本發(fā)明屬于細(xì)胞應(yīng)用領(lǐng)域，具體地說，涉及一種新的寵物糧蛋白替代品及其制備方法。

背景技術(shù)：

1、2021年全國寵物飼料產(chǎn)量113.0萬噸，同比增長17.3％，這其中寵物糧中重要的營養(yǎng)物蛋白主要來自于畜牧養(yǎng)殖。因此在一定程度上寵物與人類存在肉食的競爭，其次發(fā)現(xiàn)對牛肉過敏的寵物犬占34％，牛肉過敏的寵物貓占18％，魚肉過敏的寵物貓占17％。另外畜牧肉提供的動物蛋白在養(yǎng)殖過程中可能會有農(nóng)藥、抗生素、激素和生長促進(jìn)劑等化學(xué)制劑的殘留，且在市場上還出現(xiàn)原料表述有偷換概念，實際原料使用的是肉粉，但是在標(biāo)簽上卻虛假標(biāo)注為脫水肉。因此部分寵物主人考慮用植物蛋白替代來自畜牧養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)的肉類蛋白，但植物中含有過多不易消化的植物性蛋白，極易引起寵物腹疼甚至腹瀉，長期食用，會嚴(yán)重影響寵物的消化功能。

2、針對以上寵物飼養(yǎng)所面臨的問題，細(xì)胞培養(yǎng)肉的產(chǎn)生可以很好的解決這些矛盾。細(xì)胞培養(yǎng)肉是指利用細(xì)胞培養(yǎng)工程和組織工程等技術(shù)，在體外培養(yǎng)動物肌肉組織作為食用材料。

3、如cn117866883a公開了一種利用動物高活性肌肉和脂肪前體細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞培養(yǎng)肉的方法，該方法包括以下步驟：s1、篩選獲得高活性的田鼠肌肉前體細(xì)胞，并進(jìn)行初步擴(kuò)增；

4、s2、篩選獲得高活性的田鼠脂肪前體細(xì)胞，并進(jìn)行初步擴(kuò)增；s3、利用浸泡去除法獲取脫細(xì)胞的植物細(xì)胞外基質(zhì)薄層；s4、利用植物細(xì)胞外基質(zhì)作為細(xì)胞生長支架進(jìn)行培養(yǎng)獲取動物細(xì)胞肉培養(yǎng)層；s5、獲得分化為成熟肌肉纖維細(xì)胞的立體結(jié)構(gòu)組織，即細(xì)胞培養(yǎng)肉。該方法具有更高的效率和更低的成本，可分離更多的細(xì)胞量，且可以增強(qiáng)細(xì)胞肉的營養(yǎng)和口感等。然而，上述培養(yǎng)肌細(xì)胞的培養(yǎng)成本高，耗時久。

5、有鑒于此，特提出本發(fā)明。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種新的寵物糧蛋白替代品及其制備方法。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

3、一種新的寵物糧蛋白替代品，其中，所述的新的寵物糧蛋白替代品包括如下組分：

4、

5、作為一種優(yōu)選方案，所述的新的寵物糧蛋白替代品包括如下組分：

6、

7、本發(fā)明中，所述的百分比為質(zhì)量百分比。

8、進(jìn)一步地，所述的細(xì)胞培養(yǎng)肉是以懸浮型cho細(xì)胞為種子，用無血清培養(yǎng)基在生物反應(yīng)器中通過fed-batch工藝培養(yǎng)獲得的。

9、本發(fā)明還提供所述的新的寵物糧蛋白替代品的制備方法，包括如下步驟：

10、s1、獲得細(xì)胞培養(yǎng)肉

11、以懸浮型cho細(xì)胞為種子，用無血清培養(yǎng)基在生物反應(yīng)器中通過fed-batch工藝培養(yǎng)，獲得細(xì)胞培養(yǎng)肉；

12、s2、制備寵物糧蛋白替代品

13、采用步驟s1所得到的細(xì)胞培養(yǎng)肉作為動物蛋白來源，添加豌豆粉、玉米粉、小麥粉、海帶粉、植物油脂、迷迭香提取物、酵母提取物和nacl，干燥，即得所述的新的寵物糧蛋白替代品。

14、進(jìn)一步地，步驟s1具體包括如下步驟：

15、s11、將在搖瓶中用無血清培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)的cho細(xì)胞按30w/ml接種至700ml生物反應(yīng)器中，加無血清培養(yǎng)基至300ml設(shè)定工作體積，得到接種了cho細(xì)胞的無血清培養(yǎng)基；

16、s12、在溫度37℃、溶解氧濃度40％±5％、ph?6.8-7.2的條件下，以150r/min±10的攪拌轉(zhuǎn)數(shù)攪拌接種了cho細(xì)胞的無血清培養(yǎng)基，培養(yǎng)接種在該無血清培養(yǎng)基中的cho細(xì)胞，得到細(xì)胞培養(yǎng)肉。

17、進(jìn)一步地，在步驟s12的培養(yǎng)過程中，進(jìn)行補(bǔ)料方式控制，具體為：培養(yǎng)第5d，加入300ml無血清培養(yǎng)基；培養(yǎng)第6d，補(bǔ)充2ml2.5m葡萄糖儲液至終濃度22.83mm；培養(yǎng)第7d，補(bǔ)充6.206ml2.5m葡萄糖儲液至終濃度33.3mm，添加4％008.2+0.4％009；整個培養(yǎng)過程持續(xù)9d，培養(yǎng)第8d的活細(xì)胞密度達(dá)到1.3×107cells/ml。

18、本發(fā)明中，所述的葡萄糖儲液為葡萄糖水溶液，將其配置為濃度至2.5m時儲存?zhèn)溆谩?/p>

19、008.2為一款補(bǔ)料培養(yǎng)基。

20、009為一款補(bǔ)料培養(yǎng)基。

21、進(jìn)一步地，在步驟s12的培養(yǎng)過程中，還包括對整個培養(yǎng)周期中每天的細(xì)胞密度和細(xì)胞活力進(jìn)行監(jiān)控。

22、進(jìn)一步地，步驟s11和步驟s12中所述的無血清培養(yǎng)基為cd?04+4mm?l-glu。

23、本發(fā)明中，cd?04為cho?cd?04培養(yǎng)基。

24、進(jìn)一步地，步驟s2中，所述的干燥采用如下四種工藝中的一種：

25、1)蒸10min-30min后45℃-68℃烘干15-20h；

26、2)蒸10min-30min后冷凍干燥6h-10h；

27、3)45℃-68℃烘干15-20hh；

28、4)冷凍干燥6h-10。

29、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點：

30、本發(fā)明以懸浮型cho細(xì)胞為種子，用無血清、無動物蛋白添加的培養(yǎng)基通過fed-batch工藝培養(yǎng)獲得的細(xì)胞培養(yǎng)肉，相比傳統(tǒng)養(yǎng)殖來源的動物蛋白，細(xì)胞培養(yǎng)肉無激素，無藥物殘留，腸道更易消化吸收。

技術(shù)特征：

1.一種新的寵物糧蛋白替代品，其特征在于，所述的新的寵物糧蛋白替代品包括如下組分：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新的寵物糧蛋白替代品，其特征在于，所述的新的寵物糧蛋白替代品包括如下組分：

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的新的寵物糧蛋白替代品，其特征在于，所述的細(xì)胞培養(yǎng)肉是以懸浮型cho細(xì)胞為種子，用無血清培養(yǎng)基在生物反應(yīng)器中通過fed-batch工藝培養(yǎng)獲得的。

4.一種權(quán)利要求1-3任意一項所述的新的寵物糧蛋白替代品的制備方法，其特征在于，所述的制備方法包括如下步驟：

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟s1具體包括如下步驟：

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，在步驟s12的培養(yǎng)過程中，進(jìn)行補(bǔ)料方式控制，具體為：培養(yǎng)第5d，加入300ml無血清培養(yǎng)基；培養(yǎng)第6d，補(bǔ)充2ml2.5m葡萄糖儲液至終濃度22.83mm；培養(yǎng)第7d，補(bǔ)充6.206ml2.5m葡萄糖儲液至終濃度33.3mm，添加4％008.2+0.4％009；整個培養(yǎng)過程持續(xù)9d，培養(yǎng)第8d的活細(xì)胞密度達(dá)到1.3×107cells/ml。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，在步驟s12的培養(yǎng)過程中，還包括對整個培養(yǎng)周期中每天的細(xì)胞密度和細(xì)胞活力進(jìn)行監(jiān)控。

8.根據(jù)權(quán)利要求4-7任意一項所述的制備方法，其特征在于，步驟s11和步驟s12中所述的無血清培養(yǎng)基為cd?04+4mm?l-glu。

9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟s2中，所述的干燥采用如下四種工藝中的一種：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于細(xì)胞應(yīng)用領(lǐng)域，具體地說，涉及一種新的寵物糧蛋白替代品及其制備方法。所述的新的寵物糧蛋白替代品包括如下組分：細(xì)胞培養(yǎng)肉10?20％、豌豆粉25?35％、玉米粉5?15％、小麥粉5?15％、海帶粉3?8％、植物油脂10?20％、迷迭香提取物3?8％、酵母提取物3?8％和NaCl0.05?0.12％。本發(fā)明以懸浮型CHO細(xì)胞為種子，用無血清、無動物蛋白添加的培養(yǎng)基通過Fed?batch工藝培養(yǎng)獲得的細(xì)胞培養(yǎng)肉，相比傳統(tǒng)養(yǎng)殖來源的動物蛋白，細(xì)胞培養(yǎng)肉無激素，無藥物殘留，腸道更易消化吸收。

技術(shù)研發(fā)人員：賴良學(xué),米繼東,汪海,鄧嘉儀
受保護(hù)的技術(shù)使用者：北京希諾谷生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/30