一種含玄參提取物的植物鹽及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種含玄參提取物的植物鹽，包括以下重量份的原料：玄參提取物2~4份，鹽地堿蓬植物鹽6~8份，所述玄參提取物，多糖含量為29~35%，大腸桿菌及霉菌菌數(shù)為81~86個(gè)/g，所述鹽地堿蓬植物鹽，黃酮含量為2.6~2.7mg/g，F(xiàn)e含量為690~700mg/kg；本發(fā)明還提供所述含玄參提取物的植物鹽的制備方法，包括層析步驟，吸附樹脂柱柱高與直徑比為5~10:1；本發(fā)明制備的含玄參提取物的植物鹽，具有降低血壓和降低硝酸甘油所致的大鼠偏頭痛撓頭頻率的作用，玄參提取物中多糖含量高。
【專利說明】
一種含玄參提取物的植物鹽及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種含玄參提取物的植物鹽及其制備方法，屬于植物鹽提取工藝技術(shù) 領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 玄參，通常是指玄參科（Scrophulariaece)植物玄參(Picriaf el-terrae)的干燥 全草，又名苦草、熊膽草、四環(huán)素草，為多年生草本植物。全草均可用藥，民間用于治療肺炎、 感冒等炎癥。已有較多的學(xué)者對玄參的化合物成分進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究，從中分離到了 三萜類、黃酮類及苯乙醇苷類等不同類型的化合物。
[0003] 食鹽的食用是人類進(jìn)步的重要階梯，長期以來人類依靠海水曬鹽及井鹽、巖鹽開 采等方法制造食鹽，滿足自身需求。但人類長期食用的鹽類基本上是無機(jī)物，只能滿足人體 自身對無機(jī)鹽的需求，難以適應(yīng)由于生活水平提升造成的人類對多種功能食物的需求，特 別是目前市場上食鹽基本為氯化鈉，過高的Na+攝入對人體的血壓、血脂等均有明顯的負(fù)面 影響。
[0004] 基于以上情況，目前印度率先在世界上利用海蓬子生產(chǎn)出植物鹽，據(jù)報(bào)道，這種植 物鹽富含鉀、鈣、鎂、鐵等微量元素，加工過程中無需添加任何化學(xué)物質(zhì)，因此堪稱"天然營 養(yǎng)鹽"。
[0005] 鹽地堿蓬是一年生草本積鹽植物，植物學(xué)分類為藜科(chenopodiaceae)堿蓬屬 (suaeda forsk. exscop)，主要生長于海濱、湖邊、荒漠等處的鹽堿荒地，是一種典型的鹽堿 地指示植物，在渤海沿岸及新疆、內(nèi)蒙等地的鹽堿地區(qū)有著廣泛的分布。我國共有堿蓬屬植 物20種及1個(gè)變種，常見種為灰綠堿蓬（suaeda. glanca bunge)和鹽地堿蓬（S. salsa(L.) Pall)，產(chǎn)量最大的是灰綠堿蓬。目前對堿蓬屬植物的研究主要集中在灰綠堿蓬、鹽地堿蓬 及翅堿蓬。
[0006] 鹽地堿蓬是世界上含鹽量最高的草本植物之一，全鹽量高達(dá)4.54%。在陰離子中， Cl-占全鹽的47.14%，在陽離子中，Mg2+占全鹽的20.04%，此外脂肪、蛋白質(zhì)外，礦物質(zhì)、微 量元素和維生素的含量豐富，適于進(jìn)行植物鹽生產(chǎn)開發(fā)，但目前相關(guān)部門尚未對這一問題 給予充分重視。如天津渤海沿岸地區(qū)大部分為高鹽堿度的灘涂及濕地，極易適合堿蓬的生 長。長期以來，這些堿蓬自生自滅，一直沒有引起人們的足夠重視。
[0007] 現(xiàn)有技術(shù)存在以下缺陷： (1) 現(xiàn)有技術(shù)制備的植物鹽，對降低血壓的效果不明顯； (2) 現(xiàn)有技術(shù)制備的植物鹽，對降低硝酸甘油所致的大鼠偏頭痛撓頭頻率效用不大； (3) 現(xiàn)有技術(shù)植物鹽制備方法的玄參提取物的制備方法中，大腸桿菌及霉菌菌數(shù)不夠 低； (4) )現(xiàn)有技術(shù)植物鹽制備方法的玄參提取物的制備方法中，重金屬(As、Pb和Gr)殘留 量不低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明為解決以上技術(shù)問題，提供一種含玄參提取物的植物鹽及其制備方法，以 實(shí)現(xiàn)以下發(fā)明目的： (1)本發(fā)明制備的含玄參提取物的植物鹽，具有降低血壓的作用。
[0009] (2)本發(fā)明制備的含玄參提取物的植物鹽，具有降低硝酸甘油所致的大鼠偏頭痛 撓頭頻率的作用。
[0010] (3)本發(fā)明含玄參提取物的植物鹽的制備方法，玄參提取物的制備方法中，大腸桿 菌及霉菌菌數(shù)低。
[0011] (4)本發(fā)明含玄參提取物的植物鹽的制備方法，玄參提取物的制備方法中，重金屬 殘留量低。
[0012]為解決以上技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下： 一種含玄參提取物的植物鹽，所述植物鹽，原料包括玄參提取物和鹽地堿蓬植物鹽。
[0013] 以下是對上述技術(shù)方案的進(jìn)一步改進(jìn)： 所述植物鹽，包括以下重量份的原料:玄參提取物2~4份，鹽地堿蓬植物鹽6~8份。
[0014] 所述玄參提取物，多糖含量為29~35%，大腸桿菌及霉菌菌數(shù)為81~86個(gè)/g。
[0015] 所述鹽地堿蓬植物鹽，黃酮含量為2 · 6~2 · 7mg/g，F(xiàn)e含量為690~700mg/kg。
[0016] -種含玄參提取物的植物鹽的制備方法，所述玄參提取物的制備包括層析步驟， 所述層析步驟，吸附樹脂柱柱高與直徑比為5~10:1。
[0017] 所述玄參提取物的制備包括層析步驟，丙醇濃度50~90%。
[0018] 所述玄參提取物的制備包括層析步驟，洗脫流速為2.1~3.6 mL/min。
[0019] 所述玄參提取物的制備還包括破壁步驟，所述破壁步驟，在真空條件下，微波處理 10~30 min;所述真空條件是真空度為-〇 · 073MPa~-〇 · 08MPa。
[0020] 所述玄參提取物的制備還包括超聲波粉碎步驟，所述超聲波粉碎步驟，用lmmol/ L、pH為6 · 8的PBS緩沖液浸泡Ih。
[0021] 所述玄參提取物的制備還包括超聲波粉碎步驟，所述超聲波粉碎步驟，冰浴中用 750~820W的超聲波超聲15~19min。
[0022] 采用以上技術(shù)方案，本發(fā)明的有益效果為： (1)本發(fā)明的含玄參提取物的植物鹽，能夠降低血壓，對100名高血壓病患者的臨床治 療與觀察，有效率達(dá)到92%。
[0023] (2)本發(fā)明的含玄參提取物的植物鹽，降低硝酸甘油所致的大鼠偏頭痛撓頭頻率， 灌胃硝酸甘油所致偏頭痛大鼠〇. lg/ml的含玄參提取物的植物鹽水溶液0. lmL/kgbw后，撓 頭出現(xiàn)時(shí)間為5.6~6. Imin，撓頭緩解時(shí)間為43.5~58. Imin，有效降低撓頭頻率。
[0024] (3)本發(fā)明含玄參提取物的植物鹽的制備方法，玄參提取物的制備方法中，大腸桿 菌及霉菌菌數(shù)低，菌數(shù)為81~86個(gè)/g。
[0025] (4)本發(fā)明含玄參提取物的植物鹽的制備方法，玄參提取物的制備方法中，重金屬 殘留量低，含量為1.3~1.6ppm。其中，重金屬包括As、Pb和Gr。
【具體實(shí)施方式】
[0026] 以下對本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行說明，應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的優(yōu)選實(shí)施例僅用 于說明和解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0027] 實(shí)施例1 一種含玄參提取物的植物鹽 以重量份計(jì)，包括以下原料組分： 玄參提取物4份、鹽地堿蓬植物鹽6份。
[0028]所述玄參提取物，多糖含量為29~35%，大腸桿菌及霉菌菌數(shù)為81~86個(gè)/g，重金屬 殘留量為1.3~1.6ppm。
[0029] 所述鹽地堿蓬植物鹽，鈉含量為15.20~15.30%;鉀含量為3.4~3.5%;黃酮含量為 2 · 6~2 · 7mg/g; Ca 含量為 2600~2700mg/kg; Fe 含量為690~700mg/kg。
[0030] 實(shí)施例2-種含玄參提取物的植物鹽 以重量份計(jì)，包括以下原料組分： 玄參提取物3份、鹽地堿蓬植物鹽7份。
[0031] 所述玄參提取物，多糖含量為29~35%，大腸桿菌及霉菌菌數(shù)為81~86個(gè)/g，重金屬 殘留量為1.3~1.6ppm。
[0032] 所述鹽地堿蓬植物鹽，鈉含量為15.20~15.30%;鉀含量為3.4~3.5%;黃酮含量為 2 · 6~2 · 7mg/g; Ca 含量為 2600~2700mg/kg; Fe 含量為690~700mg/kg。
[0033] 實(shí)施例3-種含玄參提取物的植物鹽 以重量份計(jì)，包括以下原料組分： 玄參提取物2份、鹽地堿蓬植物鹽8份。
[0034]所述玄參提取物，多糖含量為29~35%，大腸桿菌及霉菌菌數(shù)為81~86個(gè)/g，重金屬 殘留量為1.3~1.6ppm。
[0035] 所述鹽地堿蓬植物鹽，鈉含量為15.20~15.30%;鉀含量為3.4~3.5%;黃酮含量為 2 · 6~2 · 7mg/g; Ca 含量為 2600~2700mg/kg; Fe 含量為690~700mg/kg。
[0036] 實(shí)施例4 一種玄參提取物的制備方法 包括以下步驟： (1)超聲波粉碎 稱取玄參新鮮塊根，粉碎，過60~80目篩，按重量比1:50的比例用ImmoI/L、pH為6.8的 PBS緩沖液浸泡40~60min，充分溶脹； 在冰浴中用功率750~8201的超聲波超聲15~1911^11進(jìn)行細(xì)胞破碎，破碎至0.5~2.5以111，得 粗提物。
[0037] (2)破壁 將玄參粗提物進(jìn)行低溫氣流破壁處理，并真空凍干處理，得玄參超微粉。
[0038] 所述低溫氣流破壁為低溫真空微波處理，所述低溫真空微波處理是溫度為-125- 100°C，真空條件下，微波處理10~30 min; 所述真空條件是真空度為. 〇73MPa~-0.08MPa。
[0039] (3)表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取 將玄參超微粉和蒸餾水按質(zhì)量比1: 11~55充分混合后得到料液； 向所述料液中加入表面活性劑，并進(jìn)行微波-超聲波提?。?所述微波-超聲波提取，微波功率為200~600W，超聲波功率為100~500W，提取時(shí)間為5~ 20min;提取結(jié)束過濾，取濾液。
[0040]所述表面活性劑的加入量為所述料液質(zhì)量的0.2%~2%。
[0041 ] (4)超濾 所得濾液用截留分子量為5000~10000道爾頓的超濾膜超濾，得超濾液； 所述超濾溫度控制在10~15°c，壓力控制在0.051~O.IMPa。
[0042] (5)層析 將玄參超濾液上樣到大孔吸附樹脂層析柱，用IOOmL去離子水沖洗除雜，再采用50%丙 醇進(jìn)行洗脫，流速為2. lmL/min，收集洗脫液； 將洗脫液在60~80°C，壓強(qiáng)為0.08~0.1 MPa下減壓濃縮至含水量小于等于5%，得玄參提 取物。
[0043]所述大孔吸附樹脂層析柱的柱體積50mL，柱高與直徑比為5:1。
[0044] 下述實(shí)施例5~實(shí)施例10是對實(shí)施例4所述玄參提取物制備方法的優(yōu)化，即：采用實(shí) 施例4的玄參提取物的制備方法，只改變(5)層析步驟，對吸附樹脂柱體積、乙醇濃度和洗脫 流速做多因素分析，采用常規(guī)方法對提取的玄參提取物進(jìn)行各項(xiàng)具體物質(zhì)的含量進(jìn)行測 定，其中，重金屬殘留量為As、Pb和Gr的含量。
[0045] 表1吸附樹脂柱柱高與直徑比、丙醇濃度和洗脫流速的多因素分析(實(shí)施例5~實(shí)施 例10)
由上述多因素分析試驗(yàn)可知，實(shí)施例6~實(shí)施例8是優(yōu)選實(shí)施例，即吸附樹脂柱柱高與直 徑比為6.5~8:1，丙醇濃度60~75%和洗脫流速為2.8~3.4 mL/min。
[0046] 實(shí)施例11 一種含玄參提取物的植物鹽的制備方法 包括以下步驟： 一、玄參提取物的制備 采用實(shí)施例4的玄參提取物的制備方法，改變(5)層析步驟中的吸附樹脂柱柱高與直徑 比、丙醇濃度和洗脫流速三個(gè)參數(shù)，改變?yōu)槲綐渲吲c直徑比為6.5~8:1，丙醇濃度 60~75%和洗脫流速為2.8~3.4 mL/min，得玄參提取物。
[0047]二、鹽地堿蓬植物鹽的提取 (1) 酶解工藝 A、 一級酶解:將堿蓬磨成漿，向堿蓬漿中加入酶解罐，調(diào)節(jié)pH6.0~7.0，并加溫至50-55 °C，加入酶活為16萬~140萬U/g的纖維素酶，加酶量0.8~3.0%質(zhì)量比，攪拌均勻，保溫50~55 °C，酶解時(shí)間4~6h; B、 二級酶解:將步驟A制得的一級酶解堿蓬漿調(diào)節(jié)pH6.0~7.0，并加溫至50~55°C，加入 酶活為60萬~80萬U/g的木瓜蛋白酶進(jìn)行二級酶解，加酶量0.1~0.5%質(zhì)量比，攪拌均勾，保溫 50-55°C，酶解時(shí)間 4-6h; C、 三級酶解:將步驟B制得的二級酶解堿蓬漿調(diào)節(jié)pH3.5~6.0，并加溫至50~55°C，加入 酶活為3萬~6萬U/mL液體果膠酶進(jìn)行三級酶解，加酶量2.0~5.0%質(zhì)量比，攪拌均勻，保溫50-55 °C，酶解時(shí)間4-6h，得酶解液； D、 過濾:酶解結(jié)束后，將酶解液調(diào)節(jié)pH為7.0，并加入板框壓濾機(jī)過濾，分離殘?jiān)锰崛?液。
[0048]優(yōu)選的，在步驟A~C中，按質(zhì)量百分比，酶的添加量分別為:纖維素酶1~2%;木瓜蛋 白酶0.1%~0.3%;果膠酶3.0~4.0%; (2) 脫色 將所述提取液進(jìn)行超聲處理8~IOmin; 超聲處理后，靜置5~8min，使提取液溫度控制在18~22°C，過硅藻土吸附層，進(jìn)行脫 色，控制流速為34~38ml/min，得脫色液； 所述脫色液經(jīng)脫重金屬、結(jié)晶處理，得鹽地堿蓬植物鹽。
[0049] 所述超聲處理的超聲波頻率為12.5~13.8MHz; 所述娃藻土吸附層，厚度為75~85cm; 所述娃藻土為經(jīng)過550~580 °C高溫處理30~40min的娃藻土原礦粉； 所述硅藻土細(xì)度為100~120目。
[0050] 三、稱量 按照配方稱量玄參提取物和鹽地堿蓬植物鹽。
[0051] 四、混合 將稱取好的玄參提取物和鹽地堿蓬植物鹽攪拌、混合均勻，制成混合粉末，得含玄參提 取物的植物鹽。
[0052]本發(fā)明含玄參提取物的植物鹽的應(yīng)用效果： 1、本發(fā)明含玄參提取物的植物鹽的降壓試驗(yàn)及效果 本發(fā)明的含玄參提取物的植物鹽使用方法是口服，一天兩次，每次2~3g，開水送服。 [0053]本發(fā)明的含玄參提取物的植物鹽已在臨床進(jìn)行了長期應(yīng)用，對高血壓病療效顯 著，接治高血壓患者1 〇〇〇余人，治愈率在85%以上。典型病例有： 病例一:王女士，46歲，濰坊市奎文區(qū)人，某單位職工?；几哐獕翰?年有余，自述曾服用 多種降壓藥物控制，效果不明顯，病情還有所加重，感覺頭昏、失眠、多夢，小便多、舌質(zhì)紅。 苔薄白，血壓212/123mmHg;服用本發(fā)明實(shí)施例1的含玄參提取物的植物鹽兩月后，病癥明顯 減輕，血壓穩(wěn)定在（150~168V(91~107)mmHg;繼續(xù)服用半年后，健如常人，血壓保持在 (138~149V(79~92)mmHg;后隨訪，一直良好，血壓未再升高。
[0054]病例二：張先生，48歲，濰坊市臨朐縣人。感覺氣喘，頭昏5年，血壓持續(xù)在（178~ 194)/(109~129)mmHg;開始出現(xiàn)耳鳴、心悸、失眠，舌質(zhì)赤，脈弦細(xì)，經(jīng)醫(yī)院檢查胸部透視， 主動(dòng)弓加寬，眼底未發(fā)現(xiàn)異常，確診為高血壓病。服用本發(fā)明實(shí)施例2的含玄參提取物的植 物鹽三周后，血壓降低至127/86mmHg;癥狀基本消失;繼續(xù)服用3個(gè)月以鞏固療效，停藥1年 后一年后隨訪，未復(fù)發(fā)。
[0055]病例三:孫先生，濰坊市濰城區(qū)人，69歲，退休老干部。于2015年7月感覺身體不適， 有經(jīng)常頭疼、失眠、四肢麻木癥狀，經(jīng)醫(yī)院檢查診斷為高血壓，曾服用過利血復(fù)方降壓片等 藥，效果不佳。2016年經(jīng)醫(yī)院檢查體溫37.2 °C，血壓192/115mmHg，呼吸21/min，脈率86次/ min;胸部透視，心呈主動(dòng)脈型升主動(dòng)脈，左心室擴(kuò)大。后服用本發(fā)明實(shí)施例3的含玄參提取 物的植物鹽14天后，血壓降低至138/97mmHg，不良癥狀基本消失。繼續(xù)服用半年，血壓未再 升高，全部治愈。
[0056] 根據(jù)對100名高血壓病患者的臨床治療與觀察，效果明顯的67人，有效的25人，8 人無效，有效率達(dá)到92%。
[0057]、本發(fā)明含玄參提取物的植物鹽對降低硝酸甘油所致的大鼠偏頭痛試驗(yàn)及效果 將50只大鼠隨機(jī)分為對照組、西比靈組、本發(fā)明實(shí)施例1組~實(shí)施例3組。將大鼠皮下注 射硝酸甘油注射劑9.5mg/kgbw，建立實(shí)驗(yàn)性偏頭痛模型，以出現(xiàn)雙耳發(fā)紅、前肢頻繁撓頭、 爬籠次數(shù)增多等提示模型動(dòng)物頭部不適的癥狀為造模成功的指標(biāo);并觀察給藥后撓頭癥狀 出現(xiàn)時(shí)間和單位時(shí)間段內(nèi)（30min、60min、90min)前肢燒頭的次數(shù)，結(jié)果見表3。
[0058]表3對硝酸甘油偏頭痛大鼠撓頭次數(shù)的影響（土，n=10)
造模成功后，對照組灌胃蒸餾水1.0 mL/kgbw;西比靈組灌胃西比靈1.0 mg/kgbw;本發(fā)明 實(shí)施例1組~實(shí)施例3組分別給予實(shí)施例1~實(shí)施例3所述含玄參提取物的植物鹽制成的0.1 g/ ml的水溶液0. lmL/kgbw灌胃，觀察給藥后撓頭出現(xiàn)和緩解的時(shí)間，結(jié)果見表4。
[0059]表4對硝酸甘油偏頭痛大鼠撓頭出現(xiàn)、緩解時(shí)間的影響
結(jié)果表明，本發(fā)明實(shí)施例1組~實(shí)施例3組均能顯著降低硝酸甘油所致的大鼠偏頭痛撓 頭頻率，與對照組相比，均有顯著性差異，其中以實(shí)施例3組的效果更明顯。
[0060] 除非另有說明，本發(fā)明中所采用的百分?jǐn)?shù)均為重量百分?jǐn)?shù)，本發(fā)明所述的比例，均 為質(zhì)量比例。
[0061] 最后應(yīng)說明的是：以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明， 盡管參照前述實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，其依然可 以對前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換。 凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的 保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種含玄參提取物的植物鹽，其特征在于，所述植物鹽，原料包括玄參提取物和鹽地 堿蓬植物鹽。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含玄參提取物的植物鹽，其特征在于，包括以下重量份的 原料:玄參提取物2~4份，鹽地堿蓬植物鹽6~8份。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含玄參提取物的植物鹽，其特征在于，所述玄參提取物， 多糖含量為29~35%，大腸桿菌及霉菌菌數(shù)為81~86個(gè)/g。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含玄參提取物的植物鹽，其特征在于，所述鹽地堿蓬植物 鹽，黃酮含量為2 · 6~2 · 7mg/g，F(xiàn)e含量為690~700mg/kg。5. -種含玄參提取物的植物鹽的制備方法，其特征在于，所述玄參提取物的制備包括 層析步驟，所述層析步驟，吸附樹脂柱柱高與直徑比為5~10:1。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種含玄參提取物的植物鹽的制備方法，其特征在于，丙醇濃 度50~90%。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種含玄參提取物的植物鹽的制備方法，其特征在于，洗脫流 速為2.1~3.6 mL/min。8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種含玄參提取物的植物鹽的制備方法，其特征在于，所述玄 參提取物的制備還包括破壁步驟，所述破壁步驟，在真空條件下，微波處理10~30 min;所 述真空條件是真空度為-0. 〇73MPa~-0.08MPa。9. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種含玄參提取物的植物鹽的制備方法，其特征在于，所述玄 參提取物的制備還包括超聲波粉碎步驟，所述超聲波粉碎步驟，用lmmol/L、pH為6.8的roS 緩沖液浸泡lh。10. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種含玄參提取物的植物鹽的制備方法，其特征在于，所述 玄參提取物的制備還包括超聲波粉碎步驟，所述超聲波粉碎步驟，冰浴中用750~820W的超 聲波超聲15~19min。
【文檔編號】A61K36/808GK105962284SQ201610293972
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年5月3日
【發(fā)明人】王勝
【申請人】王勝