存。準(zhǔn)確稱取10g蓮藕樣品，置于研缽中研碎，取制備好的酸性甲醇溶液沖洗轉(zhuǎn)移樣品至100ml離心管中，在轉(zhuǎn)速4000r/min下離心15min，收集上清液。將沉淀物再次研磨后加入酸性甲醇，重復(fù)上述步驟提取2次。將三次收集的上清液合并，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在45℃下濃縮除去水，用甲醇將殘余物定容至100ml，即得蓮藕多酚提取液，保存于-20℃冰箱凍存。配制10ml濃度為3μg/ml的蓮藕多酚溶液作2號待測樣品液備用。將5ml濃度為100μg/ml的荷葉堿溶液與5ml濃度為3μg/ml的蓮藕多酚溶液混合均勻作3號待測樣品液備用。3.dpph自由基清除能力的測定分別取1ml1、2、3號待測樣品液分別加入1.0ml的100μmol/ldpph溶液中混合均勻，于室溫下避光保存，30min后取出并在517nm處測定吸光度，實驗重復(fù)3次，以甲醇為空白對照。提取物的dpph自由基清除能力按下式計算：dpph自由基清除率(％)＝[1-(ai-aj)/a0]×100％。式中，a0為在517nm處，甲醇(1ml)和100μmol/ldpph溶液(1.0ml)的混合液的吸光度值；ai為在517nm處，樣品溶液(1ml)和100μmol/ldpph溶液(1.0ml)的混合液的吸光度值；aj為在517nm處，樣品溶液(1ml)和甲醇(1.0ml)的混合液的吸光度值。根據(jù)系列濃度下的抑制率，計算dpph自山基清除率為50％時的樣品濃度，即半數(shù)抑制濃度(ic50)值。4.abts+自由基清除能力的測定將7mmol/labts水溶液與2.45mmol/l過硫酸鉀水溶液混合后在室溫條件下避光放置15h，形成abts+自由基儲備液。用無水甲醇將此工作液稀釋直至其在734nm下的吸光度為0.700±0.020，即得abts+混合液，于30℃下預(yù)熱備用。分別取50μl1、2、3號待測樣品液加入lmlabts+混合液，混合均勻后在室溫下避光保存30min，于734nm波長下測其吸光值，空白對照為甲醇。以trolox為標(biāo)準(zhǔn)品，建立以trolox濃度(x，μg/ml)為橫坐標(biāo)、吸值(y)為縱坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程為y＝-0.0030x+0.6752，r2＝0.9992。蓮藕不同部位多酚的abts自由基清除能力以每100g樣品中所含trolox當(dāng)量來表示(mgte/100gfw)。5.實驗結(jié)果見表2表2dpph自由基清除率abts+自由基清除率蓮藕多酚溶液3μg/ml63.73％52.92％荷葉堿溶液100μg/ml66.01％48.40％混合溶液79.58％59.45％當(dāng)前第1頁12