專利名稱：固定化黃色短桿菌新技術(shù)生產(chǎn)l-蘋果酸的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬酶工程領(lǐng)域，具體說是一種固定化黃色短桿菌新技術(shù)生產(chǎn)L-蘋果酸。
目前生產(chǎn)L-蘋果酸的固定化細胞技術(shù)中一般采用單一的聚合有機電解質(zhì)，如聚丙稀酰胺，海藻酸鈣，卡拉膠等，迄今為止，已公開發(fā)表了卡拉膠固定黃色短桿菌與產(chǎn)氨短桿菌的方法，并認為以卡拉膠固定細胞的轉(zhuǎn)化率最高。
卡拉膠是一種含有許多硫酸根基團的多糖化合物，作為固定化細胞的材料具有穩(wěn)定性好的優(yōu)點，但它的固定化溫度太高，這不但給固定化成形帶來困難，而且影響被包埋細胞的活性。
本發(fā)明的目的在于避免上述現(xiàn)有技術(shù)中不足之處而提供一種為降低卡拉膠的固定化溫度，使固定化細胞成形過程中細胞中酶不失活，在卡拉膠中加入明膠，羧甲基纖維素鈉共同溶解后，此復合有機電解質(zhì)的凝固點將大大降低的固定化黃色短桿菌新技術(shù)生產(chǎn)L-蘋果酸。
本發(fā)明的目的可以通過以下措施來達到一種固定化黃色短桿菌新技術(shù)生產(chǎn)L-蘋果酸，其工藝是在卡拉膠溶液中混入菌泥，充分攪拌，進行機械成形或手工成型，在0.3M的Kcl溶液中固化，用膽汁酸與富馬酸鈉的溶液活化后，將固定化細胞裝入酶柱中，通以富馬酸鹽，本發(fā)明其特征是在卡拉膠中加入5%～20%(重量百分比)明膠與1%～5%(重量百分比)羧甲基纖維素鈉混合溶解后形成復合電解質(zhì)溶液，混入將富馬酸鹽轉(zhuǎn)化為蘋果酸鹽的菌體后，形成固定化細胞(酶)用于生產(chǎn)L-蘋果酸。
本發(fā)明下面將結(jié)合實施例作進一步描述1、定量卡拉膠與明膠及羧甲基纖維素鈉的混合物加水后，加熱至80℃溶解，加入黃色短桿菌菌泥在38℃～42℃混合后，在細胞成型機中加工為φ5mm的圓球，或手工切成5×5×5mm的顆粒經(jīng)Kcl溶液固化與膽汁酸活化后，裝入8l固定化細胞反應(yīng)器中，以
＝0.23h-1的流速通入富馬酸鹽溶液，酶的半衰期為90～120天，平均轉(zhuǎn)化率為80%。
2、定量卡拉膠與明膠的混合物加水后，加熱至80℃溶解，加入黃色短桿菌菌泥50g在38℃～40℃混合后，倒入淺盤，加入0.3MKcl溶液固化，切成小方塊后，放入陶瓷盆中用膽汁酸活化，裝入250ml的固定化細胞柱中，以
＝0.23h-1的流速通入富馬酸鹽溶液，酶的半衰期為100天，平均轉(zhuǎn)化率為75%。
本發(fā)明比現(xiàn)有技術(shù)具有如下優(yōu)點本發(fā)明的固定化過程降低了卡拉膠的凝固點，從而減少了酶失活，提高了固定化細胞的酶活。
權(quán)利要求
1.一種固定化黃色短桿菌新技術(shù)生產(chǎn)L-蘋果酸，其工藝是在卡拉膠溶液中混入菌泥，充分攪拌，進行機械成形或手工成型，在0.3M的Kcl溶液中固化，用膽汁酸與富馬酸鈉的溶液活化后，將固定化細胞裝入酶柱中，通以富馬酸鹽，本發(fā)明其特征是在卡拉膠中加入5%～20%(重量百分比)明膠與1%～5%(重量百分比)羧甲基纖維素鈉混合溶解后形成復合電解質(zhì)溶液，混入將富馬酸鹽轉(zhuǎn)化為蘋果酸鹽的菌體后，形成固定化細胞(酶)用于生產(chǎn)L-蘋果酸。
全文摘要
本發(fā)明是在卡拉膠中加入5％～20％(重量比)明膠與1％～5％(重量比)羧甲基纖維素鈉。加水、加溫后溶解形成復合有機電解質(zhì)溶液在38℃～42℃時混入菌泥，充分攪拌，進行機械成型或手工成型，在0.3M的KCl溶液中固化，用膽汁酸與富馬酸鈉的溶液活化，將固定化細胞裝入酶柱中，通以富馬酸鹽。此固定化過程降低了卡拉膠的凝固點，從而減少了酶失活，提高了固定化細胞的酶活。
文檔編號C12P7/46GK1093753SQ9311076
公開日1994年10月19日 申請日期1993年4月16日 優(yōu)先權(quán)日1993年4月16日
發(fā)明者胡永紅, 王雪根, 歐陽平凱 申請人:歐陽平凱