專利名稱：用于促進(jìn)骨骼肌適應(yīng)劇烈運(yùn)動和對抗虛弱個體疲勞過度的營養(yǎng)增補(bǔ)劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種營養(yǎng)增補(bǔ)劑，它包含作為基本活性成分的“肉堿類”的混合物，其中“肉堿類”是指L-肉堿和系列低級(短鏈)脂酰L-肉堿的首項(xiàng)，或它們的藥理學(xué)上可接受的鹽。
該營養(yǎng)增補(bǔ)劑特別適于調(diào)節(jié)參加緊張、持續(xù)體育活動的個體的骨胳肌和肝的適應(yīng)作用，還適于對抗肌疲勞感，以及身體虛弱的人即使在沒有進(jìn)行任何類型的或多或少的強(qiáng)烈體育活動的情況下仍表現(xiàn)出的疲倦感。
參加體育活動的人，無論是作為專業(yè)人員還是業(yè)余愛好者，都希望最大程度地使骨胳肌在較短的時間里與支持長期劇烈體育運(yùn)動的能力相適應(yīng)，并使這一能力保持盡可能長的時間。尋求這種最佳程度的身體適應(yīng)性，可導(dǎo)致藥物、特別是類固醇類藥物的濫用。眾所周知，這樣的藥物可以增加蛋白質(zhì)的合成，由此使肌肉塊的生長增強(qiáng)到比通過訓(xùn)練和飲食所能達(dá)到的更高的程度。然而，使用這些藥物無疑是有害的，并且在職業(yè)體育領(lǐng)域中使用這些藥物是非法的。
因此，很清楚，正確地達(dá)到上述目的的唯一方法是，適當(dāng)?shù)挠?xùn)練安排與合適的、用適宜營養(yǎng)增補(bǔ)劑強(qiáng)化的飲食相結(jié)合。
虛弱的含義是代表當(dāng)今生活壓力狀況、特別是在大都市中流行并影響大量人群的一組彌散性的特定癥狀，大半與年齡和社會狀況的因素?zé)o關(guān)，其特征是肌肉強(qiáng)度不夠或喪失、疲倦、易疲勞、對刺激的反應(yīng)不充分。
本發(fā)明的目的是提供一種可用于上述類型消費(fèi)者的營養(yǎng)增補(bǔ)劑。
線粒體基質(zhì)是長鏈脂肪酸進(jìn)行氧化的部位，L-肉堿作為長鏈脂肪酸穿過線粒體內(nèi)膜進(jìn)入線粒體基質(zhì)的載體而發(fā)揮獨(dú)特的重要生理學(xué)作用，自從這一基本原理被發(fā)現(xiàn)以來已過去了數(shù)十年(FritzI.B.肉堿對長鏈脂肪酸氧化影響的代謝結(jié)果。載于《細(xì)胞區(qū)室化和脂肪酸代謝的控制》。F.C.Gran編著，紐約，學(xué)院出版社，1968年，第39-63頁)。自從首次確認(rèn)(Engel和Angelini，科學(xué)，1973年，179899-902)原發(fā)性L-肉堿缺乏是嚴(yán)重的，有時是致命的(盡管很少見)肌病形式(脂質(zhì)貯積性肌病)的原因以來，我們關(guān)于原發(fā)性和繼發(fā)性L-肉堿缺乏的病理學(xué)結(jié)果的知識，以及反過來說，對于肉堿的外源性供給的治療和營養(yǎng)價值的知識已有了巨大的增長。
肉堿在所有生物組織中以游離肉堿形式存在時濃度相當(dāng)高，以脂酰肉堿形式存在時濃度較低，脂酰肉堿是以下可逆反應(yīng)的代謝產(chǎn)物脂酰輔酶A+肉堿脂酰肉堿+CoASH該反應(yīng)是由三組酶催化的，它們是轉(zhuǎn)移酶，主要是根據(jù)它們對反應(yīng)底物的特異性進(jìn)行區(qū)別的以短鏈?；?如乙酰基和丙?；?作為底物的肉堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(CAT)組，以中鏈?；鳛榈孜锏娜鈮A辛酰轉(zhuǎn)移酶(COT)組，和以長鏈?；鳛榈孜锏娜鈮A棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT)組。
肉堿在中間代謝中的重要作用，特別是在其有限的生物合成方面，可以說明在涉及不同器官和裝置的病理學(xué)功能中，肉堿缺乏可以怎樣作為繼發(fā)性事件而發(fā)生。臨床范圍的增寬已伴隨著與該自然產(chǎn)生的化合物的效能有關(guān)的治療機(jī)會數(shù)量的增加采用L-肉堿的替代療法逆轉(zhuǎn)了脂質(zhì)貯積性肌病患者的顯著臨床表現(xiàn)，這一觀察結(jié)果顯示出其在各個方面都有潛在的功效。美國食品及藥品管理局(FDA)不僅已給予了L-肉堿孤立藥品的地位，而且已將其列入救生藥品名單中。
與我們對涉及原發(fā)性和繼發(fā)性肉堿缺乏的病理學(xué)關(guān)系的更深了解相一致，已出現(xiàn)了令人印象深刻的、主要針對L-肉堿，實(shí)質(zhì)上更小范圍而言，是針對大量脂酰肉堿類，的科學(xué)和專利出版物。
讓我們來對此情形進(jìn)行部分回顧。有人建議，在心血管領(lǐng)域，L-肉堿可用于治療心律不齊和充血性心力衰竭(US 4,656,191)，心肌缺血和缺氧(US 4,649,159)；在脂質(zhì)代謝性疾病方面，可用于治療高脂血癥和高脂蛋白血癥(US 4,315,944)，使HDL與LDL+VLDL的異常比率正?；?US 4,255,449)；可用于全胃腸外營養(yǎng)領(lǐng)域(US4,254,147和4,320,145)；在腎病學(xué)上，可用于對抗肌無力和因在進(jìn)行定期血液透析治療的慢性尿毒癥患者的透析液中肉堿喪失而引起的肌痙攣的發(fā)作(US 4,272,549)；可對抗因抗癌劑，如阿霉素(US 4,400,371和US 4,713,379)，和含鹵麻醉劑，如鹵烷(US4,780,308)導(dǎo)致的毒性作用；用于治療靜脈停滯(US 4,415,589)；對抗老年患者許多生化和行為參數(shù)的惡化(US 4,474,812)；用于AIDS患者和無癥狀的HIV-血清陽性患者的甘油三酯和腫瘤壞死因子(TNF)水平的正?；?US 5,631,288)。
L-肉堿也被建議與其他活性成分結(jié)合使用，如L-肉堿加上輔酶Q10，有更寬的代謝/抗動脈粥樣硬化活性譜(US 4,599,232)。
至于脂酰肉堿類，眾所周知，乙酰L-肉堿可用于治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，特別是早老性癡呆(US 4,346,107)，治療糖尿病神經(jīng)病(US 4,751,242)，而丙酰L-肉堿已被建議用于治療外周血管病(US 4,343,816)和充血性心力衰竭(US 4,194,006)。
雖然是以簡明而部分的方式對上述專利進(jìn)行了描述，但從中仍可以清楚地看出一點(diǎn)，與其脂酰衍生物相比，L-肉堿有明顯更大的份量和重要性。
對專利文獻(xiàn)的分析表明，在某些情形下，對于給定的適應(yīng)征，L-肉堿和一些低級脂酰肉堿的作用是等價的。對此等價進(jìn)行更深的審視發(fā)現(xiàn)，它更多是出于獲得最寬的保護(hù)范圍的專利動機(jī)，而不是源于適當(dāng)?shù)乃幚韺W(xué)/臨床研究的結(jié)果。上述肉堿與脂酰肉堿之間的可逆平衡反應(yīng)，或許也揭示了這種行為的“等價”。
從對科學(xué)和專利文獻(xiàn)的審查也可看出，研究者的注意力總是特定集中在單個肉堿，如已說過的，主要集中在L-肉堿上。這樣就形成了一種單一化合物培養(yǎng)，實(shí)際上，這是一種技術(shù)偏見，它已妨礙了對“肉堿類”混合物功效的研究。事實(shí)上，沒有證據(jù)表明含有L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿(或它們的藥理學(xué)上可接受的鹽)的混合物曾被建議作為基本活性成分，用于治療或營養(yǎng)目的。很明顯，以前從未公開過任何這樣的混合物，其中L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿是以明確確定的重量比(下文將詳述)存在的。為了獲得預(yù)期的治療/營養(yǎng)作用，此重量比是至關(guān)重要的。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿(或其藥理學(xué)上可接受的鹽)的混合物，與單個“肉堿”相比，產(chǎn)生了未曾預(yù)料的強(qiáng)大協(xié)同作用，這些已被各種試驗(yàn)所證明。在這些試驗(yàn)中，L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿的混合物的功效和它們單獨(dú)給藥時的功效進(jìn)行了對比。
這三種“肉堿”的聯(lián)合作用能影響脂肪酸糖酵解和氧化路徑，這不足以為奇。并且，丙酰L-肉堿這一能在三羧酸循環(huán)中增加琥珀酰輔酶A濃度(添補(bǔ)作用)的物質(zhì)的存在，提高了其整體速度。顯然，通過補(bǔ)充足夠的乙酰單位可以促進(jìn)這種速度的提高。這后一種作用是由乙酰L-肉堿完成。實(shí)際上，由于線粒體肉堿乙酰轉(zhuǎn)移酶的存在，乙酰L-肉堿的乙?；赊D(zhuǎn)移到輔酶A上，以合成乙酰輔酶A，這是三羧酸循環(huán)中的一種關(guān)鍵化合物。最后，肉堿通過其已知的將脂肪酸轉(zhuǎn)移到線粒體基質(zhì)中的作用，增強(qiáng)了脂肪酸自身的氧化。肌肉收縮過程所需的大部分能量是從脂肪酸類化合物中提取的。
但是，這些明顯的原因至多會使人想到“肉堿”的混合物的“加和”作用，而不是令人吃驚的、顯著的協(xié)同作用，此作用表現(xiàn)為下文將詳述的臨床研究中顯示的ATP產(chǎn)率的增強(qiáng)。ATP是細(xì)胞的主要能量來源。
作為使得有可能確定該協(xié)同作用的研究結(jié)果，本發(fā)明提供了一種營養(yǎng)增補(bǔ)劑，它包含下列組合(a)L-肉堿；(b)乙酰L-肉堿；(c)丙酰L-肉堿；或其藥理學(xué)上可接受的鹽；和藥理學(xué)上可接受的賦形劑。(a)∶(b)∶(c)的重量比范圍是1∶1∶1至1∶0.1∶0.1，其中前述重量比是指以內(nèi)鹽表示的L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿。
同時也發(fā)現(xiàn)，除了該混合物的必需成分(L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿或其藥理學(xué)上可接受的鹽)以外，本發(fā)明的營養(yǎng)增補(bǔ)劑還可有利地包含另外的脂酰L-肉堿，如異戊酰L-肉堿，必需氨基酸的混合物以及肌酸和/或磷酸肌酸。
L-肉堿、乙酰L-肉堿、丙酰L-肉堿和異戊酰L-肉堿的重量比范圍是1∶1∶1∶1至1∶0.1∶0.1∶0.1，優(yōu)選為1∶0.5∶0.5∶0.5。
所有氨基酸，不管是必需的還是非必需的，都是肌細(xì)胞為蛋白質(zhì)合成所需的底物。眾所周知，超出蛋白質(zhì)合成所需的過量氨基酸和其他大分子既不能被排泄，也不能貯存，這一點(diǎn)與脂肪酸和葡萄糖不同。另一方面，過量氨基酸被用作能量物質(zhì)。當(dāng)α-氨基被除去后，剩余的碳原子骨架轉(zhuǎn)化為基礎(chǔ)代謝中間產(chǎn)物。這些過量氨基酸的大多數(shù)氨基轉(zhuǎn)變?yōu)殡?，而碳骨架轉(zhuǎn)化為乙酰輔酶A、乙酰乙酰輔酶A、丙酮酸鹽或是檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物之一。這樣，就從這些氨基酸形成了脂肪酸、酮體和葡萄糖。
優(yōu)選而言，必需氨基酸混合物包括支鏈氨基酸纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸。
本發(fā)明的營養(yǎng)增補(bǔ)劑也可有利地包含非必需氨基酸，特別是谷氨酰胺、L-谷氨酸、L-天冬氨酸和L-天冬酰胺。
本發(fā)明的營養(yǎng)增補(bǔ)劑的一個實(shí)例包含(i)40％至60％重量的L-肉堿、乙酰L-肉堿、丙酰L-肉堿或其藥理學(xué)上可接受的鹽的混合物；(ii)10％至15％重量的纈氨酸；10％至15％重量的亮氨酸；
10％至15％重量的異亮氨酸；和(iii)8％至12％重量的肌酸或磷酸肌酸。
如果存在非必需氨基酸，它們將占該營養(yǎng)增補(bǔ)劑的10％至30％重量。
針對本發(fā)明的所有功效和目的而言，L-肉堿、乙酰L-肉堿、丙酰L-肉堿和異戊酰L-肉堿是指內(nèi)鹽形式的這些化合物。
L-肉堿、乙酰L-肉堿、丙酰L-肉堿或異戊酰L-肉堿的藥理學(xué)上可接受的鹽，是指這些肉堿與不會產(chǎn)生不需要的毒性或副作用的酸形成的任何鹽。這些酸是藥理學(xué)家和藥學(xué)專家所熟知的。
這些鹽的非限制性實(shí)例有氯化物；溴化物；碘化物；天冬氨酸鹽；酸式天冬氨酸鹽；檸檬酸鹽；酸式檸檬酸鹽；酒石酸鹽；磷酸鹽；酸式磷酸鹽；延胡索酸鹽；酸式延胡索酸鹽；甘油磷酸鹽；葡糖磷酸；乳酸鹽；蘋果酸鹽；酸式蘋果酸鹽；乳清酸鹽；草酸鹽；酸式草酸鹽；硫酸鹽；酸式硫酸鹽；三氯乙酸鹽；三氟乙酸鹽和甲磺酸鹽。
國際藥學(xué)雜志第33期(1986)第201-217頁列出了FDA批準(zhǔn)的藥理學(xué)上可接受的鹽的名單；該出版物結(jié)合在此作為參考。
延胡索酸鹽是特別優(yōu)選的，例如，延胡索酸L-肉堿對蛋白質(zhì)代謝施加雙重保護(hù)作用；通過在中間代謝中的直接增加，它間接地刺激了蛋白質(zhì)的生物合成，同時，作為脂肪酸轉(zhuǎn)移的結(jié)果，它誘導(dǎo)了對肌肉蛋白組分的節(jié)省/保護(hù)作用。
進(jìn)行劇烈運(yùn)動的個體和虛弱的個體，都可以通過服用以下物質(zhì)而獲得最好的效果約500mg/天L-肉堿，50-500mg/天乙酰L-肉堿和50-500mg/天丙酰L-肉堿，或它們相當(dāng)重量的藥理學(xué)上可接受的鹽。
該營養(yǎng)增補(bǔ)劑還可以含有無機(jī)鹽，如檸檬酸二鈉，磷酸一鉀，乳酸鈣和?；撬徭V。
本發(fā)明的營養(yǎng)增補(bǔ)劑適于口服。
本營養(yǎng)增補(bǔ)劑不得用作日?；A(chǔ)上的唯一或主要營養(yǎng)源。
因此，飲食的補(bǔ)充部分將包括適當(dāng)?shù)陌被帷⑻妓衔?、脂肪、維生素和礦物質(zhì)。
該營養(yǎng)增補(bǔ)劑的每日攝取量可在較寬的幅度內(nèi)變化，例如，這取決于服用者的年齡和體重，以及訓(xùn)練日程的強(qiáng)度和復(fù)雜性，或根據(jù)具體情況，取決于服用者所從事的體育運(yùn)動。不過，一般說來，從該營養(yǎng)增補(bǔ)劑攝入的蛋白質(zhì)的量不應(yīng)超過服用者每天正常攝入的蛋白質(zhì)總量的30-35％重量。
合理地長期使用本發(fā)明的營養(yǎng)增補(bǔ)劑能產(chǎn)生下列積極的功效(a)能保存肌肉蛋白，特別是骨胳肌中存在的支鏈氨基酸；(b)刺激骨胳肌和肝中的蛋白質(zhì)合成；(c)可獲得用于丙氨酸和谷氨酰胺合成的氨基，丙氨酸和谷氨酰胺均參加糖異生作用；(d)促進(jìn)丙酮酸鹽代謝轉(zhuǎn)化為丙氨酸而不是乳酸鹽；和(e)促進(jìn)氫離子經(jīng)谷氨酸鹽向谷氨酰胺的轉(zhuǎn)化而從骨胳肌流出，以維持最佳肌內(nèi)pH值。
下面給出了本發(fā)明營養(yǎng)增補(bǔ)劑的一個非限制性的實(shí)例。該組合物適當(dāng)?shù)厝苡谧懔康乃?，?00-300ml水后，適于以液體形式口服?；净钚猿煞? 每日劑量-延胡索酸L-肉堿 200mg(＝143mg L-肉堿內(nèi)鹽)-乙酰L-肉堿 75mg-丙酰-肉堿 75mg支鏈氨基酸和非必需氨基酸-異亮氨酸 50mg-亮氨酸 50mg-纈氨酸 50mg-天冬氨酸 150mg-谷氨酸 200mg-天冬酰胺 100mg磷酸肌酸50mg維生素-維生素C250mg無機(jī)鹽-檸檬酸二鈉(＝7.8mg鈉) 40mg-磷酸一鉀(＝8.6mg鉀)30mg-乳酸鈣(＝20mg鈣) 110mg-?；撬徭V(＝73.0mg鎂) 820mg活性成分總量2250mg-賦形劑 2750mg總重量 5000mg對于藥學(xué)專家來說，很明顯，通過使用合適的賦形劑，能將本發(fā)明的組合物配制成固體形式，從而制成片劑、咀嚼片劑、膠囊等。
下文給出的大量研究證明了與單獨(dú)使用的L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿相比，它們的混合物具有協(xié)同作用。混合物對運(yùn)動表現(xiàn)的影響為了評估與單獨(dú)服用L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿相比，它們的混合物(COMB)對持久運(yùn)動員(研究1)和進(jìn)行非緊張的、娛樂性體育鍛煉的受試者(研究2)的表現(xiàn)的影響，我們進(jìn)行了兩項(xiàng)研究。研究1人群40位健康男性志愿者，他們已從事了至少4年的長距離賽跑(如馬拉松)。
研究設(shè)計隨機(jī)、雙盲、平行、與安慰劑對照，期限為45天。
包含標(biāo)準(zhǔn)-性別男-年齡20-40歲-體重不超過正常體重的10％-呼吸交換率0.8
排除標(biāo)準(zhǔn)-有胃腸、心血管、骨胳肌和神經(jīng)系統(tǒng)疾病-腎和肝機(jī)能不全在研究過程中，所有受試者都沒有承受不正常的身體和營養(yǎng)壓力。治療為確保研究的盲性，所有受試者每天口服6片藥(2×3，飯后)。通過改變每個治療組服用的活性片劑和安慰劑片劑的數(shù)量來實(shí)現(xiàn)研究設(shè)計。這種改變根據(jù)要服用的具體物質(zhì)而定，如下-8名受試者，每天服用1.5g COMB(3×500mg片劑，每片由167mgLC、167mg PLC和167mg ALC組成，+3片安慰劑)，服用45天；-8名受試者，每天服用2g L-肉堿(LC)(4×500mg片劑+2片安慰劑)，服用45天；-8名受試者，每天服用2.5g丙酰L-肉堿(PLC)(5×500mg片劑+1片安慰劑)，服用45天；-8名受試者，每天服用3g乙酰L-肉堿(ALC)(6×500mg片劑)，服用45天；-8名受試者，每天服用安慰劑(PLA，6片)，服用45天。
在研究過程中，要求運(yùn)動員每周的訓(xùn)練距離保持相對穩(wěn)定。功效的評估每位運(yùn)動員在完成一項(xiàng)漸進(jìn)式踏車測試(0°梯度)直至精疲力竭后，記錄各自的氧消耗量(VO2，ml/分)和踏車跑速峰值(km/小時)。運(yùn)動員起初跑速為8km/小時，每3分鐘提高2km/小時，直至達(dá)到16km/小時。之后，每2分鐘提速1km/小時，直至體力耗盡，其有兩個測量標(biāo)準(zhǔn)1-VO2穩(wěn)定；2-呼吸交換率超過1.1。踏車跑速峰值為運(yùn)動員在測試過程中能達(dá)到的、持續(xù)60秒的最高跑速。
所有受試者都在基線(T0)和治療后45天(T45)進(jìn)行評估。另外，測定血液化學(xué)和尿參數(shù)，以監(jiān)控負(fù)作用。
利用方差分析(ANOVA)對數(shù)據(jù)，包括受試者、時間和治療等因素進(jìn)行分析。利用t檢驗(yàn)評價不同治療組之間得分的差異。顯著性為P＜0.05。結(jié)果運(yùn)動員的身體特征為年齡(歲)27.5±3.8；身高(厘米)175±6.5；體重(Kg)69.9±7。有關(guān)效能參數(shù)的結(jié)果如下<
>數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差*與PLA比較，P＜0.05；$與LC比較，P＜0.05；°與ALC比較，P＜0.05；^與PLC比較，P＜0.05。
在T0時，各治療組之間沒有統(tǒng)計學(xué)上的顯著差異。
在T45時，COMB組的最高跑速顯著高于其他各組，但并未伴隨VO2的上升。
因此，很明顯，用COMB治療積極地影響了持久運(yùn)動員的身體表現(xiàn)。
沒有負(fù)作用的報道。
研究2人群40位從事非緊張的、娛樂性體育鍛煉的健康志愿者(23名男性和17名女性)。
研究設(shè)計隨機(jī)、雙盲、平行、與安慰劑對照，期限為15天。
包含標(biāo)準(zhǔn)-性別男性與女性-年齒齡18-40歲-體重不超過正常體重10％-呼吸交換率0.8排除標(biāo)準(zhǔn)-有胃腸、心血管、骨胳肌和神經(jīng)系統(tǒng)疾病-腎和肝機(jī)能不全在研究中，所有受試者都沒有承受不正常的身體和營養(yǎng)壓力。治療為確保研究的盲性，所有受試者每天口服6片藥(2×3，飯后)。通過改變每個治療組服用的活性片劑和安慰劑片劑的數(shù)量來實(shí)現(xiàn)研究設(shè)計。這種改變根據(jù)要服用的具體物質(zhì)而定，如下-8名受試者，每天服用1.5g COMB(3×500mg片劑，每片包括167mgLC、167mg PLC和167mg ALC，+3片安慰劑)，服用15天；-8名受試者，每天服用2g L-肉堿(LC)(4×500mg片劑+2片安慰劑)，服用15天；-8名受試者，每天服用2.5g丙酰L-肉堿(PLC)(5×500mg片劑+1片安慰劑)，服用15天；-8名受試者，每天服用3g乙酰L-肉堿(ALC)(6×500mg片劑)，服用15天；-8名受試者，每天服用安慰劑(PLA，6片)，服用15天。
功效評估測定最大氧消耗量(VO2max，ml/kg/分)和總工作負(fù)荷(kgm/小時)，以評估治療功效。
在基線(T0)和治療后15天(T15)，對所有受試者進(jìn)行最大動力肺活量(ergospirometric effort)測試(三角踏車)，工作負(fù)荷根據(jù)Bruce方案確定(每3分鐘7步，10-22％的傾斜度，速度為1.7-6.5Mph)。
另外，測定血液化學(xué)和尿參數(shù)，以監(jiān)控負(fù)作用。
利用方差分析(ANOVA)對數(shù)據(jù)，包括受試者、時間和治療等因素進(jìn)行分析。利用t檢驗(yàn)評價各治療組之間得分的差異。顯著性為P＜0.05。結(jié)果受試者的身體特征為年齡(歲)29±5.1；體重(Kg)74±5.2；身高(厘米)174.5±6.8。
有關(guān)效能參數(shù)結(jié)果如下
數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差*與PLA比較，P＜0.05；$與LC比較，P＜0.05；°與ALC比較，P＜0.05；^與PLC比較，P＜0.05。
在T0時，各組間沒有統(tǒng)計學(xué)上的顯著差異。
在T15時，COMB組的總工作負(fù)荷明顯高于PLA、LC和ALC組。并且，VO2max明顯高于其他各組。結(jié)果，用COMB治療的受試者有更有效的身體表現(xiàn)。
沒有負(fù)作用的報道?；旌衔飳μ撊鮽€體的影響本研究的目的是評估與單獨(dú)使用L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿相比，它們的混合物(COMB)對虛弱個體的影響。
本研究設(shè)計為COMB與L-肉堿或乙酰L-肉堿或丙酰L-肉堿或安慰劑之間的隨機(jī)的、雙盲的、平行組間比較，期限為30天。
本研究的受試者為18歲至60歲之間的男性或女性，他們?yōu)槭中g(shù)后(n＝19)和傳染病(n＝15)導(dǎo)致的虛弱以及“自發(fā)性”虛弱(n＝26)。排除標(biāo)準(zhǔn)包括心血管、骨胳肌和神經(jīng)系統(tǒng)病史，肝和腎機(jī)能不全以及抑郁(用Beck抑郁表診斷)。
在開始試驗(yàn)前征得所有受試者的同意。治療為確保研究的盲性，所有受試者每天服用6片藥(2×3，飯后)。通過改變各治療組服用的活性片劑和安慰劑片劑的數(shù)量來實(shí)現(xiàn)研究設(shè)計。這種改變根據(jù)要服用的具體物質(zhì)而定，如下-12名受試者，每天服用1.5g COMB(3×500mg片劑，每片包含167mg LC、167mg PLC和167mg ALC，+3片安慰劑)，服用30天；-12名受試者，每天服用2g L-肉堿(LC)(4×500mg片劑+2片安慰劑)，服用30天；-12名受試者，每天服用2.5g丙酰L-肉堿(PLC)(5×500mg片劑+1片安慰劑)，服用30天；-12名受試者，每天服用3g乙酰L-肉堿(ALC)(6×500mg片劑)，服用30天；-12名受試者，每天服用安慰劑(PLA，6片)，服用30天。
功效評估在基線(T0)和治療后30天(T30)時，利用20項(xiàng)自我報告評估表(MFI-20表，Smets E.M.A.等，身心研究雜志39315-325，1995；英國癌癥雜志73241-245，1996)測定虛弱情況。該評估表包括一般意義上的疲勞、身體疲勞、活力減弱、動機(jī)減弱以及精神疲倦。總分在20至40之間表明不存在虛弱，40以上(直至最大100)表明了虛弱的逐步嚴(yán)重性。
用方差分析法(ANOVA)分析數(shù)據(jù)。用t檢驗(yàn)評價各治療組之間分?jǐn)?shù)的差異。顯著性為P＜0.05。結(jié)果獲得以下結(jié)果<
數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差*與PLA比較，P＜0.05；$與LC比較，P＜0.05；°與ALC比較，P＜0.05；^與PLC比較，P＜0.05。
在T0時，各治療組間沒有顯著差異。
在T30時，COMB組受試者已從虛弱中恢復(fù)。LC、PLC和ALC組的受試者比安慰劑組的受試者具有明顯低的平均得分，但僅有ALC組的受試者達(dá)到了大體正常的平均值。
權(quán)利要求
1.一種營養(yǎng)增補(bǔ)劑，它包含以下物質(zhì)的混合物(a)L-肉堿；(b)乙酰L-肉堿；(c)丙酰L-肉堿；或其藥理學(xué)上可接受的鹽，和藥理學(xué)上可接受的賦形劑。
2.權(quán)利要求1所述的營養(yǎng)增補(bǔ)劑，其中(a)∶(b)∶(c)的重量比為1∶1∶1至1∶0.1∶0.1。
3.權(quán)利要求2所述的營養(yǎng)增補(bǔ)劑，它進(jìn)一步包含(d)異戊酰L-肉堿或其藥理學(xué)上可接受的鹽，其中(a)∶(b)∶(c)∶(d)的重量比為1∶1∶1∶1至1∶0.1∶0.1∶0.1。
4.上述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的營養(yǎng)增補(bǔ)劑，它進(jìn)一步包含必需氨基酸或其混合物。
5.權(quán)利要求4所述的營養(yǎng)增補(bǔ)劑，其中必需氨基酸選自支鏈氨基酸纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸或其混合物。
6.權(quán)利要求4所述的營養(yǎng)增補(bǔ)劑，其中L-肉堿、乙酰L-肉堿、丙酰L-肉堿的混合物與必需氨基酸或其混合物的重量比為3∶1至1∶1。
7.權(quán)利要求4-6任-項(xiàng)所述的營養(yǎng)增補(bǔ)劑，它進(jìn)一步包含谷氨酰胺、L-谷氨酸、L-天冬氨酸和L一天冬酰胺。
8.上述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的營養(yǎng)增補(bǔ)劑，它進(jìn)一步包含選自肌酸和磷酸肌酸的肌酸。
9.上述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的營養(yǎng)增補(bǔ)劑，它包含(i)40％至60％重量的L-肉堿、乙酰L-肉堿和丙酰L-肉堿或其藥理學(xué)上可接受的鹽的混合物；(ii)10％至15％重量的纈氨酸；10％至15％重量的亮氨酸；10％至15％重量的異亮氨酸；和(iii)8％至12％重量的肌酸或磷酸肌酸。
10.權(quán)利要求9所述的營養(yǎng)增補(bǔ)劑，它進(jìn)一步包含10％至30％重量的非必需氨基酸。
11.前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的營養(yǎng)增補(bǔ)劑，其中藥理學(xué)上可接受的鹽選自氯化物；溴化物；碘化物；天冬氨酸鹽；酸式天冬氨酸鹽；檸檬酸鹽；酸式檸檬酸鹽；酒石酸鹽；磷酸鹽；延胡索酸鹽；酸式延胡索酸鹽；甘油磷酸鹽；葡糖磷酸；乳酸鹽；蘋果酸鹽；酸式蘋果酸鹽；乳清酸鹽；草酸鹽；酸式草酸鹽；硫酸鹽；酸式硫酸鹽；三氯乙酸鹽和甲磺酸鹽。
12.前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的營養(yǎng)增補(bǔ)劑，它包含基本活性成分 每日劑量-延胡索酸L-肉堿200mg(＝143mg L-肉堿內(nèi)鹽)-乙酰L-肉堿75mg-丙酰L-肉堿75mg支鏈氨基酸和非必需氨基酸-異亮氨酸 50mg-亮氨酸50mg-纈氨酸50mg-天冬氨酸 150mg-谷氨酸200mg-天冬酰胺 100mg磷酸肌酸 50mg維生素-維生素C 250mg無機(jī)鹽-檸檬酸二鈉(＝7.8mg鈉) 40mg-磷酸一鉀(＝8.6mg鉀) 30mg-乳酸鈣(＝20mg鈣) 110mg-牛磺酸鎂(＝73.0mg鎂) 820mg活性成分總量 2250mg-賦形劑2750mg總重量 5000mg
13.促進(jìn)進(jìn)行劇烈體育運(yùn)動的個體的骨胳肌的適應(yīng)和對抗虛弱個體的疲勞過度和疲倦的方法，該方法包含給予需要的個體服用營養(yǎng)增補(bǔ)劑，該營養(yǎng)增補(bǔ)劑包含以下物質(zhì)的混合物(a)L-肉堿；(b)乙酰L-肉堿；(c)丙酰L-肉堿；或其藥理學(xué)上可接受的鹽。
14.權(quán)利要求13所述的方法，其中(a)∶(b)∶(c)的重量比為1∶1∶1至1∶0.1∶0.1。
15.權(quán)利要求14所述的方法，它包含給予所需個體500mg/天L-肉堿，50-500mg/天乙酰L-肉堿和50-500mg/天丙酰L-肉堿或相當(dāng)重量的其藥理學(xué)上可接受的鹽。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種能促進(jìn)進(jìn)行劇烈運(yùn)動的個體的骨胳肌的適應(yīng),和對抗虛弱個體的疲勞過度和疲倦的營養(yǎng)增補(bǔ)劑,它包含L－肉堿、乙酰L－肉堿和丙酰L－肉堿的混合物作為基本活性成分。選擇性成分包括異戊酰L－肉堿、支鏈氨基酸和肌酸和/或磷酸肌酸。
文檔編號A23L1/305GK1251496SQ98803848
公開日2000年4月26日 申請日期1998年3月27日 優(yōu)先權(quán)日1997年4月1日
發(fā)明者C·卡瓦薩 申請人:希格馬托保健科學(xué)股份公司