專利名稱：石蓮花茶及其功能的制作方法
石蓮花(Echevaria glauca)是高效純天然降血糖劑，已在申請(qǐng)?zhí)枮?7100285.1發(fā)明專利中闡明。
本發(fā)明的石蓮花茶(Echevaria glauca Tea)簡(jiǎn)稱EGT，系以鮮石蓮花葉，嫩莖烤制而成的干茶(EGT)，分袋茶和散茶兩種。
如申請(qǐng)?zhí)枮?7100285.1所述的石蓮花原粉具有高效降血糖的功能。而本發(fā)明發(fā)現(xiàn)石蓮花茶(EGT)并不經(jīng)過(guò)提取，減少了損失，簡(jiǎn)化了工藝，大大降低了成本。它不僅具有更好的降血糖功效，而且還具有對(duì)免疫抑制模型小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用，并對(duì)糖尿病大鼠有一定治療作用。實(shí)驗(yàn)表明EGT能降低大鼠血糖，并使高密度脂蛋白(HDL)升高而甘油三酯(TG)，總膽固醇(TC)，低密度脂蛋白(LDL)值顯著降低(p＜0.01)，其作用機(jī)理可能與EGT促進(jìn)胰島β細(xì)胞分泌胰島素增多清除自由基，改善血脂代謝等有關(guān)?，F(xiàn)就本發(fā)明石蓮花茶的免疫調(diào)節(jié)、降血糖、調(diào)整脂代謝等功能依次分別加以闡述。1、EGT對(duì)免疫抑制模型小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用。1.1實(shí)驗(yàn)材料1.1.1藥品與試劑EGT由北京泰達(dá)士生物化學(xué)研究所提供，環(huán)磷酰胺(CY)批號(hào)990603；RPMH-164完全培養(yǎng)液；Hanks液；植物血凝素(PHA)，廣東省醫(yī)藥工業(yè)研究所制。1.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，體重18-22g，由北京大學(xué)動(dòng)物學(xué)部提供。1.2方法與結(jié)果1.2.1實(shí)驗(yàn)分組取昆明種小鼠40只，體重18-22克，♀♂各半，隨機(jī)分為4組。1組為空白對(duì)照蒸餾水0.2ml/10g/d灌胃一次；2組環(huán)磷酰胺組(CY組)每日皮下注射CY50mg·kg-1；3組、4組EGT(100mg·kg-1、200mg·kg-1)注+CY(50mg·kg-1)組；每組10只小鼠；除第一組外，其余5組皮下注射CY50mg·kg-1·d-1，第3-4組再給CY的同時(shí)給EGT100mg·kg-1·d-1、200mg·kg·d-1，灌胃，連續(xù)10d。第10天給藥30min后，將小鼠脫頸處死，在無(wú)菌條件下進(jìn)行不同的免疫試驗(yàn)。[注]詳見(jiàn)實(shí)施例31.2.2胸腺指數(shù)、脾指數(shù)的測(cè)定4組小鼠于給藥第10天，每鼠稱重，給藥30min后，將小鼠脫頸處死，在無(wú)菌條件下取胸腺、脾用電子天平稱重，分別計(jì)算胸腺指數(shù)、脾指數(shù)。結(jié)果見(jiàn)表1-1。
表1-1GT對(duì)小鼠胸腺指數(shù)、脾指數(shù)的影響(n＝10，x±s)
1)空白對(duì)照組與CY組相比較p＜0.01，2)EGT+CY組與CY組相比較p＜0.01。1.2.3對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響取已連續(xù)給藥10d的小鼠，于停藥當(dāng)日，每只小鼠腹腔注射2％雞紅細(xì)胞混懸液1ml。30min后，脫頸處死，每只小鼠腹腔注射0.5ml Hanks液，轉(zhuǎn)動(dòng)鼠體1min，取腹腔液0.5ml滴于玻片上，37℃孵育30min，用生理鹽水漂洗晾干，用1∶1丙醛-甲醛溶液固定，以4％Ciemsa-磷酸緩沖液染色，蒸餾水漂洗涼干。油鏡下計(jì)數(shù)200個(gè)巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的數(shù)，計(jì)算吞噬率和吞噬指數(shù)。結(jié)果見(jiàn)表1-2。
表1-2EGT對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響(n＝10，x±s)
1)空白對(duì)照組與CY組相比較p＜0.01；3)EGT+組與CY組相比較p＜0.05。1.2.4脾細(xì)胞增殖測(cè)定(MTT)法給藥10d后，在無(wú)菌條件下，取小鼠脾臟剪碎，用200目網(wǎng)過(guò)濾，分離淋巴細(xì)胞，用無(wú)菌Hankds液洗3遍，用完全培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞，調(diào)細(xì)胞數(shù)至2×106/ml，取細(xì)胞混懸液加入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)，每孔加細(xì)胞混懸液100μl，加含PHA完全培養(yǎng)液100μl/孔(終濃度10μg/ml)培養(yǎng)設(shè)相應(yīng)細(xì)胞對(duì)照孔，于37℃，5％，CO2條件下培養(yǎng)72h，終止前4h，加MTT(5mg/ml)10μl/孔，繼續(xù)培養(yǎng)4h，置DG3022A酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀上，用570nm測(cè)OD值，計(jì)算增殖指數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表1-3。
表1-3EGT對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞增殖指數(shù)的測(cè)定(n＝10，x±s)
1)空白對(duì)照組CY組相比較p＜0.01；2)EGT組與CY組相比較p＜0.05。1.3討論本發(fā)明主要研究了EGT對(duì)免疫抑制劑環(huán)磷酰胺所致小鼠免疫功能的影響。在機(jī)體的免疫系統(tǒng)中，巨噬細(xì)胞占有極其重要的地位，它擔(dān)負(fù)著吞噬細(xì)胞，提呈抗原，啟動(dòng)特異性免疫應(yīng)答并參與免疫調(diào)節(jié)等作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明EGT(100mg·kg-1、200mg·kg-1)，連續(xù)灌胃10d，可使環(huán)磷酰胺所致免疫抑制小鼠胸腺指數(shù)和脾指數(shù)與CY組相比有非常顯著差異(p＜0.01)；小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能與CY組相比有顯著差異(p＜0.05)；同時(shí)還表明CY抑制小鼠淋巴細(xì)胞對(duì)PHA刺激的增殖反應(yīng)性降低，EGT(100mg·kg-1、200mg·kg-1)，可明顯對(duì)抗CY對(duì)淋巴細(xì)胞的毒性作用(p＜0.05)，使淋巴細(xì)胞對(duì)PHA的增殖反應(yīng)性有所恢復(fù)。以上結(jié)果說(shuō)明EGT具有一定的免疫調(diào)節(jié)作用，可使受抑制的免疫功能恢復(fù)至接近正常水平。2、EGT對(duì)血脂的調(diào)節(jié)的作用2.1實(shí)驗(yàn)材料2.1.1藥品與試劑及動(dòng)物雄性Sprague-Dawley大鼠(北京市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，體重180～230g。降糖靈(鹽酸苯乙雙胍，phenformin，DBL)，山東省醫(yī)藥工業(yè)研究所制藥廠產(chǎn)品，批號(hào)990903。四氧嘧啶，美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品。血糖試劑盒、血脂試劑盒為上海科欣生物技術(shù)研究所產(chǎn)品。其它試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。2.1.2糖尿病病動(dòng)物模型的建立和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組大鼠注射四氧嘧啶180mg/kg，3d后尾靜脈采血測(cè)空腹血糖(fasting flood glucose，F(xiàn)BG)，血糖值大于11.0mmol/L者為糖尿病大鼠。將糖尿病大鼠隨機(jī)分為5組、每組8只。治療用量，我們?cè)O(shè)定實(shí)驗(yàn)組(給藥劑量分別為EGT100、200、80mg·kg-1)，陽(yáng)性對(duì)照組灌胃降糖靈片(80mg·kg-1)，每日1次，連續(xù)4周。糖尿病對(duì)照組和正常對(duì)照組灌等量蒸餾水。持續(xù)給藥4周后，摘除大鼠眼球取血，測(cè)定空腹血糖和血脂等。2.1.3測(cè)定方法空腹血糖、血脂包括甘油三脂(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)的測(cè)定按試劑盒說(shuō)明書操作，取血后1～2d內(nèi)測(cè)取血清0.3～0.5ml，用0.04mol/L H2SO44.0ml，10％磷鎢酸0.5ml沉淀，洗滌后，沉淀中輥入PH3.5醋酸-醋酸鈉緩沖溶液1.5ml和0.8％TBA溶液1.5ml，95℃水浴1h后，正丁醇2.0ml提取，波長(zhǎng)532nm處比色。2.1.4數(shù)據(jù)處理所測(cè)得數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。各組間差異采用t檢驗(yàn)。2.2方法與結(jié)果2.21EGT對(duì)四氧嘧啶糖尿病大鼠FBG的影響正常大鼠40只，隨機(jī)分為5組，實(shí)驗(yàn)組分別EGT 100、200mg/kg，每日1次，連續(xù)4周，對(duì)照組灌等量蒸餾水，末次給藥后2h眼眶靜脈取血測(cè)血糖與正常對(duì)照組相比，四氧嘧啶糖尿病大鼠血糖值顯著升高。低、高劑量100、200mg/kg的EGT對(duì)四氧嘧啶糖尿病大鼠有明顯的降血糖作用。(見(jiàn)表2-1)表2-1EGT、四氧嘧啶對(duì)糖尿病大鼠(DM)FBG(n＝8，x±s)
1)P＜0.052)P＜0.01與DM3)P＜0.01與正常對(duì)照組比較2.2.2EGT對(duì)四氧嘧啶糖尿病大鼠血脂的影響與正常大鼠相比，四氧嘧啶糖尿病大鼠血清TG，TC，LDL顯著提高(P＜0.01)，HDL顯著下降(P＜0.01)。EGT給藥后，TG，TC，LDL明顯降低(P＜0.01)而HDL顯著升高(P＜0.01)，表明EGT對(duì)四氧嘧啶糖尿病大鼠血脂代謝具有較強(qiáng)的調(diào)整作用(見(jiàn)表2-2)。
表2-2 EGT對(duì)四氧嘧啶糖尿病大鼠血脂(TG，TC，HDL，LDL)的影響(mmol/L，n＝8，x±s)
1)P＜0.052)P＜0.01與DM比較2.3、討論從本發(fā)明實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)，EGT既可降低四氧嘧啶糖尿病大鼠的高血糖，對(duì)四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的胰島β細(xì)胞具有保護(hù)作用，從而改善了糖代謝。EGT對(duì)糖尿病大鼠血脂的影響表現(xiàn)為EGT可顯著降低TC，TG和LDL含量，同時(shí)使HDL水平升高，表明EGT具有較強(qiáng)的調(diào)整血脂代謝的作用。研究證實(shí)糖尿病多伴有脂代謝紊亂，這種紊亂往往是血管方面并發(fā)癥的重要誘因，因此推測(cè)EGT對(duì)糖尿病的血管方面并發(fā)癥可能具有一定的防治作用。3、EGT的實(shí)驗(yàn)例3.1實(shí)驗(yàn)例1取鮮石蓮花葉、嫩莖1kg，石蓮花袋茶烤制先用自來(lái)水速洗凈后，再用無(wú)離子水沖凈、晾干，于160℃烤箱(爐)烘烤1小時(shí)后，在80℃烤干，再溫至120℃烤1小時(shí)，粉碎成12目，得75g石蓮花干茶(EG)，收率7.5％?？静韫に嚾绺綀D
3-1所示。3.2實(shí)驗(yàn)例2 石蓮花散茶烤制取鮮石蓮花葉、莖1kg，水洗，用無(wú)離子水沖凈，晾干，切成2-3mm長(zhǎng)，于160℃烘烤1小時(shí)，快速脫水，溫度降至80℃，烘烤至干，升溫至120℃烘烤1小時(shí)，產(chǎn)量82g，收率8.2％?？静韫に嚾绺綀D3-2所示。
權(quán)利要求
1.本發(fā)明的石蓮花茶具有降血糖、調(diào)整脂代謝和免疫調(diào)節(jié)功能的天然功能型食品、保健食品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述，石蓮花茶同時(shí)對(duì)糖尿病具有一定治療作用的食品，其茶葉經(jīng)濃縮、干燥、制粒后，可作為藥物的沖劑、膠囊、片劑使用。
3.石蓮花茶的烤制工藝，升溫過(guò)程為160℃～80℃～120℃。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述，其降血糖、降血脂的特點(diǎn)是平緩、幅度大。
5.日常飲用推薦量每人每日散茶0.5～2g或袋茶1～2袋。治療量為散量1～2.5g/日；袋茶1～3袋/日。
全文摘要
本發(fā)明涉及到普通食品與保健食品以及醫(yī)藥領(lǐng)域中增強(qiáng)免疫功能、預(yù)防和治療糖尿病、高血脂及其防止并發(fā)癥的發(fā)生。本飲品對(duì)動(dòng)物、人體無(wú)任何毒副作用,本發(fā)明的石蓮花茶還適用于茶品,保健食品及藥廠開(kāi)發(fā)運(yùn)用。
文檔編號(hào)A61P37/00GK1353946SQ00132449
公開(kāi)日2002年6月19日 申請(qǐng)日期2000年11月20日 優(yōu)先權(quán)日2000年11月20日
發(fā)明者丁慶, 丁錄, 丁鑒 申請(qǐng)人:丁慶, 丁錄, 丁鑒