一種含紫杉烷提取物的植物鹽及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種含紫杉烷提取物的植物鹽，包括以下重量份的原料：紫杉烷提取物2~4份，鹽地堿蓬植物鹽6~8份，所述紫杉烷提取物，紫杉烷含量0.15~0.17‰，紫杉烷的純度為95.5~96.1%，所述鹽地堿蓬植物鹽，Ca含量為2600~2700mg/kg，F(xiàn)e含量為690~700mg/kg；本發(fā)明還提供所述含紫杉烷提取物的植物鹽的制備方法，包括層析步驟，所述層析步驟，石油醚?丙酮體積比1:5~100；本發(fā)明制備的含紫杉烷提取物的植物鹽，具有擴(kuò)大小鼠對熱刺激的痛閾值的作用，對DPPH自由基、超氧陰離子自由基、羥基自由基、過氧化氫的清除率高。
【專利說明】
一種含紫杉烷提取物的植物鹽及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種含紫杉烷提取物的植物鹽及其制備方法，屬于植物鹽提取工藝技 術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 紫杉又稱紅豆杉、赤柏松、常綠喬木，全身是寶，地栽高達(dá)25米，世界珍稀樹種，是 世界上天然珍稀抗癌植物，是集觀賞和藥用于一身的珍貴樹種。從植株中提取的紫杉烷提 取物具有抗癌作用，價(jià)格昂貴。因而，紅豆杉也具有"生物黃金"之稱。中藥紫杉為紅豆杉科 植物東北紅豆杉的枝和葉。
[0003] 食鹽的食用是人類進(jìn)步的重要階梯，長期以來人類依靠海水曬鹽及井鹽、巖鹽開 采等方法制造食鹽，滿足自身需求。但人類長期食用的鹽類基本上是無機(jī)物，只能滿足人體 自身對無機(jī)鹽的需求，難以適應(yīng)由于生活水平提升造成的人類對多種功能食物的需求，特 別是目前市場上食鹽基本為氯化鈉，過高的Na+攝入對人體的血壓、血脂等均有明顯的負(fù)面 影響。
[0004] 基于以上情況，目前印度率先在世界上利用海蓬子生產(chǎn)出植物鹽，據(jù)報(bào)道，這種植 物鹽富含鉀、鈣、鎂、鐵等微量元素，加工過程中無需添加任何化學(xué)物質(zhì)，因此堪稱"天然營 養(yǎng)鹽"。
[0005] 鹽地堿蓬是一年生草本積鹽植物，植物學(xué)分類為藜科(chenopodiaceae)堿蓬屬 (suaeda forsk. exscop)，主要生長于海濱、湖邊、荒漠等處的鹽堿荒地，是一種典型的鹽堿 地指示植物，在渤海沿岸及新疆、內(nèi)蒙等地的鹽堿地區(qū)有著廣泛的分布。我國共有堿蓬屬植 物20種及1個(gè)變種，常見種為灰綠堿蓬（suaeda. glanca bunge)和鹽地堿蓬（S. salsa(L.) Pall)，產(chǎn)量最大的是灰綠堿蓬。目前對堿蓬屬植物的研究主要集中在灰綠堿蓬、鹽地堿蓬 及翅堿蓬。
[0006] 鹽地堿蓬是世界上含鹽量最高的草本植物之一，全鹽量高達(dá)4.54%。在陰離子中， Cl-占全鹽的47.14%，在陽離子中，Mg2+占全鹽的20.04%，此外脂肪、蛋白質(zhì)外，礦物質(zhì)、微 量元素和維生素的含量豐富，適于進(jìn)行植物鹽生產(chǎn)開發(fā)，但目前相關(guān)部門尚未對這一問題 給予充分重視。如天津渤海沿岸地區(qū)大部分為高鹽堿度的灘涂及濕地，極易適合堿蓬的生 長。長期以來，這些堿蓬自生自滅，一直沒有引起人們的足夠重視。
[0007] 現(xiàn)有技術(shù)存在以下缺陷： (1) 現(xiàn)有技術(shù)制備的植物鹽，對小鼠對熱刺激的痛閾值并沒有明顯擴(kuò)大作用； (2) 現(xiàn)有技術(shù)制備的植物鹽，抗氧化作用不明顯； (3) 現(xiàn)有植物鹽制備方法的紫杉烷提取物的制備中，紫杉烷的純度低； (4) 現(xiàn)有植物鹽制備方法的紫杉烷提取物的制備中，微生物含量高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明為解決以上技術(shù)問題，提供一種含紫杉烷提取物的植物鹽及其制備方法， 以實(shí)現(xiàn)以下發(fā)明目的： (1)本發(fā)明制備的含紫杉烷提取物的植物鹽，具有擴(kuò)大小鼠對熱刺激的痛閾值的作用。
[0009] (2 )本發(fā)明制備的含紫杉烷提取物的植物鹽，對DPPH自由基、超氧陰離子自由基、 羥基自由基、過氧化氫的清除率高。
[0010] (3)本發(fā)明含紫杉烷提取物的植物鹽的制備方法，紫杉烷提取物的制備方法中，紫 杉烷純度高。
[0011] (4)本發(fā)明含紫杉烷提取物的植物鹽的制備方法，紫杉烷提取物的制備方法中，微 生物含量低。
[0012]為解決以上技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下： 一種含紫杉烷提取物的植物鹽，所述植物鹽，原料包括紫杉烷提取物和鹽地堿蓬植物 鹽。
[0013] 以下是對上述技術(shù)方案的進(jìn)一步改進(jìn)： 所述植物鹽，包括以下重量份的原料:紫杉烷提取物2~4份，鹽地堿蓬植物鹽6~8份。
[0014] 所述紫杉烷提取物，紫杉烷含量0.15~0.17%。，紫杉烷的純度為95.5~96.1%。
[0015] 所述鹽地堿蓬植物鹽，Ca含量為2600~2700mg/kg，F(xiàn)e含量為690~700mg/kg。
[0016] -種含紫杉烷提取物的植物鹽的制備方法，所述紫杉烷提取物的制備包括層析步 驟，所述層析步驟，吸附樹脂柱柱高與直徑比為5~10:1。
[0017] 所述層析步驟，石油醚-丙酮體積比1:5~100。
[0018] 所述層析步驟，洗脫流速為5.5~11.3mL/min。
[0019] 所述紫杉烷提取物的制備還包括破壁步驟，所述破壁步驟，用波長270~310nm的 紫外燈光源照射30~40min。
[0020] 所述紫杉烷提取物的制備還包括破壁步驟，所述破壁步驟，溫度為-200-185°C。
[0021] 所述紫杉烷提取物的制備還包括酶解-超聲波提取步驟，所述酶解-超聲波提取， 酶解時(shí)間〇. 5~5h，酶解溫度51~61°C。
[0022] 采用以上技術(shù)方案，本發(fā)明的有益效果為： (1)本發(fā)明的含紫杉烷提取物的植物鹽，能擴(kuò)大小鼠對熱刺激的痛閾值，給予小鼠含紫 杉烷提取物的植物鹽lmg/kgbw 7天，痛閾值為42.2~44. Os，對照組痛閾值為15.1 s。
[0023] (2)本發(fā)明制備的含紫杉烷提取物的植物鹽，對DPPH自由基清除率為61~63%;對超 氧陰離子自由基清除率為70~82%;對羥基自由基清除率為52~68%;對過氧化氫清除率為74~ 88% 〇
[0024] (3)本發(fā)明含紫杉烷提取物的植物鹽的制備方法，紫杉烷提取物的制備方法中，紫 杉烷純度高，純度為95.5~96.1%。
[0025] (4)本發(fā)明含紫杉烷提取物的植物鹽的制備方法，紫杉烷提取物的制備方法中，微 生物含量低，微生物含量87~89cfu/g。
【具體實(shí)施方式】
[0026]以下對本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行說明，應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的優(yōu)選實(shí)施例僅用 于說明和解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0027]實(shí)施例1 一種含紫杉烷提取物的植物鹽 以重量份計(jì)，包括以下原料組分： 紫杉烷提取物4份、鹽地堿蓬植物鹽6份。
[0028]所述紫杉烷提取物，紫杉烷含量0.15~0.17%。，紫杉烷的純度為95.5~96.1%，微生 物含量87~89cfu/g。
[0029] 所述鹽地堿蓬植物鹽，鈉含量為15.20~15.30%;鉀含量為3.4~3.5%;黃酮含量為 2 · 6~2 · 7mg/g; Ca 含量為 2600~2700mg/kg; Fe 含量為690~700mg/kg。
[0030] 實(shí)施例2-種含紫杉烷提取物的植物鹽 以重量份計(jì)，包括以下原料組分： 紫杉烷提取物3份、鹽地堿蓬植物鹽7份。
[0031] 所述紫杉烷提取物，紫杉烷含量0.15~0.17%。，紫杉烷的純度為95.5~96.1%，微生 物含量87~89cfu/g。
[0032] 所述鹽地堿蓬植物鹽，鈉含量為15.20~15.30%;鉀含量為3.4~3.5%;黃酮含量為 2 · 6~2 · 7mg/g; Ca 含量為 2600~2700mg/kg; Fe 含量為690~700mg/kg。
[0033] 實(shí)施例3-種含紫杉烷提取物的植物鹽 以重量份計(jì)，包括以下原料組分： 紫杉烷提取物2份、鹽地堿蓬植物鹽8份。
[0034]所述紫杉烷提取物，紫杉烷含量0.15~0.17%。，紫杉烷的純度為95.5~96.1%，微生 物含量87~89cfu/g。
[0035] 所述鹽地堿蓬植物鹽，鈉含量為15.20~15.30%;鉀含量為3.4~3.5%;黃酮含量為 2 · 6~2 · 7mg/g; Ca 含量為 2600~2700mg/kg; Fe 含量為690~700mg/kg。
[0036] 實(shí)施例4 一種紫杉烷提取物的制備方法 包括以下步驟： (1)超聲波粉碎 稱取紫杉干燥樹皮，切成長度2~3cm的段狀，按重量比1:50的比例用lmmol/L、pH為6.8 的PBS緩沖液浸泡40~60min，充分溶脹； 在冰浴中用功率750~8201的超聲波超聲15~1911^11進(jìn)行細(xì)胞破碎，破碎至0.5~2.5以111，得 粗提物。
[0037]所述紫杉干燥樹皮的含水量為5.8~10.7%。
[0038] (2)破壁 將紫杉粗提物進(jìn)行細(xì)胞破壁，所述低溫氣流破壁為紫外線輻射處理； 所述紫外燈輻射處理為在溫度為-200-185°C下，用波長270~310nm的紫外燈光源照 射30~40min，使得細(xì)胞壁中的幾丁質(zhì)材質(zhì)中的酰胺鍵吸收能量后斷裂。
[0039] (3)酶解-超聲波提取 將紫杉超微粉加水溶解，然后用復(fù)合酶制劑酶解； 加入水和藥材質(zhì)量的1%。~9%。的復(fù)合酶制劑進(jìn)行酶解，酶解時(shí)間0.5~5h，酶解溫度51~ 61°C，得紫杉酶解液； 經(jīng)試驗(yàn)證明，用酶處理后可明顯提高提取率，提取率提高了5~7%。
[0040]所述復(fù)合酶制劑的配比為纖維素酶質(zhì)量分?jǐn)?shù)50~70%，果膠酶質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15~40%， 其余為木聚糖酶； 所述復(fù)合酶制劑的平均酶活為10000~30000單位； 對紫杉酶解液進(jìn)行超聲波提取，以水為溶劑，紫杉酶解液與水的料液比為1:2~60，以 超聲波輔助提取，離心過濾后得提取液。
[0041 ] (4)超濾 所得提取液用截留分子量為5000~10000道爾頓的超濾膜超濾，取濾液。
[0042] 所述過濾溫度為10~15°C，壓力為0.051~O.IMPa。
[0043] (5)層析 濾液上樣到大孔吸附樹脂層析柱，除雜、洗脫，收集洗脫液。
[0044] 所述大孔吸附樹脂層析柱的柱體積50mL，柱高與直徑比為5:1，柱的使用壓力為 0·6~0·7MPa〇
[0045] 先用IOOmL去離子水沖洗除雜，再以體積比1:5的石油醚-丙酮為洗脫液，5.5ml/ min的流速進(jìn)行梯度洗脫。
[0046] (6)干燥 將洗脫液在60~80°C，壓強(qiáng)為0.08~0.1 MPa下減壓濃縮干燥至含水量小于等于5%，得紫 杉烷提取物。
[0047] 下述實(shí)施例5~實(shí)施例10是對實(shí)施例4所述紫杉烷提取物制備方法的優(yōu)化，即：采用 實(shí)施例4的紫杉烷提取物的制備方法，只改變(5)層析步驟，對吸附樹脂柱體積、乙醇濃度和 洗脫流速做多因素分析，采用常規(guī)方法對提取的紫杉烷提取物進(jìn)行各項(xiàng)具體物質(zhì)的含量進(jìn) 行測定。
[0048] 表1吸附樹脂柱柱高與直徑比、石油醚-丙酮體積比和洗脫流速的多因素分析(實(shí) 施例5~實(shí)施例10)
由上述多因素分析試驗(yàn)可知，實(shí)施例6~實(shí)施例8是優(yōu)選實(shí)施例，即吸附樹脂柱柱高與直 徑比為7~9:1，石油醚-丙酮體積比1:30~70和洗脫流速為8.8~9.7mL/min。
[0049] 實(shí)施例11 一種含紫杉烷提取物的植物鹽的制備方法 包括以下步驟： 一、紫杉烷提取物的制備 采用實(shí)施例4的紫杉烷提取物的制備方法，改變(5)層析步驟中的吸附樹脂柱柱高與直 徑比、石油醚-丙酮體積比和洗脫流速三個(gè)參數(shù)，改變?yōu)槲綐渲吲c直徑比為6.5~8: 1，石油醚-丙酮體積比1:30~70和洗脫流速為8.8~9.7mL/min，得到紫杉烷提取物。
[0050] 二、鹽地堿蓬植物鹽的提取 (1)酶解工藝 按堿蓬粉:水重量比為1:4~10的比例，放置于容器中，25~85°C下攪拌，按堿蓬重量 的0.3~1%加入復(fù)合酶酶解30~180min，完成后離心分離，收集上清液。
[0051 ]收集的上清液煮沸或調(diào)節(jié)pH，滅酶，離心收集上清液； 所述滅酶，滅酶方式優(yōu)選為煮沸IOmin。
[0052] 所述復(fù)合酶包括枯草芽孢桿菌蛋白酶、菠蘿蛋白酶和木瓜蛋白酶，重量配比為(6 ~12):(2~4):(1~3); 優(yōu)選地，所述復(fù)合酶加入量為脫脂植物柏重量的0.4~0.8%，所述提取酶解溫度為30°C ~80°C，所述浸提時(shí)間為60~150min。
[0053] (2)脫色 將提取液加熱至55~65°C，滴加醋酸調(diào)節(jié)pH為6.5~7.5，加入絮凝劑，開啟攪拌，攪拌 速率為180rpm，持續(xù)攪拌48~55min;經(jīng)結(jié)晶干燥后，得鹽地堿蓬植物鹽。
[0054 ]所述絮凝劑加入量為提取液質(zhì)量的8~11 %; 所述絮凝劑為殼聚糖、褐藻多糖、碳酸鈣、酸性糖蛋白，按重量比5:2:1:1混合而成的 粉末； 所述殼聚糖，細(xì)度為100目，平均分子量為1225 Da，脫乙酰度為94.28%，粘度為864 mpa.s 〇
[0055] 三、稱量 按照配方稱量紫杉烷提取物和鹽地堿蓬植物鹽。
[0056] 四、混合 將稱取好的紫杉烷提取物和鹽地堿蓬植物鹽攪拌、混合均勻，制成混合粉末，得含紫杉 烷提取物的植物鹽。
[0057] 本發(fā)明含紫杉烷提取物的植物鹽的應(yīng)用效果： 1、本發(fā)明含紫杉烷提取物的植物鹽對熱刺激所致小鼠疼痛的影響 準(zhǔn)備km小鼠，挑選熱板上5s以后30s以內(nèi)出現(xiàn)舔足的雌性小鼠80只，體重16~20g，隨機(jī) 分為4組，分別為空白組、本發(fā)明實(shí)施例1組~實(shí)施例3組，每組10只。空白組作喂蒸餾水處理， 喂水量為lmg/kgbw，連續(xù)喂7天;實(shí)施例1組~實(shí)施例3組連續(xù)喂本發(fā)明實(shí)施例1~實(shí)施例3的含 紫杉烷提取物的植物鹽7天，喂藥量lmg/kgbw，試驗(yàn)時(shí)用秒表記錄小鼠自放于熱板上至出現(xiàn) 疼痛反應(yīng)的時(shí)間，作為痛閾的指標(biāo)。
[0058] 在喂藥前先測定每只小鼠的痛閾值，給藥25 min后分別測量小鼠的痛閾值，如小 鼠60s仍無反應(yīng)將小鼠取出，其痛閾以60s計(jì)算。結(jié)果見表3。
[0059] 表3對熱刺激所致小鼠疼痛的影響（土s)
表3結(jié)果表明，本發(fā)明實(shí)施例1組~實(shí)施例3組，與空白組比較，均能擴(kuò)大小鼠對熱刺激 的痛閾值。
[0060] 、本發(fā)明含紫杉烷提取物的植物鹽的抗氧化作用 將本發(fā)明制備的含紫杉烷提取物的植物鹽，配制成lmg/ml的溶液，采用常規(guī)方法測定 對DPPH自由基清除率、對超氧陰離子自由基清除率、對羥基自由基清除率，對過氧化氫的清 除率，見表4。
[0061] 除非另有說明，本發(fā)明中所采用的百分?jǐn)?shù)均為重量百分?jǐn)?shù)，本發(fā)明所述的比例，均 為質(zhì)量比例;本發(fā)明中所述的給藥，均為給本發(fā)明含有紫杉烷提取物的植物鹽。
[0062] 最后應(yīng)說明的是：以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明， 盡管參照前述實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，其依然可 以對前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換。 凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的 保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種含紫杉烷提取物的植物鹽，其特征在于，所述植物鹽，原料包括紫杉烷提取物和 鹽地堿蓬植物鹽。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含紫杉烷提取物的植物鹽，其特征在于，包括以下重量份 的原料:紫杉烷提取物2~4份，鹽地堿蓬植物鹽6~8份。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含紫杉烷提取物的植物鹽，其特征在于，所述紫杉烷提取 物，紫杉烷含量0.15~0.17%。，紫杉烷的純度為95.5~96.1%。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含紫杉烷提取物的植物鹽，其特征在于，所述鹽地堿蓬植 物鹽，Ca 含量為 2600~2700mg/kg，F(xiàn)e 含量為690~700mg/kg。5. -種含紫杉烷提取物的植物鹽的制備方法，其特征在于，所述紫杉烷提取物的制備 包括層析步驟，所述層析步驟，吸附樹脂柱柱高與直徑比為5~10:1。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種含紫杉烷提取物的植物鹽的制備方法，其特征在于，石油 醚-丙酮體積比1:5~100。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種含紫杉烷提取物的植物鹽的制備方法，其特征在于，洗脫 流速為5.5~11.31111^/111；[11 〇8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種含紫杉烷提取物的植物鹽的制備方法，其特征在于，所述 紫杉烷提取物的制備還包括破壁步驟，所述破壁步驟，用波長270~310nm的紫外燈光源照 射30~40min。9. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種含紫杉烷提取物的植物鹽的制備方法，其特征在于，其特 征在于，所述紫杉烷提取物的制備還包括破壁步驟，所述破壁步驟，溫度為-200~-185°C。10. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種含紫杉烷提取物的植物鹽的制備方法，其特征在于，所 述紫杉烷提取物的制備還包括酶解-超聲波提取步驟，所述酶解-超聲波提取，酶解時(shí)間0.5 ~5h，酶解溫度51~61°C。
【文檔編號】A23L33/105GK105962287SQ201610294041
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年5月3日
【發(fā)明人】王勝
【申請人】王勝