一種應(yīng)用于鮮棗貯存保鮮的復(fù)合方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種應(yīng)用于鮮棗貯存保鮮的復(fù)合方法，具體地說是一種通過醋酸熏 蒸處理結(jié)合拮抗酵母菌對(duì)圓脆鮮棗的復(fù)合保鮮方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 紅棗是我國人民的傳統(tǒng)補(bǔ)品，具有健脾、益氣、和中功效，脾虛、久瀉、體弱的人， 以及肝炎，貧血、血小板減少等病人食用均有益處。目前控制棗果病害的發(fā)生，主要依賴于 使用化學(xué)殺菌劑。長(zhǎng)期以來，使用化學(xué)殺菌劑控制鮮棗的采后病害一直被認(rèn)為是最有效的 控制方法。然而，隨著病原菌抗藥性的逐漸增加，以及人們對(duì)果品質(zhì)量要求的不斷提高和環(huán) 保意識(shí)的加強(qiáng)，人們開始注意到化學(xué)殺菌劑的潛在危險(xiǎn)。因此，尋求能取代化學(xué)殺菌劑的新 方法便成為當(dāng)今棗果采后防病研宄的關(guān)鍵。
[0003] 國內(nèi)對(duì)于生防詰抗菌的研宄也日益增多，詰抗菌是南開大 學(xué)生科院微生物系分離到的一株對(duì)蘆筍莖枯病菌及其它植物病原真菌和細(xì)菌有強(qiáng)烈抑制 作用的枯草芽孢桿菌。詰抗菌5·/^ )是從柑桔根系附生微生物群體中篩 選出的對(duì)柑桔青綠霉菌有拮抗作用的假單飽桿菌。目前，研宄的拮抗菌主要為細(xì)菌。目前， 已有很多果蔬采后病害生物防治的成功應(yīng)用：將菠蘿的繩狀橘青霉噴布到菠蘿上，大大降 低了菠蘿的橘青霉腐爛率；草莓采前噴布木霉菌，能明顯的降低草莓灰霉病的發(fā)病率；用 酵母菌防治蘋果橘青霉病、灰霉病；用抗菌素類的鏈格孢霉素、軟霉素噴于大白菜，可以減 少細(xì)菌病害的發(fā)生?？莶菅勘U菌你-力菌系作為控制采后病害的生防制劑在美國取得了 專利，是生防微生物應(yīng)用性研宄的突破性進(jìn)展。
[0004] 拮抗菌只有適應(yīng)貯藏條件下的溫度、濕度以及氣體組成，才能更好的發(fā)揮其拮抗 能力。低溫是水果采后貯藏必要的環(huán)境條件。但是，有的采后病原菌在零度以下的低溫環(huán)境 也能生長(zhǎng)、繁殖和引起產(chǎn)品致病。所以生物拮抗菌對(duì)低溫貯藏環(huán)境的適應(yīng)能力將極大的影 響其抑菌效果。因此人們開始篩選那些耐低溫的拮抗菌或通過低溫馴化來提高拮抗菌對(duì)低 溫的適應(yīng)力。我們實(shí)驗(yàn)室篩選的詰抗菌CrjpiococciAs 在冷藏條件下均能有 效地防治蘋果灰霉病和橘青霉病的發(fā)生，并且能夠與氣調(diào)貯藏相容，協(xié)同抑制病害的發(fā)生。 同時(shí)，將拮抗菌與化學(xué)殺菌劑混合使用防治病害，可以提高拮抗菌的抑菌能力。拮抗菌與化 學(xué)殺菌劑的配合使用，降低了果實(shí)上化學(xué)殺菌劑量的殘留量。
[0005] 采用醋酸熏蒸處理作為一種處理方式已被廣泛用于果蔬貯藏保鮮中，以控制病 蟲害，改變對(duì)逆境的反應(yīng)，保持水果品質(zhì)。該處理不僅能夠清除果蔬表面的泥土、農(nóng)藥和 真菌孢子，而且能夠殺死果蔬表面的大量微生物，改善果蔬外觀并保持其品質(zhì)，同時(shí)與其 它熱處理方式相比，該熱處理方式更有利于商業(yè)生產(chǎn)實(shí)際應(yīng)用，并且已經(jīng)被設(shè)計(jì)成為果蔬 分級(jí)包裝生產(chǎn)線上的一部分，實(shí)現(xiàn)了對(duì)甜椒、芒果等進(jìn)行采后防腐保鮮處理。雖然已有報(bào)道 證明醋酸熏蒸單獨(dú)處理均能減少果蔬采后的腐爛，但也有一定的缺陷，從而無法完全控制 采后病害。對(duì)于尋求替代化學(xué)殺菌劑來控制腐爛的需要促使各種研宄致力于將各種非化學(xué) 的處理方法結(jié)合起來以達(dá)到與殺菌劑相同的作用效果，理想的處理方式能夠處理所遇到的 所有致病菌，并保護(hù)果實(shí)不遭遇處理后的再次感染。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種應(yīng)用于鮮棗貯存保鮮的復(fù)合方法，該方法能有效控制圓 脆棗果實(shí)采后的自然腐爛現(xiàn)象，從而延長(zhǎng)了圓脆棗果實(shí)的保鮮時(shí)間。
[0007] 為了實(shí)現(xiàn)上述任務(wù)，本發(fā)明采取如下的技術(shù)方案：一種應(yīng)用于鮮棗貯存保鮮的復(fù) 合方法，首先篩選拮抗酵母菌，此拮抗酵母菌為美極梅奇酵母菌，將一環(huán)酵母菌菌落接種在 200mL培養(yǎng)液上、28°C下振蕩培養(yǎng)24h后，用離心機(jī)收集菌體，離心轉(zhuǎn)速8000 r/min，離心機(jī) 工作時(shí)間為10 min，再用濃度為0. 85%的無菌生理鹽水洗絳酵母菌體兩次，最后用所述無 菌生理鹽水洗下酵母菌，制成酵母菌菌懸液，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，用無菌生理鹽水調(diào)整至所 需濃度，使得酵母菌菌懸液的濃度為IX 108個(gè)/mL，放入冰箱保存待用；在22± I°C條件下， 用5. 4mg/L醋酸對(duì)圓脆鮮賽果實(shí)進(jìn)行40min熏蒸處理，瞭干后再浸于所述的酵母菌菌懸浮 液中約2min，取出后強(qiáng)制通風(fēng)晾干，然后裝入干凈的保鮮袋中，置于冷庫中貯藏，貯藏溫濕 度條件為：_2±1°C，RH 90±5%。
[0008] 本發(fā)明以農(nóng)一師十團(tuán)提供的圓脆鮮棗為材料，通過測(cè)定不同方法處理后的鮮棗的 病害防治效果及貯藏保鮮的品質(zhì)； 所述鮮棗品質(zhì)的測(cè)定是對(duì)處理的鮮棗的硬度、自然發(fā)病率、可溶性固形物、可滴定酸、 失重率、Vc含量的測(cè)定； 所述鮮棗病害是由于橘青霉或鏈格孢菌引起的青腐病和黑腐??； 所述病害防治效果是對(duì)病斑直徑的指標(biāo)測(cè)定，是在果實(shí)傷口處分別接種20 μ L IO5個(gè) sproes/ mL的橘青霉或鏈格孢菌菌懸浮液，然后對(duì)鮮賽病斑直徑進(jìn)行測(cè)定。
[0009] 所述處理的鮮棗分組為：①對(duì)照組（CK)，不做任何采后處理的圓脆鮮棗果實(shí)；② 醋酸熏蒸處理組（A)，（22±l) °C，5.4mg/L醋酸對(duì)圓脆鮮棗果實(shí)進(jìn)行40min熏蒸處理， 然后立刻強(qiáng)制通風(fēng)晾干；③拮抗酵母菌處理組（Y)，將圓脆棗果實(shí)浸于酵母菌菌懸浮液中 (IO 8個(gè)/mL)約2 min，然后立刻強(qiáng)制通風(fēng)晾干；④醋酸熏蒸處理與拮抗酵母菌結(jié)合處理組 (A+Y):首先對(duì)果實(shí)進(jìn)行醋酸熏蒸處理，然后再進(jìn)行拮抗酵母菌浸泡處理，取出后，強(qiáng)制通 風(fēng)瞭干。
[0010] 所述拮抗酵母菌由生工生物工程(上海）有限公司鑒定此拮抗酵母菌為美極梅奇 酵母菌。將一環(huán)酵母菌菌落接種在20 mL NYDB培養(yǎng)液上28°C下振蕩培養(yǎng)24h后，離心（8000 r/min，10 min)收集菌體，并用無菌生理鹽水（0.85% NaCl)洗絳酵母菌體兩次，最后用無菌 生理鹽水洗下酵母菌，制成酵母菌菌懸液，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，計(jì)算出美極梅奇酵母菌菌懸 液的濃度，并用無菌生理鹽水調(diào)整至所需濃度，冰箱保存待用。
[0011] 所述NYDB培養(yǎng)基為：8g牛肉醬、5g酵母浸粉、IOg葡萄糖、IL水。
[0012] 所述測(cè)定是將處理后的各組果實(shí)置于（20±1) °C，RA (90±5)%的環(huán)境下模擬貨 架條件貯藏7d，進(jìn)行指標(biāo)的測(cè)定，還要統(tǒng)計(jì)腐爛情況。每組200個(gè)果實(shí)，試驗(yàn)重復(fù)3次。
[0013] 所述結(jié)合處理方法則顯著降低了果實(shí)的發(fā)病率，能夠有效控制果實(shí)在常溫貯藏下 的腐爛，發(fā)病率僅為10% ;對(duì)于橘青霉的處理效果，結(jié)合處理方法的發(fā)病率只有30%，對(duì)于鏈 格孢霉后傷口直徑的影響，結(jié)合處理方法并沒有引起傷口病變。由此看出，結(jié)合處理無論是 對(duì)果實(shí)在常溫貯藏條件下的自然發(fā)病率還是接種致病菌后傷口處的發(fā)病率及病斑直徑，均 有顯著的抑制效果。
[0014] 由于熱處理與生物防治兩種處理方式各有優(yōu)缺點(diǎn)，現(xiàn)在的研宄熱點(diǎn)已轉(zhuǎn)移至將 兩者結(jié)合處理。本發(fā)明首次將醋酸熏蒸處理結(jié)合拮抗酵母菌處理應(yīng)用于圓脆鮮棗采后的處 理保鮮中。結(jié)果表明，結(jié)合處理無論是對(duì)果實(shí)在常溫貯藏條件下的自然發(fā)病率還是接種致 病菌后傷口處的發(fā)病率及病斑直徑，均有顯著的抑制效果，這與已有的關(guān)于結(jié)合處理的報(bào) 道結(jié)論是一致的。結(jié)合處理產(chǎn)生的協(xié)同效應(yīng)：醋酸熏蒸處理清除了果實(shí)表面大量微生物，在 有效控制果實(shí)腐爛的同時(shí)，結(jié)合處理并未影響果實(shí)的感官品質(zhì)，單獨(dú)或結(jié)合處理與對(duì)照之 間的差異不明顯?？傮w上講，結(jié)合處理能夠有效控制圓脆棗果實(shí)采后腐爛的發(fā)生，今后仍需 進(jìn)一步研宄其作用機(jī)理，為這種結(jié)合處理的實(shí)際應(yīng)用提供支持。
【附圖說明】
[0015] 以下結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。
[0016] 圖1不同處理對(duì)圓脆鮮棗自然發(fā)病率的影響； 圖2不同處理對(duì)接種橘青霉后圓脆棗傷口發(fā)病率及病斑直徑的影響； 圖3不同處理對(duì)接種鏈格孢菌后圓脆棗傷口發(fā)病率及病斑直徑的影