專利名稱：含洛伐他汀紅曲霉菌體的制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物發(fā)酵技術(shù)，特別是采用一株高產(chǎn)洛伐他汀的紅曲霉菌經(jīng)液體深層發(fā)酵制得紅曲霉菌體的工藝方法。
紅曲在我國(guó)已有一千多年的歷史，在元朝吳端的“日用本草”、明朝宋應(yīng)星“天工開物”、清朝李時(shí)珍的“本草綱目”都有食用和藥用的報(bào)導(dǎo)。在醫(yī)藥上記載紅曲主治活血化瘀、健脾、燥胃治赤白痢，釀酒破血行勢(shì)。目前我國(guó)北京大學(xué)的血脂康和成都的降脂妥都徙是采用紅曲做成的降血脂藥品。在日本和美國(guó)也有用紅曲做成保健食品。從以上所說可見，紅曲已有悠長(zhǎng)歷史，在人體保健方面有著廣泛的市場(chǎng)，在病理醫(yī)治方面起著重要的作用。世界上目前所用的紅曲都是采用經(jīng)曲盤式通風(fēng)制曲工藝制成的紅曲米，還沒有直接制造紅曲霉菌體的方法。這種曲盤式通風(fēng)制曲工藝方法，其工藝落后且勞動(dòng)強(qiáng)度大，通常采用現(xiàn)有的一些設(shè)備加工制作，其效率較低；在其制作工藝方面，由工人直接操作，產(chǎn)品容易受污染；采用這種曲盤式通風(fēng)制曲工藝制成的紅曲產(chǎn)量較低，相對(duì)價(jià)格昂貴。
本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有制曲工藝所存在的產(chǎn)量低、易污染等這一嚴(yán)重情況，提出一種采用一株高產(chǎn)洛伐他汀(LOVASTATIN)紅曲霉菌經(jīng)多次培養(yǎng)后再經(jīng)液體深層發(fā)酵制得含有洛伐他汀紅曲霉菌體的全新工藝方法。通過上述工藝方法制得的紅曲霉菌體可用于制造各種降血脂食品和藥品。
本發(fā)明的紅曲霉菌體的制造方法主要是采用一株高產(chǎn)洛伐他汀(LOVASTATIN)的紅曲霉菌經(jīng)紅曲霉斜面純種培養(yǎng)、紅曲霉液體搖瓶種子培養(yǎng)、紅曲霉種子罐培養(yǎng)后再經(jīng)液體深層發(fā)酵及物理處理的工藝過程。
本發(fā)明的制作方法具體步驟如下它包括有液體深層發(fā)酵生產(chǎn)紅曲霉菌體過程和紅曲霉菌體的物理處理過程；液體深層發(fā)酵生產(chǎn)紅曲霉菌體分紅曲霉斜面純種培養(yǎng)、紅曲霉液體搖瓶種子培養(yǎng)、紅曲霉種子罐的培養(yǎng)及紅曲霉菌體的發(fā)酵四個(gè)部分。
一、紅曲霉斜面純種培養(yǎng)①斜面培養(yǎng)基麥芽糖4％、可溶性淀粉1％、蛋白胨3％、瓊脂2％水淀溶100ml，調(diào)PH值5～6，裝試管并滅菌1Kg/30分，擺斜面；②將斜面培養(yǎng)基在無菌室內(nèi)接入紅曲霉菌種(高產(chǎn)洛伐他汀)，在33℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)8天。
二、紅曲霉液體搖瓶種子培養(yǎng)①液體培養(yǎng)基米粉4％、磷酸二輕鉀0.25％、蛋白胨1％、玉米漿1.5％，調(diào)PH值3.5～4,500ml三角瓶裝50ml，滅菌1Kg/30分；②菌液的制備將滅好菌的液體培養(yǎng)基在無菌室內(nèi)按每三角瓶接入經(jīng)斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)的紅曲霉菌種兩個(gè)白金耳，上搖床33℃培養(yǎng)23小時(shí)，其沖程為30mm、轉(zhuǎn)數(shù)為285轉(zhuǎn)/min。
三、紅曲霉種子罐的培養(yǎng)①液體培養(yǎng)基的制備米粉4％、磷酸二輕鉀0.25％、蛋白胨1％、玉米漿1.5％，調(diào)PH值3.5～4，按70％的裝液量裝好培養(yǎng)基滅菌1Kg/30分；②將搖瓶種液按4％的接種量接入種子罐，在33℃培養(yǎng)23小時(shí)，其通風(fēng)比為1∶0.6。
四、紅曲霉菌體的發(fā)酵①發(fā)酵培養(yǎng)基制備米粉6％、磷酸二輕鉀0.2％、蛋白胨1.5％、氨基酸0.2％，調(diào)PH3.2，按70％裝液量裝入液體發(fā)酵培養(yǎng)基，并滅菌1Kg/30分；②將培養(yǎng)好的種子罐培養(yǎng)液按4％的接種量接入發(fā)酵罐中33℃培養(yǎng)50小時(shí)，通風(fēng)比為1∶0.6。
經(jīng)上述過程可制得發(fā)酵好的紅曲霉菌體再經(jīng)下列物理處理可制得含有洛伐他汀的紅曲霉菌體①將發(fā)酵好的紅曲霉菌體在10000轉(zhuǎn)/分的高速離心機(jī)下分離、在60℃～80℃自溶一小時(shí)破細(xì)胞壁后再經(jīng)乳化機(jī)(膠體磨)乳化待用；
②將上述乳化好的紅曲霉液經(jīng)噴霧干燥塔(其進(jìn)口溫度為160℃、出口溫度為108℃)噴成粉即可。
經(jīng)上述工藝方法制得的含洛伐他汀紅曲霉菌體粉可用于制成各種降血脂食品和藥品中。
本發(fā)明的紅曲霉菌體的制造方法是目前直接生產(chǎn)紅曲霉菌體的獨(dú)一的方法，經(jīng)各種培養(yǎng)及發(fā)酵工藝即可生產(chǎn)紅曲霉菌體，其勞動(dòng)強(qiáng)度低，由于所用器具較少，保證了其衛(wèi)生，不易受污染，從而保證產(chǎn)品質(zhì)量；本制造方法可采用現(xiàn)代的自動(dòng)控制進(jìn)行操作。本方法與現(xiàn)有的曲盤通風(fēng)制曲或液體種子固體曲制成的紅曲米等方法相比，除具有紅曲米與紅曲霉菌體差別以外，還保證了所制得的紅曲霉菌體粉中含洛伐他汀比紅曲米高，隨之在其應(yīng)用方面具有較顯著的優(yōu)越性如在原料配比上所用的份量較低，相應(yīng)地可縮減庫(kù)房和降低運(yùn)輸費(fèi)等。
權(quán)利要求
1.一種含洛伐他汀紅曲霉菌體的制造方法，是采用一株高產(chǎn)洛伐他汀(LOVASTATIN)的紅曲霉菌經(jīng)紅曲霉斜面純種培養(yǎng)、紅曲霉液體搖瓶種子培養(yǎng)、紅曲霉種子罐培養(yǎng)后再經(jīng)液體深層發(fā)酵及物理處理的工藝過程，其特征是A斜面純種培養(yǎng)基麥芽糖4％ 可溶性淀粉1％蛋白胨3％ 瓊脂2％調(diào)PH值5～6，裝試管并滅菌1Kg/30分，擺斜面；B、紅曲霉搖瓶種子液體培養(yǎng)基米粉4％磷酸二輕鉀0.25％蛋白胨1％ 玉米漿1.5％調(diào)PH值3.5～4,500ml三角瓶裝50ml，滅菌1Kg/30分；C、紅曲霉種子罐的培養(yǎng)基米粉4％磷酸二輕鉀0.25％蛋白胨1％ 玉米漿1.5％調(diào)PH值3.5～4，按70％的裝液量裝好培養(yǎng)基滅菌1Kg/30分；D、紅曲霉菌體的發(fā)酵發(fā)酵培養(yǎng)基米粉6％ 磷酸二輕鉀0.2％蛋白胨1.5％ 氨基酸0.2％調(diào)PH3.2，按70％裝液量裝入液體發(fā)酵培養(yǎng)基，并滅菌1Kg/30分；將紅曲霉菌種(高產(chǎn)洛伐他汀)接入斜面培養(yǎng)基，在33℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)8天后接入液體培養(yǎng)基上搖床33℃培養(yǎng)23小時(shí)；再將搖瓶種液按4％的接種量接入種子罐培養(yǎng)基，在33℃培養(yǎng)23小時(shí)，再接入發(fā)酵培養(yǎng)基內(nèi)33℃培養(yǎng)50小時(shí)后離心、破細(xì)胞壁、乳化噴霧干燥即成成品。
2.由權(quán)利要求1所述的方法制得的紅曲霉菌體可用于制成各種降血脂食品和藥品。
全文摘要
本發(fā)明為一種含洛伐他汀紅曲霉菌體的制造方法,它包括液體深層發(fā)酵生產(chǎn)紅曲霉菌體分紅曲霉斜面純種培養(yǎng)、紅曲霉液體搖瓶種子培養(yǎng)、紅曲霉種子罐的培養(yǎng)及紅曲霉菌體的發(fā)酵和紅曲霉菌體的物理處理過程。經(jīng)上述工藝方法制得的紅曲霉菌體粉可用于制成各種降血脂食品和藥品中。本方法與現(xiàn)有的曲盤通風(fēng)制曲或液體種子固體曲制成的紅曲米等方法相比,除具有紅曲米與紅曲霉菌體差別以外,還保證了所制得的紅曲霉菌體粉中含洛伐他汀比紅曲米高,隨之在其應(yīng)用方面具有較顯著的優(yōu)越性。
文檔編號(hào)C12N1/14GK1240229SQ9911088
公開日2000年1月5日 申請(qǐng)日期1999年7月23日 優(yōu)先權(quán)日1999年7月23日
發(fā)明者張軍 申請(qǐng)人:張軍