一種乳酸菌發(fā)酵型草魚(yú)濕軟飼料的制備方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種乳酸菌發(fā)酵型草魚(yú)濕軟飼料的制備方法，本發(fā)明制備方法操作簡(jiǎn)便，易于推廣普及，所需人力、物力少，能源消耗低，原材料廣泛，生產(chǎn)投資少、成本低，適用范圍廣，不僅可以促進(jìn)草魚(yú)生長(zhǎng)發(fā)育，提高草魚(yú)的成活率，降低死淘率，提高飼料效率，節(jié)省投入成本，實(shí)現(xiàn)草魚(yú)的高產(chǎn)、高效養(yǎng)殖，而且可以實(shí)現(xiàn)魚(yú)產(chǎn)品及其下腳料的合理利用，減輕環(huán)境污染，減少飼料中抗生素的使用，保障魚(yú)肉產(chǎn)品的綠色安全。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一種乳酸菌發(fā)酵型草魚(yú)濕軟飼料的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及水產(chǎn)飼料制備領(lǐng)域，具體涉及一種乳酸菌發(fā)酵型草魚(yú)濕軟飼料的制備 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 魚(yú)產(chǎn)品及其下腳料中含有豐富的蛋白質(zhì)，將其開(kāi)發(fā)生產(chǎn)為水產(chǎn)飼料對(duì)于減輕環(huán)境 污染、實(shí)現(xiàn)廢棄物的綜合利用具有重要意義。原料魚(yú)經(jīng)水解得到的液體蛋白，其營(yíng)養(yǎng)成分與 優(yōu)質(zhì)魚(yú)粉營(yíng)養(yǎng)成分相近，且其含有的賴(lài)氨酸、蛋氨酸的含量均高于魚(yú)粉，所含的必需氨基酸 種類(lèi)齊全、比例適當(dāng)，維生素和微量元素的含量也十分豐富。相對(duì)于魚(yú)粉而言，液體魚(yú)蛋白 不僅品種多、功能多、無(wú)毒副作用、香味濃郁，而且其加工制作簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，所需人力、 物力少，原料廣泛，適用范圍廣。
[0003] 谷胱甘肽(glutathione，GSH)是由γ-谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸組成的生物活性 肽，分為還原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽。通常所稱(chēng)谷胱甘肽是指還原型谷胱甘肽，是機(jī) 體內(nèi)的重要活性物質(zhì)，具有清除自由基、解毒、促進(jìn)鐵質(zhì)吸收及維持紅細(xì)胞膜的完整性、維 持DNA的生物合成、細(xì)胞的正常生長(zhǎng)及細(xì)胞免疫等多種生理功能。目前，谷胱甘肽在畜禽生 產(chǎn)中研究較多，已證實(shí)谷胱甘肽可以提高豬卵母細(xì)胞成熟率及顯微受精胚的卵裂率，提高 泌乳動(dòng)物的泌乳性能，解除黃曲霉毒素對(duì)雛雞的毒性，解除魚(yú)體微囊藻毒素引起的中毒癥 等。迄今為止，有關(guān)谷胱甘肽在水產(chǎn)動(dòng)物飼料方面應(yīng)用極少，而關(guān)于谷胱甘肽在草魚(yú)飼料中 的應(yīng)用則更為罕見(jiàn)。
[0004] 草魚(yú)(Ctenophary ngodon idella)是中國(guó)重要的淡水養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)，營(yíng)養(yǎng)豐富， 經(jīng)濟(jì)價(jià)值高。年產(chǎn)量約占中國(guó)淡水魚(yú)總產(chǎn)量的30%，年產(chǎn)值500億元以上。草魚(yú)還作為出口 品種，暢銷(xiāo)羅馬尼亞、香港、澳門(mén)等10多個(gè)國(guó)家和地區(qū)。然而，草魚(yú)是低等脊椎動(dòng)物，其免疫 系統(tǒng)功能低下，疾病極易暴發(fā)流行，從魚(yú)苗養(yǎng)到成魚(yú)，成活率不到30%。由于谷胱甘肽具有 抗氧化作用和整合解毒等作用，還能夠幫助保持正常的免疫系統(tǒng)的功能，因此，可以在草魚(yú) 飼料中添加適量的谷胱甘肽以增強(qiáng)其抗病力，提高其成活率，實(shí)現(xiàn)草魚(yú)的高產(chǎn)、多產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為了實(shí)現(xiàn)魚(yú)產(chǎn)品及其下腳料的合理利用和草魚(yú)的高產(chǎn)、高效養(yǎng)殖，本發(fā)明提供了 一種新的飼料加工制備方法，本發(fā)明方法是通過(guò)乳酸菌發(fā)酵將魚(yú)廢棄物轉(zhuǎn)化為液體蛋白， 再經(jīng)一系列步驟最終制備成能夠提高免疫機(jī)能且便于攝食的草魚(yú)濕軟飼料，本發(fā)明的技術(shù) 方案如下：
[0006] -種乳酸菌發(fā)酵型草魚(yú)濕軟飼料的制備方法，方法如下：
[0007] (1)按質(zhì)量比1:1的比例取食品級(jí)葡萄糖與食品級(jí)蔗糖各一份，加水配成質(zhì)量濃度 為2%的糖溶液，再按1%的接種量將乳酸菌接種于糖溶液中，置于30°C的條件下培養(yǎng)活化 24小時(shí)，得到乳酸菌液；
[0008] (2)將魚(yú)廢棄物絞碎，按其重量15%的比例加入糖蜜或甘蔗制糖的下腳料并攪拌 均勻，得到混合料；
[0009] (3)將步驟（1)的乳酸菌液灑入步驟(2)的混合料中并攪拌均勻，乳酸菌液的用量 為混合料總重量的2% ;
[0010] (4)將步驟(3)的混合料裝入密閉容器內(nèi)進(jìn)行厭氧發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間約30天；
[0011] (5)將厭氧發(fā)酵得到的產(chǎn)品與其重量20-40%的輔料混合并攪拌均勻，其中輔料為 100目以上的高粱粉、血粉、膨化豆柏粉、糠麩粉、干草粉的混合料；
[0012] (6)將步驟(5)的混合料邊攪拌邊加熱至50-60 °C，在此溫度下保溫繼續(xù)攪拌20-30 分鐘；
[0013] (7)將還原型谷胱甘肽加入到步驟(6)的混合料中并使其終濃度為350mg/kg;
[0014] (8)取步驟(7)的混合料總重量2.5 %的瓊脂粉加少量水稀釋后加熱至95°C熔化， 將熔化后的瓊脂加入到混合料中攪拌均勻，然后趁熱灌入模具中，待其冷卻，即成濕軟飼 料。
[0015] 本發(fā)明的有益效果：
[0016] 1、本發(fā)明制備方法操作簡(jiǎn)便，易于推廣普及，所需人力、物力少，能源消耗低，原材 料廣泛，生產(chǎn)投資少、成本低，適用范圍廣，不僅可以促進(jìn)草魚(yú)生長(zhǎng)發(fā)育，提高草魚(yú)的成活 率，降低死淘率，提高飼料效率，節(jié)省投入成本，實(shí)現(xiàn)草魚(yú)的高產(chǎn)、高效養(yǎng)殖，而且可以實(shí)現(xiàn) 魚(yú)產(chǎn)品及其下腳料的合理利用，減輕環(huán)境污染，減少飼料中抗生素的使用，保障魚(yú)肉產(chǎn)品的 綠色安全。
[0017] 2、本發(fā)明所制得的濕軟飼料比傳統(tǒng)的顆粒飼料適口性更好，消化率更高，誘食性 更佳，比顆粒飼料更經(jīng)濟(jì)、環(huán)保。
[0018] 3、乳酸菌發(fā)酵的原理是在密閉缺氧的環(huán)境下乳酸菌大量繁殖并產(chǎn)生大量乳酸，降 低了魚(yú)廢棄物的PH值，抑制了腐敗菌的生長(zhǎng)，同時(shí)由于乳酸的作用使魚(yú)廢棄物液化自溶，蛋 白質(zhì)分解，氨基酸、維生素和微量元素溶出，增加了飼料的營(yíng)養(yǎng)含量，提高了消化率。
[0019] 4、還原型谷胱甘肽(GSH)能夠清除自由基、過(guò)氧化物、重金屬、微囊藻毒素及黃曲 霉毒素等毒物，促進(jìn)Fe、無(wú)機(jī)Se和Ca的吸收，保護(hù)胃腸道黏膜上皮，防止因炎癥、局部缺血、 有毒物質(zhì)、氧化物質(zhì)等對(duì)腸黏膜造成的損傷，其在免疫系統(tǒng)抗感染和炎癥反應(yīng)中發(fā)揮著重 要作用，并參與白細(xì)胞三烯、MIF、IL-2等細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)，促進(jìn)淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞增殖， 從而影響機(jī)體的生理機(jī)能。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，凡是其 他在不脫離本發(fā)明核心的情況下做出的簡(jiǎn)單的變形或修改均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0021 ] -種乳酸菌發(fā)酵型草魚(yú)濕軟飼料的制備方法，方法如下：
[0022] (1)按質(zhì)量比1:1的比例取食品級(jí)葡萄糖與食品級(jí)蔗糖各一份，加水配成質(zhì)量濃度 為2%的糖溶液，再按1%的接種量將乳酸菌接種于糖溶液中，置于30°C的條件下培養(yǎng)活化 24小時(shí)，得到乳酸菌液；
[0023 ] (2)將魚(yú)廢棄物絞碎，按其重量15 %的比例加入糖蜜并攪拌均勻，得到混合料；
[0024] (3)將步驟（1)的乳酸菌液灑入步驟(2)的混合料中并攪拌均勻，乳酸菌液的用量 為混合料總重量的2% ;
[0025] (4)將步驟(3)的混合料裝入密閉容器內(nèi)進(jìn)行厭氧發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間約30天；
[0026] (5)將厭氧發(fā)酵得到的產(chǎn)品與其重量30 %的輔料混合并攪拌均勻，其中輔料為100 目以上的高粱粉、血粉、膨化豆柏粉、糠麩粉、干草粉的混合料；
[0027] (6)將步驟(5)的混合料邊攪拌邊加熱至50-60°C，在此溫度下保溫繼續(xù)攪拌30分 鐘；
[0028] (7)將還原型谷胱甘肽加入到步驟(6)的混合料中并使其終濃度為350mg/kg;
[0029] (8)取步驟(7)的混合料總重量2.5 %的瓊脂粉加少量水稀釋后加熱至95°C熔化， 將熔化后的瓊脂加入到混合料中攪拌均勻，然后趁熱灌入模具中，待其冷卻，即成濕軟飼 料。
[0030] 下面將結(jié)合試驗(yàn)實(shí)例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的積極作用：
[0031] (1)試驗(yàn)魚(yú):平均體重約8.5g的草魚(yú)幼魚(yú)。
[0032] (2)試驗(yàn)方法:將300尾草魚(yú)幼魚(yú)隨機(jī)分成對(duì)照組與試驗(yàn)組兩組，對(duì)照組與試驗(yàn)組 各設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50尾，飼養(yǎng)在300L的循環(huán)流水過(guò)濾水族箱中。對(duì)照組喂普通飼料，試 驗(yàn)組喂本發(fā)明所制飼料，試驗(yàn)期間定量投喂，每日分別于8:30、11:30和16:30分3次投喂，日 投喂量為體質(zhì)量的4%。每天觀察魚(yú)只健康狀況，記錄死亡情況，每2周稱(chēng)重1次，試驗(yàn)期為8 周。水溫18_30°C，pH 7.5,溶氧高于5mg/L，氨氮低于0.02mg/L。
[0033] (3)試驗(yàn)數(shù)據(jù)采集:試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，統(tǒng)計(jì)每箱草魚(yú)的存活數(shù)量和稱(chēng)量每箱草魚(yú)的總體 質(zhì)量，計(jì)算草魚(yú)的特定生長(zhǎng)率、存活率、飼料效率。每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取10尾草魚(yú)，以無(wú)菌的IOmL 注射器及5號(hào)針頭自尾動(dòng)脈取血，分為2份，1份以肝素抗凝，制備抗凝血供測(cè)定白細(xì)胞數(shù)目； 1份血液置于離心管中，經(jīng)4000r/min離心5min，取上清血漿測(cè)定胰島素樣生長(zhǎng)因子-UIGF-1)。取抽過(guò)血的5尾草魚(yú)，解剖，取肝胰臟稱(chēng)重，測(cè)定肝胰指數(shù)。
[0034] (4)試驗(yàn)結(jié)果分析：
[0035]表1:飼喂普通飼料與本發(fā)明所制飼料對(duì)草魚(yú)特定生長(zhǎng)率、存活率、飼料效率的影 響
[0037] 注:表中同一欄內(nèi)，右上角標(biāo)有不同英文字母的數(shù)據(jù)之間具有顯著差異(P〈0.05)。
[0038] 特定生長(zhǎng)率（％ ) = ( In末體體重-In初體體重)/飼養(yǎng)天數(shù)X 100;
[0039] 存活率（％ )=(末尾數(shù)-初始尾數(shù))/初始尾數(shù)X 100;
[0040] 飼料效率（％ )=(末體體重-初體體重)/投飼總質(zhì)量X 100。
[0041] 由表1可見(jiàn)，飼喂本發(fā)明所制飼料比普通飼料的草魚(yú)在特定生長(zhǎng)率、存活率、飼料 效率方面均有顯著提高，說(shuō)明本發(fā)明所制飼料可以促進(jìn)草魚(yú)的生長(zhǎng)發(fā)育，具有顯而易見(jiàn)的 積極作用。
[0042] 表2:飼喂普通飼料與本發(fā)明所制飼料的草魚(yú)的肝胰指數(shù)、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1含 量和白細(xì)胞計(jì)數(shù)
[0044] 注:表中同一欄內(nèi)，右上角標(biāo)有不同英文字母的數(shù)據(jù)之間具有顯著差異(P〈0.05)。
[0045] 由表2可見(jiàn)，本發(fā)明所制飼料由于添加了350mg · kg-1的還原型谷胱甘肽(GSH)，因 而飼喂出的草魚(yú)其肝胰指數(shù)、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1及白細(xì)胞計(jì)數(shù)均比對(duì)照組顯著提高。
[0046] 魚(yú)類(lèi)的肝胰指數(shù)是對(duì)長(zhǎng)期和短期營(yíng)養(yǎng)方式都很敏感的指標(biāo)，肝臟的生長(zhǎng)和發(fā)育往 往受到飼料成分的影響。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組草魚(yú)肝胰指數(shù)有不同程度升高，這可能是 GSH促進(jìn)了肝臟細(xì)胞DNA的合成，進(jìn)而表現(xiàn)在草魚(yú)肝胰指數(shù)有所增加。大量研究證實(shí)，血循環(huán) 中的胰島素樣生長(zhǎng)因子-I(IGF-I)大部分由肝臟合成分泌。而本試驗(yàn)中攝食本發(fā)明所制飼 料的試驗(yàn)組草魚(yú)IGF-I活性明顯提高，表明GSH促進(jìn)了肝臟合成和分泌IGF-I的能力，進(jìn)一步 增強(qiáng)了肝臟細(xì)胞DNA合成能力，最終提高了肝胰指數(shù)。
[0047]血循環(huán)中的IGF-I生物作用僅受生長(zhǎng)激素的調(diào)節(jié)，而生長(zhǎng)激素的促生長(zhǎng)作用是通 過(guò)IGF-I介導(dǎo)的，本試驗(yàn)中對(duì)照組草魚(yú)IGF-I水平的提高說(shuō)明在草魚(yú)飼料中添加 GSH能夠調(diào) 節(jié)草魚(yú)生長(zhǎng)激素水平，并最終達(dá)到促進(jìn)草魚(yú)生長(zhǎng)的作用。這也恰與試驗(yàn)中草魚(yú)特定生長(zhǎng)率、 飼料效率顯著提高相對(duì)應(yīng)。
[0048]魚(yú)類(lèi)的嗜中性白細(xì)胞和單核細(xì)胞已經(jīng)被證實(shí)具有很強(qiáng)的吞噬能力，相對(duì)于特異性 免疫機(jī)能而言，這種能力對(duì)于比較低等的水生動(dòng)物更為重要。白細(xì)胞的吞噬功能是動(dòng)物非 特異性免疫的重要組成部分。白細(xì)胞的溶酶體中含有溶菌酶、蛋白水解酶、髓過(guò)氧化酶等， 這些酶對(duì)大多數(shù)微生物是致死性的。當(dāng)白細(xì)胞受適當(dāng)?shù)拇碳ず?，可產(chǎn)生前列腺素、凝血惡烷 和三烯酸。因此，測(cè)定動(dòng)物的白細(xì)胞數(shù)目在一定程度上能反映動(dòng)物非特異性免疫能力。魚(yú)類(lèi) 血液中白細(xì)胞數(shù)目可能因機(jī)體接觸抗原性物質(zhì)或者受到環(huán)境因子的刺激而上升。本試驗(yàn)結(jié) 果表明，在草魚(yú)飼料中添加 GSH能夠增加草魚(yú)血液中白細(xì)胞數(shù)目，這恰與試驗(yàn)中草魚(yú)存活率 提高相對(duì)應(yīng)，說(shuō)明GSH通過(guò)刺激草魚(yú)血液白細(xì)胞的產(chǎn)生從而進(jìn)一步增強(qiáng)了草魚(yú)的非特異性 防御功能，進(jìn)而達(dá)到增強(qiáng)抗病力的作用。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種乳酸菌發(fā)酵型草魚(yú)濕軟飼料的制備方法，其特征在于，方法如下： (1) 按質(zhì)量比1:1的比例取食品級(jí)葡萄糖與食品級(jí)蔗糖各一份，加水配成質(zhì)量濃度為2% 的糖溶液，再按1 %的接種量將乳酸菌接種于糖溶液中，置于30°C的條件下培養(yǎng)活化24小 時(shí)，得到乳酸菌液； (2) 將魚(yú)廢棄物絞碎，按其重量15%的比例加入糖蜜或甘蔗制糖的下腳料并攪拌均勻， 得到混合料； (3) 將步驟（1)的乳酸菌液灑入步驟(2)的混合料中并攪拌均勻，乳酸菌液的用量為混 合料總重量的2%; (4) 將步驟(3)的混合料裝入密閉容器內(nèi)進(jìn)行厭氧發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間約30天； (5 )將厭氧發(fā)酵得到的產(chǎn)品與其重量20-40 %的輔料混合并攪拌均勻，其中輔料為100 目以上的高粱粉、血粉、膨化豆柏粉、糠麩粉、干草粉的混合料； (6) 將步驟（5)的混合料邊攪拌邊加熱至50-60°C，在此溫度下保溫繼續(xù)攪拌20-30分 鐘； (7) 將還原型谷胱甘肽加入到步驟(6)的混合料中并使其終濃度為350 mg/ kg; (8 )取步驟(7 )的混合料總重量2.5%的瓊脂粉加少量水稀釋后加熱至95 °C熔化，將熔化 后的瓊脂加入到混合料中攪拌均勻，然后趁熱灌入模具中，待其冷卻，即成濕軟飼料。
【文檔編號(hào)】A23K10/18GK105981995SQ201610015716
【公開(kāi)日】2016年10月5日
【申請(qǐng)日】2016年1月7日
【發(fā)明人】武為照
【申請(qǐng)人】鳳陽(yáng)縣興科農(nóng)業(yè)生態(tài)發(fā)展有限公司