專利名稱：快速切片法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明公開了一種快速切片法，涉及生物及人體組織冷凍切片技術(shù)。
當(dāng)今，醫(yī)療手術(shù)中病理的診斷往往借助切片來進(jìn)行檢驗(yàn)和分析。而常用的二氧化碳及半導(dǎo)體冰凍切片機(jī)，切片操作在室內(nèi)進(jìn)行。這種切片方法會(huì)使切片極易與切片刀附著，切出的片較厚且破碎，技術(shù)要求也很高，且顯落后，也漸被淘汰；目前，被各大中型醫(yī)院采用的低溫恒冷切片機(jī)，其技術(shù)雖先進(jìn)，但價(jià)格昂貴，在基層醫(yī)療單位難以承受和推廣，也限制了其使用范圍，不利普及。
本發(fā)明的目的在于發(fā)明一種在普通冰柜內(nèi)進(jìn)行快速冰凍切片的方法，這種方法操作方便，快捷，實(shí)用。
本發(fā)明包括冰柜、切片機(jī)、砝碼、組織托、培養(yǎng)皿、手術(shù)刀、毛筆、小鑷子和溫度計(jì)，所述的切片法是在冰柜內(nèi)冰凍切片。
所述的冰凍切片是采用202型切片機(jī)、雙門冰柜，平底砝碼和組織托各至少2只，培養(yǎng)皿至少1只。
切片前，在冰柜內(nèi)放入支架，把切片機(jī)置于支架上，把組織托、砝碼、手術(shù)刀、毛筆、小鑷子和溫度計(jì)放入冰柜內(nèi)待冷。
先給切片機(jī)添加適量的潤滑液，開啟冰機(jī)制冷，達(dá)到-20～-25℃的切片溫度即可切片。
組織取材后，在組織背面涂上一層膠水后置于組織托上，用至少1只砝碼壓在其上冷凍1分鐘，用手術(shù)刀插入組織與砝碼之間，使組織與砝碼分離。
在組織周圍加適量膠水或白乳膠，再用另一只粘有無水乙醇的砝碼壓上1分鐘，使砝碼與組織分開，吸干砝碼及組織表面的乙醇后，即可切片，切片厚度5-7um。
因組織切片會(huì)卷曲且容易從切片上滑落，在組織切全后留少許膠水部份與組織托相連，用毛筆和小鑷子把切片展開貼片。貼片后，投放甲醇液固定1分鐘，進(jìn)行常規(guī)快速HE(蘇木素伊紅)染色，然后送顯微鏡檢驗(yàn)。
本發(fā)明的切片在鏡下顯示細(xì)胞和組織結(jié)構(gòu)清晰，沒有冰晶形成而留下的孔狀空隙，切片質(zhì)量高，可與低溫恒冷切片機(jī)媲美；切片時(shí)，組織經(jīng)冷凍后，水分結(jié)冰，起到包埋劑的作用，使組織變硬，有利切成薄片；把切片機(jī)放入冰柜內(nèi)，使切片環(huán)境能達(dá)到低溫恒冷切片機(jī)技術(shù)條件，提高了切片質(zhì)量；切片時(shí)間短，整個(gè)切片過程，從取材到出片鏡檢只需15分鐘，實(shí)用價(jià)值高，設(shè)備投資少，適于在設(shè)備不足及沒有低溫恒冷切片機(jī)的廣大基層醫(yī)療單位推廣使用。
現(xiàn)結(jié)合附圖和實(shí)施例進(jìn)行說明。


圖1為快速切片操作示意圖；圖1-1為本發(fā)明所使用的雙門冰柜主視圖2為切片顯微放大圖一食道鱗癌向粘膜下浸潤性生長的切片顯微放大圖，HE×200(倍，下同)；圖3為切片顯微放大圖—胃腺癌伴幽門淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，淋巴內(nèi)可見癌栓，HE×40；圖4為切片顯微放大圖—結(jié)節(jié)性甲狀腺腫伴部份呈腺瘤樣增生，HE×100；圖5為切片顯微放大圖—結(jié)腸平滑肌肉瘤，瘤細(xì)胞呈異形性，可見核分裂，HE×400。
切片前先備好料，把需要切片的組織采集完后，備好器材200g平底砝碼2只，組織托2-4只，培養(yǎng)皿1只，手術(shù)刀、毛筆、小鑷子、低溫溫度計(jì)各1個(gè)；采用雙門冰柜14，，202型切片機(jī)。把35cm×25cm×20cm支架置于冰柜內(nèi)，把切片機(jī)放于其上。在支架兩旁與雙門冰柜14內(nèi)壁間各放一個(gè)紙盒，以盛裝修整組織時(shí)產(chǎn)生的碎屑。把組織托、砝碼、手術(shù)刀、毛筆、小鑷子等放入柜內(nèi)，于切片機(jī)上添加適量的低溫潤滑液。開啟冰柜制冷，當(dāng)冰柜溫度達(dá)到-20～-25℃切片溫度時(shí)即可進(jìn)行冰凍切片。
切片時(shí)，組織取材為1.3cm×1.3cm×0.2cm，取材后，在組織背面涂上一層膠水2后，置于組織托1上，用1只砝碼壓在其上，冰凍1分鐘，用手術(shù)刀插入組織與砝碼間，使組織與砝碼分離，在組織周圍加適量普通膠水或白乳膠，再用另1只粘有無水乙醇的砝碼壓上1分鐘，就可將砝碼與組織分開，用衛(wèi)生紙吸干砝碼及組織表面的乙醇后即可進(jìn)行切片操作，切片厚度為5-7um。
如圖1，切片時(shí)，組織切片3會(huì)卷曲，且易從切片刀上滑落，在組織切全后留少許膠水2部份與組織托1相連，打開切片機(jī)夾頭4，把組織切片3取出，用毛筆和鑷子把切片展開，粘貼固定在玻璃片上。貼片后投放甲醇液固定1分鐘，進(jìn)行常規(guī)快速HE(蘇木素伊紅)染色，染色后再把切片送顯微鏡檢驗(yàn)，檢驗(yàn)結(jié)果顯示細(xì)胞及組織結(jié)構(gòu)清晰，無冰晶形成而留下的孔狀空隙，其切片質(zhì)量可與低溫恒冷切片機(jī)的切片效果相同。
圖2-圖5為各切片顯微放大圖。圖中所示是采用本冷凍切片法所切出的組織切片經(jīng)鏡下檢驗(yàn)所顯示的結(jié)果。(因繪圖與實(shí)際拍攝照片效果相差甚遠(yuǎn)，故附上原照相片與繪圖作對(duì)照，以利真實(shí)比較)。各圖的顯示如下圖2(照片2)顯示食道鱗癌向粘膜下浸潤性生長的病變示例，HE×200，可見食道鱗癌組織5，食道纖維結(jié)締組織6。
圖3(照片3)，顯示胃腺癌伴幽門淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，淋巴內(nèi)可見癌栓，HE×40，示出了淋巴結(jié)7，淋巴結(jié)內(nèi)的轉(zhuǎn)移癌8。
圖4(照片4)，顯示結(jié)節(jié)性甲狀腺腫胖部分呈腺樣增生，HE×100，顯出了增生的纖維結(jié)締組織9，甲狀腺濾泡10，腺瘤樣增生的包膜組織11和腺瘤樣增生的甲狀腺組織12。
圖5(照片5)，顯示結(jié)腸平滑肌肉瘤，瘤細(xì)胞呈異形性，可見核分裂，HE×400，顯現(xiàn)出腫瘤細(xì)胞核分裂13。
權(quán)利要求
1．一種快速切片法，包括切片機(jī)、冰柜、砝碼、組織托、培養(yǎng)皿、手術(shù)刀、毛筆、小鑷子和溫度計(jì)，其特征在于，所述的切片法是在冰柜內(nèi)冰凍切片。
2．據(jù)權(quán)利要求1所述的快速切片法，其特征在于，所述的冰凍切片選用202型切片機(jī)、雙門冰柜，平底砝碼和組織托各至少2只，培養(yǎng)皿至少1只。
3．據(jù)權(quán)利要求1所述的快速切片法，其特征在于，切片前在冰柜內(nèi)放置支架，把切片機(jī)置于支架上；把組織托，砝碼，手術(shù)刀，毛筆，小鑷子和溫度計(jì)放入冰柜內(nèi)待冷。
4．據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的快速切片法，其特征在于，先給切片機(jī)添加適量潤滑液，開啟冰機(jī)制冷，達(dá)到-20～-25℃的切片溫度即可切片。
5．據(jù)權(quán)利要求1所述的快速切片法，其特征在于，組織取材后，在組織背面涂上一層膠水后置于組織托上，用至少1只砝碼壓在其上冷凍1分鐘，用手術(shù)刀插入組織與砝碼之間，使組織與砝碼分離。
6．據(jù)權(quán)利要求1或5所述的快速切片法，其特征在于，在組織周圍加適量膠水或白乳膠，再用另一只粘有無水乙醇的砝碼壓上1分鐘，使砝碼與組織分開，吸干砝碼及組織表面的乙醇后，即可切片，切片厚度5-7um。
7．據(jù)權(quán)利要求1或5所述的快速切片法，其特征在于，在組織切全后留少許膠水部分與組織托相連，用毛筆和小鑷子把切片展開貼片。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種快速切片法,涉及生物及人體組織冷凍切片技術(shù),它是在冰柜內(nèi)進(jìn)行的快速冰凍切片,把切片機(jī),砝碼,組織托,培養(yǎng)皿等器具置于冰柜內(nèi)至冰柜制冷至－20～－25℃時(shí)則可進(jìn)行生物組織切片。本發(fā)明切片操作方便,快捷,實(shí)用,因冰凍后的組織切片沒有冰晶形成而留下的孔狀空隙,使切片質(zhì)量高,本發(fā)明適于基層設(shè)備不足的醫(yī)療單位進(jìn)行快速切片診斷之用。
文檔編號(hào)A61B10/00GK1296803SQ0010843
公開日2001年5月30日 申請日期2000年5月23日 優(yōu)先權(quán)日2000年5月23日
發(fā)明者陳廣峰, 陳連紅, 錢世鈴 申請人:陳廣峰