專利名稱：富含多種微量元素的靈芝菌絲體及其生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種靈芝菌絲體及其生產(chǎn)方法。
硒元素、鐵元素、銅元素和鋅元素均為人體必需的微量元素，也是人體需要經(jīng)常補充的微量元素，但傳統(tǒng)的補充方法是以無機鹽形式進行，如硫酸亞鐵、硫酸鋅、亞硒酸鈉等，其缺點是副作用大、有相當?shù)亩拘?，尤其是人體不易吸收和利用，達不到補充微量元素的目的。野生靈芝菌絲體含有豐富的蛋白質(zhì)、全糖、SOD增強因子及多種微量元素，具有較高的藥用和食用價值，尤其是所含的微量元素為生物大分子結(jié)合或絡(luò)合的形式，有利于人體的吸收和利用，但由于其產(chǎn)量太低，故在藥用方面的開發(fā)利用較少。近年來隨著人工栽培靈芝菌絲體技術(shù)獲得成功，靈芝菌絲體在醫(yī)藥和食品方面的應(yīng)用亦愈來愈廣泛，但人工栽培的靈芝菌絲體中的微量元素的含量明顯偏低，使得其藥效下降，且還存在生產(chǎn)周期較長(約60天)，工藝復(fù)雜、產(chǎn)量低的缺點。
本發(fā)明的目的是提供一種安全無毒、利于人體吸收和利用的富含多種微量元素的靈芝菌絲體，且包括利用微生物發(fā)酵技術(shù)實現(xiàn)中藥材產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的生產(chǎn)方法。
本發(fā)明可按下述方式實現(xiàn)本發(fā)明的靈芝菌絲體包括含量為300000～500000ppm蛋白質(zhì)和50000～80000ppm全糖，其特征是還有含量為30～900ppm硒、200～1800ppm鐵、25～130ppm銅和80～1100ppm鋅。
本發(fā)明的方法為菌株的選擇和馴化、菌種由斜面到三角瓶到種子罐到發(fā)酵罐逐級擴大培養(yǎng)的工藝及在發(fā)酵罐的發(fā)酵培養(yǎng)基中添加含有一種或一種以上微量元素的溶液，靈芝菌絲體的干燥、粉碎和包裝，其特征是所說的菌株的選擇和馴化是將適于液體深層發(fā)酵的數(shù)株紅靈芝菌株經(jīng)紫外線和亞硝基胍誘變處理后接種到含有CuSO4或CuCl2、FeSO4或FeCl2、ZnSO4或ZnCl2和Na2SeO3或NaHSeO3的PDA斜面上進行培養(yǎng)，經(jīng)28℃培養(yǎng)5～7天能在斜面上長出豐滿的白色菌絲的菌種作為發(fā)酵菌株，所說的含有微量元素的溶液為含有硒元素、鐵元素、銅元素和鋅元素的溶液。
上述PDA中的CuSO4或CuCl2、FeSO4或FeCl2、ZnSO4或ZnCl2和Na2SeO3或NaHSeO3的含量分別為250ppm、100ppm、500ppm和100ppm，所說的含有硒元素、鐵元素、銅元素和鋅元素的溶液是將Na2SeO3或NaHSeO3、FeSO4或FeCl2、CuSO4或CuCl2和ZnSO4或ZnCl2溶入水配制成，其在發(fā)酵培養(yǎng)基中的含量分別為0.5～10ppm、1.0～50ppm、0.1～5ppm和0.5～25ppm。
本發(fā)明的產(chǎn)品安全無毒，不僅富含多種人體必需的微量元素，而且還保留了靈芝的所有生理活性及藥用成份，可制成膠囊、片劑、口服液等形式，亦可作為食品添加劑使用，有利于人體的吸收和利用，達到補充微量元素的目的；本發(fā)明的方法實現(xiàn)了中藥材產(chǎn)業(yè)化的生產(chǎn)的方式，從而改變了中藥材主要靠采集野生植物制作的傳統(tǒng)方式，尤其是本方法中所采用的對菌株的選擇和馴化方法，能保證所選取的發(fā)酵菌株對硒元素、鐵元素、銅元素和鋅元素具有較強的生物富集和轉(zhuǎn)化能力。
附圖
為本發(fā)明生產(chǎn)方法的工藝流程框圖。
下面結(jié)合附圖進一步說明本發(fā)明實施例。
實施例1一、菌株的選擇和馴化取從韓國、吉林、湖南、貴州、廣東、湖北等地采集的15株適于液體深層發(fā)酵、且營養(yǎng)要求粗放的紅靈芝菌株經(jīng)紫外線和亞硝基胍誘變處理后接種到含有CuSO4或CuCl2、FeSO4或FeCl2、ZnSO4或ZnCl2和Na2SeO3或NaHSeO3的PDA斜面上進行培養(yǎng)，經(jīng)28℃培養(yǎng)5～7天能在斜面上長出豐滿的白色菌絲的菌種即作為發(fā)酵菌株，其在培養(yǎng)過程中散發(fā)出濃郁的果香味；二、菌種的逐級擴大培養(yǎng)1、斜面培養(yǎng)將4℃冷藏的紅靈芝菌種接種到PDA斜面培養(yǎng)基上，在20℃下培養(yǎng)5～7天，直到斜面長滿白色菌絲為止，其中PDA的配制方法為200g土豆煮汁后取汁并加入20g葡萄糖和20g瓊脂，PH自然，用自來水定容至1000ml；2、三角瓶培養(yǎng)在500ml三角瓶中裝入100ml種子培養(yǎng)基(配方為玉米粉2g、黃豆餅粉2g、酵母粉0.3g、葡萄糖2g、CaCO30.1g、KH2PO40.05g、MgSO4·7H2O0.0.025g、自來水100ml配制、PH自然)，120℃滅菌30分鐘后冷卻至室溫，在無菌條件下接入“1”的斜面種子，在28℃下置于旋轉(zhuǎn)式搖床培養(yǎng)4天左右，搖床轉(zhuǎn)速為120r、p、m、偏心距為25mm；3、種子罐培養(yǎng)a、一級種子罐在501不銹鋼種子罐中投入25l種子培養(yǎng)基(配方同2)，實罐120℃滅菌30分鐘后冷卻至28℃，接入搖瓶種子液500ml，通氣攪拌培養(yǎng)3～4天，通氣量為1∶0.5(V/V/min)、培養(yǎng)溫度為27～29℃、罐壓0.05mpa、攪拌轉(zhuǎn)速150r、p、m；b、二級種子罐在200l不銹鋼種子罐中投入120l種子培養(yǎng)基(配方酮同2)，實罐120℃滅菌30分鐘后冷卻至28℃，利用壓差法接入“3、a”種子液，通氣攪拌2天，培養(yǎng)條件同3、a4、發(fā)酵罐培養(yǎng)在1200l不銹鋼發(fā)酵罐中投入600l發(fā)酵培養(yǎng)基(配方為蔗糖8kg、黃豆餅粉1kg、酵母粉0.3kg、KH2PO40.05kg、MgSO4·7H2O0.025kg、豆油0.2kg、加自來水100l配制、PH自然)，另加微量元素液、其含量為ZnSO4·7H2O25ppm、FeSO4·7H2O50ppm，CuSO4·5H2O5ppm，Na2SeO310ppm，120℃滅菌30分鐘后冷卻至28℃，接入“3.b”種子液，通氣攪拌3天，通氣量為1∶0.5(V/V/min)培養(yǎng)溫度為27～29℃，罐壓0.05mpa、攪拌轉(zhuǎn)速120r·p·m。
三、干燥、粉碎、包裝發(fā)酵罐培養(yǎng)到終點測得放罐體積680l，在無菌條件下板框過濾，無菌空氣吹干后在60℃下真空干燥、粉碎得干粉12.76Kg，收得率為1.88％，包裝即得富含多種微量元素的靈芝菌絲體，測定結(jié)果為水分58600ppm、蛋白質(zhì)408300ppm、全糖68200ppm、硒919.6ppm、鐵1843ppm、銅147ppm、鋅1263ppm。
實施例2操作步驟、工藝條件均同實施例1、將種子培養(yǎng)基中的玉米粉換成等量大米粉，其它成分同實驗例1，發(fā)酵培養(yǎng)基中的微量元素調(diào)整為ZnSO4·7H2O0.5ppm，F(xiàn)eSO4·7H2O1ppm，CuSO4·5H2O0.1ppm、Na2SeO30.5ppm，其它成分同實施例1，收得率為2.72％，測定結(jié)果為水分61100ppm，蛋白質(zhì)412300ppm，全糖72500ppm，硒36.2ppm，鐵264ppm，銅26.6ppm、鋅94.4ppm。
實施例3操作步驟、工藝條件和種子培養(yǎng)基均同實施例1，發(fā)酵培養(yǎng)基中不加微量元素溶液，其它成份同實施例1，收得率為2.48％，測定結(jié)果為水分59100ppm、蛋白質(zhì)417200ppm、全糖69400ppm、硒1.227ppm，銅18.2ppm、鋅41.8ppm，鐵149.1ppm。
權(quán)利要求
1.一種富含多種微量元素的靈芝菌絲體，包括含量為300000～500000ppm蛋白質(zhì)和50000～80000ppm全糖，其特征是還有含量為30～900ppm硒、200～1800ppm鐵、25～130ppm銅和80～1100ppm鋅。
2.一種富含多種微量元素的靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，該方法為菌株的選擇和馴化、菌種由斜面到三角瓶到種子罐到發(fā)酵罐逐級擴大培養(yǎng)的工藝及在發(fā)酵罐的發(fā)酵培養(yǎng)基中添加含有一種或一種以上微量元素的溶液，靈芝菌絲體的干燥、粉碎和包裝，其特征是所說的菌株的選擇和馴化是將適于液體深層發(fā)酵的數(shù)株紅靈芝菌株經(jīng)紫外線和亞硝基胍誘變處理后接種到含有CuSO4或CuCl2、FeSO4或FeCl2、ZnSO4或ZnCl2和Na2SeO3或NaHSeO3的PDA斜面上進行培養(yǎng)，經(jīng)28℃培養(yǎng)5～7天能在斜面上長出豐滿的白色菌絲的菌種作為發(fā)酵菌株，所說的含有微量元素的溶液為含有硒元素、鐵元素、銅元素和鋅元素的溶液。
3.按權(quán)利要求2所述的一種富含多種微量元素的靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征是所說的P0A中的CuSO4或CuCl2、FeSO4或FeCl2、ZnSO4或ZnCl2和Na2SeO3或NaHSeO3的含量分別為250ppm、100ppm、500ppm和100ppm，所說的含有硒元素、鐵元素、銅元素和鋅元素的溶液是將Na2SeO3或NaHSeO3、FeSO4或FeCl2、CuSO4或CuCl2和ZnSO4或ZnCl2溶入水配制成，其在發(fā)酵培養(yǎng)基中的含量分別為0.5～10ppm、1.0～50ppm、0.1～5ppm和0.5～25ppm。
全文摘要
本發(fā)明涉及靈芝菌絲體及其生產(chǎn)方法,主要解決現(xiàn)有產(chǎn)品存在的微量元素含量較低及工藝復(fù)雜的缺點。其方法特征是菌株的選擇和馴化是將紅靈芝菌株經(jīng)紫外線和亞硝基胍誘變處理后接種到含有銅、鐵、鋅和硒元素的PDA斜面上培養(yǎng),能長出豐滿的白色菌絲的作為發(fā)酵菌株,發(fā)酵培養(yǎng)基中含有微量元素的溶液為含有硒、鐵、銅和鋅元素的溶液。本發(fā)明的產(chǎn)品可制成膠囊、片劑、口服液等形式,亦可作為食品添加劑使用。
文檔編號C12N1/14GK1170758SQ96107080
公開日1998年1月21日 申請日期1996年7月17日 優(yōu)先權(quán)日1996年7月17日
發(fā)明者譚新國 申請人:譚新國, 董忠珍