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一種復(fù)合生物技術(shù)制作大豆乳清飲料的方法

文檔序號:9673987閱讀:350來源:國知局
一種復(fù)合生物技術(shù)制作大豆乳清飲料的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于飲品領(lǐng)域;具體涉及一種復(fù)合生物技術(shù)制作大豆乳清飲料的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 近幾年來發(fā)達國家的城市居民為擺脫動物性食品攝入過多引起的"富貴病"而高 度重視大豆食品。隨著大豆產(chǎn)業(yè)的迅速發(fā)展大量的乳清廢水隨之產(chǎn)生,但大豆乳清水多以 廢水形式排掉,每年廢棄的乳清水高達200萬噸,造成極大的資源浪費,并且乳清中BOD高達 5000-8000毫克/升,COD高達18000-20000毫克/升,分別超過了要求排放的標準80毫克/升, 25毫克/升的100多倍,造成極大的環(huán)境污染,以往人們采用厭氧法和耗氧法處理乳清廢水 效果差,耗資大而且其中的有效成分沒有得到利用,并且這樣資源浪費的問題沒有得到解 決。大豆乳清廢水中的大豆低聚糖和異黃酮等生理活性物質(zhì)已經(jīng)受到廣泛關(guān)注,但一直以 來國內(nèi)外對大豆蛋白中的乳清水綜合利用研究的比較少。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 現(xiàn)有技術(shù)中以往此類產(chǎn)品只有單一或兩種菌種做為發(fā)酵劑,發(fā)酵后的大豆乳清飲 料營養(yǎng)單一,且由于發(fā)酵后得酸度和活菌數(shù)都不及酸牛奶,直接影響了大豆乳清飲料的產(chǎn) 品質(zhì)量以及風(fēng)味,為了進一步提高飲料的質(zhì)量和風(fēng)味。就只能進一步添加其他輔料?;蛴贸?濾、膜過濾等方法去除了大豆乳清廢水中大部分低聚糖、蛋白等營養(yǎng)物質(zhì)。
[0004] 為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足,本發(fā)明提供復(fù)合生物技術(shù)研制高附加值功能性大 豆乳清飲料方法。
[0005] 本發(fā)明中一種復(fù)合生物技術(shù)制作大豆乳清飲料的方法是按下述步驟進行的:
[0006] 步驟一、選擇植物乳酸菌、釀酒酵母菌、保加利亞乳桿菌、嗜酸乳桿菌、雙歧桿菌中 三種或者三種以上,分別活化后制成菌懸液,然后混合,得到復(fù)合菌液;
[0007] 步驟二、大豆乳清水經(jīng)過濾筒進行壓濾過濾得到培養(yǎng)液,置于發(fā)酵罐中,所述過濾 筒的過濾器孔徑在2_以內(nèi);
[0008] 步驟三、將復(fù)合菌液以2%~10%接種量在發(fā)酵罐中,在20°C~40°C條件下培養(yǎng) IOh~40h,即得到大豆乳清飲料。
[0009] 步驟一中植物乳酸菌活化方法如下:冷凍干燥菌粉加入1ml經(jīng)殺菌的MRS予以溶解 呈懸浮液,吸取菌液0.1 ml至事先配制好裝有5ml MRS的小試管中,于37°C靜置培養(yǎng)24小時, 取0.1 ml至5ml新鮮的MRS肉湯,于37°C靜置培養(yǎng)5~7h;所述MRS培養(yǎng)基:蛋白陳1 % (質(zhì)量)、 牛肉膏1% (質(zhì)量)、酵母浸粉0.5% (質(zhì)量)、K2PH〇3〇.2% (質(zhì)量)、葡萄糖2% (質(zhì)量)、檸檬酸二 銨0 · 2 % (質(zhì)量)、吐溫800 · Iml、MgS04 · 7H200 · 02 % (質(zhì)量)、MnS〇4H2〇 0 · 005 % (質(zhì)量)和蒸餾 水,pH值6 · 4-6 · 8,115°C滅菌20min。
[0010] 步驟一中釀酒酵母菌活化方法如下:將冰箱保存的種子接入馬鈴薯葡萄糖液體培 養(yǎng)基中,在28°C、120r/min的搖床中振蕩培養(yǎng)24h;馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基:馬鈴薯200g、 鹿糖15~20g、瓊脂20~30g和蒸餾水1000ml。
[0011] 步驟一中保加利亞乳桿菌活化方法如下:應(yīng)用液體培養(yǎng)基對保加利亞乳桿菌菌株 進行培養(yǎng),培養(yǎng)條件為37°C、初始pH值6.2、2 % (質(zhì)量)的接種量IOml體系培養(yǎng)48h;
[0012] 種子液是15%甘油和85%菌液在-80°c條件下保存的菌種,以2% (質(zhì)量)的量接種 于液體MRS中,37°C培養(yǎng)24h的培養(yǎng)液;
[0013] MRS培養(yǎng)基:蛋白陳1 % (質(zhì)量)、牛肉膏1 % (質(zhì)量)、酵母浸粉0.5% (質(zhì)量)、 K2PHO3O · 2 % (質(zhì)量)、葡萄糖2 % (質(zhì)量)、檸檬酸二銨0 · 2 % (質(zhì)量)、吐溫800 · Iml、MgS〇4 · 7H20 0 · 02 % (質(zhì)量)、MnS〇4H20 0 · 005 % (質(zhì)量)和蒸餾水,pH6 · 4-6 · 8,115°C滅菌20min。
[0014] 步驟一中嗜酸乳桿菌活化方法如下:將冷凍干燥保存的供試菌種,使用前按1%接 種量轉(zhuǎn)接至MRS培養(yǎng)基中,37°C厭氧培養(yǎng)24小時,每次使用之前,各菌株均在MRS培養(yǎng)基上轉(zhuǎn) 接兩次(以便菌株活力得到充分恢復(fù));所述MRS培養(yǎng)基:蛋白胨10g、酵母提取物5g、牛肉膏 10g、葡萄糖20g、乙酸鈉5g,檸檬酸二銨2g、吐溫801mL、MgS〇4 · 7H20 0.58g、MnS〇4 · 4H20 0.05g、K2HP〇42g,瓊脂粉17g和水lOOOmL,在121°C、lX105Pa條件下滅菌20min,滅菌前自然 pH 6.12~6.2。
[0015] 步驟一中雙歧桿菌活化活化方法如下:凍干粉菌開封以后,用小牛血清溶解,接種 于TPY固體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)條件為72h,36 ± 1°C,然后挑菌,接種于平板上,培養(yǎng)為72h,36 ± 1 °C,再用PYG液體培養(yǎng)基+菌液+30 %甘油水,-80°C凍存;所述TPY培養(yǎng)基:蛋白胨15. Og、酵母 粉2.0g、葡萄糖20.0g、可溶性淀0.5g、氯化鈉5.0g、5%半胱氨酸10 .OmL、西紅柿浸出液 400.0 mL、吐溫801. OmL、肝提取液80.0 mL、瓊脂20.0 g和蒸餾水520.0 mL,pH7.0;所述PYG液體 培養(yǎng)基:蛋白胨20.0 g、葡萄糖5.0、酵母浸10.0 g、氯化鈉0.08g、半胱氨酸鹽酸鹽0.5g、氯化 鈣0·008g、硫酸鎂0·008g、磷酸氫二鉀0·08g和碳酸氫鈉0·4g,pH值7· 2±0· I(25°C)。
[0016]步驟一中活化后的菌體加入生理鹽水或磷酸緩沖液后,用接種環(huán)刮菌苔,震蕩均 勻得到菌懸液。
[0017] 本發(fā)明的有益效果是:用植物乳酸菌、釀酒酵母菌、保加利亞乳桿菌、嗜酸乳桿菌、 雙歧桿菌進行優(yōu)選復(fù)合發(fā)酵工藝,在大豆乳清水簡單粗過濾去除有毒有害污染物后,直接 投入復(fù)合菌種進行發(fā)酵。達到省時、省事、營養(yǎng)、高效、節(jié)能、環(huán)保的目的。使原料中有效成份 百分百得以利用,大大提高此類產(chǎn)品的作用有效被人體吸收,提高了口感,并且整體制備工 藝簡單,容易操作。
【具體實施方式】
【具體實施方式】 [0018] 一:本實施方式中一種復(fù)合生物技術(shù)制作大豆乳清飲料的方法是按 下述步驟進行的:
[0019] 步驟一、選擇植物乳酸菌、釀酒酵母菌、保加利亞乳桿菌、嗜酸乳桿菌和雙歧桿菌 分別活化后,分別在斜面培養(yǎng)基上的菌體加入生理鹽水或磷酸緩沖液后,用接種環(huán)刮菌苔, 震蕩均勻得到濃度為10 5cFU/ml的菌懸液,然后培養(yǎng)的菌懸液按植物乳酸菌、釀酒酵母菌、 保加利亞乳桿菌、嗜酸乳桿菌、雙歧桿菌質(zhì)量比為2:0.5:1:0.5:0.5的配比混合,得到復(fù)合 菌液;
[0020] 步驟二、大豆乳清水經(jīng)過濾筒進行壓濾過濾得到培養(yǎng)液,置于發(fā)酵罐中,所述過濾 筒的過濾器孔徑在2_以內(nèi);
[0021] 步驟三、將復(fù)合菌液以5%接種量在發(fā)酵罐中,在37°C條件下培養(yǎng)36h,即得到大豆 乳清飲料。
[0022] 步驟一中植物乳酸菌活化方法如下:冷凍干燥菌粉加入1ml經(jīng)殺菌的MRS予以溶解 呈懸浮液,吸取菌液0.1 ml至事先配制好裝有5ml MRS的小試管中,于37°C靜置培養(yǎng)24小時, 取0.1 ml至5ml新鮮的MRS肉湯,于37°C靜置培養(yǎng)5~7h;所述MRS培養(yǎng)基:蛋白陳1 % (質(zhì)量)、 牛肉膏1% (質(zhì)量)、酵母浸粉0.5% (質(zhì)量)、K2PH〇3〇.2% (質(zhì)量)、葡萄糖2% (質(zhì)量)、檸檬酸二 銨0 · 2 % (質(zhì)量)、吐溫800 · Iml、MgS04 · 7H200 · 02 % (質(zhì)量)、MnS〇4H20 0 · 005 % (質(zhì)量)和蒸餾 水,pH值6 · 4-6 · 8,115°C滅菌20min。
[0023] 步驟一中釀酒酵母菌活化方法如下:將冰箱保存的種子接入馬鈴薯葡萄糖液體培 養(yǎng)基中,在28°C、120r/min的搖床中振蕩培養(yǎng)24h;馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基:馬鈴薯200g、 鹿糖15~20g、瓊脂20~30g和蒸餾水1000ml。
[0024] 步驟一中保加利亞乳桿菌活化方法如下:應(yīng)用液體培養(yǎng)基對保加利亞乳桿菌菌株 進行培養(yǎng),培養(yǎng)條件為37°C、初始pH值6.2、2 %的接種量(種子液:15 %甘油和85 %菌液一 80 °C保存的菌種,以2% (質(zhì)量)的量接種于液體MRS中,37°C培養(yǎng)24h的培養(yǎng)液HOml體系培養(yǎng) 48h;
[0025] MRS培養(yǎng)基:蛋白陳1%(質(zhì)量)、牛肉膏1%(質(zhì)量)、酵母浸粉0 · 5 % (質(zhì)量)、 K2PHO3O · 2 % (質(zhì)量)、葡萄糖2 % (質(zhì)量)、檸檬酸二銨0 · 2 % (質(zhì)量)、吐溫800 · Iml、MgS〇4 · 7H20 0 · 02 % (質(zhì)量)、MnS〇4H20 0 · 005 % (質(zhì)量)和蒸餾水,pH6 · 4-6 · 8,115°C滅菌20min。步驟 一中保加利亞乳桿
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