本發(fā)明涉及畜禽養(yǎng)殖業(yè)中的飼料生產(chǎn)領(lǐng)域，具體涉及一種產(chǎn)蛋后期蛋雞飼料及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

濃蛋白高度和哈氏單位是衡量雞蛋蛋清品質(zhì)的關(guān)鍵指標(biāo)，直接關(guān)系到雞蛋的新鮮度、營(yíng)養(yǎng)特性和消費(fèi)者的認(rèn)可度。一般而言，濃蛋白高度和哈氏單位值越大，說(shuō)明雞蛋蛋清越黏稠，蛋清品質(zhì)越好。商品代產(chǎn)蛋雞經(jīng)過(guò)整個(gè)高峰期的產(chǎn)蛋過(guò)程，隨著產(chǎn)蛋雞周齡的增長(zhǎng)，產(chǎn)蛋雞機(jī)體清除自由基的能力降低，活性氧積累，產(chǎn)生氧化應(yīng)激，導(dǎo)致產(chǎn)蛋性能和雞蛋品質(zhì)變差，濃蛋白高度和哈氏單位降低。氧化應(yīng)激嚴(yán)重時(shí)，輸卵管膨大部發(fā)生氧化損傷，影響膨大部的蛋清蛋白合成、分泌功能。

茶多酚，又名抗氧靈、防哈靈、維多酚，淡黃色至茶褐色略帶茶香的粉末固體或結(jié)晶；是茶葉中提取的多羥酚類化合物的總稱，包括黃烷醇類、黃酮類、花色苷類、黃酮醇類及酚類等。具清除自由基、抑制脂質(zhì)過(guò)氧化作用，有較強(qiáng)抗氧化作用，其中兒茶素化合物占茶多酚總量的65％-80％。因此，茶多酚是潛在的用于改善產(chǎn)蛋后期蛋雞的產(chǎn)蛋性能和雞蛋蛋清品質(zhì)的天然植物添加劑。釩過(guò)量引起產(chǎn)蛋雞的輸卵管膨大部發(fā)生氧化損傷，導(dǎo)致雞蛋蛋清品質(zhì)降低，茶多酚能有效緩解釩過(guò)量引起的濃蛋白高度和哈氏單位的降低。由此，茶多酚可能通過(guò)改善輸卵管膨大部的氧化損傷，提高雞蛋濃蛋白高度和哈氏單位。前期研究結(jié)果顯示，0.02％茶多酚有效提高青年產(chǎn)蛋雞機(jī)體抗氧化能力。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞的產(chǎn)蛋性能、雞蛋蛋清品質(zhì)降低的現(xiàn)象，本發(fā)明提供了一種能夠提高產(chǎn)蛋后期蛋雞的產(chǎn)蛋性能、雞蛋蛋清品質(zhì)、改善輸卵管膨大部組織形態(tài)的飼料，維持并延長(zhǎng)產(chǎn)蛋雞較高的產(chǎn)蛋性能、雞蛋蛋清品質(zhì)，對(duì)提高蛋禽業(yè)的生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)效益具有重要意義。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：

一種產(chǎn)蛋后期蛋雞飼料，由以下重量份的原料制備而成：玉米63.3份、豆粕24.63-24.65份、大豆油0.5份、石粉9.6份、磷酸氫鈣0.9份、氯化鈉0.3份、50％氯化膽堿0.11份、dl-蛋氨酸0.11份、益康xp0.3份、植酸酶0.01份、蛋雞微量元素預(yù)混料0.2份，蛋雞維生素預(yù)混料0.02份，茶多酚0-0.02份；所述茶多酚是從綠茶中經(jīng)水提取的多酚類混合物，茶多酚含量為66.73％，兒茶素為37.25％；其中，所述兒茶素中含d-兒茶素(dc)1.25％、表兒茶素(ec)9.76％、表沒(méi)食子兒茶素(egc)8.41％、表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(egcg)12.49％、表兒茶素沒(méi)食子酸酯(ecg)5％。

上述的一種產(chǎn)蛋后期蛋雞飼料可用于提高蛋雞產(chǎn)蛋性能、改善雞蛋蛋清品質(zhì)、改善輸卵管膨大部組織形態(tài)，所述蛋雞為產(chǎn)蛋64周齡以后的蛋雞。

本發(fā)明在制備時(shí)，茶多酚應(yīng)先與少量豆粕混勻后，再與其他原料、預(yù)混料混合，避免茶多酚在與豆油混合時(shí)，發(fā)生結(jié)塊現(xiàn)象。同時(shí)，防止茶多酚的活性成分與預(yù)混料發(fā)生反應(yīng)，影響添加效果。

本發(fā)明具有以下有益效果：

經(jīng)試驗(yàn)證實(shí)，本發(fā)明所提供的飼料飼喂產(chǎn)蛋后期蛋雞后，可提高產(chǎn)蛋性能、雞蛋蛋清品質(zhì)，改善輸卵管膨大部組織形態(tài)。因此，該飼料在改善產(chǎn)蛋后期蛋雞的產(chǎn)蛋性能、雞蛋蛋清品質(zhì)，以及輸卵管膨大部組織形態(tài)等方面具有良好的應(yīng)用前景，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明實(shí)施例中卵黏蛋白sds-page電泳圖譜；

圖中，0：標(biāo)準(zhǔn)分子量；1、2、3：對(duì)照組；4、5、6：茶多酚組。

圖2為本發(fā)明實(shí)施例中200mg/kg茶多酚對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞的膨大部粘膜皺襞組織形態(tài)的影響。

圖3為本發(fā)明實(shí)施例中200mg/kg茶多酚對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞的膨大部粘膜腺上皮組織形態(tài)的影響。

圖4為本發(fā)明實(shí)施例中200mg/kg茶多酚飼糧對(duì)的雞蛋濃蛋白高度的影響。

圖5為本發(fā)明實(shí)施例中200mg/kg茶多酚飼糧對(duì)雞蛋哈氏單位的影響。

具體實(shí)施方式

為了使本發(fā)明的目的及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。

以下實(shí)施例中所使用的茶多酚為無(wú)錫太陽(yáng)綠寶科技有限公司的茶多酚。

實(shí)施例1

表1試驗(yàn)配方組成(％)

選取64周齡海蘭褐產(chǎn)蛋雞180只，隨機(jī)分成2組，每組6個(gè)重復(fù)，每重復(fù)15只雞。本發(fā)明涉及的茶多酚是由無(wú)錫太陽(yáng)綠寶科技有限公司提供(批次號(hào)：505083)。預(yù)飼期1周，試驗(yàn)期10周。計(jì)算1-5周、5-10周和1-10周的產(chǎn)蛋率、平均蛋重、平均日采食量和料蛋比(表2)。于試驗(yàn)期第4周末、第6周末、第8周末、第10周末，每重復(fù)采集5枚蛋樣，以色列orka公司生產(chǎn)的蛋品質(zhì)測(cè)定儀測(cè)定濃蛋白高度和哈氏單位(見(jiàn)表3)。

表2200mg/kg茶多酚飼糧對(duì)產(chǎn)蛋性能的影響

從表2可知，飼養(yǎng)試驗(yàn)的第5-10周，飼糧添加200mg/kg的茶多酚組產(chǎn)蛋率顯著高于對(duì)照組，且料蛋比顯著低于對(duì)照組(p＜0.05)；第1-10周，200mg/kg茶多酚組的產(chǎn)蛋率顯著高于對(duì)照組，同時(shí)料蛋比顯著降低(p＜0.05)。綜上，添加200mg/kg的茶多酚飼糧連續(xù)飼喂5周后，可顯著提高蛋雞的產(chǎn)蛋率，同時(shí)顯著提高飼料效率。

表3200mg/kg茶多酚飼糧對(duì)雞蛋蛋清品質(zhì)的影響

從試驗(yàn)結(jié)果表3可知，與對(duì)照組相比，茶多酚組顯著提高雞蛋的濃蛋白高度、哈氏單位(p＜0.05)。因此，添加200mg/kg茶多酚飼糧，能改善產(chǎn)蛋后期蛋雞的雞蛋蛋清品質(zhì)。

實(shí)施例2

表4試驗(yàn)配方組成(％)

選取64周齡海蘭褐產(chǎn)蛋雞180只，隨機(jī)分成2組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15只雞。本發(fā)明涉及的茶多酚是由無(wú)錫太陽(yáng)綠寶科技有限公司提供(批次號(hào)：505083)。預(yù)飼期1周，試驗(yàn)期10周。

試驗(yàn)期末，每重復(fù)采集3枚蛋樣，將新鮮雞蛋去殼后，用分蛋器將蛋清和蛋黃分離，將新鮮蛋清液體進(jìn)行真空冷凍干燥處理，凍干后在最短時(shí)間內(nèi)且干燥空氣下用密封袋將凍干蛋清粉收集，測(cè)定蛋白羰基、巰基含量和表面疏水性等指標(biāo)(見(jiàn)表5)。

蛋白巰基含量采用分光光度法測(cè)定，蛋白質(zhì)羰基含量、蛋白定量(雙縮脲法)按試劑盒說(shuō)明測(cè)定，所用試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

蛋白表面疏水性測(cè)定方法：精確稱取0.1g凍干樣品，利用0.1mol/l(ph7.0)的磷酸鹽緩沖液溶解，定容在100ml的容量瓶中，經(jīng)均質(zhì)機(jī)均質(zhì)，取15ml在10000r/min離心15min，除去不溶性氮，同時(shí)采用雙縮脲法測(cè)定清液中蛋白含量(試劑盒測(cè)定)。然后清液用0.1mol/lph7.0的磷酸鹽緩沖液將各樣品蛋白濃度稀釋到0.01-0.1mg/ml之間，取5個(gè)濃度梯度值，每10ml不同濃度的稀釋樣品中加入50μl的ans溶液(8mmol/l，用0.1mmol/lph7磷酸鹽緩沖液配制)?？瞻譨ns(1-苯胺基-8-萘磺酸)熒光溶液+相應(yīng)的緩沖液作對(duì)照。用1cm比色皿在ls55熒光分光光度計(jì)上測(cè)吸光度值。測(cè)量條件：激發(fā)波長(zhǎng)390nm、發(fā)射波長(zhǎng)470nm、狹縫寬10nm，室溫20℃。然后取熒光強(qiáng)度的平均值對(duì)蛋白濃度作曲線，曲線初始階段斜率即為蛋白分子的表面疏水性指數(shù)。

表5200mg/kg茶多酚飼糧對(duì)蛋清蛋白羰基、總巰基含量及表面疏水性的影響

從試驗(yàn)結(jié)果表5可知，與對(duì)照組相比，茶多酚組顯著降低蛋清蛋白羰基含量和表面疏水性指數(shù)(p＜0.05)，顯著升高巰基含量(p＜0.05)。因此，添加200mg/kg茶多酚的飼糧，能顯著降低雞蛋蛋清蛋白氧化程度，改善產(chǎn)蛋后期蛋雞的雞蛋蛋清品質(zhì)。

實(shí)施例3

表6試驗(yàn)配方組成(％)

選取64周齡海蘭褐產(chǎn)蛋雞180只，隨機(jī)分成2組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15只雞。本發(fā)明涉及的茶多酚是由無(wú)錫太陽(yáng)綠寶科技有限公司提供(批次號(hào)：505083)。預(yù)飼期1周，試驗(yàn)期10周。

卵黏蛋白的制備：試驗(yàn)期末，每重復(fù)取3枚蛋，20目網(wǎng)篩將濃蛋清與稀蛋清分離，移除系帶后，0.1mol/lnacl溶液稀釋濃蛋清并于4℃低速磁力攪拌50min(攪拌過(guò)程不應(yīng)起泡，防止蛋白變性)，用1mol/lhcl調(diào)節(jié)ph至6.0，攪拌30min，于4℃冰箱中靜置過(guò)夜，次日將混合液在低溫離心機(jī)離心15min(15000×g，4℃)，棄上清液。用0.5mol/lnacl溶液溶解沉淀，調(diào)節(jié)ph至6.0，4℃下攪拌1h，靜置4h，再經(jīng)冷凍離心(15000×g，4℃)，沉淀用去離子水洗滌3次，每次清洗后按上述條件離心，沉淀部分凍干、稱重，于-20℃冷藏備用。

制備得到的卵黏蛋白進(jìn)行sds-page凝膠電泳：取2mg卵黏蛋白提取物溶于2ml0.01mol/ltris-hcl(ph7.0)緩沖液(含有10μl/ml的2-巰基乙醇和1％(w/v))后，取20μl卵黏蛋白樣品與5μl上樣緩沖液混勻，混勻后100℃煮5min。采用tris-hcl緩沖系統(tǒng)進(jìn)行垂直電泳檢測(cè)。電泳條件：5％濃縮膠電壓80v，30min，8％分離膠電壓120v，1h。

由新鮮雞蛋中濃蛋白中提取的卵黏蛋白sds-page電泳圖如圖1。本試驗(yàn)用含sds和β-巰基乙醇的tris-hcl緩沖液溶解卵黏蛋白，使卵黏蛋白各亞基變性分離。對(duì)照組、茶多酚組中卵黏蛋白均可電泳分離出三個(gè)亞基條帶：β-亞基、α2-亞基和α1-亞基。由各組卵黏蛋白亞基條帶可以看出，β-亞基條帶最為清晰，α2-、α1-亞基條帶較淺，茶多酚組中各重復(fù)的β-亞基條帶灰度值明顯大于對(duì)照組，茶多酚組中各重復(fù)的α2-、α1-亞基較明顯，而對(duì)照組中各重復(fù)的α2-亞基幾乎消失。

因此，添加200mg/kg茶多酚的飼糧，能保護(hù)濃蛋白中卵黏蛋白亞基的氧化降解，改善蛋雞產(chǎn)蛋后期的雞蛋蛋清品質(zhì)。

實(shí)施例4

表7試驗(yàn)配方組成(％)

選取64周齡海蘭褐產(chǎn)蛋雞180只，隨機(jī)分成2組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15只雞。本發(fā)明涉及的茶多酚是由無(wú)錫太陽(yáng)綠寶科技有限公司提供(批次號(hào)：505083)。預(yù)飼期1周，試驗(yàn)期10周。試驗(yàn)期末，以重復(fù)為單位隨機(jī)選取體重相近的健康蛋雞，屠宰后取輸卵管膨大部樣品固定于福爾馬林溶液，he染色，光學(xué)顯微鏡下觀察組織學(xué)變化(見(jiàn)圖2、3及表8)。

由圖3、4及表5結(jié)果顯示，茶多酚組的粘膜皺襞粗大，皺襞高度、腺上皮厚度和纖毛高度顯著高于對(duì)照組(p<0.05)。固有層腺體發(fā)達(dá)，腺體數(shù)量多、密度大，管狀腺的腺細(xì)胞肥大，管狀腺內(nèi)可見(jiàn)大量糖原及分泌顆粒，未見(jiàn)腺體萎縮。在粘膜表層豐富的纖毛細(xì)胞中，可見(jiàn)大量顆粒細(xì)胞及分泌顆粒。

對(duì)照組的局部粘膜皺襞萎縮，腺上皮厚度和纖毛高度明顯變矮，粘膜固有層變薄，多數(shù)粘膜皺襞固有層可見(jiàn)管狀腺萎縮，萎縮部位腺體數(shù)量明顯減少，萎縮腺體內(nèi)可見(jiàn)散在空泡，糖原和分泌顆粒明顯減少。因此，200mg/kg茶多酚飼糧能有效改善產(chǎn)蛋后期蛋雞的輸卵管膨大部組織形態(tài)的惡化。

表8200mg/kg茶多酚對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋后期的輸卵管膨大部組織形態(tài)的影響

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以作出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。