專利名稱：繅絲蛹的生物脫臭方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及繅絲蛹的脫臭技術(shù)，特別涉及用生物技術(shù)去除繅絲蛹蛋白質(zhì)臭味的方法。
繅絲蛹是蠶業(yè)的大宗再生資源，蠶繭繅絲制一頓生絲的同時(shí)，可得到一噸左右的干蛹。蛹粉含有48.9％的蛹蛋白，29.5％脂肪及其它豐富的營(yíng)養(yǎng)物，在食品、醫(yī)藥、輕紡方面有廣泛用途，是制取蛋白胨、蛋白粉、復(fù)合氨基酸注射液，食品添加劑氨基酸肽、天然保健食品、飼料、蛹油、日化基料?；?、皮革光滑劑，輕紡助溶劑和洗滌劑的原料，但是，由于繅絲蛹脫臭技術(shù)難，直接影響著蛹資源綜合加工系列產(chǎn)品質(zhì)量。迫于繭絲綢產(chǎn)業(yè)生產(chǎn)上的急需，繅絲蛹蛋白脫臭技術(shù)改進(jìn)仍停留在一般化工工藝與設(shè)備上，應(yīng)用生物技術(shù)發(fā)酵繅絲蛹脫臭未見突破性進(jìn)展，因此亟待開展用生物技術(shù)去除繅絲蛹臭味的研究。
繅絲蛹蛋白發(fā)臭，主要是因?yàn)橛写罅堪奉愇镔|(zhì)、如三甲胺、二乙胺、正己胺、特別是三甲胺，所以除去或減少胺類物含量就可以脫臭。
本發(fā)明的目的是提供一種繅絲蛹的生物脫臭方法，生物發(fā)酵繅絲蛹脫臭，使繅絲蛹蛋白三甲胺類物含量＜0.5％。
實(shí)現(xiàn)上述目的技術(shù)方案是將繅絲蛹水蛹糜或干蛹粉碎成粉，過20目篩，加入麩皮，谷糠和水，滅菌后作培養(yǎng)基，接種As3.374棲土曲霉的增殖培養(yǎng)物，加溫發(fā)酵，過濾得脫臭可溶性蛹蛋白，濾渣返回再發(fā)酵。具體方法步驟是1、按繅絲蛹∶麩皮∶谷糠＝100∶(8.75-20.0)∶(1.25-2.00)干料重量比例稱料配料，加入配料量100％-120％的自來水、封閉，2、在110-121℃蒸汽滅菌30分鐘，作培養(yǎng)基。
3、待料溫度降到30-31℃時(shí)接種，As3.374培養(yǎng)物固體種子，加入量為4-8％重量(以培養(yǎng)基為基數(shù))。
4、在33-35℃，PH7.0-7.2發(fā)酵≥58小時(shí)。
5、在30℃恒溫2小時(shí)，即完成脫臭。
取樣測(cè)得蛋白酶活力在4000單位以上，殘胺量＜0.15％。
其原料繅絲干蛹、繅絲水蛹糜及麩皮由湖北省羅田明星實(shí)業(yè)總公司提供，谷糠市場(chǎng)上購(gòu)買。As3.374增殖培養(yǎng)物，是中國(guó)典型生物保藏中心提供的As3.374棲土曲霉，原種菌在斜面種子培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)的產(chǎn)物。斜面培養(yǎng)基25克干蛹粉加100毫升水，煮沸15分鐘，過濾得濾液80毫升，加入該液量的NaNO30.2％，K2HPO40.1％、KCl0.01％、MgSO40.05％、FeSO40.001％、蔗糖3％，瓊脂1.5-2％，加水到100毫升。接入As3.374原菌，在30-32℃下培養(yǎng)3-4天，得到外觀無縐折、菌落大，菌絲孢子土褐色，鏡檢孢子多、菌絲粗狀、整齊。
監(jiān)測(cè)方法蛋白酶活力費(fèi)林法酸度0.1N NaOH溶液滴定PH值用精密PH(9-12)試紙測(cè)定殘胺液相色譜法，用島津LC-3A液相色譜儀、色柱為L(zhǎng)c柱-ISC-07/S1504，F(xiàn)LD-1螢光檢測(cè)器測(cè)光，條件載流速度0.5毫升/分，壓力60-70公斤/厘米2，柱溫55℃，取基料5克用緩沖液(PHg)，40℃，500毫升浸取1小時(shí)，取50毫升浸出液待測(cè)，每發(fā)酵間隔24小時(shí)抽樣監(jiān)測(cè)一次。
發(fā)酵器盤式生物反應(yīng)器。
附圖給出了發(fā)酵過程中菌生長(zhǎng)產(chǎn)酶和三甲胺的變化。


圖1是菌生長(zhǎng)產(chǎn)酶和三甲胺消耗曲線。
圖2是發(fā)酵過程中酸度和PH曲線。
實(shí)施例1稱取53.3克過20目篩的繅絲干蛹粉、36.6克粗麩皮、10.1克谷糠，加入500毫升水，拌勻裝入500毫升三角瓶150克，封瓶，以1公斤/厘米2蒸汽滅菌30分鐘，在滅菌室內(nèi)取1支孢子生長(zhǎng)茂蜜的As3.37培養(yǎng)物菌種、用無菌水10毫升洗成孢子懸液，無菌吸管吸取1毫升，接入三角瓶料中拌勻，置入30-33℃溫箱培養(yǎng)12小時(shí)，搖瓶，6小時(shí)后再次搖瓶，待菌絲生長(zhǎng)結(jié)塊時(shí)，扣瓶成塊，培養(yǎng)30小時(shí)后，產(chǎn)生大量褐色孢子時(shí)，升溫到34-35℃培養(yǎng)24小時(shí)，測(cè)蛋白酶活力在5000單位以上，三甲胺類物在0.05％以下。
實(shí)施例2稱取75.2克繅絲水蛹制糜，加麩皮14.8克，加入5克谷糠，水120毫升，拌勻裝入500毫升三角瓶100克，封瓶，在110-121℃滅菌30分鐘，用無菌吸管接入As3.374菌孢子懸液4毫升，置入30-33℃溫箱斜放8小時(shí)后搖瓶立放，6小時(shí)后再搖瓶，培養(yǎng)至2天后，扣瓶升溫至35℃培養(yǎng)一天，測(cè)得蛋白酶活力4000單位以上，三甲胺類物0.15％以下。
實(shí)施例3稱取繅絲蛹蛋白粉26.7克，精麩皮62.8克，加入谷糠16克，和水700毫升，拌勻裝入500毫升三角瓶250克，封瓶，1公斤/厘米2蒸汽滅菌30分鐘，接入As3.374菌孢子懸液0.5毫升，置入28-30℃溫箱斜放培養(yǎng)6小時(shí)，搖瓶直放、升溫至32℃培養(yǎng)12小時(shí)后再搖瓶，培養(yǎng)至2天后扣瓶升溫干燥，測(cè)其蛋白酶在4000-5000單位以內(nèi)，三甲胺類物在0.01％以下。
實(shí)施例4常溫下向盤式生物反應(yīng)器內(nèi)按固體培養(yǎng)基重量干蛹85％、麩皮10％、谷糠5％、加入100％-120％水比投料10公斤，用1公斤/厘米2蒸汽滅菌，然后待料溫降至30-31℃時(shí)，接As3.374培養(yǎng)物，接種量為料量4％重量，先堆集培養(yǎng)5-6小時(shí)，品溫升至35℃時(shí)翻堆，每盤1.5公斤(干料)。此時(shí)將反應(yīng)器溫度提高到31-33℃，繼續(xù)培養(yǎng)7-10小時(shí)，進(jìn)行劃盤，將繅絲蛹培養(yǎng)料劃成小塊，供以充足空氣，利于孢子生長(zhǎng)，培養(yǎng)50小時(shí)后將反應(yīng)器溫度升至34-35℃，使其逐步干燥，至72小時(shí)，孢子生長(zhǎng)均勻茂密。其菌體生長(zhǎng)產(chǎn)酶和三甲胺消耗如圖1，圖中1表示蛋白酶變化曲線，2殘胺三甲胺變化曲線，由圖1可見，發(fā)酵菌生長(zhǎng)48小時(shí)達(dá)產(chǎn)酶高峰，菌絲體繁殖速度最高，使三甲胺臭味物成份迅速呈線型下降。產(chǎn)酶高峰后期胺類消耗速度達(dá)最大值，發(fā)酵終了三甲胺類物達(dá)0.05％。說明菌絲體生長(zhǎng)旺盛時(shí)，消耗了大量胺類，達(dá)到了去除蛹臭的目的。
在發(fā)酵除蛹臭過程中酸度和PH值的變化如圖2，圖中3是酸度的變化曲線，4是PH值變化曲線，可以看出，在發(fā)酵過程中PH值的變化不大，酸度隨發(fā)酵時(shí)間的增長(zhǎng)而提高，但提高幅度不大，增酸一般在3.5以內(nèi)，說明殺菌并未影響繅絲蛹發(fā)酵脫臭過程。
從以上結(jié)果證明，用As3.374棲土曲酶發(fā)酵繅絲蛹脫臭工藝技術(shù)是可行的現(xiàn)代生物技術(shù)方法，其工藝簡(jiǎn)單，成本低，負(fù)加值高，經(jīng)濟(jì)效益好。
權(quán)利要求
1.一種繅絲蛹的生物脫臭方法，其特征是按繅絲蛹∶麩皮∶谷糠＝100∶(8.75-200)∶(1.25-2.00 )干料重量比例稱料配料，加入配料干料重100％-120％水，封閉，在110-121℃蒸汽滅菌，待料溫度降到30-31℃時(shí)接種As3.374培養(yǎng)物，加入量為料重量的4-8％，在33-35℃，PH7.0-7.2發(fā)酵≥58小時(shí)，然后在30℃恒溫2小時(shí)。
2.如權(quán)利要求1所述脫臭方法，其特征是在110-121℃蒸汽滅菌30分鐘。
3.如權(quán)利要求1所述的脫臭方法，其特征是As3.374培養(yǎng)物是棲土曲霉As3.374在斜面培養(yǎng)基上，在30-32℃下培養(yǎng)3-4天的培養(yǎng)物。
4.如權(quán)利要求3所述的除臭方法，其特征是所述斜面培養(yǎng)基，是25克干蛹粉加100毫升水，煮沸15分鐘、過濾，濾液中加入該液重量的NaNO30.2％、K2HPO40.1％、KCl0.01％、MgSO40.05％、FeSO40.001％、蔗糖3％，瓊脂1.5-2％，加水到100毫升。
全文摘要
一種繅絲蛹的生物脫臭方法，該方法是將繅絲蛹水蛹糜或干蛹粉加麩皮，谷糠和水，在110-121℃蒸汽滅菌后，接種As3.374棲土曲霉增殖培養(yǎng)物，加入量為上述料量4-8％，然后33-35℃，pH7.0-7.2條件下發(fā)酵≥58小時(shí)，再在30℃下恒溫2小時(shí)，即可，這樣處理過的繅絲蛹的蛋白酶活力在4000單位以上，三甲胺類物＜0.15％。
文檔編號(hào)C12N1/14GK1156178SQ96119698
公開日1997年8月6日 申請(qǐng)日期1996年12月11日 優(yōu)先權(quán)日1996年12月11日
發(fā)明者干信, 張遠(yuǎn)祥, 糜志遠(yuǎn), 林世平, 王常高 申請(qǐng)人:羅田縣明星實(shí)業(yè)總公司