一種具有高效誘食和免疫增強(qiáng)作用的酵母復(fù)合物添加劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于飼料添加劑領(lǐng)域，涉及一種酵母產(chǎn)品，具體涉及一種具有高效誘食和 免疫增強(qiáng)作用的酵母復(fù)合物添加劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 自抗生素被發(fā)現(xiàn)和使用以來(lái)，其作用功不可沒(méi)，在促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、防治動(dòng)物腹瀉和 提高經(jīng)濟(jì)效益等發(fā)面起著非常重要的作用，但隨著抗生素的使用，抗生素的負(fù)面影響日益 突出，如引起藥物殘留、細(xì)菌耐藥性等問(wèn)題，此外抗生素還有致基因突變、引發(fā)畸形和誘發(fā) 癌癥等毒副作用，對(duì)動(dòng)物、人和生態(tài)環(huán)境造成嚴(yán)重危害。目前，世界各國(guó)開(kāi)始紛紛禁止或限 制飼用抗生素的使用。然而，禁用或限用抗生素之后，動(dòng)物在受到病原菌感染、疾病等應(yīng)激 時(shí)，易產(chǎn)生采食量下降、腹瀉等現(xiàn)象，繼而導(dǎo)致生產(chǎn)性能降低，甚至死亡，給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)巨大 的經(jīng)濟(jì)損失。尤其是幼齡動(dòng)物，如仔豬因其自身消化機(jī)能不全、腸道屏障功能發(fā)育不完善和 抗病力差等原因，在受到病原菌感染、斷奶等應(yīng)激時(shí)，易引起采食量下降、生長(zhǎng)緩慢、腹瀉， 甚至死亡的現(xiàn)象。因此，研發(fā)安全、高效、綠色的新型飼用抗生素替代品已迫在眉睫。
[0003] 核酸在動(dòng)物消化道內(nèi)被降解為核苷酸后發(fā)揮作用，能提高飼料的適口性，增加采 食量，對(duì)動(dòng)物腸道發(fā)育和免疫系統(tǒng)有著非常重要的作用，如加速幼年動(dòng)物小腸上皮細(xì)胞分 化、生長(zhǎng)及修復(fù)，以及促進(jìn)小腸的發(fā)育和成熟等。因而，動(dòng)物在應(yīng)激階段及快速生長(zhǎng)階段，均 需要補(bǔ)充外源核酸（核苷酸），其最佳來(lái)源為酵母。葡聚糖和甘露聚糖是細(xì)胞壁多糖的主 要成分，在改善腸道健康和提高機(jī)體免疫機(jī)能等方面具有重要的作用。β-葡聚糖作用于 體內(nèi)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)，繼而激活巨噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、T細(xì)胞和B細(xì)胞，提高動(dòng)物的抗病能 力。甘露聚糖能與致病菌結(jié)合，防止其與動(dòng)物機(jī)體腸道細(xì)胞接觸，還能與病原菌外凝集素上 的活性域結(jié)合后，遮蓋它的結(jié)合部位，病原菌就會(huì)失活，從而失去同腸黏膜上的甘露糖受體 位點(diǎn)結(jié)合能力。此外，它們還是動(dòng)物腸道內(nèi)有益菌如雙歧桿菌、乳酸桿菌等的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可 促進(jìn)其大量繁殖。硒元素是動(dòng)物生理不可缺少的微量元素，目前國(guó)內(nèi)的補(bǔ)硒來(lái)源，主要是無(wú) 機(jī)化合物亞硒酸鈉等。然而，這類產(chǎn)品具有吸收率低、毒性高等缺點(diǎn)。酵母硒，屬于優(yōu)質(zhì)的 有機(jī)硒源，富硒酵母已證明遠(yuǎn)比無(wú)機(jī)硒安全、穩(wěn)定、易吸收、有效且少污染，并具有多方面的 保健功能。
[0004] 因此，該種酵母復(fù)合物集合了誘食劑、免疫增強(qiáng)劑、腸道菌群調(diào)節(jié)劑、抗氧化劑等 多重功效，是高效綠色環(huán)保的豬用飼料添加劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種具有高效誘食和免疫增強(qiáng)作用的酵母復(fù)合物添加劑。
[0006] 本發(fā)明提供的添加劑，也即具有高效誘食和免疫增強(qiáng)作用的酵母復(fù)合物添加劑， 其有效成分包括酵母核酸、酵母葡聚糖、酵母甘露聚糖和富硒酵母。
[0007] 上述添加劑中，有效成分也可只由上述四組分組成。
[0008] 其中，所述酵母核酸具體可為來(lái)源于含有酵母核酸的原料中；所述含有酵母核酸 的原料中，酵母核酸的質(zhì)量百分含量為45?85 %，具體為75 %、80 %或85 % ;
[0009] 該含有酵母核酸的原料可為各種常見(jiàn)的含有酵母核酸的產(chǎn)品，如可按照如下方法 制備而得：選用華潤(rùn)雪花啤酒（中國(guó)）有限公司或百威啤酒（唐山）有限公司（這兩大集 團(tuán)，在啤酒生產(chǎn)工藝中對(duì)于啤酒酵母品質(zhì)的控制非常嚴(yán)格，啤酒酵母泥排放控制在4?6 代）生產(chǎn)啤酒后剩余的啤酒酵母泥為原料，在低溫條件（4°C )下，加水稀釋成10%?15% 酵母液、冷凝水洗滌3次、過(guò)70?90目篩、0. 5%的碳酸氫鈉溶液處理0. 5h脫苦、加水洗 絳3次后，所得10%?15%的酵母液，用酶促-自溶（所用酶為木瓜蛋白酶：美國(guó)Sigma公 司，產(chǎn)品編號(hào)為76218,酶活12U/mg，添加量為1.0%;堿性蛋白酶：美國(guó)Sigma公司，產(chǎn)品編 號(hào)為P8038,酶活14U/mg，添加量為1% ;核酸酶：美國(guó)Sigma公司，產(chǎn)品編號(hào)為N8630,酶活 200U/mg，添加量為1. 0%。反應(yīng)條件為pH5. 0,溫度45?55°C，時(shí)間30?34h)的方法降解 酵母，然后離心分離（3500r/min，IOmin)、真空濃縮后經(jīng)過(guò)噴霧干燥（進(jìn)料濃度20%，進(jìn)風(fēng) 溫度120°C，出風(fēng)溫度80°C )而得到的粉末狀原料；
[0010] 所述酵母葡聚糖具體可為來(lái)源于含有酵母葡聚糖的原料中；所述含有酵母葡聚糖 的原料中，酵母葡聚糖的質(zhì)量百分含量為30?80 %，具體為60 %、70 %或80 % ;
[0011] 該含有酵母葡聚糖的原料可按照如下方法制備而得：選用華潤(rùn)雪花啤酒（中國(guó)） 有限公司或百威啤酒（唐山）有限公司（這兩大集團(tuán)，在啤酒生產(chǎn)工藝中對(duì)于啤酒酵母品 質(zhì)的控制非常嚴(yán)格，啤酒酵母泥排放控制在4?6代）生產(chǎn)啤酒后剩余的啤酒酵母泥為原 料，在低溫條件（4°C )下，加水稀釋成10%?15%酵母液、冷凝水洗滌3次、過(guò)70?90目 篩、0. 5%的碳酸氫鈉溶液處理0. 5h脫苦、加水洗滌3次后，所得10%?15%的酵母液，通 過(guò)定向添加葡聚糖酶（美國(guó)Sigma公司，產(chǎn)品編號(hào)為49101，酶活I(lǐng). OU/mg，添加量為1. 0% ) 等定向水解酵母細(xì)胞壁多糖專一位點(diǎn)，并加入木瓜蛋白酶（美國(guó)Sigma公司，產(chǎn)品編號(hào)為 76218,酶活12U/mg，添加量為1.0%)酶解（pH 5. 0,溫度45?55°C，時(shí)間6h)后，加入2% NaOH進(jìn)行堿提取，然后離心分離（3500r/min，IOmin)、真空濃縮并經(jīng)過(guò)噴霧干燥（進(jìn)料濃度 20%，進(jìn)風(fēng)溫度120°C，出風(fēng)溫度80°C )而得到的粉末狀原料；
[0012] 所述酵母甘露聚糖具體可為來(lái)源于含有酵母甘露聚糖的原料中；所述含有酵母甘 露聚糖的原料中，酵母甘露聚糖的質(zhì)量百分含量為20?60%，具體為50%、55%或60% ;
[0013] 該含有酵母甘露聚糖的原料可按照如下方法制備而得：選用華潤(rùn)雪花啤酒（中 國(guó)）有限公司或百威啤酒（唐山）有限公司（這兩大集團(tuán)，在啤酒生產(chǎn)工藝中對(duì)于啤酒酵 母品質(zhì)的控制非常嚴(yán)格，啤酒酵母泥排放控制在4?6代）生產(chǎn)啤酒后剩余的啤酒酵母泥 為原料，在低溫條件（4°C )下，加水稀釋成10%?15%酵母液、冷凝水洗滌3次、過(guò)70? 90目篩、0.5%的碳酸氫鈉溶液處理0.5h脫苦、加水洗滌3次后，所得10%?15%的酵母 液，通過(guò)定向添加甘露聚糖酶（美國(guó)Sigma公司，產(chǎn)品編號(hào)為X2629,酶活1.0U/mg，添加量 為1. 5% )等定向水解酵母細(xì)胞壁多糖專一位點(diǎn)，并加入木瓜蛋白酶（美國(guó)Sigma公司，產(chǎn) 品編號(hào)為76218,酶活12U/mg，添加量為1.0%)酶解（pH 5.0,溫度45?55°C，時(shí)間6h) 后，加入2% NaOH進(jìn)行堿提取，然后離心分離（3500r/min，IOmin)、真空濃縮并經(jīng)過(guò)噴霧干 燥（進(jìn)料濃度20%，進(jìn)風(fēng)溫度120°C，出風(fēng)溫度80°C )而得到的粉末狀原料；
[0014] 所述富硒酵母中，硒元素的含量為500?2000mg/kg，具體為500、1000或2000mg/ kg 〇
[0015] 所述富硒酵母可按照如下方法制備而得：選用啤酒酵母為發(fā)酵菌株，向其培養(yǎng)基 (即YPED培養(yǎng)基，含3%葡萄糖、1%蛋白胨、0.5%酵母膏，pH 5.0)中通過(guò)以亞硒酸鈉的形 式引入硒（硒含量為20 μ g/mL，以后每隔6h流加含硒的濃度為0. Olg/mL的亞硒酸鈉溶液 3mL)，經(jīng)發(fā)酵（溫度28°C，時(shí)間30h)、用水洗絳3次、離心分離（2000r/min，IOmin)后經(jīng)過(guò) 并經(jīng)過(guò)冷凍干燥（溫度-30°C，時(shí)間28?30h)而得到的非活性酵母粉末狀原料；
[0016] 所述含有酵母核酸的原料、含有酵母葡聚糖的原料、含有酵母甘露聚糖的原料和 富硒酵母的質(zhì)量比為（20-40) :30 :(1-20) :(1-15)，具體為 40:30:20:10、40:30:1:1 或 20:30:15:15 ；
[0017] 另外，上述本發(fā)明提供的添加劑，還可包括維生素 A、維生素 B1、維生素 B2、維生素 B6、維生素 B12、維生素 C、維生素 E、維生素 K3、乳酸亞鐵、乳酸鋅和乳酸鈣中的至少一種。
[0018] 其中，所述維生素 A占所述添加劑總質(zhì)量的百分含量為0-1 %，且不為0 ;且所述維 生素 A以維生素 A醋酸酯計(jì)，IIU維生素 A = 0. 344 μ g維生素 A醋酸酯；
[0019] 所述維生素 B1占所述添加劑總質(zhì)量的百分含量為0-1 %，且不為0 ;
[0020] 維生素 B2占所述添加劑總質(zhì)量的百分含量為0-1 %，且不為0 ;
[0021] 維生素 B6占所述添加劑總質(zhì)量的百分含量為0-1 %，且不為0 ;
[0022] 維生素 B12占所述添加劑總質(zhì)量的百分含量為0-1 %，且不為0 ;
[0023] 維生素 C占所述添加劑總質(zhì)量的百分含量為0-10%，且不