專利名稱：仙草藤膠囊及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及以補(bǔ)腎為主治療結(jié)締組織疾病和免疫性疾病的藥品，即仙草藤膠囊。
在我國(guó)醫(yī)藥領(lǐng)域，中藥研究以前所未有的規(guī)模蓬勃發(fā)展，有千百萬(wàn)醫(yī)藥科學(xué)家，以聰明的才智，高超的技術(shù)，日以繼夜研究和開(kāi)發(fā)新藥，為振興中華民族衛(wèi)生健康事業(yè)作貢獻(xiàn)。在治療“類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、紅斑狼瘡”等結(jié)締組織疾病和免疫性疾病方面，現(xiàn)有藥品療效不高，毒副作用大，不能達(dá)到有效的治療目的。
本發(fā)明的目的就是提供一種以補(bǔ)腎為主治療結(jié)締組織疾病和免疫性疾病的仙草藤膠囊，可治療疑難病“類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、紅斑狼瘡”等結(jié)締組織病，組方合理，提取加工工藝先進(jìn)，療效高，毒副作用小，藥源廣，價(jià)格低廉。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案一種仙草藤膠囊，其特征在于方劑組成為仙靈脾(淫羊藿)、甘草、雷公藤。
其制備方法由以下工藝步驟實(shí)現(xiàn)(一)淫羊藿提取工藝(1)淫羊藿粗品提取工藝粗切之原藥加入8倍量1％硫酸水，保持80℃回流提取3小時(shí)，濾取藥液另置；殘?jiān)偌?倍量1％硫酸液，按同一操作提取2小時(shí)，連續(xù)2次，復(fù)濾取藥液與前液合并，集合多次酸水提液，濃縮成比重達(dá)1.1-1.2；加95％乙醇等量沉淀雜質(zhì)，靜置12-14小時(shí)，抽取上清液過(guò)濾，沉淀用45％已醇洗滌2-3次，將沉淀中可溶成分洗出，濾液和洗液合并，回收乙醇，減壓濃縮冷卻成膏；(2)淫羊藿皂甙純品提取工藝淫羊藿粗品浸膏加70％4倍量乙醇，加熱回流2小時(shí)，過(guò)濾，濾渣再加2倍量乙醇回流1小時(shí)，過(guò)濾，回收乙醇，60℃干燥；(3)淫羊藿多糖提取工藝淫羊藿粉碎粗粉加75％乙醇5倍量0.5AHaoH加熱回流2小時(shí)，過(guò)濾，同法提取三次，合并濾液濃縮成膏，加95％乙醇隨攪拌至沉淀、過(guò)夜、過(guò)濾，回收乙醇，連續(xù)2次；加水2倍量，用DEAE纖維素(磷酸鹽型)柱層析純化，得純品淫羊藿多糖；(二)甘草提取工藝(1)粗甘草酸提取工藝粗甘草粉用12倍量0.5％氨水滲漏，連續(xù)3次，滲漏液濃縮至原體積1/5過(guò)濾，濾液加濃硫酸至PH3，過(guò)濾析出的沉淀，水洗3次，60℃以下干燥既得粗甘草酸；(2)純品甘草酸提取工藝以上所得粗甘草酸400g，加4倍量乙醇，加熱回流3小時(shí)，過(guò)濾，濾渣加2倍量乙醇回流2次，合并回流液加10g活性炭，回流脫色半小時(shí)冷卻、過(guò)濾，濾液通氨氣至PH7-7.5，無(wú)固體析出為止，濾液沉淀，以少量乙醇洗滌、室溫干燥，得甘草酸銨250g；(3)注射用純品甘草酸白色結(jié)晶前步得到的甘草酸銨250g，繼續(xù)用4倍量的80％乙醇，加熱溶解并用活性炭脫色，冷卻過(guò)濾，回收乙醇，濾液濃縮，析出白色結(jié)晶；(4)甘草殘?jiān)统恋砦?，提取甘草酸、甘草酸鈣、甘草黃酮甘草殘?jiān)统恋砦锛?％H2SO4-70％7醇為溶媒，熱浸8小時(shí)后，加熱回流2小時(shí)，過(guò)濾，連續(xù)2次，合并過(guò)慮，回收乙醇，濃縮成膏，同時(shí)回收得甘草酸、甘草酸鈣、甘草黃酮；(三)雷公藤總甙提取工藝(1)雷公藤粗粉用85％甲醇5倍量回流提取，趁熱過(guò)濾，藥渣再加入新鮮溶劑，反復(fù)回流提取3次，每次4小時(shí)，合并4次甲醇提取液，回收甲醇，減壓濃縮，即得粗總甙浸膏；(因皂甙在熱醇中溶解，冷后既析出，所用熱醇回流提取)；(2)粗皂甙浸膏加水溶解，后用液滴逆流層析(D.C.C-A型)溶劑系統(tǒng)為氯仿-甲醇-正丁醇-水(體積比按45∶60∶6∶40)，下層作固定相，上層作移動(dòng)相，溶出溶液用自動(dòng)分步收集儀收集，回收溶劑；正丁醇提取液，水洗后減壓濃縮，即得純?cè)磉埃?3)為防止含有殘留正丁醇，工藝最后采用稀乙醇再處理方法，以縮短干燥時(shí)間，去除正丁醇?xì)埩?，即得純品雷公藤甙?四)仙草藤膠囊制劑工藝淫羊藿甙50mg/kg/日，淫羊藿黃酮20mg/kg/日，淫羊藿多糖20mg/kg/日；甘草酸50mg/kg/日，甘草黃酮10mg/kg/日，雷公藤甙1.5mg/kg/日；均按50kg體重計(jì)算用量，共計(jì)7575mg/50kg/日，共分裝16個(gè)大號(hào)膠囊，每個(gè)膠囊裝473.43mg。
本發(fā)明具有以下顯著效果1、本發(fā)明有創(chuàng)新性，組方合理、高效、低毒由仙靈脾(又名淫羊藿)、甘草、雷公藤組成，現(xiàn)有技術(shù)中未見(jiàn)以補(bǔ)腎為主治療結(jié)締組織疾病和免疫性疾病，而臨床治愈率、顯效率、有效率很高，毒副作用很小。如治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和強(qiáng)直性脊柱炎。(1)本發(fā)明所提供的藥方有很強(qiáng)的補(bǔ)腎壯陽(yáng)、強(qiáng)筋壯骨、益精、補(bǔ)腰膝、活血化瘀、祛風(fēng)濕散寒、化痰通絡(luò)功效，并有很強(qiáng)的解毒作用。對(duì)久病入絡(luò)，經(jīng)久不愈，痰瘀互結(jié)，正虛邪實(shí)之癥有獨(dú)特療效。促進(jìn)DNA合成和蛋白質(zhì)合成，促進(jìn)正常骨生長(zhǎng)和受損骨恢復(fù)健壯，特別對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和強(qiáng)直性脊柱炎真正達(dá)到高效、獨(dú)特的優(yōu)良效果。(2)高效臨床療效比單服雷公藤高，根據(jù)236例臨床治療觀察，服“仙草藤膠囊”3-7天有98％的人能達(dá)到止痛，7天內(nèi)消腫率達(dá)87％，治愈率達(dá)52.12％，顯效率達(dá)79.31％，有效率達(dá)96.91％，類風(fēng)濕因子轉(zhuǎn)陰率達(dá)76.6％，共治強(qiáng)直性脊柱炎129例，治愈率55.81％，顯效率32.56％，好轉(zhuǎn)率9.3％，總有效率97.67％。治愈率+顯效率＝88.37％，均較單服雷公藤高。“仙草藤膠囊”真正達(dá)到高效的獨(dú)特效果。(3)低毒以前單服雷公藤片或膠囊80天，心、肝、腎、生殖系統(tǒng)均有不同程度損傷病變，毒副作用達(dá)30-68.46％，生殖系統(tǒng)損傷在84％?，F(xiàn)在治類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和強(qiáng)直性脊柱炎服“仙草藤膠囊”連服180天，服藥時(shí)間比以前增加1.66倍，經(jīng)檢測(cè)心、肝、腎、生殖系統(tǒng)器管均無(wú)明顯損害。說(shuō)明“仙草藤膠囊”無(wú)嚴(yán)重毒性，只是部分人有較輕的胃腸道反應(yīng)，原有心、肝病者，個(gè)別人有反應(yīng)。但對(duì)生殖系統(tǒng)1-2％的人有反應(yīng)或性欲減退現(xiàn)象，個(gè)別人有精子異常。所有女性無(wú)閉經(jīng)或子宮減重等，說(shuō)明毒性很低。
2、本發(fā)明所提供的藥方三味藥提取工藝先進(jìn)、純度高，所以毒副作用??；特別是雷公藤甙用液滴逆流層析(D.C.C-A型)純度高，所以毒性低。
3、本發(fā)明新的中藥提純成分組方合理由于淫半藿甙、淫羊藿黃酮、淫羊藿酸多糖，甘草酸(甘草皂甙)、甘草黃酮、雷公藤甙(因毒性最低雷公藤甙類＜三萜類＜生物堿＜二萜類)三種藥均是甙類和黃酮類組成，所以無(wú)配伍禁忌，藥效穩(wěn)定，有協(xié)同作用。
4、本發(fā)明具有強(qiáng)有力的抗炎作用抑制免疫反應(yīng)，又有免疫增強(qiáng)作用，有體液免疫和細(xì)胞免疫作用，雙向調(diào)節(jié)作用，能誘生r-干擾素(IFN-r)，白細(xì)胞介素-2(IL-2)，白細(xì)胞介素-3(IL-3)，腫瘤壞死因于(TNF-a)，β1-轉(zhuǎn)化因子(TGF-B1)，HIV-1抑制因子，自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)，這些免疫活性物質(zhì)對(duì)調(diào)節(jié)免疫、抑制腫瘤、抑制HIV有顯著作用，特別對(duì)結(jié)締組織疾病及免疫性疾病的治療取得了獨(dú)特效果。
5、本發(fā)明有強(qiáng)的抗腫瘤和抗艾滋病毒作用三藥均有很強(qiáng)的抗腫瘤活性，抑制和殺傷腫瘤靶細(xì)胞，并能抑制HIV增殖，抑制HIV轉(zhuǎn)錄酶。
6、本發(fā)明所提供的藥方有很強(qiáng)的解毒作用能解除雷公藤對(duì)心、肝、腎、內(nèi)分泌和生殖系統(tǒng)的毒性。淫羊藿對(duì)內(nèi)分泌功能有促進(jìn)和增強(qiáng)作用如催淫作用，促進(jìn)附睪、精囊腺發(fā)育。對(duì)女性提高垂體對(duì)黃體生成素釋放激素LRH反應(yīng)性，能增強(qiáng)垂體前葉、卵巢、子宮重量等。對(duì)抗或是說(shuō)解除雷公藤對(duì)心、肝、腎、內(nèi)分泌生殖系統(tǒng)的毒性。甘草解除雷公藤的作用更強(qiáng)，甘草復(fù)合體(LX)對(duì)心、肝、腎、內(nèi)分泌系統(tǒng)有保護(hù)作用，對(duì)雷公藤所致心律失常有保護(hù)作用，使心臟收縮力加強(qiáng)，對(duì)生殖系統(tǒng)損害有保護(hù)作用，防傷害作用，甘草依劑量對(duì)男、女生殖系統(tǒng)有雙向調(diào)節(jié)作用。
7、本發(fā)明有抗菌、抗真菌、抗病毒作用能抑制金葡菌、鏈球菌、真菌和病毒作用，對(duì)HIV有強(qiáng)的抑制作用，并能抑制HIV轉(zhuǎn)錄酶。
8、本發(fā)明所提供的服藥方法是中藥口服方法的創(chuàng)新三種藥組成膠囊，按50公斤體重計(jì)算藥量，日一次或分次服用；由于按細(xì)胞生長(zhǎng)增殖周期，所以2-3天服藥一天，這樣用藥既減少毒副作用，使間歇期1-2天正常細(xì)胞又恢復(fù)活性，細(xì)胞增殖，達(dá)到服藥期強(qiáng)的免疫抑制作用，間歇停藥期強(qiáng)的免疫增強(qiáng)作用，分泌IFN-r、IL-2、NK、TNF-α等，又增強(qiáng)免疫功能。
9、本發(fā)明藥源廣、價(jià)格低廉而療效高、毒副作用小，便于推廣應(yīng)用。
現(xiàn)將本發(fā)明藥理、臨床應(yīng)用、毒副作用簡(jiǎn)介如下一、本發(fā)明方劑的藥理作用1、對(duì)內(nèi)分泌功能有促進(jìn)和增強(qiáng)作用(1)能促進(jìn)精液分泌，使前列腺、精囊及提肛肌重量增加。(2)催淫作用使精液分泌亢進(jìn)，刺激感覺(jué)神經(jīng)而興奮性欲。(3)促進(jìn)男性睪酮(TS)分泌和CAMP的生成。(4)對(duì)女性能提高垂體對(duì)黃體生成素釋放激素LRH的反應(yīng)性，及卵巢黃體生成素LH的反應(yīng)性能明顯增加垂體前葉、卵巢、子宮重量，服藥后，卵巢HCG、LH受體特異性結(jié)合力提高3倍。
2、對(duì)免疫功能有增強(qiáng)作用對(duì)腎虛病人T細(xì)胞數(shù)、淋轉(zhuǎn)率、抗體、抗原及網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬功能低下者，服“仙草藤膠囊”后各項(xiàng)指標(biāo)均有提高，對(duì)腎臟的組織學(xué)改變和減少細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生，對(duì)機(jī)體免疫有促進(jìn)作用。
3、低濃度增加Ea花結(jié)率，高濃度降低Ea花結(jié)率，說(shuō)明低濃度增強(qiáng)免疫作用，高濃度抑制免疫作用，對(duì)免疫有雙向調(diào)節(jié)作用。
4、對(duì)免疫球蛋白影響免疫球蛋白(1g)具有對(duì)抗外來(lái)細(xì)菌、病毒、各種毒素等有害物質(zhì)侵襲，維持生物自身的穩(wěn)定和免疫監(jiān)視等各種重要作用?；颊咴诜幥?gG、1gA測(cè)定其值在正常值下，服“仙草藤膠囊”后1gG、1gA含量明顯增加。老年人1g增加是長(zhǎng)壽的表現(xiàn)。
5、方劑中所含黃酮類成份對(duì)免疫功能有增強(qiáng)和抑制作用總黃酮能提高血清溶血素抗體水平，增加抗體生成細(xì)胞數(shù)，促進(jìn)淋轉(zhuǎn)率，增加巨噬細(xì)胞吞噬功能。高濃度可強(qiáng)烈抑制淋巴細(xì)胞對(duì)ConA、LPS的增殖反應(yīng)，混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)?？傸S酮抑制率和藥物濃度呈正比。同時(shí)可延長(zhǎng)同種異體小鼠心臟移植存活期。
6、方劑中多糖類能抑制雷公藤對(duì)造血系統(tǒng)、骨髓造血干細(xì)胞的破壞。使脾淋巴細(xì)胞增殖，產(chǎn)生白細(xì)胞介素2(IL-2)，多糖類有促進(jìn)免疫應(yīng)答作用，同時(shí)能增強(qiáng)免疫記憶功能。并能增加ConA誘性r-干擾素(IFN-r)和IL-2。
7、方劑有類固醇激素作用并能刺激下丘腦-垂體-腎上腺軸興奮，而促使腎上腺皮質(zhì)釋放激素(CRH)的分泌增加，或選擇性地興奮垂體上的CRH受體，間接作用于腎上腺而分泌激素。體內(nèi)腎上腺皮質(zhì)激素含量增加起到作用(1)抗炎作用。(2)免疫抑制作用。(3)抗毒素作用。(4)抗休克作用。(5)對(duì)代謝的作用。(6)對(duì)淋巴細(xì)胞和血液細(xì)胞作用。8、方劑有很強(qiáng)的免疫抑制作用和抗炎作用鎮(zhèn)痛、解熱、鎮(zhèn)靜、解痙作用對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎3-7天止痛率達(dá)98％，7天內(nèi)消腫率達(dá)88％，治愈率達(dá)52％，顯效率達(dá)78.6％，有效率達(dá)98.3％，類風(fēng)濕因子轉(zhuǎn)陰率達(dá)76.6％。
9、抗腫瘤作用和抗HIV作用該方能抑制ConA和LPS對(duì)淋巴細(xì)胞的增殖，抑制和殺滅腫瘤靶細(xì)胞。對(duì)HIV增殖有很強(qiáng)的抑制作用，雷公藤甙T1是抑制PHA誘導(dǎo)下細(xì)胞IL-2mRNA和IL-2RP55mRNA的轉(zhuǎn)錄，抑制作用在PHA誘導(dǎo)至第12小時(shí)末作用最強(qiáng)。T1對(duì)CD4+細(xì)胞和CD8+細(xì)胞均有明顯抑制作用，對(duì)CD4+細(xì)胞抑制作用最強(qiáng)。
10、方劑治結(jié)締組織病藥理、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡等該方能抑制抗原結(jié)合細(xì)胞和抗體分泌細(xì)胞的抗綿羊紅細(xì)胞的特異性抗體產(chǎn)生，阻斷類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者體內(nèi)1gG抗體合成的反饋途徑，而使疾病得到緩解。也可使體內(nèi)亢進(jìn)的免疫反應(yīng)趨向正常，服“仙草藤膠囊”后病人血清1gG、1gM、1gA均降低，類風(fēng)濕因子(RF)滴度減低或轉(zhuǎn)陰，說(shuō)明該方有強(qiáng)的抑制抗體生成作用。
二、單味藥理作用(一)仙靈脾(淫羊藿)藥理作用1、對(duì)內(nèi)分泌功能有促進(jìn)和增強(qiáng)作用(1)淫羊藿水浸膏可促進(jìn)狗精液分泌，提取物給小鼠注射后，前列腺、精囊及提肛肌重量增加，注射淫羊藿甙20-40mg/kg其活力可與7.5mg睪丸相當(dāng)，相當(dāng)于雄性激素效應(yīng)。(2)淫羊藿有催淫作用是由于精液分泌亢進(jìn)，精液充滿后，刺激感覺(jué)神經(jīng)，間接興奮性欲而引起。(3)淫羊藿甙(ICA)能明顯促進(jìn)小鼠附睪、精囊腺的發(fā)育，能明顯促進(jìn)睪酮(Ts)的基礎(chǔ)分泌和CAMP的生成醇提取物能促進(jìn)Ts的基礎(chǔ)分泌及人絨毛膜促性腺激素的刺激分泌，并可通過(guò)CAMP途徑使TS的分泌增加。(4)淫羊藿對(duì)下丘腦-垂體-性腺軸功能。淫羊藿提取液1ml/100g體重給雌性大鼠，5天后測(cè)定能提高垂體對(duì)黃體生成素釋放激素LRH的反應(yīng)性及卵巢黃體生成素LH的反應(yīng)性，能明顯增強(qiáng)大鼠垂體前葉、卵巢、子宮重量。服藥后卵巢HCG、LH受體特異性結(jié)合力約提高3倍。說(shuō)明淫羊藿對(duì)下丘腦-垂體-性腺軸等分泌系統(tǒng)的分泌功能有增強(qiáng)作用。
2、對(duì)免疫功能有增強(qiáng)作用(1)免疫功能降低，特別是腎虛病人T細(xì)胞數(shù)量，淋轉(zhuǎn)率、抗體、抗原及網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬功能低下，而給過(guò)淫羊藿等補(bǔ)腎藥治療均可提高。小鼠0.5ml腹腔注射，對(duì)機(jī)體免疫有促進(jìn)作用，淫羊藿可明顯減輕腎臟的組織學(xué)改變和減少細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生。(2)淫羊藿水煎劑濃度5mg/ml，能增加Ea花結(jié)率，50mg/ml濃度可降低Et花結(jié)率。提示淫羊藿低濃度有促進(jìn)Ea花結(jié)率形成，高濃度抑制ANAE活性作用。(3)淫羊藿對(duì)免疫球蛋白的影響免疫球蛋白(1g)具有對(duì)抗外來(lái)細(xì)菌、病毒等有害物質(zhì)的侵襲，維持生物自身的穩(wěn)定和免疫監(jiān)視等各種重要作用。62例1gG、1gA服藥前測(cè)定其值在正常值下，服淫羊藿后血中1gG、1gA含量明顯增加，老年人免疫球蛋白增加，是長(zhǎng)壽的表現(xiàn)。
3、淫羊藿總黃酮對(duì)免疫功能的影響(1)總黃酮能提高小鼠血清溶血素抗體水平，增加脾臟抗體生成細(xì)胞數(shù)，促進(jìn)PHA刺激的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化反應(yīng)，增加巨噬細(xì)胞吞噬功能。50％甲醇提取物總黃酮可強(qiáng)烈抑制小鼠淋巴細(xì)胞對(duì)COnA、LPS的增殖反應(yīng)和小鼠同種異體心臟移植的存活期。(2)總黃酮對(duì)T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率總玫瑰花環(huán)(EtRFC)活性玫瑰花環(huán)(EaRFC)T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)換率(LBT)值較低的老年人，服藥3個(gè)月后不僅改善臨床癥狀，而且對(duì)人T細(xì)胞免疫功能有明顯增強(qiáng)。
4、淫羊藿多糖(RPS)對(duì)疊氮胸苷抑制小鼠造血和免疫功能有對(duì)抗作用(1)給小鼠疊氮胸苷80mg/kg，其外周血細(xì)胞，骨髓造血干細(xì)胞和粒單系祖細(xì)胞數(shù)量，脾淋巴細(xì)胞增殖和產(chǎn)生白細(xì)胞介素IL-2(IL-2)的能力顯著降低。給淫羊藿多糖10-20mg/kg，上述疊氮胸苷毒副作用可部分或全部消失。EPS對(duì)初次或再次體液免疫反應(yīng)，有促進(jìn)免疫應(yīng)答作用，同時(shí)還可增加免疫記憶功能。(2)小鼠注射EPS10-50mg/kg，胸腺縮小L3、T4和Lrt2+細(xì)胞數(shù)減少對(duì)有絲分裂原刺激反應(yīng)降低，但此時(shí)胸腺細(xì)胞增殖和產(chǎn)生IL-2能力提高。100mg/kg皮下注入，引起小鼠胸腺釋放增加，增強(qiáng)機(jī)體細(xì)胞免疫功能和器官免疫功能。(3)EPS對(duì)人IL-2產(chǎn)生有調(diào)節(jié)作用2500-5000vb/ml濃度細(xì)胞存活率分別為94％和93％，對(duì)人IL-2活性調(diào)節(jié)是免疫分子學(xué)基礎(chǔ)之一。(4)淫羊藿對(duì)免疫有雙向調(diào)節(jié)作用Ea花結(jié)試驗(yàn)是測(cè)定人T細(xì)胞常用方法，在低濃度5mg/ml有增加Ea花結(jié)率，證明淫羊藿有雙向調(diào)節(jié)作用，甲醇.提取物能增強(qiáng)小鼠炎癥滲出細(xì)胞的吞噬功能。淫羊藿增強(qiáng)免疫功能主要是通過(guò)降低細(xì)胞CAMP水平，升高CGMP水平及CAMP/CGMP的比值，從而影響淋巴細(xì)胞的核酸代謝，促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖。
5、對(duì)心臟缺血有保護(hù)作用，增加冠脈血流量(1)淫羊藿靜注對(duì)垂體后葉素引起心肌缺血性損傷有保護(hù)作用。離體豚鼠心臟灌流200％淫羊藿液0.5ml可使冠脈流量增加126.6％。狗心冠脈流量增加134.6％，兔心冠脈流量提高66％，并可降低阻力68％，降低左心舒張壓，對(duì)抗心肌缺血模型大鼠供血不足。改善心肌缺血，降低氧耗量和抗心律失常。(2)1.5×10-3g/kg加強(qiáng)心的收縮力，5×10-3g/kg則抑制心的收縮力。10g/kg水煎劑有防顫作用，淫羊藿防顫功能可能通過(guò)興奮迷走神經(jīng)途徑起作用的。(3)淫羊藿有擴(kuò)張血管抑制血管平滑肌收縮作用淫羊藿具有抑制血管平滑肌細(xì)胞外Ca2+內(nèi)流作用，能夠降低高K+所致TA、MA和CA，5-HT所致CBA的收縮反應(yīng)。(4)降壓作用淫羊藿煎劑給兔2.5ml/kg、貓2mg/kg、大鼠4ml/kg靜注均有降壓作用。(5)抗血小板繁集作用能降低ADP誘導(dǎo)的血小板集聚率，并有一定解聚作用，預(yù)防血栓形成，預(yù)防心絞痛和心率失常，多糖作用最強(qiáng)，次為煎劑和黃酮。
6、淫羊藿促進(jìn)DNA合成促進(jìn)骨生長(zhǎng)作用，促進(jìn)蛋白合成作用(1)選用核苷酸還原酶抑制劑羥基脲制造陽(yáng)虛動(dòng)物模型，用氚標(biāo)記的胸腺核苷(3H-TDR)體內(nèi)參入脫氧核糖核酸(DNA)的方法，研究助陽(yáng)藥對(duì)陽(yáng)虛動(dòng)物影響，淫羊藿有促進(jìn)DNA合成作用，淫羊藿中含一種激活核苷酸還原酶的生物活性因子，從而抗羥基脲對(duì)核苷酸還原酶的抑制作用，保證核苷酸還原成脫氧核苷酸，并促進(jìn)TdR摻入DNa，最終促進(jìn)DNA合成。多糖體外試驗(yàn)可使羥基脲所致陽(yáng)虛小鼠骨髓細(xì)胞增殖率提高72％，DNA合成率提高68％。并能促進(jìn)蛋白質(zhì)合成。(2)淫羊藿提取液對(duì)骨有促進(jìn)生長(zhǎng)作用；可促進(jìn)去睪大鼠骨生長(zhǎng)，口服提取液，5g/kg連續(xù)7周，陽(yáng)虛組骨增長(zhǎng)值提高42％，注射液對(duì)試管內(nèi)雞胚股骨有促進(jìn)生長(zhǎng)作用，用藥組股骨長(zhǎng)度，干重和38S摻入強(qiáng)度等均明顯增加，并促進(jìn)蛋白質(zhì)合成。
7、抗炎作用(1)小鼠蛋清性腳腫脹，皮下注射50mg/kg，能顯著降低腳腫脹程度。兔15g/kg，能降低組織胺所致毛細(xì)血管通透性。(2)對(duì)急性感染性多發(fā)性神經(jīng)炎(GBS)有一定治療作用，并且有一定的免疫調(diào)節(jié)作用。能改善大鼠血液的濃、粘、聚狀態(tài)，改善小鼠耳微循環(huán)等作用，增加小鼠炎性滲出細(xì)胞的吞噬功能，具有抗炎作用。淫羊藿注射液對(duì)試管內(nèi)雞胚股骨生長(zhǎng)有非常顯著促進(jìn)作用，對(duì)雞胚骨蛋白多糖的合成有明顯促進(jìn)作用。
8、淫羊藿對(duì)中樞神經(jīng)作用提高小鼠耐缺氧能力，存活時(shí)間延長(zhǎng)，有鎮(zhèn)靜和抗驚厥作用，有調(diào)節(jié)M受體CGMP系統(tǒng)作用，對(duì)中樞神經(jīng)有抑制作用。
9、抗衰老作用(1)淫羊藿抗衰老機(jī)制，促進(jìn)細(xì)胞傳代，延長(zhǎng)生長(zhǎng)期，調(diào)節(jié)免疫和分泌系統(tǒng)，改善心、腦、腎、肝等各器管功能，降低腦、心、肝的脂褐質(zhì)含量，血中G，總補(bǔ)體等增加中性粒細(xì)胞及腹腔巨噬細(xì)胞功能增強(qiáng)，并抑制血栓形成。(2)淫羊藿黃酮有增強(qiáng)脾B淋巴細(xì)胞增殖功能，還能明顯提高肝臟總SOD的活性，減少LPO的心、肝等組織的脂褐素形成，提示總黃酮提高SOD酶的活性。消除自由基，保護(hù)了細(xì)胞免遭損害，延緩器官和機(jī)體衰老作用。(3)淫羊藿能保持人正常腎上腺皮質(zhì)功能和調(diào)節(jié)免疫功能，推遲老化進(jìn)程和防止老年病的發(fā)生?？傸S酮具有增強(qiáng)T細(xì)胞和B細(xì)胞免疫及腎上腺皮質(zhì)功能，延緩衰老作用與免疫系統(tǒng)功能有關(guān)。(4)抗疲勞作用給小鼠淫羊藿總黃酮，0.06或0.3g/kg/日，11天，于末次給藥后1小時(shí)實(shí)驗(yàn)給藥0.06g組游泳時(shí)間370.5±108.2秒。0.3g組398.0±109.1秒。對(duì)照組152.6±45.5秒?？傸S酮延長(zhǎng)小鼠游泳時(shí)間，說(shuō)明有抗疲勞作用。
10、藥代動(dòng)力學(xué)淫羊藿中微量錳在兔血中藥代動(dòng)力學(xué)研究，以催化動(dòng)力學(xué)分析法為監(jiān)測(cè)手段，利用二價(jià)錳離子對(duì)高碘酸鉀-羅丹明B反應(yīng)體系的催化作用。使用鄰菲羅啉為活性劑，對(duì)兔血中微量錳進(jìn)行了熒光測(cè)定，繪制了藥時(shí)曲線結(jié)果微機(jī)處理，體內(nèi)過(guò)程符合二室開(kāi)放模型，并得到系列藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
11、毒性、副作用(1)淫關(guān)藿浸膏小鼠腹腔注射LD50為36。水浸膏片中提取非氨基酸部分(NO5-1-1)小鼠靜注的LD50為56.8±2.7。本品甲醇提取液小鼠灌服450mg/kg連續(xù)觀察3天結(jié)果活動(dòng)正常，無(wú)毒副反應(yīng)。(2)淫羊藿總黃酮急性毒性試驗(yàn)LD50為2.99±0.14g/kg急性或亞急性毒性試驗(yàn)提取液不同劑量連續(xù)服用，對(duì)動(dòng)物心肝、腎、脾等組織無(wú)明顯改變，細(xì)胞組織外觀無(wú)損害改變。
(二)甘草所含甘草酸(甘草甜素)甘草皂甙、甘草黃酮、藥理作用1、對(duì)免疫功能系統(tǒng)影響(1)有抗過(guò)敏作用甘草所提取復(fù)合體(LX)含有蛋白質(zhì)，核酸，多糖，甘草酸有較強(qiáng)抗過(guò)敏作用，對(duì)小鼠過(guò)敏性休克也有保護(hù)作用，對(duì)各種原因引起過(guò)敏性休克和死亡抑制率在95％以上。甘草酸25-50能顯著抑制過(guò)敏反應(yīng)，能阻止過(guò)敏介質(zhì)釋放。(2)對(duì)非特異性免疫功能影響①甘草甜素能增強(qiáng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)活性，使白細(xì)胞總數(shù)增強(qiáng)，嗜中性白細(xì)胞，單核細(xì)胞增加更明顯，有刺激巨噬細(xì)胞吞噬功能。②對(duì)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)及自然殺傷細(xì)胞活性有顯著增強(qiáng)作用甘草酸和甘草甜素對(duì)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)有激活作用，對(duì)小鼠自然殺傷細(xì)胞活性有顯著增強(qiáng)作用。(3)對(duì)補(bǔ)體的影響甘草肌注CP50和AP50均能抑制50％溶血，能抑制補(bǔ)體反應(yīng)，相關(guān)炎癥過(guò)程緩解和靜止。(4)對(duì)抗體的影響①甘草酸能使抗體顯著增加，30mg/kg可使抗體產(chǎn)生顯著增強(qiáng)。②對(duì)抗體產(chǎn)生抑制作用、甘草抑制1gE合成是T細(xì)胞介導(dǎo)的，且與CD8+細(xì)胞有關(guān)。③甘草對(duì)抗體產(chǎn)生雙向調(diào)節(jié)作用既對(duì)病原的反應(yīng)有增強(qiáng)作用，對(duì)反常的過(guò)敏則呈抑制作用。(5)對(duì)白細(xì)胞介素-2的產(chǎn)生和誘生r-干擾素作用甘草酸100vg/ml明顯促進(jìn)刀豆蛋白A(COnA)活化的脾細(xì)胞DNA和蛋白質(zhì)的生物合成，DNA合成高峰48小時(shí)。對(duì)白細(xì)胞介素-2(IL-2)產(chǎn)生明顯增強(qiáng)作用，甘草酸能增強(qiáng)CONA誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞分泌IL-2，并可增強(qiáng)COnA誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞分泌r-干擾素(IFN-r)，可提高脾細(xì)胞產(chǎn)生IFN-r。200vb/kg增加COnA誘生48小時(shí)，細(xì)胞濃度1×103/ml為宜，產(chǎn)生IFN-r為主。(6)對(duì)前列腺素(PGE2)作用甘草酸對(duì)前列腺素有雙向調(diào)節(jié)作用。甘草酸銨100mg/kg/日×7日，灌胃小白鼠，經(jīng)放免測(cè)定，可顯著抑制肺和腎PGE2、PGF2的合成。甘草酸單胺給于小鼠灌胃100mg/kg/日×5日后，其脾PGE2和CAMP量顯著增加大鼠淋巴結(jié)細(xì)胞在8×10-10mol/L和8×7-7mol/L甘草酸單胺濃度下，分泌PGM量也顯著增加，可能是甘草酸類免疫調(diào)節(jié)的途徑之一。(7)對(duì)自然殺傷細(xì)胞(NK)活性有顯著增強(qiáng)作用，對(duì)機(jī)體免疫有重要調(diào)節(jié)作用。
2、甘草抗炎作用(1)甘草水浸膏有顯著抗炎作用，能對(duì)抗巴豆油誘發(fā)耳殼及冰醋酸腹腔注射誘發(fā)急性滲出性炎癥，對(duì)慢性肉芽組織增生的炎癥也有明顯抑制作用，當(dāng)摘除鼠雙側(cè)腎上腺后抗炎作用消失，說(shuō)明甘草浸膏抗炎作用與腎上腺相關(guān)。(2)甘草具有保泰松和氫化可的松樣的抗炎作用，其抗炎成份是甘草甜素和甘草次酸，具有類固醇骨架結(jié)構(gòu)，對(duì)大鼠棉花肉芽腫，甲醛性腳腫皮下肉芽腫性炎癥等均有抑制作用，對(duì)炎癥反應(yīng)1.2.3期都有抑制作用。(3)甘草次酸和甘草黃酮對(duì)動(dòng)物大鼠福爾馬林浮腫法，肉芽腫袋法，卡界苗致敏鼠皮膚結(jié)核菌素炎癥反應(yīng)，都有明顯抗炎作用。甘草黃酮有強(qiáng)抑制小鼠角叉菜膠浮腫和抑制敏感細(xì)胞釋放化學(xué)傳遞物質(zhì)作用，甘草抗炎作用可能與抑制毛細(xì)血管的通透性有關(guān)，與腎上腺皮質(zhì)激素樣作用有關(guān)。(4)甘草抗炎作用機(jī)理抗炎作用與腎上腺皮質(zhì)激素樣作用有關(guān)，另外，甘草通過(guò)抑制中性白細(xì)胞的代謝來(lái)降低活性氧基的形成，從而產(chǎn)生抗炎作用的，對(duì)免疫系統(tǒng)的作用也是其抗炎機(jī)理之一。
3、甘草有腎上腺皮質(zhì)激素樣作用(1)抗炎作用抑制感染性和非感染性炎癥，減輕充血，降低毛細(xì)血管通透性，抑制炎癥浸潤(rùn)和滲出，抑制纖維細(xì)胞增生和肉芽組織形成。(2)免疫抑制作用減少組織胺，5-羥色胺及其它物質(zhì)的形成和釋放，從而減輕過(guò)敏反應(yīng)引起充血、水腫、滲出、皮疹、平滑肌痙攣及細(xì)胞損害，抑制移植器官反應(yīng)，破壞具有免疫活性的淋巴細(xì)胞，抑制巨噬細(xì)胞對(duì)抗原的吞噬和處理。(3)抗毒素作用對(duì)抗細(xì)菌所致內(nèi)毒素和外毒素及各種藥物毒性對(duì)機(jī)體的刺激，減輕細(xì)胞損傷，保護(hù)機(jī)體。(4)抗休克作用解除小血管痙攣，增強(qiáng)心縮力，改善微循環(huán)，對(duì)中毒性休克、失血性休克、心源性休克、過(guò)敏性休克都有對(duì)抗作用。(5)對(duì)代謝影響升高血糖和肝糖源，使蛋白分解代謝。(6)對(duì)淋巴組織和血液細(xì)胞作用大劑量可使胸腺淋巴結(jié)，脾內(nèi)組織萎縮，抑制淋巴組織增生，使血液中淋巴細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞減少。能刺激骨髓使紅細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞及血小板增多。
4、甘草有鎮(zhèn)靜、解熱、鎮(zhèn)痛、解痙、抗驚厥作用(1)甘次酸1250mg/kg對(duì)小鼠神經(jīng)系統(tǒng)呈現(xiàn)抑制作用，鎮(zhèn)靜、催眠時(shí)間延長(zhǎng)，呼吸抑制等。(2)甘草酸和次酸對(duì)發(fā)熱大鼠及小鼠、家兔有解熱、降低體溫作用。(3)鎮(zhèn)痛作用提取物Fm100有明顯鎮(zhèn)痛作用，用壓迫小鼠尾部的方法測(cè)定痛閾的方法表明有鎮(zhèn)痛作用。并有解痙作用。具有興奮和抑制雙向調(diào)節(jié)作用?？贵@厥作用。
5、對(duì)神經(jīng)受體的作用甘草酸和甘草次酸在使用濃度8×10-3mol/L和4×10-2mol/L時(shí)，對(duì)乙酰膽堿酯酶產(chǎn)生明顯抑制作用。其50％抑制率時(shí)的藥物濃度分別為25.6±1.4ug/ml和21.9±1.1ug/ml。這兩種藥用有效成份對(duì)乙酰膽堿酯酶均呈競(jìng)爭(zhēng)-非競(jìng)爭(zhēng)型混合抑制。
6、抗艾滋病毒(HIV)作用、抗菌作用(1)甘草皂甙0.5mg/ml對(duì)HIV的增殖抑98％，50％的空斑形成抑制值0.125，但不能抑制HIV的逆轉(zhuǎn)錄則通過(guò)恢復(fù)T細(xì)胞發(fā)揮作用。(2)甘草酸和甘草黃酮，0.5mg/ml抑制HIV的增殖率達(dá)98％，甘草黃酮3種成份抑制率是甘草甜素的25倍。(3)對(duì)口炎病毒、腺病毒、牛痘病毒、皰疹病毒均有抑制作用。(4)抗菌作用甘草酸和甘草次酸對(duì)金葡菌、結(jié)核桿菌、大腸桿菌、滴蟲(chóng)、阿米巴原蟲(chóng)等，6.25-12.5vg/ml能完全抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。
7、抗腫瘤作用(1)甘草酸、甘草次酸對(duì)大鼠、小鼠腹水肝癌、吉田肉瘤、白血病、骨髓瘤等均有抑制作用。(2)抗腫瘤原理甘草酸、甘草皂甙有增強(qiáng)小鼠巨噬細(xì)胞中一氧化氮產(chǎn)生對(duì)腫瘤增殖的抑制，并引起巨噬細(xì)胞，脂多糖(LPS)進(jìn)行刺激產(chǎn)生一氧化氮，抑制腫瘤增殖。
8、甘草復(fù)合體(LX)解毒作用對(duì)心、肝、腎、內(nèi)分泌、生殖系統(tǒng)均有保護(hù)和解毒作用，各種毒素和藥物所致心律失常有保護(hù)作用，使收縮力加強(qiáng)，對(duì)各種藥物和毒素所致的肝、腎損傷，生殖系統(tǒng)損害有保護(hù)作用，防傷害作用。
9、對(duì)生殖系統(tǒng)作用(1)甘草甜素、甘草次酸小劑量能抑制激素對(duì)未成年動(dòng)物子宮、睪丸的增長(zhǎng)作用，切除腎上腺或卵巢、睪丸以后仍有同樣作用。(2)當(dāng)甘草甜素劑量增大時(shí)，則反增強(qiáng)雌激素樣作用。甘草次酸10vg/ml能抑制17-B-羥甾類脫氫酶轉(zhuǎn)變雄甾二酮為睪酮的作用，由于上述酶被抑制而造成的17-a-羥基黃酮的積聚，因此，甘草次酸大劑量具有抑制小鼠生殖腺產(chǎn)生睪酮作用。(3)甘草依劑量對(duì)男、女生殖系統(tǒng)有雙向調(diào)節(jié)作用。
10、甘草解毒作用機(jī)理(1)用其味甘能和，調(diào)和藥性以解毒。(2)用其味甘能緩、緩和峻猛以解毒。(3)用其味甘能補(bǔ)、扶正固本以解毒。(4)用其性涼以清熱解毒。(5)現(xiàn)代研究甘草解毒機(jī)理甘草次酸和毒物結(jié)合，使其轉(zhuǎn)化為毒性較小或無(wú)毒性物質(zhì)。甘草甜素吸附毒物以解毒，其解毒和吸附率成正比關(guān)系。葡萄糖醛酸經(jīng)脫水后可與體內(nèi)一些含羥基或羧基的有毒物質(zhì)結(jié)合變成無(wú)毒化合物由尿排出。甘草酸和甘草次酸的腎上腺皮質(zhì)激素樣作用，類似葡萄糖醛酸的結(jié)合解毒作用，以改善垂體一腎上腺系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用等，甘草酸具有解毒增效作用。
11、對(duì)抗氧化及抗衰老作用甘草黃酮類和皂甙均有抗氧化和抗衰老作用。
12、藥代動(dòng)力學(xué)(1)甘草酸口服小腸吸收實(shí)驗(yàn)證明甘草酸在小腸吸收呈一級(jí)吸收。經(jīng)口服給大鼠500mg/kg甘草酸，用HPLC測(cè)定血漿中甘草酸銨及其甙元甘草次酸的血藥濃度，結(jié)果30分鐘達(dá)峰值，約為30vg/ml，4小時(shí)后測(cè)才達(dá)高峰，藥為15vg/ml。8小時(shí)后衰減為10vg/ml，20小時(shí)后從血中消失。正常人口服100mg甘草酸胺，用免疫法測(cè)定表明，血中甘草次酸濃度在給藥1-4小時(shí)和10-24小時(shí)后出現(xiàn)兩個(gè)高峰，峰值約為500vg/ml。(2)甘草酸靜脈給藥的吸收靜注50，20mg/kg，用HPLC法測(cè)定血樣，結(jié)果表明，甘草酸按在血濃度于30分鐘內(nèi)迅速下降，60分鐘才緩慢維持衰減水平。若給肝損傷病人靜注甘草酸銨80mg，同法檢測(cè)血漿中甘草次酸濃度，在6小時(shí)后血中出現(xiàn)甘草次酸，24小時(shí)后達(dá)高峰，約為7mg/ml，肝損傷病人低于此水平。(3)靜注甘草酸大部分與血漿蛋白結(jié)合，一部分迅速分布至肝臟，少量較緩慢分布至其他臟器組織。
13、毒副作用(1)甘草水浸膏急性毒性，小鼠靜注LD50為1.94320±0.467g/kg，腹腔注射LD50為6.8466g/kg，皮下注LD50為7.8192g/kg。甘草浸膏LD100為3.6g/kg，死因?yàn)槁楸浴?2)甘草酸小鼠皮下注MLD為1g/kg，甘草次酸小鼠腹腔注射LD50為308mg/kg，死亡動(dòng)物見(jiàn)腹膜炎，注入藥物未完全吸收。甘草次酸琥珀酸半酯小鼠腹腔注射LD50為101mg/kg，靜注為43mg/kg。甘草甲醇提取物Fm100小鼠腹腔注射LD50為760mg/kg。甘草次酸有抑制豚鼠甲狀腺功能，有降低基礎(chǔ)代謝的趨勢(shì)。(3)長(zhǎng)期毒性甘草浸膏每日1g給兔灌服40天，給藥組比對(duì)照組體重有所增加，給藥后一周血鈉明顯上升，在一周后恒定，腎上腺機(jī)能低下，并稍有萎縮。甘草浸膏每日2g/kg連續(xù)40天灌服，結(jié)果與對(duì)照組比較體重稍有增加(但非水腫引起)，實(shí)驗(yàn)中無(wú)死亡，檢查各臟器重量見(jiàn)腎上腺重量降低，組織檢查僅見(jiàn)腎小球若干異常。甘草甜素大劑量(20-30mg/kg連續(xù)一周以上)可引起水腫，但停藥后既可消失。大劑量甘草次酸125mg/kg，使小鼠吸收抑制體重下降。
(三)雷公藤提取物雷公藤總甙藥理作用1、對(duì)抗炎作用雷公藤總甙能抑制小鼠二甲苯組織胺等所致毛細(xì)血管通透性增加，抑制大鼠巴豆油及棉球肉芽腫，抑制蛋清及甲醛性足腫脹。雷公藤多甙具有較強(qiáng)的抗炎和鎮(zhèn)痛作用，其止痛效果與對(duì)抗炎性致痛介質(zhì)有關(guān)。雷公藤有強(qiáng)的抗炎和鎮(zhèn)痛作用，有類似ACTH樣效應(yīng)。
2、雷公藤甙對(duì)下丘腦-垂體-腎上腺軸有興奮作用興奮下丘腦而促使腎上腺皮質(zhì)釋放激素(CRH)的分泌增加，或選擇性地興奮垂體上的CRH受體，而間接地作用于腎上腺。雷公藤治類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病，除強(qiáng)的免疫抑制作用外，并有強(qiáng)的興奮下丘腦-垂體-腎上腺軸，分泌皮質(zhì)激素增強(qiáng)抗炎作用。多甙能抑制PGE2的作用，其作用稍弱于消炎病，強(qiáng)于地塞米松，是雷公藤的抗炎作用。
3、雷公藤多甙對(duì)免疫系統(tǒng)作用(1)雷公藤是細(xì)胞免疫和體液免疫強(qiáng)的抑制劑雷公藤總甙60mg/kg，可使幼鼠胸腺萎縮，長(zhǎng)期給藥使成年鼠胸腺萎縮，但不能影響脾臟減重。雷公藤在試管內(nèi)對(duì)吞噬功能，淋轉(zhuǎn)及MLC等細(xì)胞免疫反應(yīng)，確有顯著的與藥物劑量相關(guān)的抑制作用。白細(xì)胞介素-1(IL-1)有促使胸腺增殖作用，雷公藤加入降低IL-1誘導(dǎo)的胸腺細(xì)胞增殖反應(yīng)，給藥5-8天，不但引起胸腺萎縮，胸腺對(duì)L-1的反應(yīng)性降低，還導(dǎo)致脾細(xì)胞對(duì)刀豆蛋白A(COnA)誘導(dǎo)的T細(xì)胞增殖反應(yīng)減弱。多甙具有抗移植物抗宿主病(GVHD)作用小鼠骨髓移植后給雷公藤多甙12.50mg/kg.d連用7d，平均存活18.5d；對(duì)照組未用多甙存活11.7d，雷公藤能抑制移植物排斥反應(yīng)。利用局部異種移植物抗宿主反應(yīng)(GVHR)；異體植皮反應(yīng)，體外溶血反應(yīng)，初次免疫反應(yīng)等四種方法研究表明雷公藤多甙是一種細(xì)胞免疫和體液免疫的抑制劑。(2)雷公藤多甙對(duì)遲發(fā)性超敏反應(yīng)及IL-2產(chǎn)生抑制作用每日12mg/kg給藥11天后，顯著抑制豚鼠舊結(jié)核菌素遲發(fā)性超敏反應(yīng)，并抑制T細(xì)胞增殖及E玫瑰花(花環(huán)和活性環(huán))反應(yīng)?？梢种芓細(xì)胞從G0/G1進(jìn)入S期，抑制T細(xì)胞的IL-2產(chǎn)生。(3)雷公藤多甙有抑制空腸彎曲菌誘導(dǎo)的自身免疫反應(yīng)，升高的ds-DNA自身抗體可被雷公藤多甙所抑制，使升高的TH/TS比值恢復(fù)作用，對(duì)感染鼠亢進(jìn)的T、B細(xì)胞功能均有抑制作用。(4)雷公藤總甙能抑制抗原結(jié)合細(xì)胞和抗體分泌細(xì)胞的抗綿羊紅細(xì)胞的特異性抗體產(chǎn)生，阻斷類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者體內(nèi)1gG抗體合成的正反饋途徑，而使疾病得到緩解。也可使體內(nèi)亢進(jìn)的體液免疫反應(yīng)趨向正常，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎臨床總顯效率85.3％，治療后病人血清1gG、1gM、1gA、均降低。類風(fēng)濕因子(RF)滴度減低或轉(zhuǎn)陰，說(shuō)明雷公藤確有強(qiáng)的抑制抗體生成作用。(5)雷公藤總甙(T1)對(duì)IL-2和IL-2R基因轉(zhuǎn)錄，實(shí)驗(yàn)用斑點(diǎn)雜交方法從IL-2T和IL-2RP55基因轉(zhuǎn)錄水平對(duì)雷公藤總甙(T1)的抑制作用，作了進(jìn)一步研究，觀察到T1是抑制PHA誘導(dǎo)下細(xì)胞IL-2mRNA和IL-2RP55mRNA的轉(zhuǎn)錄，抑制作用在PHA誘導(dǎo)至第12小時(shí)末最強(qiáng)。TI對(duì)CD4+細(xì)胞和CD8+細(xì)胞均有明顯抑制作用，對(duì)CD4+細(xì)胞抑制作用更強(qiáng)。(6)雷公藤多甙對(duì)人淋巴細(xì)胞IL-2自泌環(huán)路抑制作用多甙對(duì)T細(xì)胞激活，IL-2的產(chǎn)生，IL-2R的表達(dá)和活化T細(xì)胞對(duì)IL-2的反應(yīng)性，以及干擾IL-2的信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)均有抑制作用。
4、雷公藤多甙對(duì)精子活力、精子計(jì)數(shù)、精子密度有抑制作用(1)雄性小鼠服雷公藤多甙20-30mg/kg，1-3個(gè)月，附睪尾部精子活力降低，精子計(jì)數(shù)，精子密度顯著下降，且異性精子數(shù)明顯升高，睪丸減重，生育能力喪失，停藥2-3個(gè)月，生育力既可接近正?；蛲耆謴?fù)正常，對(duì)后代生殖器官亦無(wú)作用。(2)雷公藤對(duì)雄性生殖器官結(jié)構(gòu)有抑制作用雄大鼠服雷公藤甙30mg/kg/日，服35天，總量達(dá)1.05g/kg時(shí)可導(dǎo)致生殖細(xì)胞損傷精子活力顯著降低，睪丸精子細(xì)胞及精子發(fā)生明顯蛻變或減少，少數(shù)精母細(xì)胞出現(xiàn)病變和蛻落。服藥80天，總量達(dá)2.4g/kg時(shí)，則損傷加重，曲細(xì)精管內(nèi)精子，精子細(xì)胞及精母細(xì)胞脫落、退化、消失，并累及部分精原細(xì)胞。睪丸減重一半以上，殘留精子全部變形，對(duì)生殖系統(tǒng)的靶細(xì)胞主要是生精細(xì)胞，其損傷與給藥量和時(shí)間長(zhǎng)久有關(guān)。服多甙后睪丸中乳酸脫氫酶同工酶(LDH-C4)含量下降。
5、雷公藤多甙對(duì)雌性動(dòng)物的抗生育(1)小鼠服30mg/kg/日雷公藤共35-84天，性周期由正常轉(zhuǎn)為不規(guī)則，性活動(dòng)周期不完整或延長(zhǎng)，子宮減重，部分子宮平滑肌纖維變細(xì)變薄，子宮內(nèi)膜腺體細(xì)胞器明顯減少，溶酶體增多，卵巢依然可見(jiàn)緣卵泡及退化黃體，證明動(dòng)物有排卵現(xiàn)象。(2)對(duì)女性激素的影響女性激素有各雌二醇、雌三醇和雌酮等三種雌二醇(E2)的活性最高。在促卵泡激素(FSH)刺激下卵泡發(fā)育，并在促黃體激素(LH)協(xié)同下促進(jìn)卵泡的顆粒加快釋放E2等雌激素。當(dāng)卵巢功能衰退或受抑制時(shí)，雌激素分泌就會(huì)減少。(3)雷公藤治女性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎時(shí)，當(dāng)累積超過(guò)8000mg時(shí)，95％治療前月經(jīng)正常者發(fā)生經(jīng)閉。治療前血清E2、FSH、LH含量正常，用藥后E2下降；FSH、LH均升高。說(shuō)明雷公藤通過(guò)對(duì)卵巢功能抑制，分泌E2減少導(dǎo)致閉經(jīng)。
6、雷公藤多甙抑制抗體和免疫復(fù)合體形成(1)雷公藤多甙阻止免疫復(fù)合體形成并沉積于腎小球內(nèi)的作用。15mg/kg服四周，尿蛋白明顯下降，盤(pán)狀蛋白電泳從大分子轉(zhuǎn)向中分子蛋白、血漿蛋白、肌酐均恢復(fù)正常。(2)雷公藤多甙能顯著降低柔紅枚素、馬杉等腎炎大鼠尿蛋白、血清MDA腎皮質(zhì)MDA和能顯著降低腎炎大鼠異體相和自體相的尿蛋白，血清MDA和腎皮質(zhì)MDA，明顯減輕自體相的腎組織學(xué)改變，但不作用電子致密物在腎小球基底膜的沉積。對(duì)多種腎炎模型有預(yù)防和保護(hù)作用。
7、雷公藤多甙對(duì)腎上腺皮質(zhì)功能作用雷公藤多甙有增強(qiáng)腎上腺皮質(zhì)功能作用，糖皮質(zhì)激素在體內(nèi)合成，分泌和代謝的結(jié)果，導(dǎo)致了體內(nèi)尿一17羥類固醇含量的變化。對(duì)下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)有增強(qiáng)作用，多甙能阻斷組織胺，5-羥色胺對(duì)離體腸的作用，但對(duì)大鼠腎上腺內(nèi)維生素C含量無(wú)作用。說(shuō)明雷公藤多甙的抗炎作用不興奮或低賴垂體-腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)。對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病的療效與他的免疫抑制作用有關(guān)。
8、雷公藤對(duì)機(jī)體蛋白質(zhì)代謝的作用(1)球蛋白是網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞及漿細(xì)胞產(chǎn)生的。人血漿中較多的抗體是r球蛋白，血漿1g就是血漿中具有抗體作用的球蛋白，測(cè)定類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的r球蛋白，治療前明顯增高20％，治療一個(gè)月后明顯降低或復(fù)常。(2)雷公藤多甙治類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，治前貧血患者，治療后絕大多數(shù)恢復(fù)正常。
9、雷公藤多甙對(duì)心血管作用(1)活血化瘀作用解除血液聚集性，降低血液粘滯性，抗凝，糾正纖溶障礙，改善微循環(huán)，降低外周血流阻力作用。(2)對(duì)離休心房有興奮作用，對(duì)在體心臟出現(xiàn)一過(guò)性心博不整齊。有降壓作用，降幅與劑量有關(guān)，使周圍小動(dòng)脈舒張及血流增加，對(duì)呼吸及隔肌收縮無(wú)明顯影響。
10、抗病原微生物作用(1)雷公藤為廣譜抗菌藥，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性、陰性細(xì)菌等48種均有抑制作用，對(duì)白色念球菌效果尤好，多甙對(duì)金葡菌、枯草桿菌等有一定抑制作用。(2)抗病毒作用分離得到一種貝殼杉烷型二萜內(nèi)酯雷公藤福定，有很強(qiáng)的抗艾滋病毒活性，它在H9淋巴細(xì)胞中抗人免疫缺陷病毒(HIV)復(fù)制的活性EC50為1g/ml。
11、對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)和平滑肌作用雷公藤可引起視丘、中腦、延腦、小腦及脊髓的嚴(yán)重營(yíng)養(yǎng)不良性改變，可能是非選擇性細(xì)胞毒作用有關(guān)。興奮平滑肌作用明顯，離體或在體子宮均有收縮力加強(qiáng)，對(duì)回腸也有興奮作用。
12、抗腫瘤作用雷公藤甲素0.1-0.2mg/kg對(duì)小鼠白血病L1210和P388有效，對(duì)乳腺癌和胃癌均有強(qiáng)的療效，有效抑制率70％以上，對(duì)小鼠肉瘤S37、肝癌等均有明顯抑制作用。
13、藥代動(dòng)力學(xué)雷公藤口服或靜注，藥物在體內(nèi)廣泛分布，與組織親合力強(qiáng)，在體濃度分布為肝＞脾＞肺＞腸＞心＞腦，血漿蛋白結(jié)合64.7％，灌胃和靜注，藥物在體內(nèi)消失一半的時(shí)間為2天，12天后全部排出體外，由糞和尿中排出，以原藥為主和部分代謝產(chǎn)物，24小時(shí)內(nèi)藥物膽汁排泄為6.73％，在體內(nèi)有肝腸循環(huán)。
14、毒副作用(1)小鼠急性LD50為全根煎劑口服18.4-26.55g，腹腔注射4.8g/kg，多甙口服LD50為159.70mg/kg，毒性在24-60小時(shí)發(fā)生。多甙腹腔注射LD50為93.99mg/kg，中毒在12-48小時(shí)發(fā)生。(2)主要毒性①對(duì)腸和胃粘膜產(chǎn)生輕度壞死性炎癥，引起劇烈嘔吐、腹瀉、便血等。②電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，心肌多發(fā)性溶灶的形成，損壞心肌。③中毒量使脾的淋巴細(xì)胞廣泛崩解而導(dǎo)致免疫功能下降，脾小結(jié)節(jié)萎縮。④腎小管細(xì)胞變形及壞死，與腎功能衰竭有關(guān)。⑤中毒的死亡病例尸檢見(jiàn)廣泛胃腸，心肌出血、肝肺瘀血、腎小管壞死，劑量大者有心肌損害，急性心原性腦缺血，和惡性肺水腫。
以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。
該仙草藤膠囊的方劑組成為仙靈脾(淫羊藿)、甘草、雷公藤。
制備方法由以下工藝步驟實(shí)現(xiàn)(一)淫羊藿提取工藝(1)淫羊藿粗品提取工藝粗切之原藥加入8倍量1％硫酸水，保持80℃回流提取3小時(shí)，濾取藥液另置；殘?jiān)偌?倍量1％硫酸液，按同一操作提取2小時(shí)，連續(xù)2次，復(fù)濾取藥液與前液合并，集合多次酸水提液，濃縮成比重達(dá)1.1-1.2；加95％乙醇等量沉淀雜質(zhì)，靜置12-14小時(shí)，抽取上清液過(guò)濾，沉淀用45％己醇洗滌2-3次，將沉淀中可溶成分洗出，濾液和洗液合并，回收乙醇，減壓濃縮冷卻成膏；(2)淫羊藿皂甙純品提取工藝淫羊藿粗品浸膏加70％4倍量乙醇，加熱回流2小時(shí)，過(guò)濾，濾渣再加2倍量乙醇回流1小時(shí)，過(guò)濾，回收乙醇，60℃干燥；(3)淫羊藿多糖提取工藝淫羊藿粉碎粗粉加75％乙醇5倍量0.5NHaoH加熱回流2小時(shí)，過(guò)濾，同法提取三次，合并濾液濃縮成膏，加95％乙醇隨攪拌至沉淀、過(guò)夜、過(guò)濾，回收乙醇，連續(xù)2次；加水2倍量，用DEAE纖維素(磷酸鹽型)柱層析純化，得純品淫羊藿多糖；(二)甘草提取工藝(1)粗甘草酸提取工藝粗甘草粉用12倍量0.5％氨水滲漏，連續(xù)3次，滲漏液濃縮至原體積1/5過(guò)濾，濾液加濃硫酸至PH3，過(guò)濾析出的沉淀，水洗3次，60℃以下干燥既得粗甘草酸；(2)純品甘草酸提取工藝以上所得粗甘草酸400g，加4倍量乙醇，加熱回流3小時(shí)，過(guò)濾，濾渣加2倍量乙醇回流2次，合并回流液，加10g活性炭，回流脫色半小時(shí)冷卻、過(guò)濾，濾液通氨氣至PH7-7.5，無(wú)固體析出為止，濾液沉淀，以少量乙醇洗滌、室溫干燥，得甘草酸銨250g；(3)注射用純品甘草酸白色結(jié)晶前步得到的甘草酸銨250g，繼續(xù)用4倍量的80％乙醇，加熱溶解并用活性炭脫色，冷卻過(guò)濾，回收乙醇，濾液濃縮，析出白色結(jié)晶；(4)甘草殘?jiān)统恋砦铮崛「什菟?、甘草酸鈣、甘草黃酮甘草殘?jiān)统恋砦锛?％H2SO4-70％乙醇為溶媒，熱浸8小時(shí)后，加熱回流2小時(shí)，過(guò)濾，連續(xù)2次，合并過(guò)慮，回收乙醇，濃縮成膏，同時(shí)回收得甘草酸、甘草酸鈣、甘草黃酮；(三)雷公藤總甙提取工藝(1)雷公藤粗粉用85％甲醇5倍量回流提取，趁熱過(guò)濾，藥渣再加入新鮮溶劑，反復(fù)回流提取3次，每次4小時(shí)，合并4次甲醇提取液，回收甲醇，減壓濃縮，即得粗總甙浸膏；(因皂甙在熱醇中溶解，冷后既析出，所用熱醇回流提取)；(2)粗皂甙浸膏加水溶解，后用液滴逆流層析(D.C.C-A型)溶劑系統(tǒng)為氯仿-甲醇-正丁醇-水(體積比按45∶60∶6∶40)，下層作固定相，上層作移動(dòng)相，溶出溶液用自動(dòng)分步收集儀收集，回收溶劑；正丁醇提取液，水洗后減壓濃縮，即得純?cè)磉埃?3)為防止含有殘留正丁醇，工藝最后采用稀乙醇再處理方法，以縮短干燥時(shí)間，去除正丁醇?xì)埩?，即得純品雷公藤甙?四)仙草藤膠囊制劑工藝根據(jù)臨床反復(fù)試驗(yàn)和驗(yàn)證應(yīng)用，選擇最佳安全用量淫羊藿甙50mg/kg/日，淫羊藿黃酮20mg/kg/日，淫羊藿多糖20mg/kg/日；甘草酸50mg/kg/日，甘草黃酮10mg/kg/日，雷公藤甙1.5mg/kg/日；均按50體重計(jì)算用量，共計(jì)7575mg/50kg/日，共分裝16個(gè)大號(hào)膠囊，每個(gè)膠囊裝473.43mg。
權(quán)利要求
1.一種仙草藤膠囊，其特征在于方劑組成為仙靈脾(淫羊藿)、甘草、雷公藤。
2.一種仙草藤膠囊的制備方法，其特征在于由以下工藝步驟實(shí)現(xiàn)(一)淫羊藿提取工藝(1)淫羊藿粗品提取工藝粗切之原藥加入8倍量1％硫酸水，保持80℃回流提取3小時(shí)，濾取藥液另置；殘?jiān)偌?倍量1％硫酸液，按同一操作提取2小時(shí)，連續(xù)2次，復(fù)濾取藥液與前液合并，集合多次酸水提液，濃縮成比重達(dá)1.1-1.2；加95％乙醇等量沉淀雜質(zhì)，靜置12-14小時(shí)，抽取上清液過(guò)濾，沉淀用45％已醇洗滌2-3次，將沉淀中可溶成分洗出，濾液和洗液合并，回收乙醇，減壓濃縮冷卻成膏；(2)淫羊藿皂甙純品提取工藝淫羊藿粗品浸膏加70％4倍量乙醇，加熱回流2小時(shí)，過(guò)濾，濾渣再加2倍量乙醇回流1小時(shí)，過(guò)濾，回收乙醇，60℃干燥；(3)淫羊藿多糖提取工藝淫羊藿粉碎粗粉加75％乙醇5倍量0.5NHaoH加熱回流2小時(shí)，過(guò)濾，同法提取三次，合并濾液濃縮成膏，加95％乙醇隨攪拌至沉淀、過(guò)夜、過(guò)濾，回收乙醇，連續(xù)2次；加水2倍量，用DEAE纖維素(磷酸鹽型)柱層析純化，得純品淫羊藿多糖；(二)甘草提取工藝(1)粗甘草酸提取工藝粗甘草粉用12倍量0.5％氨水滲漏，連續(xù)3次，滲漏液濃縮至原體積1/5過(guò)濾，濾液加濃硫酸至PH3，過(guò)濾析出的沉淀，水洗3次，60℃以下干燥既得粗甘草酸；(2)純品甘草酸提取工藝以上所得粗甘草酸400g，加4倍量乙醇，加熱回流3小時(shí)，過(guò)濾，濾渣加2倍量乙醇回流2次，合并回流液加10g活性炭，回流脫色半小時(shí)冷卻、過(guò)濾，濾液通氨氣至PH7-7.5，無(wú)固體析出為止，濾液沉淀，以少量乙醇洗滌、室溫干燥，得甘草酸銨250g；(3)注射用純品甘草酸白色結(jié)晶前步得到的甘草酸銨250g，繼續(xù)用4倍量的80％乙醇，加熱溶解并用活性炭脫色，冷卻過(guò)濾，回收乙醇，濾液濃縮，析出白色結(jié)晶；(4)甘草殘?jiān)统恋砦?，提取甘草酸、甘草酸鈣、甘草黃酮甘草殘?jiān)统恋砦锛?％H2SO4-70％乙醇為溶媒，熱浸8小時(shí)后，加熱回流2小時(shí)，過(guò)濾，連續(xù)2次，合并過(guò)慮，回收乙醇，濃縮成膏，同時(shí)回收得甘草酸、甘草酸鈣、甘草黃酮；(三)雷公藤總甙提取工藝(1)雷公藤粗粉用85％甲醇5倍量回流提取，趁熱過(guò)濾，藥渣再加入新鮮溶劑，反復(fù)回流提取3次，每次4小時(shí)，合并4次甲醇提取液，回收甲醇，減壓濃縮，即得粗總甙浸膏；(因皂甙在熱醇中溶解，冷后既析出，所用熱醇回流提取)；(2)粗皂甙浸膏加水溶解，后用液滴逆流層析(D.C.C-A型)溶劑系統(tǒng)為氯仿-甲醇-正丁醇-水(體積比按45∶60∶6∶40)，下層作固定相，上層作移動(dòng)相，溶出溶液用自動(dòng)分步收集儀收集，回收溶劑；正丁醇提取液，水洗后減壓濃縮，即得純?cè)磉埃?3)為防止含有殘留正丁醇，工藝最后采用稀乙醇再處理方法，以縮短干燥時(shí)間，去除正丁醇?xì)埩簦吹眉兤防坠龠埃?四)仙草藤膠囊制劑工藝淫羊藿甙50mg/kg/日，淫羊藿黃酮20mg/kg/日，淫羊藿多糖20mg/kg/日；甘草酸50mg/kg/日，甘草黃酮10mg/kg/日，雷公藤甙1.5mg/kg/日；均按50kg體重計(jì)算用量，共計(jì)7575mg/50kg/日，共分裝16個(gè)大號(hào)膠囊，每個(gè)膠囊裝473.43mg。
全文摘要
本發(fā)明提供一種仙草藤膠囊及其制備方法,其方劑組成為仙靈脾(淫羊藿)、甘草、雷公藤,對(duì)各組分單獨(dú)制取其有效成分,最后根據(jù)臨床最佳用量,制取仙草藤膠囊,用于以補(bǔ)腎為主治療結(jié)締組織疾病和免疫性疾病,可治療疑難病“類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、紅斑狼瘡”等結(jié)締組織病,組方合理,提取加工工藝先進(jìn),療效高,毒副作用小,藥源廣,價(jià)格低廉。
文檔編號(hào)A61P19/00GK1265318SQ0010158
公開(kāi)日2000年9月6日 申請(qǐng)日期2000年1月27日 優(yōu)先權(quán)日2000年1月27日
發(fā)明者辛耀祿 申請(qǐng)人:辛耀祿