專利名稱：以n-乙酰-d-氨基葡萄糖作為添加劑的保健酒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及N-乙酰-D-氨基葡萄糖作為活性添加劑的應(yīng)用，特別是一種以N-乙酰-氨基葡萄糖為添加劑配制的保健酒。
N-乙酰-D-氨基葡萄糖作為一個(gè)化學(xué)試劑，在市場上已公開出售。國際上最大的試劑公司-Sigma公司用化學(xué)合成法將氨基葡萄糖乙酰化而獲得該產(chǎn)品，一直是作為一種生物化學(xué)分析試劑使用。
生物化學(xué)的研究表明，人體正常情況下是可以產(chǎn)生N-乙酰-D-氨基葡萄糖的。作為一個(gè)化合物，它能夠在人體內(nèi)正常存在。由于在正常人體內(nèi)含量極微，對其代謝未進(jìn)行較深入的研究，生物化學(xué)的研究也從未涉及到該物質(zhì)對人體生理功能的影響。近年來，日本科學(xué)家在研究人體科學(xué)過程中逐漸認(rèn)識到透明質(zhì)酸在人體中的作用，透明質(zhì)酸是一種粘彈性的物質(zhì)，由等分子的N-乙酰-D-氨基葡萄糖和D-葡萄糖醛酸所組成的大分子化合物，透明質(zhì)酸與水形成粘稠凝膠，有潤滑和保護(hù)細(xì)胞的作用。而有些細(xì)菌、惡性腫瘤和蛇毒中含有透明質(zhì)酸酶，能使透明質(zhì)酸分解，粘度減少，病原體得以侵入和傳播，因此說透明質(zhì)酸是保護(hù)機(jī)體健康的重要物質(zhì)，而作為合成透明質(zhì)酸的原料之一的N-乙酰-D-氨基葡萄糖也同樣具有重要的意義。
人們在進(jìn)行“生物波”理論的研究時(shí)，建立了細(xì)菌波動生長模型，經(jīng)過研究認(rèn)識到這種波動有其內(nèi)在的調(diào)節(jié)機(jī)制，主要是通過某些化學(xué)物質(zhì)來完成的。這些具有調(diào)節(jié)作用的化學(xué)物質(zhì)可促進(jìn)生物波動，把病態(tài)的有序性慢波轉(zhuǎn)變成正常的呈混沌狀態(tài)的快波，有人把這種物質(zhì)稱為促波因子。將其分離提取出來并進(jìn)行鑒定，最后被確定為N-乙酰-D-氨基葡萄糖，因其促波作用，被稱為促波氨基糖。人體的許多功能需要促波因子協(xié)助完成，當(dāng)體內(nèi)這種促波因子缺乏時(shí)則會導(dǎo)致異常狀況。
不適量飲酒對胃腸道的刺激和對肝臟的損傷，均來自組織受到酒精的作用后發(fā)生的應(yīng)激反應(yīng)，表現(xiàn)為非特異性炎癥。傳統(tǒng)的以酒中泡制中藥材制備而成的保健酒，雖然有滋補(bǔ)身體的作用，但仍然存在酒精對肝臟的損傷，而且不能對胃腸道的微生態(tài)環(huán)境及腸道功能調(diào)進(jìn)行整和改善。
本發(fā)明的目的在于；提供一種能夠使胃腸組織及肝細(xì)胞對酒精刺激的應(yīng)激反應(yīng)降低進(jìn)而達(dá)到在減輕酒精對胃腸道及肝臟損害的同時(shí)還能改善腸道微生態(tài)環(huán)境，促進(jìn)腸道功能的以N-乙酰-D-氨基葡萄糖作為添加劑的保健酒。
本發(fā)明的上述目的是這樣實(shí)現(xiàn)的即采用結(jié)構(gòu)式為(I)的化合物作為活性添加劑，按0.05-0.2g/100ml的重量、體積比與酒溶液配制成能夠減輕酒精對肝臟損傷，并對腸道微生態(tài)環(huán)境及腸道功能具有改善和促進(jìn)作用的保健酒；其中，結(jié)構(gòu)式(I)的化學(xué)名稱為N-乙酰-D-葡萄糖胺(N-Acetyl-D-qlucosamine)，分子式C8H15NO6，結(jié)構(gòu)表示如下
經(jīng)大量動物試驗(yàn)及人體試食試驗(yàn)證明，該保健酒具有減輕酒精對肝臟的損傷及調(diào)整腸道微生態(tài)系統(tǒng)，改善腸道功能的作用。所述的動物試驗(yàn)包括一.本發(fā)明的保健酒調(diào)整腸道菌群，維擴(kuò)微生態(tài)平衡的作用的試驗(yàn)本試驗(yàn)以保健酒對小鼠使用抗生素后腸道菌群紊亂形成過程中腸道菌群的影響作為重點(diǎn)。
由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，小鼠服用氟哌酸后，腸內(nèi)主要菌群的菌量均發(fā)生變化，其中與人類生理活動關(guān)系較為密切的雙歧桿菌，乳桿菌菌量下降，類桿菌的菌量也有所下降，在小鼠形成腸道菌群紊亂的過程中，加喂保健酒后，小鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌、類桿菌、乳桿菌菌量有明顯的增長，并能恢復(fù)到正常小鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌、類桿菌和乳桿菌的菌量。
雙歧桿菌、乳桿菌和類桿菌為小鼠腸道內(nèi)主要的正常菌群，它們對維擴(kuò)機(jī)體的健康有著密切的關(guān)系。雙歧桿菌是人體內(nèi)一種重要的生理菌，具有抗感染、抗腫瘤、增強(qiáng)機(jī)體對某些營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，對機(jī)體健康起著一定的作用。乳桿菌能合成維生素，輸助食物消化，促進(jìn)營維生素。本發(fā)明的保健灑能使小鼠腸道內(nèi)已降低的雙歧桿菌、乳桿菌、類桿菌菌量上升至正常水平，從而起到改善胃腸道功能的作用。
二.本發(fā)明的保健酒對增進(jìn)小鼠食欲作用的觀察由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，本發(fā)明保健酒對三個(gè)劑量的試驗(yàn)組小鼠的食量及飲水量比對照組小鼠均有提高，表明該保健酒具有增進(jìn)小鼠食欲的作用。
三.本發(fā)明保健酒對促進(jìn)小鼠小腸運(yùn)動的作用試驗(yàn)由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，三個(gè)劑量的保健酒組炭末小腸推進(jìn)率與對照組相比均有提高，說明ga12保健酒能促進(jìn)小腸蠕動，縮短排泄物在腸管內(nèi)的停留時(shí)間。
由以上三個(gè)實(shí)驗(yàn)的陽性結(jié)果表明，本發(fā)明的保健酒具有明顯改善腸道微生態(tài)、調(diào)節(jié)胃腸道功能的作用。
四.抗慢性損傷實(shí)驗(yàn)方法每天清早，按設(shè)置的劑量，分別給普通白酒對照組的大鼠灌胃38°白酒，給保健酒組灌胃保健酒。連續(xù)30日，于末次灌胃后24小時(shí)處死大鼠，取肝臟標(biāo)本做病理切片供組織形態(tài)學(xué)觀察，并做電鏡標(biāo)本觀察其超微結(jié)構(gòu)。
試驗(yàn)結(jié)果表明使用保健酒的大鼠辭典肝臟與普通白酒對照組相比損傷程度明顯減輕。前者僅出現(xiàn)肝組織水腫，少有壞死，而后者大片狀壞死，細(xì)胞水腫，大量脂肪沉積。
五.本發(fā)明的保健灑中主要功效成分抗肝臟脂質(zhì)過氧化損傷的作用方法是以常規(guī)飼料喂飼小鼠，每天按設(shè)定的劑量以灌胃法給予保健酒，連續(xù)喂養(yǎng)30d，在末次灌胃后6h，頸椎脫臼處死，用0.1M磷酸緩沖液(pH7.4)0℃冰浴制備10％肝勻漿，以測定GSII及MDA含量。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，小鼠灌胃普通白酒后，肝臟GSH含量較正常對照組明顯下降，差異顯著，而脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量明顯上升，差異十分顯著，表明肝臟有脂質(zhì)過氧化損傷。而使用保健酒三個(gè)劑量組較普通白酒對照組GSH含量明顯升高，有顯著性的差異。統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明酒中采用N-乙酰-D-葡萄糖胺能夠提高小鼠肝臟的GSII含量，降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA的含量。
六.急性酒精致死試驗(yàn)方法是將小鼠分組分別腹腔注射致死劑量的保健酒和白酒，試驗(yàn)結(jié)果表明，對照組小鼠均昏迷死亡，而試驗(yàn)組小鼠全部均可從昏迷中蘇醒并恢復(fù)正常。
由以上三個(gè)實(shí)驗(yàn)的陽性結(jié)果可判定本發(fā)明的保健酒功效添加劑能夠明顯減輕酒精對大鼠肝臟的損傷，將其加入保健酒后大減輕了產(chǎn)品中酒精對肝臟的損傷，對比普通白酒具有對肝臟損傷低的顯著特點(diǎn)。
七.促波試驗(yàn)1.實(shí)驗(yàn)材料和方法1.1.樣品式(I)化合物純品。
1.2.實(shí)驗(yàn)材料菌種奇異變形桿菌(應(yīng)符合如下生化反應(yīng)特征動力(+)、尿素酶(+)、乳糖(-)、葡萄糖(+)、H2S(-)、苯丙氨酸脫氨酶(+)。
培養(yǎng)基改良LB培養(yǎng)基(組成成份為1％胰蛋白胨、0.5％酵母提取物，1％氯化鈉、0.1％葡萄糖、0.002％TTC、PH7.2～7.4)。
1.3.實(shí)驗(yàn)方法；在LB平板中心點(diǎn)種奇異變形桿菌，37℃培養(yǎng)9小時(shí)，開始出現(xiàn)不斷向外擴(kuò)展間隔3小時(shí)的同心環(huán)，以此作為對照；在LB平板中加入終濃度為0.5％式(I)化合物同法點(diǎn)種奇異變形桿菌，37℃培養(yǎng)，結(jié)果不但形成每隔3小時(shí)出現(xiàn)的同心環(huán)，而且與對照相比，可見在每條環(huán)上有許多細(xì)小的波動也表現(xiàn)出來。
2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果及評價(jià)本實(shí)驗(yàn)采用生物波動模型，用以研究式(I)化合物的促波作用，結(jié)果可見式(I)化合物不僅可以使細(xì)菌細(xì)胞表現(xiàn)正常的生物波特征，而且使這種波動表現(xiàn)出更加微細(xì)的波動方式，表明式(I)化合物對生物波動是有促進(jìn)作用的。
八.本發(fā)明的保健酒添加劑式(I)化合物的毒理試驗(yàn)包括1.急性毒性試驗(yàn)2.Ames試驗(yàn)；3.小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)；4.鼠精子畸性試驗(yàn)；5.小鼠睪丸染色體畸變試驗(yàn)；6.慢性致死試驗(yàn)；7.亞慢性毒性(90天喂養(yǎng))試驗(yàn)；8.傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)。
試驗(yàn)結(jié)論表明式(I)化合物急性毒性試驗(yàn)劑量超過2g/kg，是人注射劑量的300倍，仍未出現(xiàn)急性中毒反應(yīng)；在長期毒性試驗(yàn)中，最高劑量已達(dá)到1g/kg，經(jīng)四周試驗(yàn)觀察，未出現(xiàn)中毒反應(yīng)；在生殖試驗(yàn)中，從常規(guī)劑量7mg/kg喂小鼠，經(jīng)三次傳代，證明式(I)化合物對小鼠受孕、妊娠、分娩、哺乳及仔鼠發(fā)育均無影響。證明式(I)化合物屬無毒物質(zhì)。因此由其作為添加劑的保健酒也無毒性。
本發(fā)明提供的以式(I)化合物作為功效添加劑的保健酒不同于已知的保健酒，它不但能夠在調(diào)整程度微生態(tài)環(huán)境改善程度功能具有功效而且能夠最大限度避免酒精對肝臟的損傷，從而提高了該保健酒開發(fā)的價(jià)值，作為一種功效獨(dú)特的保健酒，它還具有配制方法簡單，無任何毒副作用的優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明的一個(gè)最佳實(shí)施方案是采用0.1g/100ml重量、體積比配制保健酒，在酒溶液100ml中，加入式(I)化合物添加劑為0.1g。還可添加其它滋補(bǔ)品。
權(quán)利要求
1.一種以N-乙酰-D-氨基葡萄糖作為添加劑的保健酒，其特征在于采用結(jié)構(gòu)式為(I)的化合物作為活性添加劑，按0.05-0.2g/100ml的重量、體積比與酒溶液配制而成；其中，結(jié)構(gòu)式(I)的化學(xué)名稱為N-乙酰-D-葡萄糖胺(N-Acetyl-D-glucosamine)，分子式C8H15NO6，結(jié)構(gòu)表示如下
全文摘要
本發(fā)明公開一種以N-乙酰-D-氨基葡萄糖作為添加劑的保健酒，其特征是采用結(jié)構(gòu)式為(I)的化合物作為活性添加劑，按0.05-0.2g/100ml的重量、體積比與酒溶液配制而成，能夠減輕酒精對肝臟損傷，并對腸道微生態(tài)環(huán)境及腸道功能具有改善和促進(jìn)作用。本發(fā)明功效獨(dú)特，配制方法簡單，無毒性。
文檔編號C12G3/00GK1156175SQ9611786
公開日1997年8月6日 申請日期1996年12月27日 優(yōu)先權(quán)日1996年12月27日
發(fā)明者徐啟旺 申請人:中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)