一種靈芝提取物及其制備方法和應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種靈芝提取物的制備方法，該方法包括以下步驟：(1)將靈芝菌種注入培養(yǎng)基中，在溫度25～30℃，濕度70～95％的條件下培育45?60天得到培養(yǎng)體；(2)將培養(yǎng)體在60～90℃條件下烘干至含水量為12％以下，再將烘干后的培養(yǎng)體粉碎，過(guò)20～60目篩，得到靈芝粉；(3)向靈芝粉中加入水和中性蛋白酶，40～55℃條件下酶解6～24h；(4)將酶解的靈芝粉通過(guò)板框過(guò)濾器過(guò)濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈芝提取物。本發(fā)明將廉價(jià)易得的蠶蛹、雞蛋、黃粉蟲(chóng)，蚯蚓等作為培養(yǎng)基，快速培育出靈芝菌絲及子實(shí)體，通過(guò)酶解?過(guò)濾?濃縮?干燥制得靈芝提取物，其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值獲得了極大的提高，保健功能明顯提升。
【專利說(shuō)明】
_種靈芝提取物及其制備方法和應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及生物和酶工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及靈芝培育、靈芝精華物質(zhì)的制備方 法及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 靈芝屬于自然界分布的一類真菌生物，是傳統(tǒng)名貴中藥材之一，藥食兼用。古今藥 理與臨床研究均證明，靈芝確有防病治病、延年益壽之功效，具有廣泛的藥理作用，如抗腫 瘤作用、免疫調(diào)節(jié)作用、抗放射與抗化療作用，鎮(zhèn)靜作用、強(qiáng)心及抗心肌缺血作用、調(diào)節(jié)血脂 作用、降血糖作用、平喘作用、保肝作用、抗缺氧作用和抗衰老作用等。
[0003] 經(jīng)化學(xué)分析，靈芝中含有多種多糖、多肽、氨基酸、三萜類、核苷等，具有廣闊的市 場(chǎng)前景。但為數(shù)眾多的靈芝品種中，只有赤靈芝、紫芝、云芝等具有較高的藥用價(jià)值，野生靈 芝的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足人們對(duì)藥用靈芝的需求。而且，目前人們利用靈芝的方式多為直接 食用或制成飲品，大部分營(yíng)養(yǎng)成分未能被人體所吸收。因此，亟需一種高效制備靈芝精華物 質(zhì)的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種靈芝提取物及其制備方法和應(yīng)用，用以解決靈芝難以 大規(guī)模生產(chǎn)，以及靈芝中的營(yíng)養(yǎng)成分難以被人體充分吸收的問(wèn)題。
[0005] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明第一方面提供了一種靈芝提取物的制備方法。具體地，該 方法包括如下步驟：
[0006] (1)將靈芝菌種注入培養(yǎng)基中，在溫度25~30°C，濕度70~95%的條件下培育45~ 60天得到培養(yǎng)體，即靈芝菌絲、靈芝子實(shí)體和培養(yǎng)基的混合物；
[0007] (2)將所述培養(yǎng)體在60~90°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培 養(yǎng)體粉碎，過(guò)20~60目篩，得到靈芝粉；
[0008] (3)向所述靈芝粉中加入水和中性蛋白酶，40~55°C條件下酶解6~24h;
[0009] (4)將酶解的靈芝粉通過(guò)板框過(guò)濾器過(guò)濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物；
[0010]其中，所述培養(yǎng)基為蠶蛹、雞蛋、黃粉蟲(chóng)，蚯蚓，螞蟻，蟬中的一種或多種。
[0011 ] 優(yōu)選地，所述菌種的接種量為10~30%。
[0012] 優(yōu)選地，所述中性蛋白酶為木瓜酶、胰蛋白酶、枯草芽孢桿菌蛋白酶中的一種或多 種。
[0013] 優(yōu)選地，所述步驟(3)中加入水的質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的1~10倍，加入中性蛋白酶 的質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的〇. 1~1 %。
[0014] 優(yōu)選地，步驟（3)中酶解時(shí)還加入脂肪酶，所述脂肪酶的添加量為靈芝粉質(zhì)量的 0.1 ~0.5%〇
[0015] 優(yōu)選地，靈芝精華提取物粒徑小于800nm。
[0016] 優(yōu)選地，所述靈芝精華提取物制成沖劑、片劑或膠囊。
[0017] 本發(fā)明第二方面提供了一種靈芝提取物，所述靈芝提取物是本發(fā)明第一方面提供 的一種靈芝提取物的制備方法制得的。優(yōu)選地，所述靈芝提取物含有靈芝多肽20~60%、三 萜1~5%、靈芝多糖1~10%、氨基酸10~30%、核苷1~3%、生物堿0.1~3%、灰分1~5%、 其余為水分。
[0018] 本發(fā)明第三方面提供了一種根據(jù)本發(fā)明第二方面提供的靈芝提取物的應(yīng)用，所述 靈芝提取物用于食品、保健或醫(yī)藥領(lǐng)域。
[0019] 本發(fā)明方法具有如下優(yōu)點(diǎn)：
[0020] 1、本發(fā)明利用蠶蛹、雞蛋、黃粉蟲(chóng)，蚯蚓，螞蟻，蟬為培養(yǎng)基，操作方法簡(jiǎn)單，材料易 于取得，具有低成本、高產(chǎn)出、易于大規(guī)模推廣的特點(diǎn)。
[0021] 2、本發(fā)明中的培養(yǎng)體的培育條件易于控制，具有菌絲生長(zhǎng)速度快，生物量高，培育 周期短，成本低的優(yōu)點(diǎn)。
[0022] 3、本發(fā)明中的靈芝精華提取物具有易溶于水的特點(diǎn)，可根據(jù)需要制成各種水溶性 制劑，使用方便。
[0023] 4、本發(fā)明中的靈芝精華提取物蛋白含量比普通方法培育出的靈芝蛋白含量提高 了 6倍，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值大大提高。
[0024] 5、本發(fā)明中的靈芝精華提取物靈芝三萜和靈芝多糖含量比普通方法培育出的靈 芝三萜和靈芝多糖含量提高了 2~3倍，抗腫瘤，抗血栓，抗氧化，抗衰老，抗輻射，保肝，降血 糖，降血脂，調(diào)節(jié)免疫，調(diào)節(jié)核酸，增強(qiáng)體液免疫功能的作用明顯提升。
【具體實(shí)施方式】
[0025] 以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。
[0026] 實(shí)施例1
[0027] 本實(shí)施例靈芝提取物的制備方法，按以下步驟進(jìn)行：
[0028] (1)將8g靈芝菌種注入50g蟬中，在溫度為25 °C，濕度95 %的條件下培育50天得到 培養(yǎng)體(即靈芝菌絲、靈芝子實(shí)體和培養(yǎng)基的混合物）；
[0029] (2)將培養(yǎng)體在90°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養(yǎng)體粉碎， 過(guò)25目篩得到靈芝粉；
[0030] (3)向靈芝粉中加入質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的6倍的水和質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的1 %的胰 蛋白酶，54°C條件下酶解6h;
[0031] (4)將酶解的靈芝粉通過(guò)板框過(guò)濾器過(guò)濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物(靈芝精華提取物粒徑小于800nm)。
[0032] 實(shí)施例2
[0033]本實(shí)施例靈芝提取物的制備方法，按以下步驟進(jìn)行：
[0034] (1)將18g靈芝菌種注入120g蚯蚓中（即菌種的接種量為15%)，在溫度為29°C，濕 度90 %的條件下培育45天得到培養(yǎng)體；
[0035] (2)將培養(yǎng)體在85°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養(yǎng)體粉碎， 過(guò)30目篩得到靈芝粉；
[0036] (3)向靈芝粉中加入質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的7倍的水和質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的0.8%的 酶為木瓜酶，40 °C條件下酶解12h;
[0037] (4)將酶解的靈芝粉通過(guò)板框過(guò)濾器過(guò)濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物。
[0038] 實(shí)施例3
[0039] 本實(shí)施例靈芝提取物的制備方法，按以下步驟進(jìn)行：
[0040] (1)將14.4g靈芝菌種注入80g黃粉蟲(chóng)中，在溫度26°C，濕度80%的條件下培育47天 得到培養(yǎng)體；
[0041] (2)將培養(yǎng)體在75°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養(yǎng)體粉碎， 過(guò)40目篩得到靈芝粉；
[0042] (3)向靈芝粉中加入質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的1倍的水和質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的0.7%的 枯草芽孢桿菌蛋白酶以及質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的0.1%的脂肪酶，53°C條件下酶解14h;
[0043] (4)將酶解的靈芝粉通過(guò)板框過(guò)濾器過(guò)濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物。
[0044] 實(shí)施例4
[0045] 本實(shí)施例靈芝提取物的制備方法，按以下步驟進(jìn)行：
[0046] (1)將48g靈芝菌種注入160g雞蛋中，在溫度27°C，濕度72%的條件下培育48天得 到培養(yǎng)體；
[0047] (2)將培養(yǎng)體在80°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養(yǎng)體粉碎， 過(guò)45目篩得到靈芝粉；
[0048] (3)向靈芝粉中加入質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的2倍的水和質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的0.4%的 木瓜酶和枯草芽孢桿菌蛋白酶，52 °C條件下酶解8h;
[0049] (4)將酶解的靈芝粉通過(guò)板框過(guò)濾器過(guò)濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物。
[0050] 實(shí)施例5
[0051] 本實(shí)施例靈芝提取物的制備方法，按以下步驟進(jìn)行：
[0052] (1)將25g靈芝菌種注入100g螞蟻中，在溫度28°C，濕度70%的條件下培育58天得 到培養(yǎng)體；
[0053] (2)將培養(yǎng)體在65°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養(yǎng)體粉碎， 過(guò)60目篩得到靈芝粉；
[0054] (3)向靈芝粉中加入質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的8倍的水和質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的0.2%的 木瓜酶和胰蛋白酶，42 °C條件下酶解20h;
[0055] (4)將酶解的靈芝粉通過(guò)板框過(guò)濾器過(guò)濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物。
[0056] 實(shí)施例6
[0057] 本實(shí)施例靈芝提取物的制備方法，按以下步驟進(jìn)行：
[0058] (1)將30g靈芝菌種注入150g蠶蛹中，在溫度30°C，濕度75%的條件下培育60天得 到培養(yǎng)體；
[0059] (2)將培養(yǎng)體在60°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養(yǎng)體粉碎， 過(guò)50目篩得到靈芝粉；
[0060] (3)向靈芝粉中加入質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的9倍的水和質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的0.1 %的 木瓜酶、胰蛋白酶和枯草芽孢桿菌蛋白酶以及質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的0.5%的脂肪酶，50°C條 件下酶解21h;
[0061] (4)將酶解的靈芝粉通過(guò)板框過(guò)濾器過(guò)濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物。
[0062] 實(shí)施例7
[0063]本實(shí)施例靈芝提取物的制備方法，按以下步驟進(jìn)行：
[0064] (1)將24g靈芝菌種注入200g干蠶蛹中，在溫度25 °C，濕度89 %的條件下培育52天 得到培養(yǎng)體；
[0065] (2)將培養(yǎng)體在63°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養(yǎng)體粉碎， 過(guò)20目篩得到靈芝粉；
[0066] (3)向靈芝粉中加入質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的3倍的水和質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的0.5%的 胰蛋白酶和枯草芽孢桿菌蛋白酶，48 °C條件下酶解24h;
[0067] (4)將酶解的靈芝粉通過(guò)板框過(guò)濾器過(guò)濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物。
[0068] 實(shí)施例8
[0069] 本實(shí)施例靈芝提取物的制備方法，按以下步驟進(jìn)行：
[0070] (1)將18g靈芝菌種注入180g干螞蟻中，在溫度28°C，濕度92%的條件下培育56天 得到培養(yǎng)體；
[0071] (2)將培養(yǎng)體在70°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養(yǎng)體粉碎， 過(guò)35目篩得到靈芝粉；
[0072] (3)向靈芝粉中加入質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的10倍的水和質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的0.6% 的酶為木瓜酶、胰蛋白酶和枯草芽孢桿菌蛋白酶以及質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的0.2%的脂肪酶， 55°C條件下酶解22h;
[0073] (4)將酶解的靈芝粉通過(guò)板框過(guò)濾器過(guò)濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物。
[0074] 本申請(qǐng)實(shí)施例1~8中培養(yǎng)基以溫度25~30°C，濕度70~95%的條件下培育，不僅 可以促進(jìn)子實(shí)體的均衡生長(zhǎng)，而且可以避免子實(shí)體的僵化。在一個(gè)實(shí)施例中，可以在培養(yǎng)基 培育過(guò)程中，在晚間或清晨開(kāi)窗門(mén)1~2次，每次1~2小時(shí)，或全天長(zhǎng)緩氣流通風(fēng)，以促進(jìn)子 實(shí)體的正常發(fā)育。其次，子實(shí)體發(fā)育過(guò)程中，還可以增加光照，光照強(qiáng)度在4000~6000LX下 對(duì)子實(shí)體進(jìn)行照射，使菌柄粗壯，菌蓋厚大。
[0075]表1實(shí)施例1~8靈芝提取物產(chǎn)出率
[0077]從表1中可以看出，實(shí)施例1~8制得的靈芝提取物產(chǎn)出率均在9.3%左右。實(shí)施例1 ~8中的蠶蛹培養(yǎng)基、雞蛋培養(yǎng)基、黃粉蟲(chóng)培養(yǎng)基，蚯蚓培養(yǎng)基，螞蟻培養(yǎng)基，蟬培養(yǎng)基靈芝 提取物產(chǎn)出率大體相同，且本實(shí)施例中的活體培養(yǎng)基和干培養(yǎng)基的靈芝提取物產(chǎn)出率，都 明顯高于現(xiàn)有產(chǎn)品中產(chǎn)出率的8.2%。本發(fā)明實(shí)施例1~8制得的靈芝提取物粒徑小于 800nm，且易溶于水，使用時(shí)可根據(jù)需要制成各種水溶性制劑。
[0078] 表2實(shí)施例1~8培養(yǎng)體菌絲生物量
[0080]從表2中可以看出，實(shí)施例1~8的培養(yǎng)體菌絲生物量均達(dá)到了 6mg/g以上，高于現(xiàn) 有產(chǎn)品的4.7mg/g。實(shí)施例1~8中的培養(yǎng)體培養(yǎng)天數(shù)均在45-60天，所需培養(yǎng)條件為溫度25 ~30 °C，濕度70~95%，具有培育條件易于控制，菌絲生長(zhǎng)速度快，生物量高，培育周期短， 成本低的優(yōu)點(diǎn)。
[0081]另外，本實(shí)施例中的培養(yǎng)體可以采用活體的蠶蛹、雞蛋、黃粉蟲(chóng)，蚯蚓，螞蟻，蟬等， 也可以采用干蠶蛹、干黃粉蟲(chóng)、干蚯蚓、干螞蟻、干蟬等，材料易于取得，具有低成本、高產(chǎn) 出、易于大規(guī)模推廣的特點(diǎn)。
[0082]表3實(shí)施例1~8制得的靈芝提取物靈芝蛋白、靈芝三萜及靈芝多糖的含量
[0084] 從表3中可以看出，實(shí)施例1~8制得的靈芝提取物中靈芝蛋白、靈芝三萜和靈芝多 糖與普通方法培育出的靈芝中的靈芝蛋白、靈芝三萜和靈芝多糖相比有了明顯的提高。本 實(shí)施例1~8制得的靈芝提取物中的靈芝蛋白含量與普通方法培育出的靈芝中的靈芝蛋白 含量提高了 6倍;本實(shí)施例1~8制得的靈芝提取物中的靈芝三萜含量與普通方法培育出的 靈芝中的靈芝三萜含量提高了 2~3倍;本實(shí)施例1~8制得的靈芝提取物中的靈芝多糖含量 與普通方法培育出的靈芝中的靈芝多糖含量提高了 2~3倍。
[0085] 此外，靈芝中靈芝多糖是一種非特異性免疫增強(qiáng)劑，不僅能增強(qiáng)細(xì)胞免疫作用，而 且能夠增強(qiáng)體液免疫作用，促進(jìn)巨噬細(xì)胞的吞噬能力，直接地產(chǎn)生抗腫瘤作用;靈芝三萜類 是靈芝菌絲體一、二級(jí)代謝產(chǎn)物，是靈芝發(fā)揮抗炎、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗衰老、毒殺腫瘤細(xì)胞、抗缺 氧等作用的主要功效成分;靈芝中含有18種氨基酸，其中人體必需氨基酸的相對(duì)含量高于 50%，為一般食用菌的2~3倍。
[0086]雖然，上文中已經(jīng)用一般性說(shuō)明及具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本 發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的。因此， 在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種靈芝提取物的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟： (1) 將靈芝菌種注入培養(yǎng)基中，在溫度25~30°C，濕度70~95%的條件下培育45-60天 得到培養(yǎng)體，即靈芝菌絲、靈芝子實(shí)體和培養(yǎng)基的混合物； (2) 將所述培養(yǎng)體在60~90°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養(yǎng)體 粉碎，過(guò)20~60目篩，得到靈芝粉； (3) 向所述靈芝粉中加入水和中性蛋白酶，40~55 °C條件下酶解6~24h; (4) 將酶解的靈芝粉通過(guò)板框過(guò)濾器過(guò)濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈芝提 取物； 其中，所述培養(yǎng)基為蠶蛹、雞蛋、黃粉蟲(chóng)，蚯蚓，螞蟻，蟬中的一種或多種。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述菌種的接種量為10~30%。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述中性蛋白酶為木瓜酶、胰蛋白酶、枯草 芽孢桿菌蛋白酶中的一種或多種。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)中酶解時(shí)加入水的質(zhì)量為靈 芝粉質(zhì)量的1~10倍，加入中性蛋白酶的質(zhì)量為靈芝粉質(zhì)量的0.1~1%。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)中酶解時(shí)還加入脂肪酶，所述脂肪 酶的添加量為靈芝粉質(zhì)量的0.1~0.5%。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述靈芝精華提取物粒徑小于800nm。7. 根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述靈芝精華提取物制成沖 劑、片劑或膠囊。8. -種靈芝提取物，其特征在于，所述靈芝提取物是利用權(quán)利要求1中的方法制得的。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的靈芝提取物，其特征在于，所述靈芝提取物含有靈芝多肽20~ 60%、三萜1~5%、靈芝多糖1~10%、氨基酸10~30%、核苷1~3%、生物堿0.1~3%、灰分 1~5 %、其余為水分。10. -種權(quán)利要求8所述的靈芝提取物的應(yīng)用，其特征在于，所述靈芝提取物用于食品、 保健或醫(yī)藥領(lǐng)域。
【文檔編號(hào)】A23L31/00GK106072632SQ201610424911
【公開(kāi)日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年6月15日
【發(fā)明人】錢(qián)衛(wèi)文, 錢(qián)容
【申請(qǐng)人】錢(qián)衛(wèi)文