專利名稱：心腦脈通注射液的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生化注射液的制備方法。
目前，國內(nèi)外較為先進(jìn)的采用自體網(wǎng)膜移植術(shù)治療缺血性血管病，且被廣泛應(yīng)用，由于人體網(wǎng)膜含有促進(jìn)血管生長因子，是一種活性的生物制劑，因此用網(wǎng)膜移植術(shù)治療人體四肢閉塞性脈管類等血管疾病具有較好的效果，但采用此種方法治療有其不足之處血管病的治療必須通過手術(shù)方法進(jìn)行，手術(shù)繁雜，護(hù)理困難，且療效持續(xù)時間短，患者不易接受，給一些心血管病患者的治療帶來不便。
為解決人體心腦血管病的治療，本發(fā)明的目的提供一種心腦血管注射液的制備方法，利用動物臟器網(wǎng)膜組織，經(jīng)過特殊工藝流程制備一種針劑，從肌肉或靜脈內(nèi)注入人體，以達(dá)到對血管病之抗凝、降纖、溶栓、降粘，促進(jìn)血管生長，達(dá)到有效治療的目的。
本發(fā)明注射液制備方法工藝流程如下→1→2→3→4→5→61．原料選??；2．組織處理、去污、破碎；3．成份分離；4．有效成份提取及處理；5．有效成份測定；6．除菌處理、包裝貯存。
其詳細(xì)工藝流程如下
1．原料選取選取家庭養(yǎng)殖牛心臟血管網(wǎng)膜、類網(wǎng)膜；2．組織處理、去污、破碎在無菌條件下取上述原料，稱量去污，在無菌條件下將組織膜剪碎，加入二倍體積的漢格氏液，此液為一種細(xì)胞營養(yǎng)液，起營養(yǎng)作用，同時具有溶解作用，可以將有效成份溶解在里邊，其功能是保持生物活性持久，然后加入與漢格氏液等量的1～6％十二烷基硫酸鈉和1～6％乙二胺四乙酸鈉，此二種物質(zhì)為陰離子去污劑及細(xì)胞解離劑，最后用組織破碎機(jī)將有機(jī)組織破碎；3．成份分離將破碎的組織用高速離心機(jī)3000g/分，運行30分鐘，使有效成份分離；4．有效成份提取及處理將含有完整細(xì)胞沉淀物取出，按組織重量5倍加入漢格氏液，然后再加入6％十二烷基硫酸鈉和6％乙二胺四乙酸鈉，使其溶解，存放在4℃的條件下反應(yīng)48小時，再用離心機(jī)，以7000g/分分離，運行30分鐘，分離后上清呈乳白色狀態(tài)，取上清，按上清5倍體積加入提取生物制劑的有機(jī)溶劑三氯甲烷，放0℃下存放一小時再取出，再用離心機(jī)以3000g/分，運行30分鐘，取出紊狀物，呈稠狀，用冷丙酮洗二次，再用冷無水乙醇洗4～5次，再用胰酶酶解；5．有效成份測定取沉淀，按每100克組織加入400ml的無菌無熱源不含毒素雜質(zhì)的漢格氏液，加入20ml的葡萄糖溶液，使其溶解，呈無色透明狀態(tài)，用葡萄糖凝膠，采用設(shè)備型號為G75、G25分子篩過柱，實際是進(jìn)行篩分過程，將收集的液體用凱氏定氮法將含氮蛋白量調(diào)至2mg/ml標(biāo)準(zhǔn)濃度，收集蛋白類吸收峰，大規(guī)模生產(chǎn)時采用粗濾、超濾過程，粗濾應(yīng)用圓筒式過濾器，0.45μm和0.22μm濾板粗濾，將粗濾液用2萬分子量的超濾膜超濾；6．除菌處理將該液體用G6除菌器設(shè)備除菌，按注射液標(biāo)準(zhǔn)重量封裝，放在4℃的溫度下保存，即可包裝、貯存和使用。
此種藥劑有效成份為小分子蛋白，含有少量胺基酸，還有多肽類和少量稀有金屬等血管活性物質(zhì)及有效酚酶系統(tǒng)。
本發(fā)明血管病針劑藥物制取的優(yōu)點原料來源廣泛，在實驗室內(nèi)都可生產(chǎn)；工藝簡單、無須特殊設(shè)備，所制藥物療效高、持續(xù)時間長，無須手術(shù)，只需肌肉注射，容易接受，效果突出，特別對治療脈管炎、動脈炎、雷諾氏病、下肢靜脈炎等疾病都有顯著療效。
實施例1取牛的新鮮心臟250克，經(jīng)過冷凍、解凍數(shù)次后再用無菌生理鹽水洗二次，然后將心臟剪碎，加入500克漢格氏液(比重近似為1)，再加入15克十二烷基硫酸鈉和15克乙二胺四乙酸鈉，然后用組織破碎機(jī)破碎，將破碎后的組織用高速離心機(jī)以3000g/分，運行30分鐘，將沉淀取出200克，加入1000克漢格氏液，加入60克十二烷基硫酸鈉和60克乙二胺四乙酸鈉，使其溶解，放在4℃冰箱內(nèi)存48小時，取出后再用離心機(jī)以3000g/分，運行30分鐘，取上清加入1000克三氯甲烷放零度以下存放一小時，再用離心機(jī)離心3000g/分，運行30分鐘，取出紊狀物用冷丙酮適量洗二次，再用無水乙醇洗5次，取沉淀100克加入400ml的無菌無熱源漢格氏液，加入20ml葡萄糖，使其溶解，用葡聚糖凝膠，采用設(shè)備型號為G75、G25分子篩過柱，篩分，將收集的液體用凱氏定氮法將含氮蛋白量加入適量的蒸流水調(diào)至2mg/ml標(biāo)準(zhǔn)濃度收集蛋白類吸收峰，用除菌器設(shè)備除菌，最后按注射液標(biāo)準(zhǔn)計量分裝，低溫4℃保存?zhèn)溆谩?br> 實施例2用牛的腸系膜組織為原料，方法同上。
本產(chǎn)品在實驗室內(nèi)進(jìn)行多次小批量生產(chǎn)，經(jīng)幾年的臨床應(yīng)用，治療效果非常明顯，得到醫(yī)院臨床的確認(rèn)，無任何副作用，適合患心腦血管疾病患者臨床應(yīng)用。
權(quán)利要求
1．一種心腦脈通注射液的制備方法，其特征是工藝流程為(1)原料選取選取家庭養(yǎng)殖牛心臟血管網(wǎng)膜、類網(wǎng)膜；(2)組織處理、去污、破碎在無菌條件下取上述原料，稱量去污，在無菌條件下將組織膜剪碎，加入二倍體積的漢格氏液，此液為一種細(xì)胞營養(yǎng)液，起營養(yǎng)作用，同時具有溶解作用，可以將有效成份溶解在里邊，其功能是保持生物活性持久，然后加入與漢格氏液等量的1～6％十二烷基硫酸鈉和1～6％乙二胺四乙酸鈉，此二種物質(zhì)為陰離子去污劑及細(xì)胞解離劑，最后用組織破碎機(jī)將有機(jī)組織破碎；(3)成份分離將破碎的組織用高速離心機(jī)3000g/分，運行30分鐘，使有效成份分離；(4)有效成份提取及處理將含有完整細(xì)胞沉淀物取出，按組織重量5倍加入漢格氏液，然后再加入6％十二烷基硫酸鈉和6％乙二胺四乙酸鈉，使其溶解，存放在4℃的條件下反應(yīng)48小時，再用離心機(jī)，以7000g/分分離，運行30分鐘，分離后上清呈乳白色狀態(tài)，取上清，按上清5倍體積加入提取生物制劑的有機(jī)溶劑三氯甲烷，放0℃下存放一小時再取出，再用離心機(jī)以3000g/分，運行30分鐘，取出紊狀物，呈稠狀，用冷丙酮洗二次，再用冷無水乙醇洗4～5次，再用胰酶酶解；(5)有效成份測定取沉淀，按每100克組織加入400ml的無菌無熱源不含毒素雜質(zhì)的漢格氏液，加入20ml的葡萄糖溶液，使其溶解，呈無色透明狀態(tài)，用葡萄糖凝膠，采用設(shè)備型號為G75、G25分子篩過柱，實際是進(jìn)行篩分過程，將收集的液體用凱氏定氮法將含氮蛋白量調(diào)至2mg/ml標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)度，收集蛋白類吸收峰，大規(guī)模生產(chǎn)時采用粗濾、超濾過程，粗濾應(yīng)用圓筒式過濾器，0.45μm和0.22μm濾板粗濾，將粗濾液用2萬分子量的超濾膜超濾；(6)除菌處理將該液體用G6除菌器設(shè)備除菌，按注射液標(biāo)準(zhǔn)重量封裝，放在4℃的溫度下保存，即可包裝、貯存和使用。
全文摘要
該藥為心腦血管病注射液的生產(chǎn)工藝方法,主要以牛的心腦網(wǎng)膜、肋系膜,經(jīng)過組織處理,去污破碎;成份分離;有機(jī)成份提取;有機(jī)成份處理,有機(jī)成份測定和除菌等工藝過程,將這種有機(jī)成份制成人體用的針劑藥,用于治療各種血管病。優(yōu)點:原料來源廣泛;工藝簡單、無須特殊設(shè)備,所制藥物療效高、持續(xù)時間長,無須手術(shù),只需肌肉注射,容易接受,效果突出,特別對治療脈管炎、動脈炎、雷諾氏病、下肢靜脈炎等疾病都有顯著療效。
文檔編號A61K35/44GK1318374SQ0011033
公開日2001年10月24日 申請日期2000年4月19日 優(yōu)先權(quán)日2000年4月19日
發(fā)明者劉學(xué)博 申請人:劉學(xué)博