專利名稱：凝血酶抑制劑的鹽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及凝血酶抑制劑的新型鹽，其制備方法和在制備具有抗血栓形成效果的藥物方面的用途。
本發(fā)明具體涉及通式Ⅰ或Ⅱ的新型化合物及其互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體， 其中n是0．5，1，2，及HX是 H2N(CH2)mSO3H 而且，HX可任選被甲基，乙基或經(jīng)基取代一次或兩次，其中m是0-4。
優(yōu)選的HX定義如下 特別優(yōu)選的式Ⅰ活性物質(zhì)具有R構(gòu)型的環(huán)己基苯胺和S構(gòu)型的脫氫脯氨酸。
HX=HOAc的凝血酶抑制劑Ⅰ的制備方法描述于WO96／25426，n=0的凝血酶抑制劑Ⅱ的制備方法描述于WO94／29336。它們的鹽通常是非晶狀的。這些物質(zhì)的保存，尤其是在較高溫度下的保存，會導(dǎo)致許多副產(chǎn)物的形成。
本發(fā)明的目的之一是尋找貯存穩(wěn)定的活性物質(zhì)形式。
通過將酸性鹽滴定到等電點(diǎn)，經(jīng)過沉淀或結(jié)晶，過濾或離心，然后干燥，可以得到活性物質(zhì)的甜菜堿。通式Ⅰ和Ⅱ的鹽是通過甜菜堿與HX反應(yīng)得到的，或者將HX的堿金屬鹽與Ⅰ或Ⅱ的無機(jī)酸鹽或C1-C4羧酸鹽反應(yīng)。合適的溶劑是水，C1-C6醇，C2-C6醚，C1-C6酯，甲苯，二甲苯，DMF，DMSO，THF，其中，水是非常優(yōu)選的溶劑。通過過濾或離心，然后干燥，或通過溶液凍干或噴淋干燥來分離產(chǎn)物。
所有常用方法都適于生產(chǎn)晶體，例如，如下列文獻(xiàn)所述Houben-Weyl，I／1卷(Volume)，Georg Thieme出版社(Verlag)，Stuttgrt，1958，341；Rmpps Chemie-Lexikon，第8版(8th edition)，F(xiàn)ranckh’sche Verlagshandlung，Stuttgart 1983，2244，這些文獻(xiàn)在此引作參考。
一般Ⅰ或Ⅱ的生理上可接受的鹽常常是非晶狀固體。我們已經(jīng)驚喜地發(fā)現(xiàn)，尤其是帶有乙酰舒泛-K和糖精的鹽是結(jié)晶很好的化合物。它們自然地從水中沉淀。然而，如果向固體中添加5-500wt％的少量水，Ⅰ或Ⅱ與HX化學(xué)計(jì)量混合也足以得到晶狀物質(zhì)。
鹽的形成通常在反應(yīng)容器中分批進(jìn)行。但是，連續(xù)性生產(chǎn)也是可以的，例如在級聯(lián)的攪拌容器中，或在擠出機(jī)中。該方法很穩(wěn)定以致其還可以通過在適于該目的的儀器中，優(yōu)選在用于制備藥物活性物質(zhì)的儀器中混合固體來進(jìn)行。
結(jié)晶溫度通常在-80-200℃，優(yōu)選-20-150℃。
壓力在1-2000bar范圍。
樣品的結(jié)晶性能已經(jīng)根據(jù)Debye-Scherrer照片進(jìn)行了評價(jià)。
通式Ⅰ和Ⅱ化合物的熱分解性已經(jīng)通過穩(wěn)定性試驗(yàn)進(jìn)行了研究。該試驗(yàn)是將化合物Ⅰ或Ⅱ存放在70℃大氣壓下10天，然后以7天為間隔用HPLC分析對每種情況的含量的相對減少進(jìn)行測定。
我們已經(jīng)驚喜地發(fā)現(xiàn)，通式Ⅰ和Ⅱ的鹽比無機(jī)酸的和C1-C4羧酸的甜菜堿和鹽穩(wěn)定得多。這些鹽的結(jié)晶性能尤其有助于活性物質(zhì)穩(wěn)定性。
通式Ⅰ或Ⅱ的新鹽可以用于以下-直接或間接地以凝血酶蛋白分解作用為基礎(chǔ)的病理(pathomechanism)疾病，-以受體的凝血酶依賴性活化作用和信號傳導(dǎo)作用為基礎(chǔ)的病理疾病，-與體細(xì)胞基因表達(dá)的刺激作用(例如，通過PAI-1，PDGF(血小板衍生生長因子)，P-選擇蛋白，ICAM-1，組織因子)或抑制作用(例如，在平滑肌細(xì)胞中無合成反應(yīng))有關(guān)的疾病，-以凝血酶的促分裂原作用為基礎(chǔ)的疾病，-以上皮細(xì)胞(例如，血管內(nèi)皮細(xì)胞)的收縮性和滲透性的凝血酶依賴性改變?yōu)榛A(chǔ)的疾病，-凝血酶依賴性血栓栓塞癥狀，如深度靜脈血栓形成，肺栓塞，心肌或腦梗塞，動脈纖維化，旁路閉塞，-播散式血管內(nèi)凝固(DIC)，-再閉塞，以及減少與血栓溶解劑結(jié)合使用時(shí)的再灌注時(shí)間，所說血栓溶解劑包括鏈激酶，尿激酶，前尿激酶(prourokinase)，t-PA，APSAC，出自動物唾液腺的纖維蛋白溶血原激活酶，及所有這些物質(zhì)的再結(jié)合體和突變形式，-PTCA之后出現(xiàn)的早期再閉塞和后期再狹窄，-平滑肌細(xì)胞的凝血酶依賴性增生，-活性凝血酶在CNS中的積累(例如在阿爾茨海默病中)，-腫瘤生長，以及為了防止腫瘤細(xì)胞的粘連和轉(zhuǎn)移。
這些新化合物尤其可以用來治療和預(yù)防凝血酶依賴性血栓栓塞癥，如深度靜脈血栓形成，肺栓塞，心肌或腦梗塞，及不穩(wěn)定性心絞痛，還可用來治療播散式血管內(nèi)凝固(DIC)。它們還適合與血栓溶解劑相結(jié)合進(jìn)行治療，如鏈激酶，尿激酶，前尿激酶，t-PA，APSAC和其它纖維蛋白溶血原激活酶，以減少再灌注時(shí)間和延長再閉塞時(shí)間。
另一個優(yōu)選的應(yīng)用領(lǐng)域是在經(jīng)皮透照(transluminal)冠狀血管成形術(shù)(PTCA)之后預(yù)防凝血酶依賴性早期再閉塞和后期再狹窄，預(yù)防凝血酶介導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞增生，預(yù)防活性凝血酶在CNS中的堆積(例如，在阿爾茨海默病中)，控制腫瘤生長，以及預(yù)防腫瘤細(xì)胞的粘連和轉(zhuǎn)移。
新化合物還可用來給人工表面包膜，例如血液透析膜，用來疏通必要的系統(tǒng)和管線，以及用作血管外循環(huán)，斯坦特印膜和心瓣的氧化劑。
新化合物還可用于直接或間接地以激肽原酶，尤其是激肽釋放酶蛋白分解作用為基礎(chǔ)的病理疾病，例如炎癥，如哮喘，胰腺炎，鼻炎，關(guān)節(jié)炎，蕁麻疹及其它內(nèi)部炎癥。
本發(fā)明可用常用方式口服或胃腸外(皮下，靜脈內(nèi)，肌肉內(nèi)，腹膜內(nèi)，直腸)給藥。還可以通過鼻咽通道用噴氣或噴霧方式給藥。這些化合物尤其以口服。
劑量取決于患者的年齡，身體情況和體重，以及給藥方式。每人的日活性物質(zhì)劑量，對于口服給藥，約為10-2000mg，而對于胃腸外給藥，約為1-200mg。這個劑量可在一天內(nèi)以2-4個單劑或一次給藥。
新化合物可以常用固體或液體藥物形式給藥，例如，未包衣或(膜)包衣片劑，膠囊劑，粉劑，顆粒劑，栓劑，溶液，軟膏，乳膏或噴霧劑。它們可以常規(guī)方式制成。為此目的，這些活性物質(zhì)可與常用藥物賦形劑混合制成，賦形劑如片劑粘合劑，膨脹劑，防腐劑，片劑崩解劑，流動性調(diào)整劑，增塑劑，潤濕劑，分散劑，乳化劑，溶劑，緩釋劑，抗氧化劑和／或推進(jìn)氣體(參見H．Sucker等人的《制藥技術(shù)》(Pharmazeutische Technologie)，Thieme出版社，Stuttgart，1978)。以這種方式得到的給藥劑型一般含有0．1-99wt％的活性物質(zhì)。
對比實(shí)施例實(shí)施例1N-[(羥基羰基)亞甲基]-(R)-環(huán)己基丙氨酰-(S)-3，4-脫氫脯氨酸6-脒基-3-皮考啉基酰胺(甜菜堿)將90g(0．116mol)WO98／09950實(shí)施例3所述化合物N-Boc-N-[(叔丁氧羰基)亞甲基]-(R)-環(huán)己基丙氨酰-(S)-3，4-脫氫脯氨酸6-脒基-3-皮考啉基酰胺N-乙?；?(S)-半胱氨酸鹽，360g水和44．56g(濃度38％，0．464mol)鹽酸在65℃加熱2小時(shí)。冷卻到室溫后用乙酸乙酯萃取一次。分離各相，用105g 25％氨水溶液將pH調(diào)至8．2。沉淀產(chǎn)物，攪拌1小時(shí)后進(jìn)行吸濾。用冰水洗滌，在真空爐中干燥，得到41．66g(0．091mol，79％)N-[(羥基羰基)亞甲基]-(R)-環(huán)己基丙氨酰-(S)-3，4-脫氫脯氨酸6-脒基-3-皮考啉基酰胺，為無色固體。Debye-Scherrer照片非晶狀
權(quán)利要求
1．式Ⅰ或Ⅱ化合物及其互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體， (Ⅱ)其中n是0．5，1，2，及HX是 而且，HX可任選被甲基，乙基或羥基取代一次或兩次，其中m是0-4。
2．如權(quán)利要求1所要求的化合物，為晶體形式。
3．權(quán)利要求1或2所要求的式Ⅰ化合物的制備方法，其中式Ⅰ或Ⅱ(n=0)的甜菜堿與n個HX反應(yīng)。
4．權(quán)利要求1或2所要求的式Ⅰ化合物的制備方法，其中式Ⅰ或Ⅱ活性物質(zhì)的無機(jī)酸鹽或C1-C4羧酸鹽與HX的堿金屬鹽反應(yīng)。
5．如權(quán)利要求3所要求的方法，其中式Ⅰ或Ⅱ化合物在水中制備。
6．如權(quán)利要求4所要求的方法，其中式Ⅰ或Ⅱ化合物在水中制備。
7．如權(quán)利要求6所要求的方法，其中使用式Ⅰ或Ⅱ化合物的無機(jī)酸鹽或C1-C4羧酸鹽的化學(xué)計(jì)量的固體混合物和占水重量的5-500wt％的HX的堿金屬鹽。
8．含有權(quán)利要求1或2所要求的式Ⅰ或Ⅱ化合物及常用載體和賦形劑的藥物。
9．權(quán)利要求1或2所要求的式Ⅰ或Ⅱ化合物在制備治療或預(yù)防下列疾病的藥物中的用途-直接或間接地以凝血酶蛋白分解作用為基礎(chǔ)的病理疾病，-以受體的凝血酶依賴性活化作用和信號傳導(dǎo)作用為基礎(chǔ)的病理疾病，-與體細(xì)胞基因表達(dá)的刺激作用或抑制作用有關(guān)的疾病，-以凝血酶的促分裂原作用為基礎(chǔ)的疾病，-以上皮細(xì)胞的收縮性和滲透性的凝血酶依賴性改變?yōu)榛A(chǔ)的疾病，-凝血酶依賴性血栓栓塞癥狀，-播散式血管內(nèi)凝固，-再閉塞，以及減少與血栓溶解劑結(jié)合使用時(shí)的再灌注時(shí)間，-PTCA之后出現(xiàn)的早期再閉塞和后期再狹窄，-平滑肌細(xì)胞的凝血酶依賴性增生，-活性凝血酶在CNS中的積累，-腫瘤生長，以及為了防止腫瘤細(xì)胞的粘連和轉(zhuǎn)移。
10．權(quán)利要求1或2所要求的式Ⅰ或Ⅱ化合物用于包裹表面。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式Ⅰ化合物及其互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體(見右式),而且,HX可任選被甲基,乙基或羥基取代一次或兩次,并涉及它們的制備方法和用途。
文檔編號A61K38/00GK1279236SQ00118039
公開日2001年1月10日 申請日期2000年5月10日 優(yōu)先權(quán)日1999年5月10日
發(fā)明者B·謝菲爾 申請人:Basf公司