專利名稱：從深層發(fā)醇獲得的香菇多糖粗品中提取注射用香菇多糖的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明為一種從深層發(fā)酵獲得的香菇多糖粗品中提取注射用香菇多糖的方法，屬于生物化學(xué)制藥領(lǐng)域。
國內(nèi)外提取香菇多糖醫(yī)用注射藥物，均從香菇子實體中提取。如日本味之素株式會社生產(chǎn)的香菇多糖(LENTINAN Vial Injection)注射劑。幾乎不溶于水。國內(nèi)福州梅蜂制藥廠從香菇子實體(Lentinus Sedodes(Bevk)Sing)提取的多糖，在水中溶解，在乙醇中幾乎不溶。中科院上海藥物研究所正在報批的香菇多糖純品也是從干香菇子實體中提取的。與日本相同，幾乎不溶于水。從香菇子實體中提取香菇多糖，原料來源困難，成本高，收率低，提取技術(shù)繁雜，工業(yè)化大批量生產(chǎn)困難。
本發(fā)明的目的是針對目前提取香菇多糖醫(yī)用注射藥物的困難，采用與現(xiàn)有技術(shù)截然不同的工藝路線，用少量菌種在發(fā)酵罐中深層發(fā)酵取得香菇多糖粗品，從粗品中提取香菇多糖，原料易得，成本低，不用消耗大量香菇子實體，以便進行工業(yè)化成批生產(chǎn)。同時取得水溶性和微溶于水的香菇多糖。
本發(fā)明的內(nèi)容如下(1)以深層發(fā)酵法取得含香菇多糖為20-30％的香菇多糖粗品作為原料，用20-30倍水浸提8-24小時，水溫控制在70-80℃；(2)收集上層浸提液，棄去下層固形物；
(3)醇析，用50％乙醇→70％乙醇→80％乙醇逐級醇析(4)醇析的上清液進入乙醇回收裝置，收集醇析沉淀物；(5)用95％乙醇洗滌醇析沉淀物3次，再用丙酮洗滌3次，最后用乙醚洗滌3次；(6)在5-10℃真空干燥或冰凍干燥；(7)收集干燥后的乳白色疏松粉末狀物，即得香菇多糖注射用產(chǎn)品。
所制出的產(chǎn)品經(jīng)浙江省測試中心分析含香菇多糖860.1mg/g，達到衛(wèi)生部標準規(guī)定850mg/g標準。
本發(fā)明的效果本發(fā)明從少量香菇子實體中制取少量菌種，利用此少量菌種，在培養(yǎng)基上深層發(fā)酵制取大量香菇多糖粗品作為原料，不需用大量香菇子實體，即可進行工業(yè)化成批生產(chǎn)，可降低生產(chǎn)成本，所得產(chǎn)品香菇多糖含量高，水溶性好，清澈透明，在實驗室和工廠進行6批次重復(fù)試驗，重現(xiàn)性好。
實施例采用真菌常規(guī)發(fā)酵方法所用培養(yǎng)基原材料如下葡萄糖、蛋白胨、(NH4)2SO4、KH2PO4、MgSO4、7H2O、B1、玉米油及少量香菇多糖菌種，用深層發(fā)酵法獲取大量香菇多糖粗品，含香菇多糖20-30％，以此作原料提取注射用香菇多糖產(chǎn)品。
(1)香菇多糖粗品，加入30倍77℃的水浸提8小時，抽濾，收集上層浸提液，棄去下層固形物；
(2)所收集的上層浸提液用50％乙醇，70％乙醇、80％乙醇逐級進行醇析，棄去上清液，送進乙醇回收裝置；(3)收集醇析沉淀物，用95％乙醇洗滌3次，再用丙酮洗滌3次，再用乙醚洗滌3次；(4)在10℃條件下真空干燥，干燥后為類白色或微黃色粉末狀香菇多糖。
以上實驗在發(fā)明內(nèi)容所述的工藝參數(shù)范圍內(nèi)共作6次都得到合格產(chǎn)品。
權(quán)利要求
1.一種從深層發(fā)酵獲得的香菇多糖粗品中提取注射用香菇多糖的方法，其特征是(1)以深層發(fā)酵法取得含香菇多糖為20-30％的香菇多糖粗品作為原料，用20-30倍水浸提8-24小時；(2)收集上層浸提液；(3)醇析，浸提液用50％乙醇→70％乙醇→80％乙醇逐級醇析；(4)收集醇析沉淀物；(5)用95％乙醇洗濟醇沉淀物3次，再用丙酮洗滌3次，最后用乙醚洗滌3次；(6)低溫干燥；(7)收集干燥后的乳白色疏松粉末狀物，即為本產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述(1)中用溫水浸提，是用70-80℃的溫水。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述的低溫干燥在5-10℃條件下真空干燥。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述的低溫干燥是冰凍干燥。
全文摘要
本發(fā)明為一種從深層發(fā)酵獲得的香菇多糖粗品中提取注射用香菇多糖的方法，是用溫水浸提香菇多糖粗品，收集上層浸提液用50％、70％、80％乙醇醇析，醇析沉淀物用95％乙醇洗3次，用丙酮洗3次，用乙醚洗3次，低溫干燥得到成品；本方法不用香菇子實體作原料，可降低生產(chǎn)成本，可進行工業(yè)化成批生產(chǎn)，所得香菇多糖含量高、水溶性好。
文檔編號C12P19/04GK1140202SQ9510761
公開日1997年1月15日 申請日期1995年7月7日 優(yōu)先權(quán)日1995年7月7日
發(fā)明者李玉萍, 趙路, 蘇玉林 申請人:李玉萍