專利名稱：抗腫瘤藥物洛莫司汀控制釋放藥膜的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬控制釋放藥膜的制備。
抗腫瘤藥物洛莫司汀(CCNU)目前市場化的產(chǎn)品為體外透皮吸收的緩釋藥膜、口服緩釋片，前者的藥物載體不能夠被機(jī)體降解吸收，后者屬消化道給藥，且無法控制使得藥物恒速釋放。
本發(fā)明的目的是提供一種抗腫瘤藥物洛莫司汀(CCNU)控制釋放藥膜，可以克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，在腫瘤病灶局部術(shù)后埋植，降低腫瘤患者傳統(tǒng)給藥方式帶來的全身毒副作用，增加腫瘤病灶局部的藥物濃度。
本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)成洛莫司汀1-3份，明膠、阿拉伯膠各300-900份、表面活性劑(吐溫60)2-6份，通過復(fù)凝聚法制備洛莫司汀微囊，加入膠原溶脹液2000-6000份，冷凍干燥制備藥膜。
實(shí)施本發(fā)明的具體步驟是洛莫司汀溶于乙醚，然后加入吐溫60研磨混勻；加入阿拉伯膠水溶液，攪拌(400rpm)50℃下將溶液制成油微滴呈均態(tài)的CCNU-阿拉伯膠乳劑；取明膠水溶液加入乳劑中，攪拌均勻；用10％的NaOH溶液調(diào)節(jié)其pH值接近7，持續(xù)攪拌，攪拌時(shí)間以乳劑不起泡沫為限(40min)，然后加入5％的HAc溶液調(diào)節(jié)溶液pH值至4．06，油微滴完全被包在透明的復(fù)合凝聚體囊鞘內(nèi)，呈圓球形，繼續(xù)攪拌(60rpm)5min，然后加入水稀釋，降溫至28℃，再在冰浴中降溫到10℃以下，攪拌。然后，加甲醛溶液進(jìn)行固化，30min后用10％的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至7-8，攪拌4h(60rpm)，靜置，微囊下沉。抽濾混懸液，棄去濾液，保留濾渣即為微囊。水洗3-4次除去甲醛。將微囊在50℃時(shí)干燥；過200目篩，篩下微粒即是微囊。取膠原溶脹液，加丙二酸溶液溶解得膠原溶脹液。取上述制備的洛莫司汀微囊，加入膠原溶脹液，混勻。然后將液體冷凍(-60℃)干燥成為藥膜。以甲醛溶液交聯(lián)2小時(shí)后，水洗除去甲醛。再次干燥即得洛莫司汀控釋藥膜。
本發(fā)明洛莫司汀控釋藥膜釋放恒速；藥膜理化性質(zhì)穩(wěn)定，重復(fù)性好，適合在體內(nèi)埋植使用的要求；小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)表明藥膜的血液和中樞神經(jīng)毒性降低(與靜脈注射組比較，P＜0．01)；藥膜對(duì)腫瘤細(xì)胞有明顯的抑制作用(MTT比色)；藥膜的體內(nèi)抑瘤效果顯著(與空白對(duì)照組比較，P＜0．01，瘤重)。本發(fā)明低毒高效地殺死腫瘤細(xì)胞，且成本低、方法簡便易重復(fù)，可望產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)效益。
本發(fā)明的突出的實(shí)質(zhì)性的特點(diǎn)和積極效果可從下述實(shí)施例中得以體現(xiàn)，但是它們并不是對(duì)本發(fā)明作任何限制。
實(shí)施例1稱取洛莫司汀12．2mg，溶于少量乙醚，然后加入少許吐溫60研磨混勻；加入10ml3％的阿拉伯膠水溶液，在50℃下攪拌(400rpm)，將溶液制成一般油微滴呈均態(tài)的CCNU-阿拉伯膠乳劑；取3％的明膠水溶液10ml加入乳劑中，用10％的NaOH溶液調(diào)節(jié)其pH值接近7，保持原速持續(xù)攪拌40min。加入5％的HAc溶液調(diào)節(jié)溶液pH值至4．06，此時(shí)在顯微鏡下觀察，油微滴應(yīng)完全被包在透明的復(fù)合凝聚體囊鞘內(nèi)，呈圓球形(以上操作均在水浴中進(jìn)行)。繼續(xù)攪拌(60rpm)5min，加入20ml水稀釋，降溫至28℃，再在冰浴中迅速降溫到10℃以下，攪拌。然后，加37％的甲醛溶液進(jìn)行固化30min后，用10％的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至7-8，攪拌4h(60rpm)，靜置，微囊下沉。抽濾混懸液，棄去濾液，保留濾渣即為微囊。水洗3-4次除去甲醛，將微囊在50℃時(shí)干燥；然后過200目篩，篩下微粒即是微囊。取膠原溶脹液25g(1．39％)，加0．3％(w／v)丙二酸溶液100ml得膠原溶液。取上述微囊，加入膠原溶脹液，混勻。然后將液體冷凍干燥(-60℃)成為面積為10cm×10cm的藥膜。以0．25％甲醛溶液沒過藥膜進(jìn)行交聯(lián)2小時(shí)后，水洗除去甲醛。再次冷凍干燥(-60℃)即得洛莫司汀控釋藥膜。
洛莫司汀制備微囊的產(chǎn)率為65．7％；控釋藥膜的體內(nèi)埋植后，藥物釋放30天內(nèi)基本達(dá)到恒速見

圖1；藥膜理化性質(zhì)(接觸角、表面形態(tài)、吸水性、差熱分析、抗張強(qiáng)度)穩(wěn)定，重復(fù)性好，適合在體內(nèi)埋植使用的要求；正常昆明種小鼠體內(nèi)埋植藥膜后14天，進(jìn)行小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)檢測，表明藥膜對(duì)小鼠的血液和中樞神經(jīng)毒性較傳統(tǒng)口服給藥明顯降低見表1圖2；體外培養(yǎng)K562腫瘤細(xì)胞，加入藥膜培養(yǎng)液共同培養(yǎng)14天后，用MTT法測定藥膜對(duì)K562細(xì)胞的抑制率，結(jié)果表明藥膜對(duì)該腫瘤細(xì)胞有明顯的抑制作用見表2；在荷瘤小鼠體內(nèi)腫瘤部位埋植藥膜，考察藥膜的抑瘤率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明藥膜的抑瘤效果高于或接近口服給藥見表3。
實(shí)施例2稱取洛莫司汀122mg，溶于少量乙醚，然后加入少許吐溫60研磨混勻；加入100ml3％的阿拉伯膠水溶液，攪拌(400rpm)，50℃下將溶液制成一般CCNU-阿拉伯膠乳劑；用顯微鏡觀察，乳劑中的油微滴呈均態(tài)。取3％的明膠水溶液100ml加入乳劑中，攪拌均勻(400rpm)；用10％的NaOH溶液調(diào)節(jié)其pH值接近7，持續(xù)攪拌40min，攪拌時(shí)間以乳劑不起泡沫為限。加入5％的HAc溶液調(diào)節(jié)溶液pH值至4．06，此時(shí)在顯微鏡下觀察，油微滴應(yīng)完全被包在透明的復(fù)合凝聚體囊鞘內(nèi)，呈圓球形(以上操作均在水浴中進(jìn)行，不斷攪拌)。繼續(xù)攪拌(60rpm)5min，然后加入200ml水稀釋，降溫至28℃左右，再在冰浴中迅速降溫到10℃以下，攪拌。然后，加一定量37％的甲醛溶液進(jìn)行固化，30min后用10％的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至7-8，繼續(xù)攪拌4h(60rpm)，靜置，微囊下沉。抽濾混懸液，棄去濾液，保留濾渣即為微囊。水洗3-4次除去甲醛，將微囊在50℃干燥；然后過200目篩，即得微囊。取膠原溶脹液250g(1．39％)，加0．3％(w／v)丙二酸溶液得膠原溶脹液。取上述制備的洛莫司汀微囊，加入膠原溶脹液，混勻。將液體干燥成為面積為40cm×25cm的藥膜。以0．25％甲醛溶液交聯(lián)2小時(shí)后，水洗除去甲醛。再次干燥即得洛莫司汀控釋藥膜。
實(shí)施例3稱取洛莫司汀6．1mg，溶于少量乙醚，然后加入少許吐溫60研磨混勻；加入5ml 3％的阿拉伯膠水溶液，攪拌(400rpm)，50℃下將溶液制成CCNU-阿拉伯膠乳劑；用顯微鏡觀察，乳劑中的油微滴呈均態(tài)。取3％的明膠水溶液5ml加入乳劑中，攪拌均勻(400rpm)；用10％的NaOH溶液調(diào)節(jié)其pH值接近7，持續(xù)攪拌，攪拌時(shí)間以乳劑不起泡沫為限，約40min。加入5％的HAc溶液調(diào)節(jié)溶液pH值至4．06，此時(shí)在顯微鏡下觀察，油微滴應(yīng)完全被包在透明的復(fù)合凝聚體囊鞘內(nèi)，呈圓球形。繼續(xù)攪拌(60rpm)5min，然后加入10ml水稀釋，降溫至28℃，再在冰浴中迅速降溫到IO℃以下，在降溫的過程中用玻璃棒慢速攪拌。然后，加37％的甲醛溶液進(jìn)行固化，30min后用10％的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至7-8，繼續(xù)攪拌4h(60rpm)，靜置，微囊下沉。抽濾混懸液，棄去濾液，保留濾渣即為微囊。水洗3-4次除去甲醛，將微囊在50℃時(shí)干燥然后過篩，篩下微粒即是本實(shí)驗(yàn)得到的微囊。取膠原溶脹液12．59(1．39％)，加0．3％(w／v)丙二酸溶液得膠原溶脹液。取上述制備的洛莫司汀微囊，然后加入膠原溶脹液，混勻。然后將液體干燥成為面積為5cm×10cm的藥膜。以0．25％甲醛溶液交聯(lián)2小時(shí)后，水洗除去甲醛。再次干燥即得洛莫司汀控釋藥膜。
表1 CCNU藥膜對(duì)小鼠血細(xì)胞數(shù)的影響
Compare with i．V．group，**P〈0.01，*P〈0.05表2洛莫司汀藥膜對(duì)K562細(xì)胞的抑制作用
表3洛莫司汀藥膜對(duì)艾氏實(shí)體瘤的抑制作用(X±SD)
Compare with control group，*P〈0．05，**P〈0．0權(quán)利要求
1．一種抗腫瘤藥物洛莫司汀控制釋放藥膜，其特征存于它的重量組成和含量是洛莫司汀 1-3份明膠300-900份阿拉伯膠300-900份表面活性劑吐溫60 2-6份
2．權(quán)利要求1所說的抗腫瘤藥物洛莫司汀控制釋放藥膜制備方法，其特征在于它包括下述步驟(1)將洛莫司汀溶于乙醚至完全溶解，然后加入吐溫60研磨混勻；加入阿拉伯膠水溶液，以400rpm攪拌，50℃下將溶液制成油微滴呈均態(tài)的洛莫司汀-阿拉伯膠乳劑；(2)取明膠水溶液加入洛莫司汀-阿拉伯膠乳劑中，攪拌均勻，用堿溶液調(diào)節(jié)pH=7，持續(xù)以400rpm攪拌40min，然后用醋酸溶液調(diào)節(jié)溶液pH值至4．06，油微滴完全被包在透明的復(fù)合凝聚體囊鞘內(nèi)；繼續(xù)以60rpm攪拌5min，倍量水稀釋，降溫至28℃，再在冰浴中降溫到10℃以下，然后加甲醛溶液交聯(lián)固化；(3)30min后用堿溶液調(diào)節(jié)pH值至7-8，以60rpm攪拌4h，靜置，微囊下沉，抽濾混懸液，棄去濾液，保留濾渣即為微囊；水洗3-4次除去甲醛；(4)將微囊在50℃時(shí)干燥，過200目篩，篩下微粒即是微囊；(5)取膠原溶脹液，加丙二酸溶液稀釋，取上述制備的微囊，加入稀釋后的膠原溶脹液，混勻，然后將液體-60℃冷凍干燥成為藥膜；(6)以甲醛溶液交聯(lián)2小時(shí)，水洗除去甲醛，再次-60℃冷凍干燥即得洛莫司汀控釋藥膜。
3．按照權(quán)利要求2所說的抗腫瘤藥物洛莫司汀控制釋放藥膜制備方法，其特征在于所說的成藥膜的膠原溶脹液的取值范圍為2000-6000份。
4．按照權(quán)利要求2所說的抗腫瘤藥物洛莫司汀控制釋放藥膜制備方法，其特征在于所說的膠原與其溶劑丙二酸的質(zhì)量比值為1．2∶1，溶解膠原的丙二酸溶液的濃度為0．3％。
全文摘要
本發(fā)明屬控制釋放藥膜的制備?？鼓[瘤藥物洛莫司汀控制釋放藥膜,洛莫司汀1—3份,明膠、阿拉伯膠各300—900份、表面活性劑(吐溫60)2—6份,通過復(fù)凝聚法制備洛莫司汀微囊,加入膠原溶脹液2000—6000份,冷凍干燥制備藥膜。本發(fā)明能夠達(dá)到在體內(nèi)外恒速釋放,抑瘤效果高于口服給藥,低毒高效,且成本低、方法簡便易重復(fù),可望產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)效益。
文檔編號(hào)A61K9/70GK1282578SQ00121099
公開日2001年2月7日 申請(qǐng)日期2000年7月20日 優(yōu)先權(quán)日2000年7月20日
發(fā)明者張其清 申請(qǐng)人:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物醫(yī)學(xué)工程研究所