一種輔助降血脂茶及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于保健品領(lǐng)域，具體涉及一種具有輔助降血脂功能的保健茶及其制備方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前，市面上關(guān)于降血脂功能的保健食品繁多，但是實(shí)際應(yīng)用中真正效果顯著的 為數(shù)不多。而本申請(qǐng)中作為主要原料的黑茶、銀杏葉提取物、山楂提取物的組合物用于輔助 降血脂功能保健品的應(yīng)用尚無報(bào)道，本申請(qǐng)人以黑茶、銀杏葉等制成的產(chǎn)品通過動(dòng)物及人 體功能試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其具有較好的輔助降血脂的效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種輔助降血脂茶；本發(fā)明還有一個(gè)目的在于提供該 輔助降血脂茶的制備方法。
[0004] 本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
[0005] -種輔助降血脂茶，由如下重量份的原料制備而成：
[0006] 黑茶220-300份銀杏葉提取物10-14份
[0007] 山楂提取物22-28份 環(huán)糊精2-4份
[0008] 該輔助降血脂茶的原料配比優(yōu)選為：
[0009] 黑茶260份銀杏葉提取物12份
[0010] 山楂提取物25份環(huán)糊精3份
[0011] 本發(fā)明輔助降血脂茶的制備方法包括以下步驟：
[0012] (1)粉碎：將黑茶粉碎使全部通過10目篩，備用；
[0013] (2)調(diào)配：將環(huán)糊精加入適量的純化水，制成8-12%的環(huán)糊精溶液，然后 加入銀杏葉提取物、山楂提取物，攪拌均勻，得糊狀物，備用；
[0014] (3)混合：將黑茶粗粉置混合機(jī)中，加入上述糊狀物，混合20-40min，60-80°C干燥 至水分< 9 %，得干燥物，備用；
[0015] (4 )將步驟（3 )所得干燥物分裝，滅菌后即為成品。
[0016] 本發(fā)明輔助降血脂茶的制備方法優(yōu)選為包括以下步驟：
[0017] (1)粉碎：將黑茶粉碎使全部通過10目篩，備用；
[0018] (2)調(diào)配：將環(huán)糊精加入適量的純化水，制成10%的環(huán)糊精溶液，然后加 入銀杏葉提取物、山楂提取物，攪拌均勻，得糊狀物，備用；
[0019] (3)混合：將黑茶粗粉置混合機(jī)中，加入上述糊狀物，混合30min，70°C干燥至水分 < 9%，得干燥物，備用；
[0020] (4)將步驟（3)所得干燥物分裝，滅菌后即為成品。
[0021]本發(fā)明所述的輔助降血脂茶，其標(biāo)志性成分總黃酮含量> 720mg/100g，茶多酚含 量彡 10g/100g。
[0022] 本發(fā)明所述的輔助降血脂茶，其原料黑茶的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為：水分/%< 14%，總灰分 /%彡8. 5%，茶梗/%彡18. 0%，非茶類夾雜物/%彡0. 5%，水浸出物/%彡21% ;銀杏葉提取物的 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為：總黃酮（以蘆丁計(jì))/%彡15%，銀杏酸彡10mg/kg，水分/%彡5%，灰分/%彡5%; 山楂提取物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為：總黃酮（以蘆丁計(jì))/%彡4%，水分/%< 5%，灰分/%< 5% ; 0 -環(huán) 糊精應(yīng)符合《中華人民共和國(guó)藥典》二部項(xiàng)下規(guī)定。
[0023] 申請(qǐng)人通過功能動(dòng)物試驗(yàn)和毒理學(xué)試驗(yàn)分別觀察本發(fā)明輔助降血脂茶的有效性 和安全性，上述實(shí)驗(yàn)的受試樣品由如下工藝制得：
[0024] (1)原料：黑茶(水浸出物25. 3%)2600g，銀杏葉提取物(總黃酮（以蘆丁計(jì))，24. 7%， 銀杏酸〇? 3mg/kg) 120g，山楂提取物(總黃酮（以蘆丁計(jì)）4. 5%) 250g，0 -環(huán)糊精30g ;
[0025] (2)粉碎：將黑茶粉碎使全部通過10目篩，備用；
[0026] (3)調(diào)配：將環(huán)糊精加入適量的純化水，制成10%的環(huán)糊精溶液，然后加 入銀杏葉提取物、山楂提取物，攪拌均勻，得糊狀物，備用；
[0027] (4)混合：將黑茶粗粉置混合機(jī)中，加入上述糊狀物，混合30min，70°C干燥至水分 < 9%，得干燥物，備用；
[0028] (5)將步驟（4)所得干燥物分裝，制成1000袋，每袋3g，滅菌后即為受試樣品。
[0029] 一、功能動(dòng)物試驗(yàn)詳述如下：
[0030] 1材料和方法
[0031] 1. 1樣品：由申請(qǐng)人提供上述受試樣品，人體口服推薦劑量為每日6g，以每人60kg 體重計(jì)算，折合劑量0. lg/kg *bw。稱取樣品500g，加入85°C的蒸饋水500mL，于常壓、85°C 浸泡30min,提取兩次,合并提取液并濃縮至500mL(此浸泡濃縮液lmL相當(dāng)于樣品lg)。
[0032] 1. 2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及環(huán)境條件：SPF級(jí)雄性SD大鼠40只由長(zhǎng)沙市開福區(qū)東創(chuàng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 科技服務(wù)部提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK(湘）2009-0012。飼料由同一單位提供。實(shí) 驗(yàn)條件為屏障環(huán)境，實(shí)驗(yàn)期間實(shí)驗(yàn)環(huán)境溫度22 °C~24°C，濕度52 %~56%。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用 許可證號(hào)為SYXK (湘）2005-0001。
[0033] 1. 3主要儀器、器材與試劑：0LYMPUS AU400全自動(dòng)塵化分析儀，TD5A-WS離心機(jī) 等：膽固醇（CH0L)、甘油三酯（TG)試劑盒購(gòu)自上海復(fù)星長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司；高密度脂 蛋白膽固醇（HDL-C)試劑盒購(gòu)自寧波美康生物科技有限公司。
[0034] 1. 4高脂飼料：78. 8%基礎(chǔ)飼料，1 %膽固醇，10%蛋黃粉，10%豬油，0. 2%膽鹽。
[0035] 1. 5實(shí)驗(yàn)方法：
[0036] 1.5. 1劑量設(shè)計(jì)：據(jù)人體口服推薦量，設(shè)輔助降血脂茶低、中、高劑量分別為 0? 50g/kg .bwU. 00g/kg *bw、3. 00g/kg *bw(分別相當(dāng)于人體推薦劑量的 5、10、30 倍）。試 驗(yàn)時(shí)，分別取輔助降血脂茶浸泡濃縮液10. 0mL、20. 0mL、60.0 mL加蒸餾水定容至200mL，按 1. 0mL/100g ? bw體積給大鼠灌胃，每天一次，連續(xù)灌胃30天。對(duì)照組灌胃予以等體積的溶 劑。
[0037] 1. 5. 2動(dòng)物分組：以基礎(chǔ)飼料喂飼大鼠觀察一周后，禁食16小時(shí)，取尾血，用 OLYMPUS AU400全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清總膽固醇（TC)、甘油三酯（TG)、高密度脂蛋白 膽固醇（HDL-C)，根據(jù)TC水平兼顧TG將動(dòng)物隨機(jī)分為4組：高脂對(duì)照組和低、中、高三個(gè)受 試物組。自正式試驗(yàn)開始，各組動(dòng)物換用高脂飼料，同時(shí)按1. 5. 1劑量設(shè)計(jì)給各組受試動(dòng)物 灌胃。
[0038] 1. 5. 3指標(biāo)測(cè)定：每周稱體重一次，于實(shí)驗(yàn)結(jié)束禁食16小時(shí)，拔眼球采血測(cè)定血清 TC、TG、HDL-C。
[0039] 1. 6數(shù)據(jù)處理
[0040]數(shù)據(jù)用Excel2003，Spssll. 0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。先對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，若 方差齊，采用單因素方差分析進(jìn)行總體比較，發(fā)現(xiàn)差異再用Dunnett法進(jìn)行多個(gè)劑量組與 一個(gè)對(duì)照組均數(shù)間的兩兩比較。若方差不齊，則對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，滿足方差 齊性檢驗(yàn)后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)：若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到方差齊的目的，改用秩和檢 驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)總體比較有差異，則采用不要求方差齊性的Tamhane' s T2檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩 比較。
[0041] 1.7結(jié)果判定
[0042] 1. 7. 1輔助降血脂功能結(jié)果判定：在血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固 醇檢測(cè)中，血清總膽固醇、甘油三酯二項(xiàng)指標(biāo)陽性，可判定該受試樣品輔助降血脂功能動(dòng)物 實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。
[0043] 1. 7. 2輔助降低甘油三酯結(jié)果判定：①甘油三酯二個(gè)劑量組結(jié)果陽性；②甘油三 酯一個(gè)劑量組結(jié)果陽性，同時(shí)高密度脂蛋白膽固醇顯著高于對(duì)照組，可判定該受試樣品輔 助降低甘油三酯動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。
[0044] 1. 7. 3輔助降低血清總膽固醇結(jié)果判定：①血清總膽固醇二個(gè)劑量組結(jié)果陽性； ②血清總膽固醇一個(gè)劑量組結(jié)果陽性，同時(shí)高密度脂蛋白膽固醇顯著高于對(duì)照組，可判定 該受試樣品輔助降低血清總膽固醇動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。
[0045] 2 結(jié)果
[0046] 2. 1樣品對(duì)大鼠體重的影晌
[0047] 表1樣品對(duì)大鼠體重的影響i ±s fc)
[0049]見表1。實(shí)驗(yàn)前后受試物組動(dòng)物體重及實(shí)驗(yàn)期間體重增長(zhǎng)與高脂對(duì)照組比較，差異 無顯著性（P>〇. 05)。
[0050] 2. 2樣品對(duì)大鼠血清TC、TG、HDL-C的影響
[0051] 表2實(shí)驗(yàn)前后各組大鼠血清TC水平
[0053]表3實(shí)驗(yàn)前后各組大鼠血清TG水平
[0055]表4實(shí)驗(yàn)前后各組大鼠血清HDL-C水平
[0057] 見表2~4。實(shí)驗(yàn)后，高脂對(duì)照組血清TC、TG均明顯升高，與實(shí)驗(yàn)前比較，差異具 有顯著性（P< 0.05)，表明造模成功。與高脂對(duì)照組比較，高劑量可顯著降低大鼠血清總 膽固醇及甘油三酯水平（P〈〇. 05)，各劑量對(duì)大鼠血清高密度脂蛋白膽固醇水平無顯著影響 (P>0. 05)。
[0058] 3 小結(jié)
[0059] 本實(shí)驗(yàn)室條件下，以0? 50g/kg ? bw、1. 00g/kg ? bw、3. 00g/kg ? bw劑量的輔助降血 脂茶給SD大鼠灌胃30天，與高脂對(duì)照組比較，3. OOg/kg *bw劑量可顯著降低飼高脂飼料大 鼠血清總膽固醇及甘油三酯水平（P〈〇. 05)，各劑量對(duì)大鼠血清高密度脂蛋白膽固醇水平無 顯著影響（P>〇. 05)。提示送檢樣品對(duì)動(dòng)物具有輔助降血脂功能。
[0060] 二、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)詳述如下：
[0061] 1材料和方法
[0062] 1. 1樣品：由申請(qǐng)人提供受試樣品，人體口服推薦劑量為每日6g，以每人60kg體重 計(jì)算，折合劑量〇. lg/kg訃《。取樣品5000g，加入溫度85°C左右的蒸餾水lOOOmL，于常壓， 溫度85°C，浸泡30min，提取兩次，將提取液合并濃縮至500mL(此浸泡濃縮液lmL相當(dāng)于lg 樣品)。
[0063] 1. 2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及環(huán)境：SPF級(jí)昆明種小鼠、SD大鼠和飼料由長(zhǎng)沙市開福區(qū)東創(chuàng)實(shí)驗(yàn) 動(dòng)物科技服務(wù)部提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK (湘)2009-0012。飼料由同一單位提供。 實(shí)驗(yàn)環(huán)境為屏障環(huán)境。實(shí)驗(yàn)期間實(shí)驗(yàn)環(huán)境溫度22°C~24°C，濕度52%~58%。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使 用許可證號(hào)為SY)(K (湘）2005-0001號(hào)。
[0064] 1. 3小鼠急性毒性試驗(yàn)：采用最大耐受劑量法，選用體重為18g~22g的昆明種小 鼠20只，雌雄各半。取浸泡濃縮液給小鼠一次性經(jīng)口灌胃，灌胃體積0. 2mL/10g ? bw，劑量 折合為20. 00g/kg Aw。灌胃前禁食16h，灌胃后連續(xù)觀察兩周，記錄中毒表現(xiàn)及死亡情況。
[0065] 1. 4Ames試驗(yàn)：采用經(jīng)鑒定符合要求的鼠傷寒沙門氏菌組氨酸缺陷型TA97、TA98、 TA100、TA102四株菌株進(jìn)行試驗(yàn)。采用多氯聯(lián)苯