本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，具體涉及一種牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、隨著肥胖人口的迅速增加，肥胖已成為一個(gè)全球性問題，它通常被認(rèn)為是各種疾病的危險(xiǎn)因素，如糖尿病和心血管疾病。肥胖癥的形成，很大程度上是由不健康的飲食習(xí)慣和生活方式引起的，特別是長(zhǎng)期過量攝入高脂膳食，具有高血脂癥的特征。胰脂肪酶(pancreatic?lipase，pl)是脂肪消化吸收過程的關(guān)鍵酶，抑制胰脂肪酶的活性可以減少人體對(duì)脂肪的吸收，因此，通過抑制胰脂肪酶活性來降低脂肪的消化和吸收，是抑制肥胖和降低高血脂的有效方法。然而，目前臨床常用的減肥降脂藥物如奧利司他、利拉魯肽、他汀類藥物等對(duì)人體具有一定的副作用，包括胃腸道不良反應(yīng)，油性糞便，糞便急迫和油性斑點(diǎn)等，因而限制了其廣泛應(yīng)用。因此，開發(fā)天然高效、無毒副作用的新型胰脂肪酶抑制劑已成為近年來的研究熱點(diǎn)之一。

2、目前，常見天然來源的胰脂肪酶抑制劑包括黃酮類、皂苷類、萜類、生物堿等活性物質(zhì)?；ㄉ帐且环N類黃酮物質(zhì)，廣泛分布于深色谷物、漿果及蔬菜中，可賦予其紅色、藍(lán)色、紫色等色調(diào)。研究發(fā)現(xiàn)，花色苷具有抗氧化，抗炎癥，降血糖及降血脂等多種功能。然而，花色苷的穩(wěn)定性較差，其應(yīng)用容易受到一些物理或化學(xué)因素的限制，例如ph、氧氣、溫度和金屬離子等。隨著對(duì)海洋生物資源研究的不斷深入，海洋生物活性肽因其良好的天然活性、安全性以及高效性而受到廣泛關(guān)注。研究表明，牡蠣肽具有降血糖，免疫調(diào)節(jié)，降血脂及抗疲勞等多種生物活性功能，但其存在消化穩(wěn)定性差的問題，極大地限制了活性肽的活性發(fā)揮。近些年，文獻(xiàn)研究報(bào)道黃酮類與蛋白質(zhì)的相互作用具有提高二者穩(wěn)定性、促進(jìn)其活性發(fā)揮的優(yōu)勢(shì)。因此，將牡蠣肽與花色苷協(xié)同組裝成復(fù)合物具有保護(hù)二者活性結(jié)構(gòu)、協(xié)同增強(qiáng)胰脂肪酶抑制活性的潛力。但目前對(duì)于牡蠣肽和花色苷協(xié)同抑制胰脂肪酶活性及探究二者相互作用的研究鮮有報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明以牡蠣肽-花色苷組裝復(fù)合物為研究對(duì)象，探討出該組裝復(fù)合物具有協(xié)同抑制胰脂肪酶活性的功效。研究結(jié)果可為闡明牡蠣肽和花色苷協(xié)同降脂作用機(jī)制及相關(guān)減肥降脂功能食品的開發(fā)利用提供理論依據(jù)和科學(xué)指導(dǎo)。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案：

3、本發(fā)明技術(shù)方案之一：提供一種牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物的制備方法，包括以下步驟：

4、將牡蠣肽和花色苷溶于水，反應(yīng)后得到牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物；

5、所述牡蠣肽的氨基酸序列為vdlm、vavl、vadl、vafe、igal、lga?l、lgle、alpnspf、aipnspf、afgpgle、dqphfpf、giqypvvv、qei?pnspf、ehvpgspf、gfppitgt、tfpvinpa、aipvhdpsq、appppppmq、dahipgspf、ptapgeyavh、appppppmqgq、vvgldkpmtvn、diripvgpifn、sagpgdigial和yfptapgeyavh。

6、所述牡蠣肽與所述花色苷的質(zhì)量比為1:4～4:1。

7、優(yōu)選地，所述反應(yīng)的溫度為25-50℃，時(shí)間為0.5-5h。

8、優(yōu)選地，所述牡蠣肽的制備步驟包括：將牡蠣肉加水勻漿后均質(zhì)，調(diào)節(jié)ph至9，加入堿性蛋白酶酶解，滅酶，離心，上清液干燥，得到所述牡蠣肽。

9、更優(yōu)選地，所述堿性蛋白酶的加入量為牡蠣肉重的2％；所述酶解的溫度為50℃，時(shí)間為3h。

10、本發(fā)明技術(shù)方案之二：提供一種根據(jù)上述牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物的制備方法制得的牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物。

11、本發(fā)明技術(shù)方案之三：提供一種上述牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物在制備預(yù)防或治療肥胖或高血脂癥藥物中的應(yīng)用。

12、本發(fā)明技術(shù)方案之四：提供一種上述牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物在制備降血脂食品中的應(yīng)用。

13、本發(fā)明的有益技術(shù)效果如下：

14、本發(fā)明通過酶解法制備牡蠣肽，探究牡蠣肽與花色苷的體外降脂活性，并將不同質(zhì)量比例的牡蠣肽和花色苷進(jìn)行復(fù)合，研究其協(xié)同降脂效果。采用體外胰脂肪酶活性抑制模型與synergy?finder軟件中的zip模型和hsa模型篩選出最佳協(xié)同區(qū)域，并利用compusyn協(xié)同計(jì)算模型分析牡蠣肽協(xié)同花色苷的活性增效作用。同時(shí)采用酶抑制動(dòng)力學(xué)模型研究了牡蠣肽、花色苷及其復(fù)合物的胰脂肪酶的抑制類型，運(yùn)用多光譜學(xué)研究牡蠣肽與花色苷的相互作用機(jī)制。結(jié)果表明，牡蠣肽與花色苷具有較好的胰脂肪酶抑制活性，其中不同比例的牡蠣肽-花色苷復(fù)合物均顯示出了一定的協(xié)同作用，以牡蠣肽：花色苷＝1:1時(shí)協(xié)同效果最強(qiáng)。酶抑制動(dòng)力學(xué)分析表明牡蠣肽、花色苷及其復(fù)合物對(duì)胰脂肪酶的抑制方式包括混合性抑制和競(jìng)爭(zhēng)性抑制。分析多光譜學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果得到，牡蠣肽與花色苷相互作用后形成了復(fù)合物，使得復(fù)合物中酪氨酸和色氨酸殘基暴露，疏水性降低，極性增加。本發(fā)明提供的牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物為肥胖以及高血脂癥的治療和預(yù)防提供了新方向。

技術(shù)特征：

1.一種牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物的制備方法，其特征在于，所述反應(yīng)的溫度為25-50℃，時(shí)間為0.5-5h。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物的制備方法，其特征在于，所述牡蠣肽的制備步驟包括：將牡蠣肉加水勻漿后均質(zhì)，調(diào)節(jié)ph至9，加入堿性蛋白酶酶解，滅酶，離心，上清液干燥，得到所述牡蠣肽。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物的制備方法，其特征在于，所述堿性蛋白酶的加入量為牡蠣肉重的2％；所述酶解的溫度為50℃，時(shí)間為3h。

5.一種根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物的制備方法制得的牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物。

6.權(quán)利要求述5所述牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物在制備預(yù)防或治療肥胖或高血脂癥藥物中的應(yīng)用。

7.權(quán)利要求述5所述牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物在制備降血脂食品中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物及其制備方法和應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。所述牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物的制備步驟包括：將牡蠣肽和花色苷溶于水，反應(yīng)后得到牡蠣肽和花色苷組裝復(fù)合物，牡蠣肽與花色苷的質(zhì)量比為1:4～4:1。本發(fā)明以牡蠣肽?花色苷組裝復(fù)合物為研究對(duì)象，探討出該組裝復(fù)合物具有協(xié)同抑制胰脂肪酶活性的功效。研究結(jié)果可為闡明牡蠣肽和花色苷協(xié)同降脂作用機(jī)制及相關(guān)減肥降脂功能食品的開發(fā)利用提供理論依據(jù)和科學(xué)指導(dǎo)。

技術(shù)研發(fā)人員：陳忠琴,張萌萌,周龍建,鐘凱翠,曹文紅,譚明堂,鄭惠娜,高加龍,林海生
受保護(hù)的技術(shù)使用者：廣東海洋大學(xué)深圳研究院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/2