一種含中藥的大豆蛋白活性肽飼料添加劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明屬飼料生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及一種含中藥的大豆蛋白活性膚飼料添加劑 及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著現(xiàn)代集約化畜牧業(yè)的發(fā)展，動(dòng)物感染各類疫病的危險(xiǎn)性逐年增大，抗生素類 飼料添加劑在預(yù)防疾病發(fā)生和促進(jìn)動(dòng)物生長等方面發(fā)揮了巨大的作用，同時(shí)其負(fù)面效應(yīng) (耐藥性、抗生素殘留等)卻日趨嚴(yán)重，給人們的畜產(chǎn)品安全及經(jīng)濟(jì)發(fā)展造成了極大的危害。 動(dòng)物長期使用抗生素導(dǎo)致細(xì)菌產(chǎn)生抗藥性，大量的抗生素被攝入到體內(nèi)，隨著血液循環(huán)進(jìn) 入到各組織器官，動(dòng)物機(jī)體的免疫能力會(huì)逐漸消弱。抗生素在作用于病原菌的同時(shí)，也會(huì)殺 死動(dòng)物體內(nèi)的有益菌，菌群失調(diào)，體外的有害菌趁虛而入，造成外源性的感染。畜牧業(yè)急需 開發(fā)能取代傳統(tǒng)抗生素的無殘留、無抗藥性、安全無污染的新一代綠色飼料添加劑。功能性 活性膚獨(dú)特的理化性質(zhì)和天然免疫源性使其成為此類研究物質(zhì)的首選?；钚阅w不僅具有廣 譜抗菌和多項(xiàng)免疫調(diào)節(jié)功能，同時(shí)，作為宿主自身的天然免疫調(diào)節(jié)分子，還具有安全無殘 留、不產(chǎn)生抗藥性、與其它抗菌物質(zhì)具有協(xié)同作用等特性，生物活性膚的出現(xiàn)為開發(fā)新型綠 色飼料添加劑開辟了一個(gè)新途徑?；钚阅w不僅易消化吸收，還具有促進(jìn)免疫、調(diào)節(jié)激素、抗 菌、抗病毒等作用。此外活性膚還有較好的酸、熱穩(wěn)定性，水溶性及粘度隨濃度變化遲純等 優(yōu)點(diǎn)，易于作為功能因子添加到各種飼料中。近年來的許多研究表明，中草藥飼料添加劑能 促進(jìn)畜禽生長，抑制病原菌，增強(qiáng)動(dòng)物體免疫功能，提高抗病力，但由于其植物細(xì)胞壁的阻 礙作用，它的大量有效成分難W釋放出來，導(dǎo)致其藥效慢，使用劑量大。中草藥經(jīng)過微生物 發(fā)酵后，其有效成分被充分釋放，使其更具生物活性和療效，且具有"安全、綠色、無殘留"等 特性。如果利用有益微生物通過發(fā)酵中草藥而制得集"中草藥、酶制劑、益生素"與一體的產(chǎn) 品，將會(huì)更有力地推動(dòng)畜牧業(yè)的健康發(fā)展。因此，利用運(yùn)些廉價(jià)的植物蛋白和中草藥開發(fā)具 有高附加值的生物活性膚飼料添加劑產(chǎn)品，具有廣闊的市場發(fā)展前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明提供一種含中藥的大豆蛋白活性膚飼料添加劑，及該飼料添加劑的制備方 法。
[0004] 本發(fā)明的一種含中藥的大豆蛋白活性膚飼料添加劑，其原料按重量百分比分別 為:黃巧2-3 %，馬齒寬3-5%，靈芝1-2%，蒲公英3-5%，金銀花1-2%，大豆蛋白粉80.4-88.7%，乳酸菌1-2%，蛋白酶0.1-0.2%，纖維素酶0.1-0.2%，木聚糖酶0.1-0.2%。
[0005] -種含中藥的大豆蛋白活性膚飼料添加劑的制備方法，包括下列步驟：
[0006] 1.確定原料，具體為:大豆蛋白粉、黃巧、馬齒寬、靈芝、蒲公英、金銀花、乳酸菌、蛋 白酶、纖維素酶、木聚糖酶；
[0007] 2.將步驟1中的大豆蛋白粉粉碎至40目；
[000引3.將步驟1中的黃巧、馬齒寬、靈芝、蒲公英、金銀花分別粉碎至60目；
[0009] 4.將步驟I中的乳酸菌、蛋白酶、纖維素酶、木聚糖酶按10:1:1:1的比例混合物溶 解到40倍水中，形成溶解液；
[0010] 5.根據(jù)實(shí)際需要，對經(jīng)步驟2和3處理的大豆蛋白粉、黃巧、馬齒寬、靈芝、蒲公英、 金銀花分別進(jìn)行稱量；
[0011] 6.將步驟5稱量后的原料按對添加劑重量百分比的要求選取，并充分?jǐn)埌璩苫旌?物；
[0012] 7.將步驟4所得的溶解液倒入步驟6所得的混合物中，攬拌均勻，裝入發(fā)酵袋中，密 封，室溫發(fā)酵5-7天；
[0013] 8.將步驟7中發(fā)酵好的原料轉(zhuǎn)到干燥機(jī)中，在溫度55-60°C的條件下進(jìn)行干燥，使 物料水份降到14%，冷卻、稱重、包裝。
[0014] 本發(fā)明具有W下優(yōu)點(diǎn)：
[0015] 1. W大豆蛋白粉和中草藥為原料，不僅具有小分子飼料營養(yǎng)的功能，還具有中藥 保健、防病的功能。
[0016] 2.活菌和酶制劑共同發(fā)酵，使大豆蛋白粉和中藥中成分經(jīng)過酶菌轉(zhuǎn)化，由大分子 物質(zhì)變成小分子物質(zhì)，易被動(dòng)物腸道吸收。
[0017] 3.不含任何對畜禽有害的物質(zhì)，在畜禽飼養(yǎng)中使用，作用效果明顯，具有無毒副作 用、綠色、安全等特點(diǎn)，特別適合幼齡動(dòng)物使用。
[0018] 4.具有促生長、抗氧化、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、降低腹瀉率等作用，進(jìn)而提高畜禽日增 重和飼料利用率。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 通過W下實(shí)施例進(jìn)一步舉例描述本發(fā)明。
[0020] 實(shí)施例1
[0021] 添加劑原料的名稱和重量百分比為：黃巧2.5%，馬齒寬4%，靈芝1.5%，蒲公英 3.55%，金銀花1.5%，大豆蛋白粉85%，乳酸菌1.5%，蛋白酶0.15%，纖維素酶0.15%，木 聚糖酶0.15 %。
[0022] 本實(shí)施例的含中藥的大豆蛋白活性膚飼料添加劑的制備方法，包括下列步驟：
[0023] 1.確定原料，具體為:大豆蛋白粉、黃巧、馬齒寬、靈芝、蒲公英、金銀花、乳酸菌、蛋 白酶、纖維素酶、木聚糖酶；
[0024] 2.將步驟1中的大豆蛋白粉粉碎至40目；
[0025] 3.將步驟1中的黃巧、馬齒寬、靈芝、蒲公英、金銀花分別粉碎至60目；
[0026] 4.將步驟1中的乳酸菌、蛋白酶、纖維素酶、木聚糖酶按10:1:1:1的比例混合物溶 解到40倍水中，形成溶解液；
[0027] 5.根據(jù)實(shí)際需要，對經(jīng)步驟2和3處理的大豆蛋白粉、黃巧、馬齒寬、靈芝、蒲公英、 金銀花分別進(jìn)行稱量；
[0028] 6.將步驟5稱量后的原料按重量百分比選取，并充分?jǐn)埌璩苫旌衔铮?br>[0029] 7.將步驟4所得的溶解液倒入步驟6所得的混合物中，攬拌均勻，裝入發(fā)酵袋中，密 封，室溫發(fā)酵5-7天；
[0030] 8.將步驟7中發(fā)酵好的原料轉(zhuǎn)到干燥機(jī)中，在溫度55-60°C的條件下進(jìn)行干燥，使 物料水份降到14%，冷卻、稱重、包裝。
[0031] 實(shí)施例2
[0032] 添加劑原料的名稱和重量百分比為:黃巧2%，馬齒寬3%，靈芝1%，蒲公英3%，金 銀花1 %，大豆蛋白粉88.7%，乳酸菌1 %，蛋白酶0.1 %，纖維素酶0.1 %，木聚糖酶0.1 %。
[0033] 制備方法與實(shí)施例1的相同。
[0034] 實(shí)施例3
[0035] 添加劑原料的名稱和重量百分比為:黃巧3%，馬齒寬5%，靈芝2%，蒲公英5%，金 銀花％ 2，大豆蛋白粉80.4%，乳酸菌2%，蛋白酶0.2%，纖維素酶0.2%，木聚糖酶0.2%。
[0036] 制備方法與實(shí)施例1的相同。
[0037] W下試驗(yàn)為表明本發(fā)明的積極效果：
[0038] -、本發(fā)明對小白鼠生長、日糧營養(yǎng)物質(zhì)消化率、血液抗氧化指標(biāo)和腸道菌群的影 響
[0039] 1.材料與方法
[0040] 1.1試驗(yàn)材料與方法
[0041] 60只昆明系小鼠，按體重相近原則隨機(jī)分為4個(gè)處理組，每組15只，設(shè)3個(gè)重復(fù)。1組 飼喂普通日糧，另外3組分別在普通日糧中添加1%的實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3的添加劑。
[0042] 將各組小鼠置于溫度20-25°C，濕度55-65%的實(shí)驗(yàn)室。自然光照，室內(nèi)通風(fēng)良好， 小鼠自由采食，自由飲水。預(yù)飼1周后開始正式試驗(yàn)，試驗(yàn)期4周。飼養(yǎng)4周后，與次日早晨8: 00,摘除眼球取血于eppdof管中，待析出血清時(shí)，于3500;r/min離屯、15min，上清夜分裝于管 中，然后封口置于-20°C低溫冰箱中保存，然后將試驗(yàn)鼠斷頸處死，迅速解剖，取出胃中和回 腸中食糜放入液氮中冷凍保存。無菌條件下，從盲腸中刮取全部內(nèi)容物，加入15%的甘油， 迅速放入液氮中，然后轉(zhuǎn)移到-80°C中保存，備測。
[00創(chuàng) 1.2測定指標(biāo)
[0044] 1.2.1生長性能
[0045] 預(yù)飼7天，試驗(yàn)期28天，每天記錄投料量，每周稱體重1次，同時(shí)，稱量剩料量，計(jì)算 日增重、采食量。
[0046] 1.2.2血液抗氧化指標(biāo)
[0047] 總抗氧化力、丙二醒、總超氧化物歧化酶:采用試劑盒(南京建成生物工程研究所 生產(chǎn)）。
[004引1.2.3消化酶測定
[0049] 1.2.3.1 胃蛋白酶
[0050] 準(zhǔn)確稱取胃中食糜的重量，按重量體積比加2倍體積的勻漿介質(zhì)抽提，2500轉(zhuǎn)/分 離屯、10分鐘，取上清即10%的勻漿。按照南京建成胃蛋白酶測定試劑盒說明書進(jìn)行操作。
[0051] 1.2.3.2 膜蛋白酶
[0052] 取完全解凍的回腸食糜，將準(zhǔn)備放置食糜的空管稱重(Wl)，然后裝上食糜后再稱 重(W2)，然后計(jì)算兩次的重量差即食糜的重量。按照重量體積比1:9(食糜：勻漿介質(zhì)）加入 勻漿介質(zhì)，在冰浴條件下，充分勻漿，所制得的懸浮液U2500轉(zhuǎn)/分，4°C離屯、10分鐘，上清即 為10%的勻漿，待用。按照南京建成膜蛋白酶測定試劑盒說明書進(jìn)行測定。
[0053] 1.2.3.3 膜脂肪酶
[0054] 準(zhǔn)確稱取一定量的食糜，按照重量體積比1:4(g:ml)的比例加入生理鹽水，冰浴中 進(jìn)行勻漿，然后2500轉(zhuǎn)/分離屯、10分鐘，取上清，分成兩份，一份測定膜脂肪酶，按照南京建 成膜脂肪酶測定試劑盒說明書進(jìn)行操作。另一份測定膜淀粉酶活性。
[0055] 1.2.3.4 膜淀粉酶
[0056] 膜淀粉酶按照南京建成膜脂肪酶測定試劑盒說明書進(jìn)行測定。
[0化7] 1.2.4腸道菌群
[005引用無菌生理鹽水進(jìn)行10-3-10-6倍稀釋。將不同稀釋度的0.1 mL稀釋液涂布于各種 鑒別培養(yǎng)基上。大腸桿菌接種于麥康凱培養(yǎng)基中，37°C有氧培養(yǎng)2地后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。乳酸 菌和雙歧桿菌分別接種于LBS和BS培養(yǎng)基中，37°C厭氧培養(yǎng)4她后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。
[0059] 1.2.5臟器指數(shù)
[0060] 試驗(yàn)期末稱小鼠活體重，分離內(nèi)臟器官稱重，并計(jì)算臟器指數(shù)。
[0062] 1.3數(shù)據(jù)處理
[0063] 數(shù)據(jù)處理與分析采用SPSSl 1.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，差異顯著者用LS的去進(jìn)行 多重比較，結(jié)果W平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
[0064] 2.結(jié)果與分析
[0065] 2.1本發(fā)明對試驗(yàn)鼠生長性能的影響
[0066] 表1本發(fā)明對試驗(yàn)小鼠日采食量的影響(g)
[0068] 同列數(shù)據(jù)肩注不同小寫字母者表示差異顯著（P<0.05)肩注不同小寫字母者表示 差異極顯著(P<〇.01)，下表同。
[0069] 由表1可W看出，與對照組相比，使用實(shí)施