技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及轉(zhuǎn)基因家兔模型技術(shù)領(lǐng)域,更具體地說涉及一種使兔子形成動脈粥樣硬化的誘導(dǎo)飼料的制備方法。
背景技術(shù):
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心腦血管疾病是目前威脅群人類健康最嚴重的疾病,動脈粥樣硬化是其病理基礎(chǔ),研究cvd離不開動物模型,我們知道人類cvd的發(fā)病與脂質(zhì)代謝異常密切相關(guān),動脈粥樣硬化是所有cvd共同的病理基礎(chǔ),所以人類研究cvd離不開脂質(zhì)代謝異常和動脈粥樣硬化,現(xiàn)在生物醫(yī)學(xué)研究中廣泛使用小鼠和大鼠模型來研究cvd存在著缺陷:
(1)小鼠和大鼠體內(nèi)脂蛋白以高密度脂蛋白(hdl)為主,hdl具有先天抗動脈粥樣硬化作用,不易形成動脈粥樣硬化。
(2)小鼠和大鼠的apob100,又可以合成apob48,因此小鼠和大鼠的apob48即存在于肝源性極低密度脂蛋白(vldl)中,也存在于腸源性乳糜微粒中,而人類的apob48只存在于腸源性乳糜微粒中。
(3)小鼠和大鼠天生缺乏cetp。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
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本發(fā)明的目的就在于提供一種使兔子形成動脈粥樣硬化的誘導(dǎo)飼料的制備方法,它可以生產(chǎn)專門用于轉(zhuǎn)基因家兔模型培育過程中使得兔子形成動脈粥樣硬化的誘導(dǎo)飼料。
為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明的一種使兔子形成動脈粥樣硬化的誘導(dǎo)飼料的制備方法,其特征在于,所述制備方法包括的具體步驟為:選取家兔飼料,按比例加入相應(yīng)的膽固醇、食用油,在60攝溫度下,進行翻炒,使膽固醇、食用油與家兔飼料進行融合得到誘導(dǎo)飼料。
本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明可以生產(chǎn)專門用于轉(zhuǎn)基因家兔模型培育過程中使得兔子形成動脈粥樣硬化的誘導(dǎo)飼料。
具體實施方式:
以下所述僅為體現(xiàn)本發(fā)明原理的較佳實施例,并不因此而限定本發(fā)明的保護范圍。
實施例:在培育轉(zhuǎn)基因家兔模型的時候,首先超數(shù)排卵和同期發(fā)情(注射孕馬血清促性腺激素或促卵泡激素)誘導(dǎo)供體雌兔超數(shù)排卵,與雄兔交配后(17~20小時后),處死供體雌兔,打開腹腔,取出輸卵管,沖取、收集受精卵(將形態(tài)正常受精卵收集在一起培養(yǎng),直至用于顯微注射)然后將外源基因注射到受精卵的雄原核中(在200倍放大倍數(shù)下、在帶有機械壁的倒置微分干涉相差顯微鏡下進行,用固定針吸住受精卵,將吸入注射針內(nèi)的外源溶液注入到雄原核中)注射后的胚胎再移植給假懷孕的受體家兔(麻醉假孕受體家兔,仰位放置,無菌操作實施受精卵移植,在下腹部切開皮膚、肌肉和腹膜,找到卵巢和輸卵管。給每只家兔移植30~40枚注射過的受精卵。仔兔出生2~3周后,取耳組織,提取基因組,用pcr或southern雜交檢測仔兔基因組中是否整合了外源基因,用northern或western雜交檢測外源基因表達水平。如果表達輕微可以使用誘導(dǎo)飼料,進行誘導(dǎo),飼喂4、8、12周依次分別進行血脂分析,直至達標。
本實施例中,誘導(dǎo)飼料的制造過程為:選取家兔飼料,按比例加入相應(yīng)的膽固醇、食用油,在60攝溫度下,進行翻炒,使膽固醇、食用油與家兔飼料進行融合得到誘導(dǎo)飼料。
本實施例中的家兔飼料可選取我們?nèi)粘I钪衅胀ǖ募彝蔑暳稀?/p>
本文中所描述的具體實施例僅僅是對本發(fā)明精神作舉例說明。本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員可以對所描述的具體實施例做各種各樣的修改或補充或采用類似的方式替代,但并不會偏離本發(fā)明的精神或者超越所附權(quán)利要求書所定義的范圍。