用布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于混菌固態(tài)發(fā)酵飼料制備技術(shù)領(lǐng)域，具體是用布氏乳桿菌、黑曲霉和植 物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木馨渣的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 木馨渣是木馨加工淀粉和酒精后的副產(chǎn)物，其干物質(zhì)主要成分為淀粉、纖維素及 少量的蛋白質(zhì)，碳水化合物含量高，礦物質(zhì)、微量元素和氨基酸含量豐富，而且價(jià)格低廉，是 一種有開(kāi)發(fā)潛力的新型飼料資源，但木馨渣在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中存在水分含量高(新鮮木馨 渣水分含量為80~90%)不易膽存，蛋白質(zhì)含量低及適口性差等問(wèn)題，成為制約木馨渣發(fā)展 的瓶頸，導(dǎo)致木馨渣一直沒(méi)有得到很好的利用，目前，木馨渣主要是用作生產(chǎn)酒精、飼料、栽 培平茹等方面，使用量有限，絕大部分的木馨渣被丟棄，不僅造成資源浪費(fèi)，而且對(duì)環(huán)境造 成嚴(yán)重的污染。應(yīng)用微生物混合固態(tài)發(fā)酵木馨渣，通過(guò)微生物和相關(guān)化學(xué)物質(zhì)發(fā)生一系列 的復(fù)雜的生物化學(xué)反應(yīng)，不僅可W降解木馨渣中的纖維含量，改善其適口性，還可W全面的 提高木馨渣的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，從而解決上述問(wèn)題。應(yīng)用微生物發(fā)酵木馨渣，菌株的選擇非常關(guān) 鍵，許多研究表明，混合菌種發(fā)酵木馨渣比單一菌種效果好，目前菌種的選擇由單一菌種向 混合菌種方向發(fā)展。目前研究的微生物品種及搭配非常有限，布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳 桿菌=菌組合處理木馨渣的研究基本未見(jiàn)報(bào)道。本發(fā)明為探索最佳木馨渣發(fā)酵條件，改善 木馨渣品質(zhì)，提高其適口性，為木馨渣在飼料行業(yè)中的更廣泛的應(yīng)用打下基礎(chǔ)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是提供用布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木馨渣的 方法。
[0004] 本發(fā)明應(yīng)用的微生物菌種來(lái)源：黑曲霉（Aspergillus niger);植物乳桿菌 (Xactobacillus plantarum);布氏乳桿菌(XactobasiIlus buchneri)均購(gòu)買(mǎi)于中國(guó)工業(yè) 微生物菌種保藏管理中屯、。
[0005] 本發(fā)明應(yīng)用的尿素和紅糖來(lái)源:尿素和紅糖均為市購(gòu)。
[0006] 本發(fā)明應(yīng)用的培養(yǎng)基:MRS的液體培養(yǎng)基用于植物乳桿菌、布氏乳桿菌活化和菌液 培養(yǎng);MRS固體培養(yǎng)基用于植物乳桿菌和布氏乳桿菌涂板計(jì)數(shù);M邸液體培養(yǎng)基用于黑曲霉 的活化和菌液培養(yǎng);M邸固體培養(yǎng)基用于黑曲霉涂板計(jì)數(shù)；
[0007] 試驗(yàn)菌種的活化及擴(kuò)培：安飯管凍干菌種^活化^按5%添加量接種到相應(yīng)的液 體培養(yǎng)基中，黑曲霉的培養(yǎng)條件為溫度30°C，150rpm搖床培養(yǎng)，植物乳桿菌和布氏乳桿菌的 培養(yǎng)條件為溫度37°C，靜態(tài)培養(yǎng)。
[000引接種液計(jì)數(shù):采用涂板對(duì)各菌種接種液進(jìn)行計(jì)數(shù)。
[0009] 用布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木馨渣的方法，包括如下步驟：
[0010] (1)將新鮮木馨渣在65°C下烘干后作為發(fā)酵原料；
[0011] 間向經(jīng)過(guò)步驟(1)處理過(guò)的木馨渣中按木馨渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分比添加 I %的尿素 或者添加1%尿素+0.6%紅糖，添加尿素作為氮源，添加紅糖用于調(diào)節(jié)木馨渣的可溶性糖濃 度；
[0012] 間將布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌的菌液Wl: 1:1的體積比混合，W木馨渣干 物質(zhì)5%的量進(jìn)行接種，使每克干木馨渣中布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌的活菌含量分 別達(dá)到 1.3 X l〇5cfu/g，9.7 X l〇2cfu/g，2.2 X l〇5cfu/g;
[0013] (4)將步驟間添加了布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌混合制劑的木馨渣，用生理 鹽水調(diào)制含水量為60~65%，混合均勻，裝入聚乙締薄膜袋中，用真空累抽出袋內(nèi)的空氣至 真空狀態(tài)，密封，置于室溫下膽藏；
[0014] 間將步驟(4)包裝好的木馨渣在室溫下固態(tài)發(fā)酵10天，得到木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物。
[0015] 除另有說(shuō)明外，本發(fā)明所述的百分比均為質(zhì)量百分比，各組分含量百分?jǐn)?shù)之和為 100%。
[0016] 本發(fā)明的有益效果：
[0017] 1.經(jīng)產(chǎn)品檢測(cè)，采用布氏乳桿菌+黑曲霉+植物乳桿菌+尿素固態(tài)發(fā)酵木馨渣后，得 到木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物中性洗涂纖維NDF含量由24.11 %降低到19.48%，酸性洗涂纖維ADF含量 由20.00%降低到15.77%;采用布氏乳桿菌+黑曲霉+植物乳桿菌+尿素+紅糖固態(tài)發(fā)酵木馨 渣后，得到木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物中性洗涂纖維NDF含量由24.11 %降低到19.42%，酸性洗涂纖維 (ADF)含量由20.00 %降低到15.66 %。通過(guò)在木馨渣固體發(fā)酵過(guò)程中添加布氏乳桿菌、黑曲 霉和植物乳桿菌能夠有效改善木馨渣品質(zhì)。
[0018] 2.制備方法簡(jiǎn)單，便于操作，原料豐富易得。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步說(shuō)明。
[0020] W下實(shí)施例僅為本發(fā)明示意性的【具體實(shí)施方式】，并非用W限定本發(fā)明的范圍。任 何本領(lǐng)域的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明的構(gòu)思和原則的前提下所作的等同變化、修改與結(jié) 合，均應(yīng)屬于本發(fā)明保護(hù)范圍。
[0021] 實(shí)施例1
[0022] 本發(fā)明所述的用布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木馨渣的方法的 一個(gè)實(shí)例，操作步驟如下：
[0023] (1)將新鮮木馨渣在65°C下烘干后作為發(fā)酵原料；
[0024] 間向經(jīng)過(guò)步驟(1)處理過(guò)的木馨渣中按木馨渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分比添加1 %的尿素 作為氮源；
[0025] 間將布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌的菌液Wl: 1:1的體積比混合，W木馨渣干 物質(zhì)5%的量進(jìn)行接種，使每克干木馨渣中布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌的活菌含量分 別達(dá)到 1.3 X l〇5cfu/g，9.7 X l〇2cfu/g，2.2 X l〇5cfu/g;
[0026] (4)將步驟間添加了布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌混合制劑的木馨渣，用生理 鹽水調(diào)制含水量為60~65%，混合均勻，裝入聚乙締薄膜袋中，用真空累抽出袋內(nèi)的空氣至 真空狀態(tài)，密封，置于室溫下膽藏；
[0027] 間將步驟(4)包裝好的木馨渣在室溫下固態(tài)發(fā)酵10天，得到木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物。
[002引應(yīng)用ANKOM 2000纖維測(cè)定儀測(cè)定木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物中的DNF和ADF含量，產(chǎn)品檢測(cè)結(jié) 果為：
[0029] 采用布氏乳桿菌+黑曲霉+植物乳桿菌+尿素固態(tài)發(fā)酵木馨渣后，得到木馨渣發(fā)酵 產(chǎn)物中性洗涂纖維NDF含量由24.11 %降低到19.48 %，酸性洗涂纖維ADF含量由20.00 %降 低到15.77%。
[0030] 實(shí)施例2
[0031] 本發(fā)明所述的用布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木馨渣的方法的 另一個(gè)實(shí)例，操作步驟如下：
[0032] W新鮮木馨渣在65°C下烘干后作為發(fā)酵原料；
[0033] 間向經(jīng)過(guò)步驟(1)處理過(guò)的木馨渣中按木馨渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分比添加1 %的尿素 +0.6 %紅糖，添加尿素作為氮源，添加紅糖用于調(diào)節(jié)木馨渣的可溶性糖濃度。
[0034] 間將布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌的菌液Wl: 1:1的體積比混合，W木馨渣干 物質(zhì)5%的量進(jìn)行接種，使每克干木馨渣中布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌的活菌含量分 別達(dá)到 1.3 X l〇5cfu/g，9.7 X l〇2cfu/g，2.2 X l〇5cfu/g。
[0035] (4)將步驟間添加了布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌混合制劑的木馨渣，用生理 鹽水調(diào)制含水量為60~65%，混合均勻，裝入聚乙締薄膜袋中，用真空累抽出袋內(nèi)的空氣至 真空狀態(tài)，密封，置于室溫下膽藏；
[0036] 間將步驟(4)包裝好的木馨渣在室溫下固態(tài)發(fā)酵10天，得到木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物。
[0037] 應(yīng)用ANKOM 2000纖維測(cè)定儀測(cè)定木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物中的DNF和ADF含量；應(yīng)用 F0SS8400凱氏定氮儀測(cè)定木馨渣發(fā)酵產(chǎn)物中的粗蛋白質(zhì)含量，產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果為：
[0038] 采用布氏乳桿菌+黑曲霉+植物乳桿菌+尿素+紅糖固態(tài)發(fā)酵木馨渣后，得到木馨渣 發(fā)酵產(chǎn)物中性洗涂纖維NDF含量由24.11 %降低到19.42 %，酸性洗涂纖維ADF含量由 20.00% 降低到15.66%。
[0039] 不同微生物添加劑對(duì)木馨渣營(yíng)養(yǎng)成分的影響見(jiàn)表1。
[0040] 表1不同微生物添加劑對(duì)木馨渣營(yíng)養(yǎng)成分的影響(風(fēng)干基礎(chǔ)）
[0042]注：同列無(wú)字母或肩標(biāo)相同字母表示差異不顯著(P〉0.05)，不同小寫(xiě)字母表示差 異顯著(P〈〇. 05)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.用布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法，其特征在于，操作 步驟如下： ⑴將新鮮木薯渣在65°c下烘干后作為發(fā)酵原料； ⑵向經(jīng)過(guò)步驟⑴處理過(guò)的木薯渣中按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分比添加1%的尿素或者 添加1 %尿素+0.6 %紅糖，添加尿素作為氮源，添加紅糖用于調(diào)節(jié)木薯渣的可溶性糖濃度； (3)將布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌的菌液以1:1:1的體積比混合，以木薯渣干物質(zhì) 5%的量進(jìn)行接種，使每克干木薯渣中布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌的活菌含量分別達(dá) 至lj 1 · 3 X 105cfu/g，9 · 7 X 102cfu/g，2 · 2 X 105cfu/g; ⑷將步驟⑶添加了布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌混合制劑的木薯渣，用生理鹽水 調(diào)制含水量為60~65%，混合均勻，裝入聚乙烯薄膜袋中，用真空栗抽出袋內(nèi)的空氣至真空 狀態(tài)，密封，置于室溫下貯藏； (5)將步驟⑷包裝好的木薯渣在室溫下固態(tài)發(fā)酵10天，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物。
【專(zhuān)利摘要】用布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法，以木薯渣為發(fā)酵原料，將布氏乳桿菌、黑曲霉和植物乳桿菌的菌液以1:1:1的體積比混合，以木薯渣干物質(zhì)5％的量進(jìn)行接種，按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分比添加0.6％的紅糖調(diào)節(jié)木薯渣的可溶性糖濃度，按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分比添加1％的尿素作為氮源，用生理鹽水調(diào)制含水量為60～65％，混合均勻，裝入聚乙烯薄膜袋中，用真空泵抽出袋內(nèi)的空氣至真空狀態(tài)，密封，置于室溫下貯藏發(fā)酵10天。經(jīng)過(guò)發(fā)酵處理后，能顯著降低木薯渣的中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量，能有效改善木薯渣品質(zhì)。
【IPC分類(lèi)】A23K10/12
【公開(kāi)號(hào)】CN105494918
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510953727
【發(fā)明人】唐慶鳳, 鄒彩霞, 彭開(kāi)屏, 韋升菊, 梁辛, 楊炳壯, 梁賢威, 黃鋒, 李麗莉, 林波, 楊承劍, 彭麗娟
【申請(qǐng)人】廣西壯族自治區(qū)水牛研究所
【公開(kāi)日】2016年4月20日
【申請(qǐng)日】2015年12月18日