酶解杜仲葉制備杜仲保健藥粉的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明與天然藥物有關(guān)，也與高分子物質(zhì)的處理工藝有關(guān)，具體而言，涉及用酶解杜仲葉制備杜仲保健藥粉。
技術(shù)背景
[0002]杜仲科植物杜仲(Eucommia ulmoides)的樹皮是一種名貴中藥材，中國(guó)第一部傳統(tǒng)中醫(yī)藥珍貴書籍《神農(nóng)本草經(jīng)》中將杜仲均列為上品中藥，李時(shí)珍的《本草綱目》也把杜仲列為珍貴中藥，幾千年的中醫(yī)藥實(shí)踐證明杜仲是滋補(bǔ)藥材，歸肝、腎經(jīng)具補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、降血壓、安胎等諸多功效。中醫(yī)藥書籍記載，杜仲謂其“主治腰膝痛，補(bǔ)中，益精氣，堅(jiān)筋骨，除陰下癢濕，小便余瀝。久服，輕身耐老”；“凡下焦之慮，非杜仲不補(bǔ)；下焦之濕，非杜仲不利;足脛之酸，非杜仲不去;腰膝之痛，非杜仲不除”?，F(xiàn)代醫(yī)藥的研究證明杜仲確有多種功能和功效:⑴杜仲是世界上最高品質(zhì)的天然降壓藥物(美國(guó)哈佛大學(xué)胡秀英教授)；⑵杜仲是世界上四大抗衰老藥物之一(日本教授高橋周七);(3)杜仲是有效無(wú)毒副作用的絕佳減肥飲品；⑷抗疲勞作用;(5)增強(qiáng)機(jī)體免疫功能;(6)安神、促進(jìn)睡眠;(7)壯陽(yáng)作用、調(diào)節(jié)雌性激素；
(8)具有解毒、抗腫瘤活性。
[0003]近年來，健康問題日益為人們所關(guān)注。隨著對(duì)杜仲的深入研究和藥物成分提取的研究，人們?cè)谘芯慷胖倌z提取的同時(shí)，也開發(fā)了一些與杜仲相關(guān)的保健藥品，例如中國(guó)專利申請(qǐng)件200410070200.0號(hào)《強(qiáng)力天麻杜仲軟膠囊及其制備工藝》、201410499693.3號(hào)《一種杜仲精粉、杜仲多糖及杜仲膠聯(lián)產(chǎn)提取分離方法》、201410601104.8號(hào)《一種杜仲灸療制品及其制備方法》等。但這些專利技術(shù)對(duì)于人們健康的效果尚未得到充分證實(shí)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]研究證明，杜仲葉與杜仲皮的化學(xué)成分和藥理作用極為相似，且杜仲落葉植物的特性為杜仲葉的開發(fā)利用提供了堅(jiān)實(shí)的物質(zhì)基礎(chǔ)。明朝李時(shí)珍著的《本草綱目》中就有關(guān)于杜仲“初生嫩葉及花實(shí)可用作藥用”的記載。
[0005]本發(fā)明旨在提供一種酶解杜仲葉制備杜仲保健藥粉的方法，既能完整提取杜仲葉中的有效成分，又不會(huì)破壞杜仲膠的結(jié)構(gòu)，為人們的身體健康。服務(wù)，也可同時(shí)制取杜仲膠。
[0006]發(fā)明人提供的酶解杜仲葉制備杜仲保健藥粉的方法是以杜仲葉為基料，經(jīng)多次酶解制備杜仲保健藥粉;具體方法包括:
(1)制備杜仲葉基料
取經(jīng)過篩選的杜仲葉用風(fēng)淋風(fēng)選吹除雜質(zhì)異物，經(jīng)過揉爛或碾壓折斷且保持原大片結(jié)構(gòu)，分裝至3只100ml三角瓶中或送入酶解罐中；
(2)用角質(zhì)酶去除杜仲葉碎片表面的角質(zhì)層
分別在每只三角瓶中添加角質(zhì)酶液，沒過揉爛的杜仲葉片，置水浴搖床中反應(yīng);反應(yīng)后收集酶解液，用快速濾紙過濾，濾渣返回至三角瓶中，收集清液，并取樣測(cè)紫外和色譜;將過濾得到的角質(zhì)酶酶解液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中真空濃縮，添加無(wú)水乙醇至終濃度為75%?80%。添加乙醇后酶解液會(huì)出現(xiàn)部分沉淀，取上清液負(fù)載至環(huán)糊精上，沉淀另行收集；
(3)用蛋白酶去除蛋白質(zhì)組分
稱取蛋白質(zhì)酶4.5g于500mL燒杯中，用食用級(jí)梓檬酸和梓檬酸鈉配成pH緩沖液，分3次溶解酶制劑上的蛋白酶，收集上層清液，混合后，平均加注于三角瓶中；在最適PH條件下在搖床上酶解反應(yīng)，反應(yīng)后收集3瓶的酶解液，合并酶解液，過濾，取樣測(cè)紫外和色譜，濾渣返回至三角瓶中；接著將酶解液濾液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中真空濃縮，添加無(wú)水乙醇至終濃度為75%?80%。添加乙醇后酶解液會(huì)出現(xiàn)部分沉淀，取上清液負(fù)載至環(huán)糊精上，沉淀另行收集；
(4)用果膠酶酶解與角質(zhì)層和細(xì)胞壁之間連接作用的果膠質(zhì)和部分植物細(xì)胞壁之后，稱取果膠酶于500mL燒杯中，用食品級(jí)檸檬酸和檸檬酸鈉調(diào)節(jié)pH為4.5，分3次溶解酶制劑上的果膠酶，收集上層清液，混合后，平均加注于三角瓶中；在最適PH條件下在搖床上酶解反應(yīng)，反應(yīng)后收集3瓶的酶解液，合并酶解液，過濾，取樣測(cè)紫外和色譜，濾渣返回至三角瓶中；接著將酶解液濾液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中真空濃縮，添加無(wú)水乙醇至終濃度為75%?80%;添加乙醇后酶解液會(huì)出現(xiàn)部分沉淀，取上清液負(fù)載至環(huán)糊精上，沉淀另行收集；
(5)用纖維素酶繼續(xù)酶解植物細(xì)胞組織的細(xì)胞壁，細(xì)胞壁的水解有利于胞內(nèi)藥物成分的溶出
稱取梓檬酸和梓檬酸鈉，溶于1500mL水中，至pH ? 5.0，備用;取纖維素酶于50011^燒杯中，用備用的檸檬酸-鈉溶液分三次溶解酶制劑上的纖維素酶蛋白，收集上層清液，混合后，平均加注于三角瓶中；在最適pH條件下在搖床上酶解反應(yīng)，反應(yīng)后收集3瓶的酶解液，合并酶解液，過濾，取樣測(cè)紫外和色譜;接著將酶解液濾液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中真空濃縮，添加無(wú)水乙醇至終濃度為75%?80%;添加乙醇后酶解液會(huì)出現(xiàn)部分沉淀，取上清液負(fù)載至環(huán)糊精上，沉淀另行收集；
(6)杜仲保健藥粉的制備
稱取50gi3_環(huán)糊精于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，將經(jīng)乙醇處理的角質(zhì)酶酶解液、蛋白酶酶解液、果膠酶酶解液、纖維素酶酶解液上層清液逐量添加到盛有環(huán)糊精的蒸發(fā)瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，最終制得杜仲保健藥粉。
[0007]上述方法的第⑴步中，所述三角瓶每瓶裝杜仲葉碎片50?100g。
[0008]上述方法的第⑵步中，所述添加的角質(zhì)酶液量為500ml;所述水浴搖床中反應(yīng)的溫度是40 °C，反應(yīng)時(shí)間24h;所述收集酶解液的量為每瓶500ml;所述真空濃縮后的量為100ml。
[0009]上述方法的第⑶步中，所述最適pH條件為pH? 4.0;所述酶解反應(yīng)的溫度是451:，反應(yīng)時(shí)間24h;所述真空濃縮的至100ml。
[0010]上述方法的第⑷步中，所述果膠酶的量為4.5g，占物料3%;所述酶解反應(yīng)的溫度是50°C，反應(yīng)時(shí)間16?24h;所述真空濃縮后的量為100ml。
[0011]上述方法的第(5)步中，所述纖維素酶的量為4.5g，占物料3%;所述最適pH條件為pH ? 5.0;所述酶解反應(yīng)的溫度是50 °C，反應(yīng)時(shí)間16h;所述真空濃縮后的量為10ml。
[0012]上述方法的第(6)步中，所述酶解液為500ml;所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干的溫度控制為45 0C，轉(zhuǎn)速控制為4r/min。
本發(fā)明方法制得的杜仲保健藥粉用法是口服，每天2次間隔8h，每次3g，溫開水沖服。
[0013]發(fā)明人指出，本發(fā)明方法不僅可以酶解杜仲葉，對(duì)杜仲樹皮、杜仲果皮均可采用本發(fā)明方法進(jìn)行酶解，制得杜仲保健藥粉。
[0014]經(jīng)多位老中醫(yī)和中老年人服用后獲得了滿意的保健效果。4名65歲左右的老中醫(yī)各自連服7天，均感覺到:腰膝酸軟消失，精神充沛，睡眠極好，血壓穩(wěn)定沒有波動(dòng)。其中有I人白天忘了吃，到晚上11點(diǎn)想起來吃，結(jié)果當(dāng)夜精神十足而失眠，第二天精神仍很好沒有疲倦感覺；而正常服用的人晚上睡得很好，小便減少。4人一致認(rèn)為杜仲精粉的保健效果非常明顯。其他服用了杜仲精粉的人都不斷地持續(xù)來電索要杜仲精粉繼續(xù)服用，他們真切地體會(huì)到調(diào)節(jié)身體功能、提高免疫能力的作用:有流淚現(xiàn)象的服用后不再流淚，而且漸覺身體強(qiáng)壯許多，體能增強(qiáng);有高血壓的婦女服用后，血壓正常平穩(wěn)，原來有月經(jīng)不調(diào)的也恢復(fù)正常；韓國(guó)美容院使用后反饋說用于婦女有明顯的美容效果。
[0015]本發(fā)明用角質(zhì)酶先去除杜仲葉表面的角質(zhì)層，代替了傳統(tǒng)的粉碎碾壓處理，有利于完整的保護(hù)杜仲葉中的有效成分，且不會(huì)破壞杜仲膠的結(jié)構(gòu)，在提取天然物質(zhì)的同時(shí)還可以對(duì)剩余物進(jìn)行杜仲膠的提取，一舉兩得，高效環(huán)保。適用于杜仲葉、杜仲樹皮和杜仲果皮的加工利用。
【具體實(shí)施方式】
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