一種厚殼貽貝多糖口服液的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種厚殼貽貝多糖口服液的制備方法，在去離子水中加入貽貝糖胺聚糖、膳食纖維、海藻多糖、中草藥提取物、復(fù)合維生素、復(fù)合礦物質(zhì)與添加劑灌裝，滅菌得到厚殼貽貝多糖口服液。本發(fā)明的原料來源廣泛，價格低廉；技術(shù)工藝科學(xué)合理，制備方法簡單易行，適合工業(yè)化生產(chǎn)；經(jīng)過本發(fā)明的技術(shù)轉(zhuǎn)化可以有效提高厚殼貽貝的附加值，能夠大幅度提高厚殼貽貝的利用率，對促進水產(chǎn)加工業(yè)的發(fā)展有重要意義；本發(fā)明厚殼貽貝的提取物與中草藥、海藻多糖的結(jié)合，可用于免疫調(diào)節(jié)，抗菌、提高免疫力、抗衰老、易于消化吸收。
【專利說明】
_種厚殼貽貝多糖口服液的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明涉及厚殼貽貝多糖口服液，尤其涉及一種抗菌、提高免疫力、抗衰老、易于消化吸收的厚殼貽貝多糖口服液的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]貽貝屬軟體動物門貽貝科，是我國傳統(tǒng)的養(yǎng)殖貝類，具有生長快、繁殖力強、抗病能力和適應(yīng)性強，易于人工養(yǎng)殖等特點。目前我國人工養(yǎng)殖的貝類主要有紫貽貝、翡翠貽貝和厚殼貽貝等。我國貽貝養(yǎng)殖產(chǎn)量極大，年產(chǎn)量達到56.83萬噸，浙江省作為海洋大省貽貝資源尤其豐富，年產(chǎn)量達到4萬噸。然而，貽貝在我國被認為是一種低值海產(chǎn)品，雖有極豐富的資源，但經(jīng)濟價值低，沒有被充分利用，在我國貽貝主要是新鮮或粗加工后供民間食用，以活鮮品銷售為主，銷售范圍狹窄，深加工率較低。
貽貝作為海洋生物中的重要一族，具有重要的藥用價值，中國古代《本草拾遺》就記載貽貝主虛贏勞損，因產(chǎn)瘦瘠，血氣結(jié)積，腹冷，腸鳴，下痢腰痛，帶下”。近現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究也表明貽貝具有抗炎、抗癌、抗心血管疾病等作用。國外流行病學(xué)、動物和人體試驗研究結(jié)果顯示，新西蘭翡翠貽貝脂溶性提取物具有顯著的抗炎作用，對慢性關(guān)節(jié)炎，如風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎等具有很好的療效。動物試驗研究表明，新西蘭翡翠貽貝的脂溶性提取物_Lyprin0I具有顯著的抗關(guān)節(jié)炎作用，其抗炎效果比治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的消炎痛強，比其它抗炎油(n-3多不飽和油)和抗關(guān)節(jié)炎油(夜來香油)對預(yù)防佐劑誘導(dǎo)的多發(fā)性關(guān)節(jié)炎腫脹強200倍以上。臨床試驗研究表明，新西蘭翡翠貽貝脂溶性提取物對風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎以及骨質(zhì)疏松引起的關(guān)節(jié)痛和關(guān)節(jié)腫脹都有很好的緩解和治療作用。我國對貽貝的抗炎活性也有相關(guān)報道，袁高峰等對厚殼貽貝的抗炎活性進行了研究，結(jié)果顯示經(jīng)冷凍干燥和氯仿:甲醇(2:1，V:V)溶液提取得到的厚殼貽貝脂溶性提取物具有與新西蘭翡翠貽貝相似的抗多發(fā)性關(guān)節(jié)炎活性。
[0003]專利公開號CN1768765A，該申請案公開了利用木瓜蛋白酶和中性蛋白酶從牡蠣蛋白中獲得了抗氧化肽，其不足之處在于，產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)不經(jīng)濟，原料來源不夠廣泛，不耐貯運，成本較高，不利于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于為了解決現(xiàn)有貽貝主要是新鮮或粗加工后供民間食用，以活鮮品銷售為主，銷售范圍狹窄，深加工率$父低的缺陷而提供一種提尚賭貝深加工率、抗菌、提高免疫力、抗衰老、易于消化吸收的厚殼貽貝多糖口服液的制備方法。
[0005]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
一種厚殼貽貝多糖口服液的制備方法，所述制備方法包括以下步驟:
一)在去離子水中加入貽貝糖胺聚糖、膳食纖維、海藻多糖與中草藥提取物55-65°C下超聲震蕩2_4h，冷卻至1 °C過夜得到混合液備用；
二)在步驟一)得到的混合液中加入復(fù)合維生素、復(fù)合礦物質(zhì)與添加劑，混合均勻后加入去離子水，灌裝，145°C下滅菌30-45min，得到厚殼貽貝多糖口服液。
[0006]作為優(yōu)選，厚殼貽貝多糖口服液中各原料的重量份數(shù)為:40-55份貽貝糖胺聚糖、25-35份膳食纖維、5-10份復(fù)合維生素、3-5份復(fù)合礦物質(zhì)、15-20份海藻多糖、5-15份添加劑、15-20份中草藥提取物與300-600份去離子水。在本技術(shù)方案中，原料來源廣泛，價格低廉;技術(shù)工藝科學(xué)合理，制備方法簡單易行，適合工業(yè)化生產(chǎn);經(jīng)過本發(fā)明的技術(shù)轉(zhuǎn)化可以有效提尚厚殼賭貝的附加值，能夠大幅度提尚厚殼賭貝的利用率，對促進水廣加工業(yè)的發(fā)展有重要意義;膳食纖維主要起到將貽貝糖胺聚糖與中草藥提取物結(jié)合起來的作用，可以使得貽貝糖胺聚糖的抗炎作用與中草藥提取物中的抗免疫力的作用更好的發(fā)揮。
[0007]作為優(yōu)選，所述膳食纖維為果膠、藻膠或魔芋;所述添加劑為質(zhì)量比5:1的蜂蜜與梓檬汁。
[0008]作為優(yōu)選，所述中草藥提取物的制備方法為:15份甘茶、5份茯苓、20份紅蓮子草與5份葛花在95 °C下蒸煮60-85min后，將藥液濃縮至含水量I %的濃縮液在超臨界二氧化碳設(shè)備中進行超臨界萃取而得到。
[0009]作為優(yōu)選，超臨界萃取工藝條件為:分離釜I的壓力為9-10MPa，溫度為75°C;分離釜II的壓力為2-3MPa，溫度為45°C;萃取釜壓力為55MPa，溫度為50°C; 二氧化碳流量為350L/h;萃取時間為3h。
[0010]作為優(yōu)選，貽貝糖胺聚糖的制備方法如下:
a)取新鮮貽貝肉組織15-20g，加去離子水45-50mL，勻漿后調(diào)節(jié)pH至6.5-7，在磁力攪拌器作用下加入貽貝肉組織質(zhì)量的0.1-0.3%的復(fù)合酶酶解，滅酶后在8000-12000r/min下離心15-20min，取上清液加無水乙醇至終濃度75%，0°C下沉淀過夜，再在12000-14000r/min下離心15-20min，沉淀用無水乙醇-丙酮交替洗滌4_5次，透析48h，濃縮后冷凍干燥得到粗多糖；
b)將步驟a)得到的粗多糖進行離子交換柱層析和凝膠柱層析，首先采用QSepharoseFast Flow陰離子交換柱對粗多糖進行純化，上樣量40mL，流速2mL/min，每管收集16mL，流動相分別為純水、0.311101/1111^&(:1、1.611101/1111^&(:1;最后用截留分子量為81^)-141^的透析袋透析24h，濃縮后冷凍干燥再采用Sephacryl S_300High Resolut1n凝膠柱進行進一步分離，上樣量5mL，流速0.8mL/min，每管收集5mL，流動相為純水，濃縮后冷凍干燥，得到貽貝糖胺聚糖。
[0011 ]作為優(yōu)選，步驟一)中去離子水的用量為去離子水總量的2/3 ；步驟二)中的加入去離子水的量為去離子水總量的剩余量。
[0012]作為優(yōu)選，步驟一)中超聲功率為75_85kw。
[0013]本發(fā)明的有益效果是:
1)本發(fā)明的原料來源廣泛，價格低廉;技術(shù)工藝科學(xué)合理，制備方法簡單易行，適合工業(yè)化生產(chǎn);經(jīng)過本發(fā)明的技術(shù)轉(zhuǎn)化可以有效提高厚殼貽貝的附加值，能夠大幅度提高厚殼貽貝的利用率，對促進水產(chǎn)加工業(yè)的發(fā)展有重要意義；
2)本發(fā)明厚殼貽貝的提取物與中草藥、海藻多糖的結(jié)合，可用于免疫調(diào)節(jié)，抗菌、提高免疫力、抗衰老、易于消化吸收。
【具體實施方式】
[0014]為了進一步了解本發(fā)明，下面結(jié)合實施例對本發(fā)明優(yōu)選實施方案進行描述，但是應(yīng)當(dāng)理解，這些描述只是為了進一步說明本發(fā)明的特征和優(yōu)點，而不是對本發(fā)明權(quán)利要求的限制。
[0015]原料:厚殼貽貝購自舟山南珍菜場。
[0016]主要試劑:胰蛋白酶，廣西南寧龐博生物工程有限公司；
木瓜蛋白酶，亞太恒信生物科技有限公司；
無水乙醇、丙酮、氯化鈉等購置國藥試劑；
主要器材:磁力攪拌器、Sephacryl S-3OOHigh Resolut1n凝膠柱、Q Sepharose FastFlow離子交換柱、組織勻漿機、高速離心機、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、冷凍干燥機。
[0017]其余原料均可從市場購得。
[0018]復(fù)合酶為質(zhì)量比為1:2的胰蛋白酶與木瓜蛋白酶。
[0019]實施例1
一種厚殼貽貝多糖口服液的制備方法，所述制備方法包括以下步驟:
一)在去200份離子水中加入40份貽貝糖胺聚糖、25份膳食纖維、15份海藻多糖與15份中草藥提取物55°C下超聲震蕩2h，冷卻至10°C過夜得到混合液備用;超聲功率為75kw;
二)在步驟一)得到的混合液中加入5份復(fù)合維生素、3份復(fù)合礦物質(zhì)與5份添加劑，混合均勻后加入100份去離子水，灌裝，145°C下滅菌30min，得到厚殼貽貝多糖口服液。
[0020]所述膳食纖維為果膠;所述添加劑為質(zhì)量比5:1的蜂蜜與檸檬汁。
[0021]所述中草藥提取物的制備方法為:15份甘茶、5份茯苓、20份紅蓮子草與5份葛花在95°C下蒸煮60min后，將藥液濃縮至含水量1%的濃縮液在超臨界二氧化碳設(shè)備中進行超臨界萃取而得到。
[0022]超臨界萃取工藝條件為:分離釜I的壓力為9MPa，溫度為75°C;分離釜II的壓力為2MPa，溫度為45°C;萃取釜壓力為55MPa，溫度為50°C; 二氧化碳流量為350L/h;萃取時間為3h。
[0023]貽貝糖胺聚糖的制備方法如下:
a)取新鮮貽貝肉組織15g，加去離子水45mL，勻漿后調(diào)節(jié)pH至6.5，在磁力攪拌器作用下加入貽貝肉組織質(zhì)量的0.1%的復(fù)合酶酶解，滅酶后在8000r/min下離心15min，取上清液加無水乙醇至終濃度75%，0°C下沉淀過夜，再在12000r/min下離心15min，沉淀用無水乙醇-丙酮交替洗滌4次，透析48h，濃縮后冷凍干燥得到粗多糖；
b)將步驟a)得到的粗多糖進行離子交換柱層析和凝膠柱層析，首先采用QSepharoseFast Flow陰離子交換柱對粗多糖進行純化，上樣量40mL，流速2mL/min，每管收集16mL，流動相分別為純水、0.3mol/mLNaCl、1.6mol/mLNaCl;最后用截留分子量為8kD的透析袋透析24h，濃縮后冷凍干燥再采用Sephacryl S_300High Resolut1n凝膠柱進行進一步分離，上樣量5mL，流速0.8mL/min，每管收集5mL，流動相為純水，濃縮后冷凍干燥，得到貽貝糖胺聚糖。
[0024]實施例2
一種厚殼貽貝多糖口服液的制備方法，所述制備方法包括以下步驟:
一)在去300份離子水中加入50份貽貝糖胺聚糖、30份膳食纖維、18份海藻多糖與17份中草藥提取物60°C下超聲震蕩3h，冷卻至10°C過夜得到混合液備用;超聲功率為80kw; 二)在步驟一)得到的混合液中加入7份復(fù)合維生素、4份復(fù)合礦物質(zhì)與10份添加劑，混合均勻后加入150份去離子水，灌裝，145°C下滅菌40min，得到厚殼貽貝多糖口服液。
[0025]所述膳食纖維為藻膠;所述添加劑為質(zhì)量比5:1的蜂蜜與檸檬汁。
[0026]所述中草藥提取物的制備方法為:15份甘茶、5份茯苓、20份紅蓮子草與5份葛花在95°C下蒸煮70min后，將藥液濃縮至含水量1%的濃縮液在超臨界二氧化碳設(shè)備中進行超臨界萃取而得到。
[0027]超臨界萃取工藝條件為:分離釜I的壓力為lOMPa，溫度為75°C;分離釜II的壓力為3MPa，溫度為45°C;萃取釜壓力為55MPa，溫度為50°C; 二氧化碳流量為350L/h;萃取時間為3h。
[0028]貽貝糖胺聚糖的制備方法如下:
a)取新鮮貽貝肉組織18g，加去離子水47mL，勻漿后調(diào)節(jié)pH至6.8，在磁力攪拌器作用下加入貽貝肉組織質(zhì)量的0.2%的復(fù)合酶酶解，滅酶后在1000(^/1^11下離心171^11，取上清液加無水乙醇至終濃度75%，0°C下沉淀過夜，再在13000r/min下離心18min，沉淀用無水乙醇-丙酮交替洗滌5次，透析48h，濃縮后冷凍干燥得到粗多糖；
b)將步驟a)得到的粗多糖進行離子交換柱層析和凝膠柱層析，首先采用QSepharoseFast Flow陰離子交換柱對粗多糖進行純化，上樣量40mL，流速2mL/min，每管收集16mL，流動相分別為純水、0.3mol/mLNaCl、1.6mol/mLNaCl;最后用截留分子量為1kD的透析袋透析24h，濃縮后冷凍干燥再采用Sephacryl S_300High Resolut1n凝膠柱進行進一步分離，上樣量5mL，流速0.8mL/min，每管收集5mL，流動相為純水，濃縮后冷凍干燥，得到貽貝糖胺聚糖。
[0029]實施例3
一種厚殼貽貝多糖口服液的制備方法，所述制備方法包括以下步驟:
一)在去400份離子水中加入55份貽貝糖胺聚糖、35份膳食纖維、20份海藻多糖與20份中草藥提取物65°C下超聲震蕩4h，冷卻至10°C過夜得到混合液備用;超聲功率為85kw;
二)在步驟一)得到的混合液中加入10份復(fù)合維生素、5份復(fù)合礦物質(zhì)與15份添加劑，混合均勻后加入100份去離子水，灌裝，145°C下滅菌45min，得到厚殼貽貝多糖口服液。
[0030]所述膳食纖維為魔芋;所述添加劑為質(zhì)量比5:1的蜂蜜與檸檬汁。
[0031]所述中草藥提取物的制備方法為:15份甘茶、5份茯苓、20份紅蓮子草與5份葛花在95°C下蒸煮85min后，將藥液濃縮至含水量1%的濃縮液在超臨界二氧化碳設(shè)備中進行超臨界萃取而得到。
[0032]超臨界萃取工藝條件為:分離釜I的壓力為lOMPa，溫度為75°C;分離釜II的壓力為3MPa，溫度為45°C;萃取釜壓力為55MPa，溫度為50°C; 二氧化碳流量為350L/h;萃取時間為3h。
[0033]貽貝糖胺聚糖的制備方法如下:
a)取新鮮貽貝肉組織20g，加去離子水50mL，勻漿后調(diào)節(jié)pH至7，在磁力攪拌器作用下加入貽貝肉組織質(zhì)量的0.3 %的復(fù)合酶酶解，滅酶后在12000r/min下離心20min，取上清液加無水乙醇至終濃度75%，0°C下沉淀過夜，再在14000r/min下離心20min，沉淀用無水乙醇-丙酮交替洗滌5次，透析48h，濃縮后冷凍干燥得到粗多糖；
b)將步驟a)得到的粗多糖進行離子交換柱層析和凝膠柱層析，首先采用QSepharoseFast Flow陰離子交換柱對粗多糖進行純化，上樣量40mL，流速2mL/min，每管收集16mL，流動相分別為純水、0.3mol/mLNaCl、1.6mol/mLNaCl;最后用截留分子量為14kD的透析袋透析24h，濃縮后冷凍干燥再采用Sephacryl S_300High Resolut1n凝膠柱進行進一步分離，上樣量5mL，流速0.8mL/min，每管收集5mL，流動相為純水，濃縮后冷凍干燥，得到貽貝糖胺聚糖。
[0034]以上所述的實施例只是本發(fā)明的一種較佳的方案，并非對本發(fā)明作任何形式上的限制，在不超出權(quán)利要求所記載的技術(shù)方案的前提下還有其它的變體及改型。
【主權(quán)項】
1.一種厚殼貽貝多糖口服液的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟: 一)在去離子水中加入貽貝糖胺聚糖、膳食纖維、海藻多糖與中草藥提取物55-65°C下超聲震蕩2_4h，冷卻至1 °C過夜得到混合液備用； 二)在步驟一)得到的混合液中加入復(fù)合維生素、復(fù)合礦物質(zhì)與添加劑，混合均勻后加入去離子水，灌裝，145°C下滅菌30-45min，得到厚殼貽貝多糖口服液。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種厚殼貽貝多糖口服液的制備方法，其特征在于，厚殼貽貝多糖口服液中各原料的重量份數(shù)為:40-55份貽貝糖胺聚糖、25-35份膳食纖維、5-10份復(fù)合維生素、3-5份復(fù)合礦物質(zhì)、15-20份海藻多糖、5-15份添加劑、15-20份中草藥提取物與300-600份去離子水。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種厚殼貽貝多糖口服液的制備方法，其特征在于，所述膳食纖維為果膠、藻膠或魔芋;所述添加劑為質(zhì)量比5:1的蜂蜜與檸檬汁。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種厚殼貽貝多糖口服液的制備方法，其特征在于，所述中草藥提取物的制備方法為:15份甘茶、5份茯苓、20份紅蓮子草與5份葛花在95°C下蒸煮60-85min后，將藥液濃縮至含水量I %的濃縮液在超臨界二氧化碳設(shè)備中進行超臨界萃取而得到。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種厚殼貽貝多糖口服液的制備方法，其特征在于，超臨界萃取工藝條件為:分離釜I的壓力為9-10MPa，溫度為75°C;分離釜II的壓力為2-3MPa，溫度為45°C ;萃取釜壓力為55MPa，溫度為50°C ; 二氧化碳流量為350L/h;萃取時間為3h。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種厚殼貽貝多糖口服液的制備方法，其特征在于，貽貝糖胺聚糖的制備方法如下: a)取新鮮貽貝肉組織15-20g，加去離子水45-50mL，勻漿后調(diào)節(jié)pH至6.5-7，在磁力攪拌器作用下加入貽貝肉組織質(zhì)量的0.1-0.3%的復(fù)合酶酶解，滅酶后在8000-12000r/min下離心15-20min，取上清液加無水乙醇至終濃度75%，0°C下沉淀過夜，再在12000-14000r/min下離心15-20min，沉淀用無水乙醇-丙酮交替洗滌4_5次，透析48h，濃縮后冷凍干燥得到粗多糖;b)將步驟a)得到的粗多糖進行離子交換柱層析和凝膠柱層析，首先采用Q SepharoseFast Flow陰離子交換柱對粗多糖進行純化，上樣量40mL，流速2mL/min，每管收集16mL，流動相分別為純水、0.311101/1111^&(:1、1.611101/1111^&(:1;最后用截留分子量為81^)-141^的透析袋透析24h，濃縮后冷凍干燥再采用Sephacryl S_300High Resolut1n凝膠柱進行進一步分離，上樣量5mL，流速0.8mL/min，每管收集5mL，流動相為純水，濃縮后冷凍干燥，得到貽貝糖胺聚糖。7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種厚殼貽貝多糖口服液的制備方法，其特征在于，步驟一)中去離子水的用量為去離子水總量的2/3;步驟二)中的加入去離子水的量為去離子水總量的剩余量。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種厚殼貽貝多糖口服液的制備方法，其特征在于，步驟一)中超聲功率為75-85kw。
【文檔編號】A23L33/21GK105852132SQ201610197008
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年3月31日
【發(fā)明人】曲有樂
【申請人】浙江海洋學(xué)院