專利名稱：治療勃起功能障礙癥的毛冬青提取物制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥制劑制備方法，具體涉及一種治療勃起功能障礙癥的毛冬青提取物制劑及制備方法。
歷史上將男性性功能障礙癥稱之為“陽(yáng)痿”。近年來(lái)醫(yī)學(xué)界改稱其為“勃起功能障礙”，英文為Erectile Dysfunction，簡(jiǎn)稱ED。治療ED的方法很多，目前，臨床上以理療和藥物治療為主，而藥物治療中以口服藥物較受歡迎。枸櫞酸昔多酚(Sildenafil citrate，商品名為Viagra，俗稱偉哥)原是1992年美國(guó)輝瑞公司開(kāi)發(fā)的治療心絞痛的新藥，在臨床試驗(yàn)中，其心絞痛療效平平，而對(duì)ED卻療效顯著，為一種陰莖動(dòng)脈擴(kuò)張劑。經(jīng)重新申報(bào)新用途，美國(guó)FDA于1997年3月批準(zhǔn)上市。目前，該藥為世界上公認(rèn)的、較成功的ED治療藥物。德國(guó)的Bayer、Schering-Plough和Zonagen lnc.及Eli Lily和ICOS Corp.也在合作開(kāi)發(fā)ED治療藥物?？梢灶A(yù)料，今后幾年內(nèi)類似于偉哥的產(chǎn)品將相繼上市。
盡管偉哥的起效快、有效率較高，較受消費(fèi)者歡迎，但它同樣存在其它合成藥所具有的弱點(diǎn)。在上市以來(lái)的兩年中相繼有500多例死亡的報(bào)道，故醫(yī)學(xué)界認(rèn)為偉哥有毒、副作用。英國(guó)等國(guó)家對(duì)偉哥的銷售采取嚴(yán)格的管制，對(duì)消費(fèi)者來(lái)說(shuō)，這無(wú)疑是一種負(fù)面影響。顯然，尋找功效類似于偉哥，而又無(wú)副作用或低副作用的藥物，尤其是天然藥物倍受矚目。
毛冬青(Ilex pubescens Hook.et Arm.)是一種生長(zhǎng)于我國(guó)南方的常綠灌木，以根等入藥。為傳統(tǒng)中藥，藥用歷史久遠(yuǎn)。毛冬青主含黃酮、皂甙等成份，有擴(kuò)張血管及抗菌消炎作用，主要用于冠狀動(dòng)物硬化性心臟病，血管閉塞性脈管炎，中心性視網(wǎng)膜炎，小兒肺炎等。到目前為止，毛冬青未見(jiàn)其有明顯毒、副反應(yīng)，更無(wú)治療ED的文獻(xiàn)報(bào)道。
本發(fā)明的目的是要提供一種治療勃起功能障礙癥的高活性成份含量的毛冬青提取物制劑。
本發(fā)明公開(kāi)的高活性成份含量的毛冬青提取物制劑是由5～80％毛冬青提取物浸膏和95～20％藥用輔料組成的顆粒劑、膠囊劑、片劑、口服液和注射劑，其中毛冬青提取物含總黃酮和總皂甙≥50％。
本發(fā)明所述的藥用輔料為常用藥用輔料如糊精、淀粉、乳糖、碳酸鈣、乙二醇、苯甲酸、氯化鈉、蔗糖、山梨酸、阿斯巴甜、甜蜜素、檸檬酸、低取代羥丙纖維素、膨速、硬脂酸鎂、白碳黑、滑石粉、鈦白粉、改良淀粉、羥丙基甲基纖維素、水、乙醇等。
本發(fā)明的另一目的是要公開(kāi)上述毛冬青提取物制劑的制備方法。
本發(fā)明毛冬青提取物制劑的制備包括下列步驟(1)活性成份浸膏的制備將干燥的毛冬青根切制成飲片，加原生藥量10-20倍量的水或親水性溶劑，浸漬2小時(shí)后，加熱回流，熱提1-2次，每次1小時(shí)，冷卻后，靜置24小時(shí)，過(guò)濾，濾液通過(guò)以不帶離子交換基團(tuán)的分離介質(zhì)為載體的層析柱1-2次，再用水及水-醇混合溶劑洗脫，收集洗脫液，于＜60℃溫度下減壓濃縮，干燥后制得含總黃酮和總皂甙≥50％的浸膏，浸膏提取得率為1.5～3％。
(2)含毛冬青提取物制劑的制備取5～80％上述活性成份浸膏和95～20％藥用輔料按常規(guī)制劑方法制成顆粒劑、膠囊劑、片劑、口服液和注射液。
本發(fā)明方法中所述的親水性溶劑為脂肪族低級(jí)醇或低級(jí)酮；不帶離子交換基團(tuán)的分離介質(zhì)為大孔吸附樹(shù)脂、硅膠、氧化鋁、聚酰鞍硅、硅藻土、活性炭或纖維素等，這些介質(zhì)可以單一使用也可混合使用。
本發(fā)明方法中所述的水-醇混合劑中的醇為脂肪族低級(jí)醇，水與醇的混合比例為水∶醇＝99-1∶1-99的任意比例。
本發(fā)明的再一目的是公開(kāi)毛冬青活性成份提取物制劑在治療勃起功能性障礙癥中的應(yīng)用。
用本發(fā)明的含毛冬青活性成份提取物制劑進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)和臨床研究表明，和偉哥一樣，毛冬青提取物低、中、高劑量組去勢(shì)大鼠的陰莖勃起潛伏期顯著縮短(P＜0.01)，給藥后大鼠陰莖對(duì)外部刺激的興奮性顯著提高。40例ED患者經(jīng)毛冬青制劑一個(gè)療程的治療后，臨床癥狀明顯好轉(zhuǎn)，國(guó)際勃起功能障礙指數(shù)顯著提高，總有效率為82.5％。
本發(fā)明產(chǎn)品的治療劑量為每日口服相當(dāng)于毛冬青活性成份浸膏1.5～3g的制劑，連續(xù)服用1個(gè)月為1個(gè)療程。
毛冬青為冬青科冬青植物毛冬青(Ilex pubescens Hook.Et Arn.)的根，具有活血通脈，清熱解毒，消腫止痛的功效。為心血管疾病用藥，有擴(kuò)張血管及抗菌消炎作用。該植物含黃酮類、皂甙類、甾醇、氨基酸、酚性化合物、鞣質(zhì)、三萜類化合物等，它常用于冠狀動(dòng)脈硬化性心臟病、血栓閉塞性脈管炎、中心性視網(wǎng)膜炎和小兒肺炎的治療。
據(jù)報(bào)道，昔多酚的藥理作用機(jī)理是，通過(guò)抑制磷酸二酯酶-5(PDE-5)，減少環(huán)鳥(niǎo)苷酸(cGMP)降解，引起陰莖海綿體血管平滑肌舒張，血流增加，從而使陰莖勃起。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，毛冬青提取物的藥理機(jī)理既有對(duì)陰莖血管的作用，還可能通過(guò)其它途徑起效。
現(xiàn)有的毛冬青制劑有片劑、膠囊劑、注射劑等，所用的毛冬青提取物均為水提醇沉工藝，一些有效成份隨大分子化合物沉淀而大量流失，其主要活性成份總黃酮＜30％。本發(fā)明工藝為水提液經(jīng)柱層吸附，富集小分子有效成分，然后，用一定比例的醇性溶媒洗脫、解吸有效成分，經(jīng)干燥后，配以適量輔料，混合后制成片劑、膠囊、顆粒劑或注射劑。柱層吸附法能有效地克服有效成分的流失，從而提高了提取物中有效成分的含量。使主要活性成份黃酮和皂甙的含量大大提高，可達(dá)到≥50％水平。
用本發(fā)明的毛冬青提取物浸膏進(jìn)行藥理和臨床試驗(yàn)，具體結(jié)果如下一、藥理試驗(yàn)(一)實(shí)驗(yàn)材料I動(dòng)物SD大鼠，雄性，體重180-200g，由上海西普爾-必凱公司提供，合格證號(hào)滬動(dòng)合證字152號(hào)。ICR小鼠，雌雄各10只，體重18-22g，由上海西普爾-必凱公司提供，合格證號(hào)滬動(dòng)合證字153號(hào)。飼養(yǎng)條件按純系動(dòng)物要求飼養(yǎng)。II儀器JL-B型電刺激器上海嘉龍教儀廠制造。III藥物(I)毛冬青浸膏粉為淡棕黃色粉末狀固體，批號(hào)20000428，使用時(shí)用水配成適當(dāng)濃度的溶液備用。(II)丙酸睪丸素注射液上海第九制藥廠；批號(hào)990401；花生油稀釋后備用。(III)枸櫞酸昔多酚(Sildenafil citrate)純度99.12％，使用前用1％CMC配置成混懸液。(二)實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果1、對(duì)去勢(shì)大鼠陰莖勃起潛伏期的影響動(dòng)物在戊巴比妥鈉(4％，40mg/kg，ip)麻醉下消毒陰囊皮膚，摘除雙側(cè)睪丸，術(shù)后肌注青霉素G鉀2萬(wàn)/kg。
去勢(shì)手術(shù)3日后，將大鼠隨機(jī)分為6組。丙睪組皮下注射丙酸睪丸素1.25mg/1ml/kg，作陽(yáng)性對(duì)照；3組給藥組分別灌胃給與毛冬青浸膏0.15、0.45和1.35/10ml/kg；模型組灌胃蒸餾水10ml/kg。以上5組動(dòng)物均連續(xù)給藥20天，每日1次。偉哥組于測(cè)試前約40分鐘給與枸櫞酸昔多酚，作為陽(yáng)性對(duì)照。另取10只未去勢(shì)大鼠同期飼養(yǎng)，作為正常對(duì)照組。
7組動(dòng)物均于第21日，用電刺激器的電極置于大鼠陰莖部位，給與局部電刺激，電流強(qiáng)度為4mA。記錄從刺激開(kāi)始至陰莖勃起的時(shí)間(勃起潛伏期)。
結(jié)果顯示(見(jiàn)表1)，在局部電刺激作用下，與陽(yáng)性對(duì)照丙酸睪丸素和昔多酚一樣，毛冬青浸膏低、中、高劑量組去勢(shì)大鼠的陰莖勃起潛伏期顯著縮短(P＜0.01)，給藥后大鼠陰莖對(duì)外部刺激的興奮性顯著提高。
表1毛冬青浸膏對(duì)電刺激去勢(shì)大鼠陰莖勃起潛伏期的影響組別 動(dòng)物數(shù)劑量潛伏期(n)(mg/kg)(mean±SDs)正常對(duì)照組 105.50±1.71*去勢(shì)模型組 826.13±5.38丙睪組 91.254.80±0.73*昔多酚組 890 7.64±1.32*給藥組 9150 12.77±4.13*8450 7.60±1.76*813506.42±1.60**與去勢(shì)模型組比較，P＜0.01。2、對(duì)大鼠交配的影響①雌性大鼠準(zhǔn)備取體重為200-300g的性成熟大鼠120只，雌雄各半。60只雌性大鼠在乙醚麻醉下，行雙側(cè)卵巢切除術(shù)，術(shù)后肌注青霉素2萬(wàn)U/kg，共3天以抗感染。卵巢切除二周后可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)48小時(shí)前皮下注射苯甲酸雌二醇20μg/只，4小時(shí)前再次注射黃體酮注射液500μg/只。
②雄性大鼠準(zhǔn)備60只雄性大鼠隨機(jī)均分成6組，每日灌胃給藥1次，連續(xù)7天。
③交配實(shí)驗(yàn)觀察方法將雄性大鼠單獨(dú)放入54.5×39.5×20cm籠中，使其適應(yīng)環(huán)境后，每籠加入1只雌鼠，開(kāi)始記時(shí)并記錄撲捉潛伏期(自雌鼠投入至雄鼠第一次撲捉雌鼠之間的時(shí)間)、射精潛伏期(自雌鼠投入至雄鼠發(fā)生第一次射精之間的時(shí)間)、20分鐘內(nèi)雄鼠撲捉雌鼠的次數(shù)、20分鐘內(nèi)雄鼠射精的次數(shù)。上述觀察結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)(組間t-test)處理。
結(jié)果表明，與空白組比較，給與毛冬青提取物后，大鼠的撲捉潛伏期和射精潛伏期明顯縮短，撲捉次數(shù)和射精次數(shù)明顯增加。尤其是射精次數(shù)的增加具有顯著性意義(P＜0.01)。提示毛冬青提取物能提高大鼠的性欲和交配能力。
表2毛冬青提取物對(duì)大鼠交配的影響藥物劑量動(dòng)物數(shù)撲捉潛伏期撲捉次數(shù)射精潛伏期射精次數(shù)
(mg/kg) (n) (min) (次) (Min) (次)空白92.73±1.60 17.6±9.6 7.92±7.56 2.56±2.19昔多酚 3082.24±1.60 22.0±10.43.56±3.35 5.50±4.81丙酸睪酮6 80.56±0.39**23.5±8.2 0.97±0.50*6.50±3.63*120 91.65±0.88 20.3±5.6 2.70±1.38 8.00±3.50**毛冬青提取物 240 92.00±2.06 23.0±6.5 3.25±2.24 8.33±4.90**480 82.49±2.24 22.3±12.92.96±2.60 8.63±5.15***P＜0.05，**P＜0.01.二、毛冬青浸膏的急性毒性試驗(yàn)挑選并稱重健康小鼠，雌雄各10只，灌胃給與54％濃度的毛冬青浸膏水溶液0.4ml/10g，給藥劑量為21.6g/kg，相當(dāng)于臨床劑量的360倍。觀察小鼠灌胃后的反應(yīng)情況，連續(xù)7天。
結(jié)果給藥后小鼠的飲食和活動(dòng)均正常，未見(jiàn)異常的反應(yīng)，在7天的觀察期內(nèi)亦未見(jiàn)動(dòng)物死亡。提示毛冬青浸膏的毒性較低。三、毛冬青治療陰莖勃起功能障礙的臨床療效觀察(1)對(duì)象與方法I觀察對(duì)象男性病，年齡20-59歲(平均39.65±10.25歲)，病程1月-17年(平均3.35±4.32月)。II用藥方法每日口服浸膏1次，每次3.6g，連續(xù)1個(gè)月為1療程。III療效判斷標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)中醫(yī)辨證(表3)國(guó)際勃起功能障礙指數(shù)標(biāo)準(zhǔn)(表4)等，判斷療效標(biāo)準(zhǔn)如下表3中醫(yī)辯證癥狀輕中 重性欲淡漠 性欲降低偶有性要求 陽(yáng)痿射精無(wú)力偶有 經(jīng)常發(fā)作 持續(xù)出現(xiàn)腰膝酸軟偶有發(fā)作 反復(fù)發(fā)作持續(xù)發(fā)作，不易緩解精神萎靡精神不振 精神萎靡精神萎靡，反應(yīng)遲鈍表4國(guó)際勃起功能障礙指數(shù)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)0分1分2分3分4分5分對(duì)獲得和維持 很低低中等 高 很高勃起的自信度受性刺激勃起后 無(wú)性活動(dòng) 幾乎沒(méi)有或 遠(yuǎn)少于 約一半 多于一半 幾乎總是多少次能插入 完全沒(méi)有一半或總是性交時(shí)，多少次 沒(méi)有嘗試 幾乎沒(méi)有或 遠(yuǎn)少于 約一半 多于一半 幾乎總是能維持勃起狀態(tài) 性交 完全沒(méi)有一半或總是維持勃起直至性 沒(méi)有嘗試 困難極大困難很大 困難 有點(diǎn)困難 不困難交完成困難程度 性交性交有多少次沒(méi)有嘗試 幾乎沒(méi)有或 遠(yuǎn)少于約一半 多于一半 幾乎總是感到滿足性交 完全沒(méi)有一半或總是近期治愈經(jīng)一療程后，臨床癥狀消失，陰莖勃起大于90°，性交成功率＞70％，國(guó)際勃起功能障礙指數(shù)＞20。
顯效經(jīng)一療程治療后，臨床癥狀明顯改善(二級(jí)以上)，陰莖勃起＞90°，性交成功率＞50％，國(guó)際勃起功能障礙指數(shù)＞20。
有效經(jīng)一療程治療后，臨床癥狀好轉(zhuǎn)，陰莖勃起有改善，性交成功率＞25％。
無(wú)效癥狀無(wú)改善。(2)結(jié)果I臨床療效經(jīng)一個(gè)療程的治療，治愈8例，占20.0％；顯效11例，占27.5％；有效14例，占35.0％；無(wú)效7例，占17.5％?？傆行蕿?2.5％(見(jiàn)表5)。
表5臨床總療效(例％)組別例數(shù)臨床痊愈 顯效有效 無(wú)效總有效率治療組 40 8/20.0 11/27.5 14/35.07/17.5 33/82.5II臨床癥狀變化經(jīng)一個(gè)療程的治療后，患者的臨床癥狀明顯好轉(zhuǎn)(見(jiàn)表6)。表6 40例患者治療前后臨床癥狀變化(例)治療前治療后P值性欲淡漠247 ＜0.01射精無(wú)力1815＜0.05腰膝酸軟153 ＜0.01精神萎靡2712＜0.05III國(guó)際勃起功能障礙指數(shù)40例病人經(jīng)治療國(guó)際起功能障礙指數(shù)顯著提高(見(jiàn)表7)。
表7國(guó)際勃起功能障礙指數(shù)變化情況(mean±SD)治療前治療后指數(shù)分值13.38±6.36 22.48±2.85**與治療前比較，P＜0.01。
ED的發(fā)生與年齡增長(zhǎng)有關(guān)，美國(guó)一項(xiàng)調(diào)查研究表明，40-50歲的男性中，40％的人曾發(fā)生過(guò)ED；而70-80歲的男性則為70％。但ED并非老齡的必然結(jié)果，而是其它年齡相關(guān)疾病，包括心身疾病導(dǎo)致的結(jié)果。最近估計(jì)美國(guó)約有4千萬(wàn)ED患者，全球約有一億以上患者。可以預(yù)測(cè)，隨著生活節(jié)奏的加快和社會(huì)老齡化，ED患者將逐年增長(zhǎng)。
本發(fā)明含毛冬青活性浸膏的制劑治療勃起功能障礙癥的療效與昔多酚相當(dāng)，但長(zhǎng)期使用未發(fā)現(xiàn)任何毒副作用，是一種安全、價(jià)廉、療效可靠的全天然藥物，具有巨大的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。
實(shí)施例1、取毛冬青飲片20kg，加水200kg，加熱，回流，回流提取2小時(shí)，放出藥液，殘?jiān)鼉?nèi)再加水150kg，回流提取1小時(shí)，然后合并提取液，經(jīng)部分濃縮后，過(guò)一裝有大孔樹(shù)脂(D-101)的不銹鋼柱(Φ200×1000mm)，用10kg純水洗滌后，分別用20％、50％和95％乙醇各20kg洗滌，收集50％和95％乙醇洗脫，經(jīng)濃縮、干燥，得到提取物0.4kg。
實(shí)施例2、取毛冬青10kg，加50％乙醇100kg，加熱回流2小時(shí)，放出藥液，殘?jiān)鼉?nèi)再加50％乙醇80kg，加熱回流2小時(shí)，然后合并提取液，經(jīng)部分濃縮后，過(guò)一裝有聚酰胺的不銹鋼柱(Φ150×800mm)，依次用20％、40％和95％乙醇洗滌，收集95％乙醇洗脫液，經(jīng)濃縮、干燥，得到提取物0.2kg。
實(shí)施例3、取實(shí)施例1方法得到的提取物1kg，內(nèi)加乳糖0.75kg和淀粉0.75kg，經(jīng)充分混合后，過(guò)60目篩，然后干壓制粒，整粒，得到顆粒均勻的顆粒劑2.5kg，包裝成袋，每袋為1.5g。
實(shí)施例4、
取實(shí)施例2方法得到的提取物1kg，內(nèi)加糊精0.5kg，淀粉0.5kg，經(jīng)充分混合后過(guò)60目篩，然后濕法制粒，干燥后裝填膠囊，制成每粒重0.4g的膠囊劑。
實(shí)施例5、取實(shí)施例1方法得到的提取物2kg內(nèi)加微晶纖維素0.667kg、淀粉0.333kg和膨速0.167，經(jīng)充分混合后，過(guò)細(xì)篩，制粒。然后在顆粒內(nèi)加入硬脂酸鎂和白碳黑各33g，混合后制成0.49異型片，經(jīng)薄膜包衣后得到重為0.5g的片劑。
實(shí)施例6、取實(shí)施例1方法得到的提取物1kg，加注射用水使每ml含提取物50mg，調(diào)節(jié)pH值，濾過(guò)、灌封、滅菌，即得每支2ml裝注射劑。
權(quán)利要求
1.一種治療勃起功能障礙癥的毛冬青提取物制劑，其特征在于該制劑是由5～80％，毛冬青提取物浸膏和95～20％藥用輔料組成的顆粒劑、膠囊劑、片劑、口服液和注射劑，其中毛冬青提取物含總黃酮和總皂甙≥50％。
2.一種如權(quán)利要求1所述的治療勃起功能障礙癥的毛冬青提取物制劑的制備方法，其特征在于該方法包括下列步驟(1)活性成份浸膏的制備將干燥的毛冬青根切制成飲片，加原生藥量10-20倍量的水或親水性溶劑，浸漬2小時(shí)后，加熱回流，熱提1-2次，每次1小時(shí)，冷卻后，靜置24小時(shí)，過(guò)濾，濾液通過(guò)以不帶離子交換基團(tuán)的分離介質(zhì)為載體的層析柱1-2次，再用水及水-醇混合溶劑洗脫，收集洗脫液，于＜60℃溫度下減壓濃縮，干燥后制得含總黃酮和總皂甙≥50％的浸膏；(2)含毛冬青提取物制劑的制備取5～80％上述活性成份浸膏和95～20％藥用輔料按常規(guī)制劑方法制成顆粒劑、膠囊劑、片劑、口服液和注射液。
3.一種如權(quán)利要求2所述的治療勃起功能障礙癥的毛冬青提取物制劑的制備方法，其特征在于其中所述的親水性溶劑為脂肪族低級(jí)醇或低級(jí)酮。
4.一種如權(quán)利要求2所述的治療勃起功能障礙癥的毛冬青提取物制劑的制備方法，其特征在于其中所述的不帶離子交換基團(tuán)的分離介質(zhì)為大孔吸附樹(shù)脂、硅膠、氧化鋁、聚酰鞍硅、硅藻土、活性炭或纖維素等，這些介質(zhì)可以單一使用也可混合使用。
5.一種如權(quán)利要求2所述的治療勃起功能障礙癥的毛冬青提取物制劑的制備方法，其特征在于其中所述的水-醇混合劑中的醇為脂肪族低級(jí)醇，水與醇的混合比例為水∶醇＝99-1∶1-99的任意比例。
6.一種如權(quán)利要求1所述的毛冬青提取物制劑在治療勃起功能障礙癥中的應(yīng)用，其特征在于該制劑可用于治療勃起功能障礙癥，治療劑量為每日口服相當(dāng)于毛冬青活性成份浸膏1.5～3g的制劑，連續(xù)服用1個(gè)月為1個(gè)療程。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療勃起功能障礙癥的毛冬青提取物制劑及制備方法。本發(fā)明治療勃起功能障礙癥的毛冬青提取物制劑是由5～80%毛冬青提取物浸膏和95～20%藥用輔料組成的顆粒劑、膠囊劑、片劑、口服液和注射劑,其中毛冬青提取物含總黃酮和總皂甙≥50%。本發(fā)明毛冬青制劑療效與偉哥相當(dāng),但長(zhǎng)期使用未發(fā)現(xiàn)任何毒副作用,是一種安全、價(jià)廉、療效可靠的全天然藥物,具有巨大的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。
文檔編號(hào)A61P15/00GK1355028SQ0012759
公開(kāi)日2002年6月26日 申請(qǐng)日期2000年11月28日 優(yōu)先權(quán)日2000年11月28日
發(fā)明者周國(guó)偉, 王寧, 張國(guó)明 申請(qǐng)人:上海市中藥研究所