本發(fā)明涉及一種孢子型乳酸菌乳飲料及其制備方法，屬于乳制品加工
技術領域：
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背景技術：
：益生菌從廣義上講，是對人體有益的菌種，其基本上是通過攝入后改善人體腸道菌群，調節(jié)腸道微生態(tài)環(huán)境平衡，起到對人體積極的作用，從而加強人體健康程度的一種生物制劑。孢子型乳酸菌，是一種新型的益生菌，而凝結芽胞桿菌屬于孢子型乳酸菌的一種。隨著微生態(tài)技術的不斷發(fā)展，益生菌的概念已經(jīng)漸漸深入人心，而乳酸菌制品以其天然、安全、健康等優(yōu)點逐漸延伸到各種食品當中，并取得了很好的效果。市面上的乳酸菌飲料種類繁多，但是由于不正當?shù)膬Υ?、運輸，和消化器官分泌的消化液作用，活乳酸菌在到達大腸前的時候就大多被消滅了，只有極少部分乳酸菌幸存，到達大腸，并真正能發(fā)揮作用的活菌少之又少。因此發(fā)明一種乳酸菌飲料在喝入人體內能更高效的發(fā)揮乳酸菌于腸道中的作用的產(chǎn)品是非常必要的。同時人們的養(yǎng)生觀念與時俱進，益生菌制品已經(jīng)成為人們每天必食用的食品，而現(xiàn)有乳酸菌飲料長期食用除調節(jié)腸道菌群的作用以外沒有其他附加作用，極大的浪費了資源。技術實現(xiàn)要素：為解決現(xiàn)有乳酸菌飲料由于儲存不當以及人體消化液的作用，能夠真正到達大腸的活菌較少，乳酸菌的作用不能得到高效發(fā)揮，并且現(xiàn)有乳酸菌飲料長期食用除調節(jié)腸道菌群的作用以外沒有其他附加作用的問題，本發(fā)明提供了一種孢子型乳酸菌乳飲料及其制備方法，該方法發(fā)明的孢子型乳酸菌乳飲料具有促進生長代謝、抗氧化及改善腸道菌群平衡等營養(yǎng)和保健功能效果。采用的技術方案如下：本發(fā)明的目的在于提供一種孢子型乳酸菌乳飲料，該孢子型乳酸菌乳飲料是通過向經(jīng)過孢子型乳酸菌發(fā)酵制成的發(fā)酵乳中加入輔料調配后再進行均質而制成的；所述發(fā)酵乳是通過向脫脂牛乳中加入葡萄糖后滅菌，冷卻后加入孢子型乳酸菌發(fā)酵至半固態(tài)而制成的。進一步地，所述發(fā)酵乳的添加量為：(35份-45份)/100份孢子型乳酸菌乳飲料。更進一步地，所述發(fā)酵乳的添加量為：(38份-42份)/100份孢子型乳酸菌乳飲料。更進一步地，所述發(fā)酵乳的添加量為：40份/100份孢子型乳酸菌乳飲料。進一步地，每100份所述發(fā)酵乳是由脫脂牛乳90份-93份、葡萄糖0.7份-0.9份、孢子型乳酸菌4份-6份和水通過發(fā)酵制備而成的。更進一步地，每100份所述發(fā)酵乳是由脫脂牛乳92份-93份、葡萄糖0.75份-0.85份、孢子型乳酸菌4.5份-5.5份和水通過發(fā)酵制備而成的。更進一步地，每100份所述發(fā)酵乳是由脫脂牛乳93份、葡萄糖0.8份、孢子型乳酸菌5份和水通過發(fā)酵制備而成的。進一步地，所述孢子型乳酸菌為凝結芽孢桿菌tbc169。進一步地，所述輔料為蔗糖，酸度調節(jié)劑和食用香精。更進一步地，以孢子型乳酸菌乳飲料為100重量份計，所述輔料的質量份數(shù)為：蔗糖11份-13份、酸度調節(jié)劑0.15份-0.25份，食用香精0.01份-0.3份。更進一步地，以孢子型乳酸菌乳飲料為100重量份計，所述輔料的質量份數(shù)為：蔗糖11.5份-12.5份、酸度調節(jié)劑0.18份-0.22份，食用香精0.03份-0.25份。更進一步地，以孢子型乳酸菌乳飲料為100重量份計，所述輔料的質量份數(shù)為：蔗糖12份、酸度調節(jié)劑0.2份，食用香精0.05份。更進一步地，所述酸度調節(jié)劑為檸檬酸、乳酸、蘋果酸和檸檬酸鈉中的一種或其中幾種的組合。本發(fā)明還提供了一種上述任一所述的乳飲料的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：1)發(fā)酵乳的制備：向脫脂牛乳中加入葡萄糖后攪拌均勻，滅菌后冷卻至40℃，然后加入孢子型乳酸菌，發(fā)酵至牛乳成半固態(tài)，制得發(fā)酵乳，冷藏備用；2)調配：將步驟1)得到的發(fā)酵乳降溫至30℃以下，加入蔗糖混合均勻，加酸度調節(jié)劑，加入食用香精調香；3)均質：將步驟2)調配好的物料在60℃-65℃，18mpa-25mpa的條件下均質，獲得孢子型乳酸菌乳飲料。進一步地，所述發(fā)酵是在42℃下發(fā)酵20h-28h。進一步地，所述滅菌為121℃下高壓滅菌15min。本發(fā)明有益效果：1、本發(fā)明制備的孢子型乳酸菌乳飲料不僅能夠改善腸道菌群平衡、降低由于儲存不當以及人體消化液對活菌的破壞，使得乳酸菌的作用能夠得到高效發(fā)揮，并且本發(fā)明的孢子型乳酸菌乳飲料還具有促進生長代謝、抗氧化的保健功能效果。2、本發(fā)明以內生孢子型乳酸菌(凝結芽胞桿菌tbc169)為發(fā)酵菌種制備的孢子型乳酸菌乳飲料，由于凝結芽孢桿菌抗逆性強，能夠使凝結芽孢桿菌在制成飲料及喝入人體的過程中幾乎不會被消化道中的各種不利于條件所傷害，因此能夠更高效的發(fā)揮其在腸道中的益生作用，且運輸和保存過程中的條件也大大降低，該孢子型乳酸菌乳飲料健康、高效、適口、營養(yǎng)均衡、易保藏，非常適合廣大人群日常飲用。3、本發(fā)明的孢子型乳酸菌乳飲料，風味濃郁和諧，酸甜適中，無澀味，口感佳，色澤質地較均勻，呈明亮的淺褐色，表面平滑細膩，無分層現(xiàn)象，無沉淀，無異物。產(chǎn)品的凝結芽孢桿菌的活菌總數(shù)均大于≥1╳108cfu/ml。該孢子型乳酸菌乳飲料健康、高效、適口、營養(yǎng)均衡、易保藏，非常適合廣大人群日常飲用，具有良好的穩(wěn)定性和口感，適合實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。4、利用本發(fā)明的孢子型乳酸菌乳飲料，對疲勞大鼠血清水平、抗氧化功能及腸道菌群影響實驗結果表明，與模型組相比，樣品組的大鼠血清中堿性磷酸酶活性及白蛋白、總蛋白含量均有所提高，而血清尿素氮含量降低；樣品組的大鼠血清中tac、sod、gsh-px活性均比模型組提高，樣品組血清中mda含量比模型組均有不同程度的降低；樣品組體重增加；與模型組相比，樣品組的腸道菌群微生態(tài)有改善，大腸桿菌明顯減少，雙歧桿菌、乳酸桿菌、總厭氧菌明顯增加，基本恢復至正常組。說明了長期食用該孢子型乳酸菌乳飲料能夠促進生長代謝及保護免受氧化應激反應，該乳酸菌乳飲料還能夠起到改善腸道菌群作用，因此該乳酸菌乳飲料能夠起到營養(yǎng)和保健功能，適合日常人們食用。5、本發(fā)明不同于孢子型乳酸菌水飲料，為了孢子型乳酸菌孢子在小腸腸道中被復蘇，進而發(fā)揮孢子型乳酸菌的益生作用，需要在生產(chǎn)過程中利用培養(yǎng)條件嚴格控制孢子型乳酸菌使其產(chǎn)生休眠狀態(tài)的內生孢子，本發(fā)明的孢子型乳酸菌乳飲料，利用凝結芽孢桿菌進行發(fā)酵，在發(fā)酵過程中，不僅能產(chǎn)生蛋白質水解酶，使發(fā)酵乳中含有更多的肽和比例更合理的人體所需的必須氨基酸，而且發(fā)酵產(chǎn)生的乳酸與乳中ca、p、fe等礦物質形成易于溶于水的乳酸鹽，大大提高了ca、p、fe的利用率，此外含有大量的b族維生素(維生素b1、b2、b6)和少量脂溶性維生素，發(fā)酵過程中代謝分泌一些酶類，能夠降解脂肪、蛋白質等大分子物質，從而使得發(fā)酵乳更利于消化吸收。因此本發(fā)明的孢子型乳酸菌乳飲料不僅比孢子型乳酸菌水飲料具有較高的營養(yǎng)價值和保健功能，且本發(fā)明的孢子型乳酸菌乳飲料含大量的凝結芽孢桿菌活菌，而活菌會在嚴苛環(huán)境下內部產(chǎn)生具保護作用的內生孢子從到達到耐受環(huán)境的作用，而不受本加工工藝條件嚴格控制。6、此外，與現(xiàn)有的普通的乳酸菌乳飲料相比，本發(fā)明的孢子型乳酸菌乳飲料，不僅有現(xiàn)有乳酸菌乳飲料的營養(yǎng)功能，而且以優(yōu)秀的有孢子型乳酸菌為基本原料，由于該種乳酸菌抗逆性強，且在嚴苛環(huán)境下內部會產(chǎn)生具保護作用的內生孢子，讓乳酸菌在制成乳飲料及喝入人體的過程中幾乎不會被消化道中的各種不利于乳酸菌的條件所傷害，更高效的發(fā)揮乳酸菌于腸道中的作用。本發(fā)明以內生孢子型乳酸菌為發(fā)酵菌種，這種乳飲料不僅增進腸道降解的效果增強，而且運輸和保存過程中的條件也大大降低，非常適合廣大人群日常飲用。具體實施方式下面結合具體實施例對本發(fā)明做進一步說明，但本發(fā)明不受實施例的限制。實施例1：本實施例提供了一種孢子型乳酸菌乳飲料，該乳飲料的配方為：以100重量份計，主要由以下重量份的原料制備而成的：發(fā)酵乳35份、輔料11.16份，其余為水；其中：輔料由如下重量份的組分組成：蔗糖11份、乳酸0.15份，食用香精0.01份；每100份發(fā)酵乳是由90份脫脂牛乳、0.7份葡萄糖、4份孢子型乳酸菌和5.3份水制備而成的。每份取10g。本實施例中孢子型乳酸菌采用凝結芽孢桿菌tbc169。該孢子型乳酸菌乳飲料的制備方法如下：1)發(fā)酵乳制備：向90份脫脂牛乳中加入0.7份葡萄糖、5.3份水，攪拌均勻，在121℃，高壓滅菌15min，冷卻至40℃后加入4份凝結芽孢桿菌tbc169，在42℃的溫度下發(fā)酵20h至牛乳成半固態(tài)，制得所述發(fā)酵乳，冷藏備用。2)調配：取35份步驟1)獲得的發(fā)酵乳降溫至30℃以下，以所述孢子型乳酸菌乳飲料100重量份計，加入蔗糖11份混合均勻，加入0.15份乳酸，加入0.01份食用香精調香及53.84份的水。3)均質：將步驟2)調配好的物料在60℃，18mpa的條件下均質，獲得孢子型乳酸菌乳飲料。實施例2：本實施例提供了一種孢子型乳酸菌乳飲料，該乳飲料的配方為：以100重量份計，主要由以下重量份的原料制備而成的：發(fā)酵乳45份、輔料13.55份，其余為水；其中：輔料由如下重量份的組分組成：蔗糖13份、蘋果酸0.25份，食用香精0.3份；每100份發(fā)酵乳是由93份脫脂牛乳奶、0.9份葡萄糖、6份孢子型乳酸菌，0.1份水制備而成的。每份取10g。本實施例中孢子型乳酸菌采用凝結芽孢桿菌tbc169。該孢子型乳酸菌乳飲料的制備方法如下：1)發(fā)酵乳制備：向93份脫脂牛乳中加入0.9份葡萄糖、0.1份水，攪拌均勻，在121℃，高壓滅菌15min，冷卻至40℃后加入6份凝結芽孢桿菌tbc169，在42℃的溫度下發(fā)酵28h至牛乳成半固態(tài)，制得所述發(fā)酵乳，冷藏備用。2)調配：取45份步驟1)獲得的發(fā)酵乳降溫至30℃以下，以所述孢子型乳酸菌乳飲料100重量份計，加入蔗糖13份混合均勻，加入0.25份蘋果酸，加入0.3份食用香精調香及41.45份水。3)均質：將步驟2)調配好的物料在60℃，18mpa的條件下均質，獲得孢子型乳酸菌乳飲料。實施例3：本實施例提供了一種孢子型乳酸菌乳飲料，該乳飲料的配方為：以100重量份計，主要由以下重量份的原料制備而成的：發(fā)酵乳38份、輔料11.71份，其余為水；其中：輔料由如下重量份的組分組成：蔗糖11.5份、檸檬酸鈉0.18份，食用香精0.03份；每100份發(fā)酵乳是由92份脫脂牛乳奶、0.75份葡萄糖、4.5份孢子型乳酸菌，2.75份水制備而成的。每份取10g。本實施例中孢子型乳酸菌采用凝結芽孢桿菌tbc169。該孢子型乳酸菌乳飲料的制備方法如下：1)發(fā)酵乳制備：向92份脫脂牛乳中加入0.75份葡萄糖、2.75份水，攪拌均勻，在121℃，高壓滅菌15min，冷卻至40℃后加入4.5份凝結芽孢桿菌tbc169，在42℃的溫度下發(fā)酵24h至牛乳成半固態(tài)，制得所述發(fā)酵乳，冷藏備用。2)調配：取38份步驟1)獲得的發(fā)酵乳降溫至30℃以下，以所述孢子型乳酸菌乳飲料100重量份計，加入蔗糖11.5份混合均勻，加入0.18份檸檬酸鈉，加入0.03份食用香精調香及50.29份水。3)均質：將步驟2)調配好的物料在60℃，18mpa的條件下均質，獲得孢子型乳酸菌乳飲料。實施例4：本實施例提供了一種孢子型乳酸菌乳飲料，該乳飲料的配方為：以100重量份計，主要由以下重量份的原料制備而成的：發(fā)酵乳42份、輔料12.97份，其余為水；其中：輔料由如下重量份的組分組成：蔗糖12.5份、檸檬酸0.22份，食用香精0.25份；每100份發(fā)酵乳是由93份脫脂牛乳奶、0.85份葡萄糖、5.5份孢子型乳酸菌，0.65份水制備而成的。每份取10g。本實施例中孢子型乳酸菌采用凝結芽孢桿菌tbc169。該孢子型乳酸菌乳飲料的制備方法如下：1)發(fā)酵乳制備：向93份脫脂牛乳中加入0.85份葡萄糖、0.65份水，攪拌均勻，在121℃，高壓滅菌15min，冷卻至40℃后加入5.5份凝結芽孢桿菌tbc169，在42℃的溫度下發(fā)酵24h至牛乳成半固態(tài)，制得所述發(fā)酵乳，冷藏備用。2)調配：取42份步驟1)獲得的發(fā)酵乳降溫至30℃以下，以所述孢子型乳酸菌乳飲料100重量份計，加入蔗糖12.5份混合均勻，加入0.22份檸檬酸，加入0.25份食用香精調香及45.03份水。3)均質：將步驟2)調配好的物料在60℃，18mpa的條件下均質，獲得孢子型乳酸菌乳飲料。實施例5：本實施例提供了一種孢子型乳酸菌乳飲料，該乳飲料的配方為：以100重量份計，主要由以下重量份的原料制備而成的：發(fā)酵乳40份、輔料12.25份，其余為水；其中：輔料由如下重量份的組分組成：蔗糖12份、檸檬酸0.2份，食用香精0.05份；每100份發(fā)酵乳是由93份脫脂牛乳奶、0.8份葡萄糖、5份孢子型乳酸菌，1.2份水制備而成的。每份取10g。本實施例中孢子型乳酸菌采用凝結芽孢桿菌tbc169。該孢子型乳酸菌乳飲料的制備方法如下：1)發(fā)酵乳制備：向93份脫脂牛乳中加入0.85份葡萄糖、1.2份水，攪拌均勻，在121℃，高壓滅菌15min，冷卻至40℃后加入5份凝結芽孢桿菌tbc169，在42℃的溫度下發(fā)酵24h至牛乳成半固態(tài)，制得所述發(fā)酵乳，冷藏備用。2)調配：取42份步驟1)獲得的發(fā)酵乳降溫至30℃以下，以所述孢子型乳酸菌乳飲料100重量份計，加入蔗糖12份混合均勻，加入0.2份檸檬酸，加入0.05份食用香精調香及47.75份水。3)均質：將步驟2)調配好的物料在60℃，18mpa的條件下均質，獲得孢子型乳酸菌乳飲料。實施例6：為了說明該孢子型乳酸菌乳飲料的品質，下面采用實施例1-5制備獲得的孢子型乳酸菌乳飲料制備過程中的發(fā)酵乳進行感官評價，分別在實驗中設為樣品1組、樣品2組、樣品3組、樣品4組、樣品5組表示。感官評價方法如下：請30位經(jīng)驗豐富的評價員對孢子型乳酸菌乳飲料制備過程中的發(fā)酵乳進行感官評定，對其口感，風味、色澤、組織狀態(tài)等指標進行打分，感官評價評分標準如表1所示，評價結果如表2所示。表1孢子型乳酸菌乳飲料制備過程中的發(fā)酵乳感官評價標準表2孢子型乳酸菌乳飲料制備過程中的發(fā)酵乳感官評價結果樣品得分樣品1組81.3樣品2組82.7樣品3組86.3樣品4組88.2樣品5組90.2從上表可知，樣品5為最優(yōu)實施例，樣品3和樣品4次之，樣品1和2最低，但所有樣品組均能達到預期效果。制得的發(fā)酵乳酸度適宜，色澤質地較均勻，風味濃郁，色澤呈褐色。接種量為4-6％的發(fā)酵乳品質良好，發(fā)酵時間20-28h，沒有發(fā)酵不成熟和乳清析出等問題。因此，由脫脂牛乳90份-93份、葡萄糖0.7份-0.9份、孢子型乳酸菌4份-6份和水通過發(fā)酵制備而成的發(fā)酵乳具有良好性質，能夠用于乳酸菌乳飲料的制備。下面對實施例1-5制備獲得的孢子型乳酸菌乳飲料產(chǎn)品進行感官評價，分別在實驗中設為樣品1組、樣品2組、樣品3組、樣品4組、樣品5組表示。感官評價方法如下：請30位經(jīng)驗豐富的評價員對孢子型乳酸菌乳飲料產(chǎn)品進行感官評定，對其口感，風味、色澤、組織狀態(tài)等指標進行打分，感官評價評分標準如表3所示，評價結果如表4所示。表3孢子型乳酸菌乳飲料產(chǎn)品感官評價標準表4孢子型乳酸菌乳飲料產(chǎn)品感官評價結果樣品得分樣品1組81.2樣品2組85.3樣品3組86.5樣品4組88.5樣品5組90.1從上表可知，樣品5為最優(yōu)實施例，樣品3和樣品4次之，樣品1和2最低，但所有樣品組均能達到效果。因此利用該配方制備的孢子型乳酸菌乳飲料，特征風味濃郁和諧，酸甜適中，無澀味，口感佳，色澤質地較均勻，呈明亮的淺褐色，表面平滑細膩，無分層現(xiàn)象，無沉淀，無異物。對實施例1-5制備獲得的孢子型乳酸菌乳飲料產(chǎn)品進行乳酸菌總數(shù)檢驗，分別在實驗中設為樣品1組、樣品2組、樣品3組、樣品4組、樣品5組表示。孢子型乳酸菌乳飲料中凝結芽孢桿菌的數(shù)量依照gb4789.35-2016《食品安全國家標準食品微生物學檢驗乳酸菌檢驗》進行乳酸菌總數(shù)檢驗測定。結果如表5。表5孢子型乳酸菌乳飲料產(chǎn)品乳酸菌總數(shù)檢驗結果樣品菌落總數(shù)(logcfu/ml)樣品1組≥8.50樣品2組≥9.42樣品3組≥8.73樣品4組≥9.37樣品5組≥9.12從上表可知，所有樣品組均能達到效果，凝結芽孢桿菌的活菌總數(shù)均大于≥1╳108cfu/ml。實施例7：下面采用實施例1-5制備獲得的孢子型乳酸菌乳飲料對疲勞大鼠血清生化指標水平、抗氧化作用及腸道菌群影響的評價以說明長期食用該孢子型乳酸菌飲料能夠在外界因素刺激下改善腸道菌群，抵抗氧化應激，保持健康狀態(tài)的作用。以下實施例1-5制備獲得的乳酸菌乳飲料設為樣品1組、樣品2組、樣品3組、樣品4組、樣品5組表示。1.實驗材料：血清堿性磷酸酶(alkaline，alp)活性，白蛋白(albumin，alb)、總蛋白(totalprotein，tp)，尿素氮(ureanitrogen，un)含量，分別采用試劑盒法進行測定。總抗氧化能力(totalantioxidantcapacity，tac)，超氧化物岐化酶(superoxidedismutase，sod)，丙二醛(malondialdehyde，mda)含量，采用試劑盒法測定。gsh-px(谷胱甘肽過氧化物酶)試劑盒。以上試劑盒購于南京建成生物工程研究所。2.實驗動物：wistar雄性大鼠(200±20g)，購于中國醫(yī)學科學院實驗動物研究所，適應性飼養(yǎng)一周，飼養(yǎng)條件，飼養(yǎng)于spf級動物房，室溫22±2℃，相對濕度38～42％rh，光照12h自動亮-暗循環(huán)，自由飲食，游泳鍛煉4天(5min/次)。3.實驗方法：隨機將70只雄性wistar大鼠分為7組，每組10只：(1)正常對照組(全程喂養(yǎng)基礎飼料，不加任何干擾物)；(2)模型組；(3)樣品1組；(4)樣品2組；(5)樣品3組；(6)樣品4組；(7)樣品5組。疲勞大鼠模型組：采用大鼠負重游泳試驗，每只大鼠按大鼠體質量5％～7％在其尾根部綁扎鉛絲，隨之將大鼠置于水溫(25±1)℃、水深30～40cm的自來水池內自由游泳，用秒表記錄小鼠自落水至鼻孔沉入水中8s不能浮出水面的時間，為小鼠游泳時間。將(2)～(7)組大鼠每天負重游泳6h，正常飼養(yǎng)。正常對照組不給予任何刺激，自由飲食。模型組(全程喂養(yǎng)基礎飼料)。(3)-(7)喂飼基礎飼料加孢子型乳酸菌乳飲料。實驗周期60天。用不銹鋼食盒及玻璃飲水瓶分籠飼養(yǎng)，自由攝食和飲水。生化指標及抗氧化指標的測定：實驗結束時測定體重，處死大鼠，心臟取血，測定大鼠血清水平及抗氧化水平。血清水平包括alp、alb、tp和un含量。抗氧化水平包括tac、sod、mda和gsh-px含量。tac采用鐵還原法測定，sod活性檢測采用黃嘌呤氧化酶法(羥胺法)，mda含量檢測采用硫代巴比妥酸法(tba)，gsh-px活性檢測采用比色法。檢測所用試劑盒購自南京建成生物工程研究所，具體方法參見試劑盒說明書。腸道菌群實驗：取大鼠新鮮糞約0.5g，加入4.5ml肉湯進行混勻，吸取混合液約0.1ml置于0.9ml稀釋液進行102-107梯度稀釋，需氧菌接種在相應選擇性培養(yǎng)基上，置于37℃5％co2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。厭氧菌也接種在相應選擇培養(yǎng)基上，置于厭氧培養(yǎng)罐中，在37℃5％co2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h。計數(shù)培養(yǎng)皿表面的菌落形成單位(cfu)數(shù)量，乘以稀釋倍數(shù)則得到每克糞便標本的菌落形成單位數(shù)。取對數(shù)值(log10cfu/g形式)運算。細菌種類鑒定參考bergey氏細菌鑒定手冊，根據(jù)細菌形態(tài)、染色性及生化特征鑒定。4.統(tǒng)計方法：計量資料數(shù)據(jù)用平均值±標準誤(mean±standarderror)表示，各組間差異比較采用one-wayanova，由spss22統(tǒng)計軟件完成。p<0.05為有顯著差異，p<0.01為有極顯著差異。5.實驗結果孢子型乳酸菌乳飲料對疲勞大鼠生化指標、抗氧化作用及腸道菌群影響實驗結果如下：表6孢子型乳酸菌乳飲料對疲勞大鼠血清生化指標的影響注：與正常對照組比較，##p<0.01，#p<0.05；與模型對照組比較，**p<0.01，*p<0.05。結論：實驗表明，與對照組相比，模型組大鼠血清中堿性磷酸酶活性及白蛋白、總蛋白含量均比對照組降低血清尿素氮含量升高，說明模型組大鼠體內體內代謝合成減弱，影響了其生長代謝。與模型組相比，樣品組的大鼠血清中堿性磷酸酶活性及白蛋白、總蛋白含量均比對照組有所提高。樣品組血清尿素氮含量比對照組有不同程度的降低。堿性磷酸酶作為具有遺傳標記的同工酶，其活性的高低可以反映動物的生長速度和成長性能；總蛋白有運輸營養(yǎng)物質、維持滲透壓和酸堿平衡、參與體液免疫等重要功能；白蛋白是血清中重要的運輸?shù)鞍祝饕筛闻K合成具有運輸內外源性物質、維持膠體滲透壓穩(wěn)定和膠體保護并穩(wěn)定血液中免疫球蛋白等功能；尿素氮是體內蛋白質分解代謝的主要產(chǎn)物之一，直接反應蛋白質代謝水平和營養(yǎng)情況，其含量越低，表明氮的利用率越高，即蛋白質合成代謝加強，分解代謝降低。因此實驗組的大鼠的血清總蛋白含量及白蛋白含量升高，尿素氮降低反映了凝結芽孢桿菌有效促進蛋白質的有效利用，促進大鼠體內蛋白質合成代謝，因此該實驗結果也說明了飲用了該孢子型乳酸菌飲料能夠促進蛋白質的有效利用，促進大鼠增長及促進代謝。表7孢子型乳酸菌乳飲料對疲勞大鼠抗氧化指標及體重的影響注：與正常對照組比較，##p<0.01，#p<0.05；與對照組比較，**p<0.01，*p<0.05。結論：實驗表明，與對照組相比，模型組大鼠血清中tac、sod、gsh-px活性均降低，mda含量升高。說明模型組大鼠體內的氧化平衡保護已經(jīng)失衡。與模型組相比，樣品組大鼠血清中tac、sod、gsh-px活性均升高，mda含量降低，樣品組體重增加。tac是衡量機體抗氧化功能的綜合性指標，內能反映機體抗氧化酶體統(tǒng)和非酶促系統(tǒng)對外來刺激的代償能力及機體自由基代謝狀況。sod是特異性消除超氧自由基的抗氧化酶類，主要防御過氧化作用引起的組織損傷，能夠歧化超氧陰離子形成h2o2，消除超氧陰離子的毒性，保護細胞免受損傷。mda是脂質過氧化作用的產(chǎn)物，其含量反映了機體脂質過氧化程度，間接反映細胞損傷程度，另外還可引起腸道內細菌和毒素移位，加重機體氧化應激。gsh-px在細胞內能消除有害的過氧化物代謝產(chǎn)物，阻斷脂質過氧化連鎖反應，從而起到了保護細胞膜結構和功能完整的作用。因此可以通過測定tac、sod、mda及gsh-px活性來反應該孢子型乳酸菌乳飲料對大鼠體內抗氧化作用的影響。由于在外界條件刺激下，大鼠體內氧化平衡被打破，機體會受到損傷，而食用該乳酸菌飲料能夠提高機體抗氧化酶系統(tǒng)和非酶促系統(tǒng)對外來次級的代償能力及機體自由基代謝情況，保護大鼠免受氧化應激反應，此外，該孢子型乳酸菌乳飲料中的凝結芽孢桿菌可以產(chǎn)生具有顯著抗氧化活性的胞外多糖，能夠清除體內二苯基苦基苯肼自由基、羥自由基和超氧陰離子自由基，可以通過直接或間接作用免疫細胞分泌各種細胞因子與免疫球蛋白、誘導抗氧化酶的合成加速清除脂質過氧化產(chǎn)物起到抗氧化作用。因此也說明了該乳酸菌乳飲料能夠起到營養(yǎng)和保健功能，適合日常人們食用。且樣品5效果最顯著，樣品4和樣品3效果次之，樣品1和樣品2再次之。表8孢子型乳酸菌乳飲料對疲勞大鼠腸道菌群水平的影響(log10cfu/g)注：與正常對照組比較，##p<0.01，#p<0.05；與對照組比較，**p<0.01，*p<0.05。結論：實驗表明，與對照組相比，模型組的腸球菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌和總厭氧菌減少，大腸桿菌雖然增加，說明模型組的大鼠經(jīng)過長期的負重游泳實驗受到外界刺激，腸道菌群數(shù)量及平衡已經(jīng)打破，影響了大鼠的健康。而食用該孢子型乳酸菌乳飲料后，與模型組相比，樣品組大腸桿菌明顯減少，雙歧桿菌、乳酸桿菌、總厭氧菌明顯增加，基本恢復至正常組。腸道菌群平衡是維持機體健康的重要指標，腸道菌群平衡，不僅可以與機體進行物質與信息交換，而且影響著機體正常代謝和營養(yǎng)吸收。而凝結芽胞桿菌能夠生產(chǎn)芽孢而耐受胃酸和膽汁等不利條件進入消化道定值，能夠降低腸桿菌科生態(tài)平衡，增加腸道內乳酸菌和雙歧桿菌等益生菌數(shù)量，抑制大腸桿菌等有害菌的生長。凝結芽孢桿菌能夠產(chǎn)乳酸，還可產(chǎn)生l-乳酸脫氫酶，降低ph，提高鈣、磷的利用率，并促進蛋白酶原向蛋白酶的轉化，促進營養(yǎng)物質的消化，另外凝結芽孢桿菌產(chǎn)生維生素、氨基酸、有機酸、未知生長因子等物質，為機體提供營養(yǎng)的同時還促進小腸的蠕動，改善消化功能。因此長期食用該乳酸菌乳飲料能夠起到改善腸道菌群，具有營養(yǎng)和保健功能，適合日常人們食用。且樣品5效果最顯著，樣品4和樣品3效果次之，樣品1和樣品2再次之。綜上所述，利用該配方制成的孢子乳酸菌飲料不僅具有促進生長代謝、抗氧化，長期食用可改善腸道菌群作用、且易保藏、營養(yǎng)全面而且乳酸菌飲料特征風味濃郁、和諧酸甜適中，無澀味，口感佳色澤均勻一致，呈明亮的淺褐色整體均勻分散，表面平滑細膩，無沉淀異物。雖然本發(fā)明已以較佳的實施例公開如上，但其并非用以限定本發(fā)明，任何熟悉此技術的人，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內，都可以做各種改動和修飾，因此本發(fā)明的保護范圍應該以權利要求書所界定的為準。當前第1頁12