一種提高免疫力的蛹蟲草獼猴桃酵素的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物制劑技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種提高免疫力的蛹蟲草獼猴桃酵素的 制作方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 酵素又稱為"酶"，是具有生物催化功能的高分子物質(zhì)。幾乎所有的細(xì)胞活動(dòng)進(jìn)程 都需要酵素的參與?，F(xiàn)代社會(huì)，隨著人們生活節(jié)奏的加快和環(huán)境污染的加劇，人們體內(nèi)酵素 的含量日益減少，進(jìn)而降低了人體免疫力和代謝速率，使人們患病的幾率大增。目前，日常 食品中的酵素含量太低，無法滿足人們的正常需要。為了符合現(xiàn)代人對(duì)營(yíng)養(yǎng)需要的多樣性、 平衡性和易于吸收性，高效的酵素產(chǎn)品的生產(chǎn)迫在眉睫。
[0003] 蛹蟲草具有和冬蟲夏草相似的活性成分和藥理作用，被稱為可人工培養(yǎng)的"冬蟲 夏草"。2009年，蛹蟲草被批準(zhǔn)為新資源食品，且其價(jià)格遠(yuǎn)低于冬蟲夏草，因而越來越受到 廣大消費(fèi)者的青睞。中醫(yī)認(rèn)為，蛹蟲草入肺腎二經(jīng)，既補(bǔ)肺陰，又補(bǔ)腎陽，功能主治為補(bǔ)肺益 腎，止咳化痰?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究其具有細(xì)胞免疫和體液免疫調(diào)節(jié)作用，還具有抗疲勞作用。因 此，若能開發(fā)以蛹蟲草為主要原料的產(chǎn)品，不僅能推動(dòng)蛹蟲草產(chǎn)業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展，更能為廣 大人民群眾的健康帶來福祉。盡管市場(chǎng)上已有蛹蟲草相關(guān)的產(chǎn)品，但市場(chǎng)規(guī)模小，附加值 低，功效不明確，亟需開發(fā)高效的、高附加值的蛹蟲草系列產(chǎn)品。并且，現(xiàn)有的酵素提高免疫 力方面功效差。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種提高免疫力的蛹蟲草獼猴桃酵素的制作方 法。
[0005] 本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的：該方法包括如下步驟： 步驟1 :制備酵母菌種液 種液罐擴(kuò)大培養(yǎng)基：Yro液體培養(yǎng)基，其質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為1%酵母提取物，2%蛋白胨，2%蘋 果糖，2%瓊脂，其余為水，將YPD液體培養(yǎng)基放入0. 5M3種子罐內(nèi)，在115°C下高溫滅菌30-50 分鐘； 無菌操作條件下將1. 5公斤酵母菌干菌粉溶于3倍的無菌水中，形成菌液，將所述的菌 液裝入血清瓶并接種到0. 5M3種子罐，在28-30°C下通入無菌壓縮空氣，通氣量為0. 2-0. 3 立方米/分鐘，培養(yǎng)20-30h，待菌體生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)期末期時(shí)停止培養(yǎng)，重復(fù)上述步驟可制得 所需質(zhì)量的酵母菌液的種液。
[0006] 步驟2.制備乳酸菌種液 種液罐擴(kuò)大培養(yǎng)基：麥芽復(fù)合汁增菌培養(yǎng)基，其10%麥芽汁，0. 5%大豆蛋白胨，0. 5%酵 母膏，1%牛肉膏，0. 2%Κ2ΗΡ04，其余為水，將麥芽復(fù)合汁增菌培養(yǎng)基放入0. 5M3種子罐內(nèi)，在 115°C下高溫滅菌30-50分鐘； 無菌操作條件下將1. 5公斤乳酸菌干菌粉溶于3倍的無菌水中，菌液裝入血清瓶并接 種到0. 5M3種子罐，37°C恒溫靜置培養(yǎng)24-36h，待菌體生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)期末期時(shí)停止培養(yǎng)，可重 復(fù)上述步驟可制得所需乳酸菌的種液； 步驟3.發(fā)酵培養(yǎng) 將質(zhì)量比為1. 3:0. 7:10的獼猴桃、桃和水混合打碎后過濾得到濾液，用所述濾液制成 培養(yǎng)基，在115°C下高溫滅菌30-50分鐘，將所述培養(yǎng)基加入發(fā)酵罐中，然后按質(zhì)量為所述 濾液的5%-10%的接種量接種步驟1制得的酵母菌的種液，在28°C的溫度下培養(yǎng)48h，所述 的發(fā)酵罐的體積為V立方米，通氣量為（0. 4-0. 6)V立方米/分鐘，攪拌轉(zhuǎn)速100-120rpm/ min;然后按質(zhì)量為所述濾液的5%-10%的接種量接種步驟2制得的乳酸菌種液，在37°C的 溫度下繼續(xù)培養(yǎng)5-7d至發(fā)酵結(jié)束，得到發(fā)酵液； 步驟4.離心處理，獲取酵素原液 發(fā)酵液導(dǎo)入離心機(jī)，經(jīng)6000rpm離心lOmin，所得上清液即為酵素原液； 步驟5、向酵素原液加入蟲草多糖提取物，按照酵素原液與蟲草多糖提取物質(zhì)量比為 1000:50，在115°C下高溫滅菌30-50分鐘，進(jìn)行分裝。
[0007] 所述的乳酸菌為嗜熱鏈球菌和雙歧桿菌，其中嗜熱鏈球菌質(zhì)量為1. 2公斤，雙歧 桿菌質(zhì)量為〇. 3公斤。
[0008] 本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明結(jié)合酵素和蛹蟲草的各自特點(diǎn)，將兩者進(jìn)行混合發(fā)酵 或復(fù)配，再配以其它活性成分，創(chuàng)新性地開發(fā)出蛹蟲草酵素產(chǎn)品。該產(chǎn)品集合酵素和蛹蟲草 的功效于一身，具有提高免疫力，增強(qiáng)免疫球蛋白，強(qiáng)身健體的功效。
【具體實(shí)施方式】
[0009] -種減緩老年癡呆的蛹蟲草蘋果酵素的制作方法，包括如下步驟： 步驟1 :制備酵母菌種液 種液罐擴(kuò)大培養(yǎng)基：Yro液體培養(yǎng)基，其質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為1%酵母提取物，2%蛋白胨，2%蘋 果糖，2%瓊脂，其余為水，將YPD液體培養(yǎng)基放入0. 5M3種子罐內(nèi)，在115°C下高溫滅菌30-50 分鐘； 無菌操作條件下將1. 5公斤酵母菌干菌粉溶于3倍的無菌水中，形成菌液，將所述的菌 液裝入血清瓶并接種到0. 5M3種子罐，在28-30°C下通入無菌壓縮空氣，通氣量為0. 2-0. 3 立方米/分鐘，培養(yǎng)20-30h，待菌體生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)期末期時(shí)停止培養(yǎng)，重復(fù)上述步驟可制得 所需質(zhì)量的酵母菌液的種液。
[0010] 步驟2.制備乳酸菌種液 種液罐擴(kuò)大培養(yǎng)基：麥芽復(fù)合汁增菌培養(yǎng)基，其10%麥芽汁，0. 5%大豆蛋白胨，0. 5%酵 母膏，1%牛肉膏，0. 2%Κ2ΗΡ04，其余為水，將麥芽復(fù)合汁增菌培養(yǎng)基放入0. 5M3種子罐內(nèi)，在 115°C下高溫滅菌30-50分鐘； 無菌操作條件下將1. 5公斤乳酸菌干菌粉溶于3倍的無菌水中，菌液裝入血清瓶并接 種到0. 5M3種子罐，37°C恒溫靜置培養(yǎng)24-36h，待菌體生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)期末期時(shí)停止培養(yǎng)，可重 復(fù)上述步驟可制得所需乳酸菌的種液； 步驟3.發(fā)酵培養(yǎng) 將質(zhì)量比為1. 3:0. 7:10的獼猴桃、桃和水混合打碎后過濾得到濾液，用所述濾液制成 培養(yǎng)基，在115°C下高溫滅菌30-50分鐘，將所述培養(yǎng)基加入發(fā)酵罐中，然后按質(zhì)量為所述 濾液的5%-10%的接種量接種步驟1制得的酵母菌的種液，在28°C的溫度下培養(yǎng)48h，所述 的發(fā)酵罐的體積為V立方米，通氣量為（0. 4-0. 6)V立方米/分鐘，攪拌轉(zhuǎn)速100-120rpm/ min;然后按質(zhì)量為所述濾液的5%-10%的接種量接種步驟2制得的乳酸菌種液，在37°C的 溫度下繼續(xù)培養(yǎng)5-7d至發(fā)酵結(jié)束，得到發(fā)酵液； 步驟4.離心處理，獲取酵素原液 發(fā)酵液導(dǎo)入離心機(jī)，經(jīng)6000rpm離心lOmin，所得上清液即為酵素原液； 步驟5、向酵素原液加入蟲草多糖提取物，按照酵素原液與蟲草多糖提取物質(zhì)量比為 1000:50，在115°C下高溫滅菌30-50分鐘，進(jìn)行分裝。
[0011] 所述的乳酸菌為嗜熱鏈球菌和雙歧桿菌，其中嗜熱鏈球菌質(zhì)量為1. 2公斤，雙歧 桿菌質(zhì)量為〇. 3公斤。
[0012] 本發(fā)明提高免疫力通過實(shí)驗(yàn)獲得效果： 采用飼喂法飼喂昆明小鼠，隨機(jī)分為：正常對(duì)照組（純水組），實(shí)施例產(chǎn)品組（蟲草酵 素組），每組10只。蟲草酵素組每天以0.lmL/20g的體積給予蛹蟲草酵素受試物，陰性對(duì) 照組給予等體積純水，連續(xù)30d后，稱重，眼眶取血處死，分取胸腺與脾臟，稱重，按下述公 式分別計(jì)算胸腺指數(shù)與脾臟指數(shù)： 胸腺指數(shù)=胸腺重量（mg)/小鼠重量（g) 脾臟指數(shù)=脾臟重量（mg)/小鼠重量（g) 結(jié)果見表，蟲草酵素組胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)均高于正常對(duì)照組，差異有顯著性（P<〇. 01)，說明產(chǎn)品組的免疫力提升效果顯著。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種提高免疫力的蛹蟲草獼猴桃酵素的制作方法，其特征在于：包括如下步驟： 步驟1 :制備酵母菌種液 種液罐擴(kuò)大培養(yǎng)基：Yro液體培養(yǎng)基，其質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為1%酵母提取物，2%蛋白胨，2%蘋 果糖，2%瓊脂，其余為水，將YPD液體培養(yǎng)基放入0. 5M3種子罐內(nèi)，在115°C下高溫滅菌30-50 分鐘； 無菌操作條件下將1. 5公斤酵母菌干菌粉溶于3倍的無菌水中，形成菌液，將所述的菌 液裝入血清瓶并接種到0. 5M3種子罐，在28-30°C下通入無菌壓縮空氣，通氣量為0. 2-0. 3 立方米/分鐘，培養(yǎng)20-30h，待菌體生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)期末期時(shí)停止培養(yǎng)，重復(fù)上述步驟可制得 所需質(zhì)量的酵母菌液的種液； 步驟2.制備乳酸菌種液 種液罐擴(kuò)大培養(yǎng)基：麥芽復(fù)合汁增菌培養(yǎng)基，其10%麥芽汁，0. 5%大豆蛋白胨，0. 5%酵 母膏，1%牛肉膏，0. 2%Κ2ΗΡ04，其余為水，將麥芽復(fù)合汁增菌培養(yǎng)基放入0. 5M3種子罐內(nèi)，在 115°C下高溫滅菌30-50分鐘； 無菌操作條件下將1. 5公斤乳酸菌干菌粉溶于3倍的無菌水中，菌液裝入血清瓶并接 種到0. 5M3種子罐，37°C恒溫靜置培養(yǎng)24-36h，待菌體生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)期末期時(shí)停止培養(yǎng)，可重 復(fù)上述步驟可制得所需乳酸菌的種液； 步驟3.發(fā)酵培養(yǎng) 將質(zhì)量比為1. 3:0. 7:10的獼猴桃、桃和水混合打碎后過濾得到濾液，用所述濾液制成 培養(yǎng)基，在115°C下高溫滅菌30-50分鐘，將所述培養(yǎng)基加入發(fā)酵罐中，然后按質(zhì)量為所述 濾液的5%-10%的接種量接種步驟1制得的酵母菌的種液，在28°C的溫度下培養(yǎng)48h，所述 的發(fā)酵罐的體積為V立方米，通氣量為（0. 4-0. 6)V立方米/分鐘，攪拌轉(zhuǎn)速100-120rpm/ min;然后按質(zhì)量為所述濾液的5%-10%的接種量接種步驟2制得的乳酸菌種液，在37°C的 溫度下繼續(xù)培養(yǎng)5-7d至發(fā)酵結(jié)束，得到發(fā)酵液； 步驟4.離心處理，獲取酵素原液 發(fā)酵液導(dǎo)入離心機(jī)，經(jīng)6000rpm離心lOmin，所得上清液即為酵素原液； 步驟5、向酵素原液加入蟲草多糖提取物，按照酵素原液與蟲草多糖提取物質(zhì)量比為 1000:50，在115°C下高溫滅菌30-50分鐘，進(jìn)行分裝。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高免疫力的蛹蟲草獼猴桃酵素的制作方法，其特征在于： 所述的乳酸菌為嗜熱鏈球菌和雙歧桿菌，其中嗜熱鏈球菌質(zhì)量為1. 2公斤，雙歧桿菌質(zhì)量 為0. 3公斤。
【專利摘要】一種提高免疫力的蛹蟲草獼猴桃酵素的制作方法，包括如下步驟：步驟1：制備酵母菌種液；步驟2.制備乳酸菌種液；步驟3.發(fā)酵培養(yǎng)；步驟4.離心處理，獲取酵素原液；步驟5、向酵素原液加入蟲草素提取物。本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明結(jié)合酵素和蛹蟲草的各自特點(diǎn)，將兩者進(jìn)行混合發(fā)酵或復(fù)配，再配以其它活性成分，創(chuàng)新性地開發(fā)出蛹蟲草酵素產(chǎn)品。該產(chǎn)品集合酵素和蛹蟲草的功效于一身，具有提高免疫力，增強(qiáng)免疫球蛋白，強(qiáng)身健體的功效。
【IPC分類】A23L33/10, A23L31/00, A23L33/00
【公開號(hào)】CN105361161
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510865242
【發(fā)明人】不公告發(fā)明人
【申請(qǐng)人】沈陽園康天然生物科技有限公司
【公開日】2016年3月2日
【申請(qǐng)日】2015年12月1日