專(zhuān)利名稱(chēng)：用于預(yù)防和治療內(nèi)臟痛的加巴噴丁衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通過(guò)應(yīng)用有效量的[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸預(yù)防和治療內(nèi)臟痛以及胃腸障礙[例如功能性腸障礙(FBD)和炎性腸病(IBD)]的方法。
背景技術(shù)：
加巴噴丁[1-(氨甲基)環(huán)己烷乙酸]是一種鎮(zhèn)癲癇藥，在癲癇的各種動(dòng)物模型中具有活性，并且可有效降低患者中癲癇發(fā)作的頻率。加巴噴丁雖然是γ-氨基丁酸(GABA)結(jié)構(gòu)上的類(lèi)似物，但是不與GABA受體有效地結(jié)合，卻與鈣通道的α2δ亞基結(jié)合[Gee N.S.等(1996)，生物化學(xué)雜志(J.Biological Chemistry)2715768～5776]，啟示了電壓依賴(lài)性神經(jīng)元Ca2+通道的調(diào)制對(duì)加巴噴丁的作用是重要的。此外，還說(shuō)明了[3H]加巴噴丁結(jié)合位點(diǎn)上配體的親和性與抗驚厥活性之間的關(guān)系[Taylor C.P.等(1993)，癲癇研究(Epilepsy Res.)1411～15]。最近證實(shí)了皮下注射加巴噴丁可抑制慢性異常性疼痛模型中TNBS-誘導(dǎo)的結(jié)腸過(guò)敏性[Diop L.等(1998)，神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)文摘(Soc.Neurosci.Abstr.)24639]。
國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)WO 97/33858描述了加巴噴丁的取代衍生物，包括[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸，它們與鈣通道的α2δ亞基結(jié)合，并且適用于治療癲癇和相關(guān)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)障礙。
通常遇到的胃腸(GI)障礙包括功能性腸障礙(FBD)和炎性腸病(IBD)。這些GI障礙包括目前只被適度地控制的寬范圍的病況，就FBD來(lái)說(shuō)包括胃食管反流、消化不良和過(guò)敏性腸綜合征(IBS)，以及就IBD來(lái)說(shuō)包括局限性回腸炎、回腸炎和潰瘍性結(jié)腸炎，而且它們都經(jīng)常產(chǎn)生內(nèi)臟痛。最近證實(shí)了在這些病理學(xué)(特別是過(guò)敏性腸綜合征和消化不良)中，內(nèi)臟痛覺(jué)閾減小了，表明內(nèi)臟的過(guò)敏性。
已知很少的藥物選擇性地作用于GI障礙相關(guān)的過(guò)敏性[FarthingM.J.(1998)，藥物(Drugs)5611～21]。
疼痛的可行治療分為兩類(lèi)1)非類(lèi)固醇抗炎藥，用于治療不強(qiáng)烈的疼痛，但它的治療應(yīng)用受GI不利作用(胃糜爛，消化性潰瘍形成，十二指腸和結(jié)腸的炎癥)的限制；2)嗎啡和相關(guān)的類(lèi)阿片，用于治療中度至嚴(yán)重的疼痛，但它的治療應(yīng)用受不希望有的副作用(包括便秘、呼吸阻抑、耐藥性和濫用的可能)的限制。
需要能緩解內(nèi)臟痛而沒(méi)有不希望有的副作用的藥物。
發(fā)明概述本發(fā)明提供了預(yù)防和治療內(nèi)臟痛和GI障礙的方法，它包括，對(duì)需要治療的對(duì)象施用有效量的[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸(I) 或其藥物上可接受的鹽。
本發(fā)明還涉及式I的化合物在制備用于預(yù)防或治療內(nèi)臟痛和胃腸障礙的藥物(尤其通過(guò)經(jīng)口途徑)方面的應(yīng)用。
發(fā)明詳述本發(fā)明中應(yīng)用的化合物[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸(上式I)被描述于國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)WO 97/33858(將它并入本文作參考)中，它更一般性的描述加巴噴丁的衍生物，包括[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸；這樣的衍生物與鈣通道的α2δ亞基結(jié)合，所以適用于治療癲癇。在申請(qǐng)WO 97/33858中，已證實(shí)了在本發(fā)明中應(yīng)用的化合物具有類(lèi)似于加巴噴丁對(duì)來(lái)自豬腦組織的α2δ亞基的親和性。
現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)了，[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸雖然具有與加巴噴丁相似的或更小的對(duì)軀體疼痛或癲癇的活性，但意外地比加巴噴丁對(duì)內(nèi)臟痛的效果高十倍。
這一發(fā)現(xiàn)與人們公認(rèn)的認(rèn)識(shí)不一致，即，在神經(jīng)系統(tǒng)的所有水平，軀體疼痛途徑和內(nèi)臟途徑之間的緊密關(guān)系很普遍[Cross S.A.(1994)，梅奧診所記錄(Mayo Clin Proc)69375～83]。
本發(fā)明中應(yīng)用的化合物包括式I化合物的溶劑合物、水合物、藥物上可接受的鹽和多晶型物(不同的晶格標(biāo)碼)。
如果它適合形成鹽，藥物上可接受的鹽包括乙酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、酒石酸氫鹽、乙酸鈣、樟腦磺酸鹽、碳酸鹽、檸檬酸鹽、乙二胺四乙酸鹽、乙二磺酸鹽、丙二酸酯十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、谷氨酸鹽、乙醇酰阿散酸鹽、己基間苯二酚鹽(hexylresorcinate)、hydrabamine、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、碳酸氫鹽、羥萘甲酸鹽、碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、蘋(píng)果酸鹽、馬來(lái)酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、硝酸甲酯、硫酸二甲酯、粘酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、巴莫酸鹽(雙羥萘酸鹽)、泛酸鹽、磷酸鹽/二磷酸(diphosphate)、聚半乳糖醛酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、堿式乙酸鹽、琥珀酸鹽或半琥珀酸鹽、硫酸鹽或半硫酸鹽、單寧酸鹽、酒石酸鹽或半酒石酸鹽、theoclate、trierhiodide、N，N′-雙芐基乙撐二胺、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺、普魯卡因、鋁、銨、四甲基銨、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉和鋅。[還參見(jiàn)Berge S.M.等的“藥物鹽”，(1997)，藥物科學(xué)雜志(J.Pharm.Sci.)661～19，將它并入本文作參考。]術(shù)語(yǔ)“患者”旨在包括哺乳動(dòng)物，特別是人。
按本發(fā)明實(shí)施預(yù)防和治療內(nèi)臟痛和GI障礙FBD或IBD的方法所要求的是以一定的量施用[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸，所述一定的量也就是預(yù)防或治療損傷病況(即，控制內(nèi)臟痛和/或FBD或IBD)有效的量。需要應(yīng)用的[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸的有效量通常應(yīng)是約1～約300mg/kg患者的體重。對(duì)正常體重的成年患者來(lái)說(shuō)，典型劑量應(yīng)是每天約10～約5000mg。典型FBD病況包括胃食管反流疾病、消化不良和IBS。典型IBD病況包括回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎和局限性回腸炎。
本發(fā)明的又一方面提供了治療或預(yù)防內(nèi)臟痛和GI障礙的藥物組合物，它包含式I的[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸這一活性組分。本發(fā)明化合物的藥物組合物-包括它的鹽之一，是通過(guò)將該活性組分以單元?jiǎng)┝啃问脚c至少一種藥物上可接受的載體或賦形劑配制而生產(chǎn)的。至于從本發(fā)明中應(yīng)用的化合物制備藥物組合物，惰性、藥物上可接受的載體可以呈固態(tài)或液態(tài)。
口服固體劑型包括膠囊、片劑、丸劑、粉末和顆粒。它們優(yōu)選含5％～約70％[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸。在這樣的固體劑型中，將所述活性組分與至少一種下列惰性常規(guī)賦形劑(或載體)摻和，例如檸檬酸鈉或磷酸二鈣或者(a)填充劑或增量劑，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸，(b)粘合劑，例如羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿卡膠，(c)保濕劑，例如甘油，(d)崩解劑，例如瓊膠、碳酸鈣、土豆淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些復(fù)合硅酸鹽和碳酸鈉，(e)溶解阻滯劑，例如石蠟，(f)吸收促進(jìn)劑，例如季銨化合物，(g)濕潤(rùn)劑，例如十六烷醇和單硬脂酸甘油酯，(h)吸附劑，例如高嶺土和膨潤(rùn)土，以及(i)潤(rùn)滑劑，例如滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固態(tài)聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉或其混合物。就膠囊、片劑和丸劑來(lái)說(shuō)，劑型還可包含緩沖劑。
相似類(lèi)別的固態(tài)組合物還可被用作軟明膠膠囊和硬明膠膠囊的填料，應(yīng)用這樣的賦形劑例如乳糖和高分子量聚乙二醇等。
固體劑型例如片劑、錠劑、膠囊、丸劑和顆?？捎冒潞蜌ぶ苽洌缒c溶包衣和本領(lǐng)域熟知的其它包衣。它們還可以是這樣的組合物，即，它們?cè)谀c道的某部分以延遲的方式釋放活性組分?？衫玫陌窠M合物的實(shí)例有聚合物和蠟。如果合適的話(huà)，活性組分還可呈微膠囊化形式，摻有一種或多種上述賦形劑。
口服液體劑型包括藥物上可接受的乳液、溶液、懸浮液、糖漿劑和酏劑。除了[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸之外，所述液體劑型還可包含常用于本領(lǐng)域的惰性稀釋劑，例如水或其它溶劑、增溶劑和乳化劑，例如，乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、芐醇等。
懸浮液中除了活性組分外還可包含懸浮劑，例如，乙氧基化異十八烷醇、聚氧乙烯山梨糖醇酯和聚氧乙烯脫水山梨糖醇酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁(aluminium metahydroxide)、膨潤(rùn)土、瓊脂和黃蓍膠、或者這些物質(zhì)的混合物等。
用于直腸施藥的組合物優(yōu)選是栓劑，它們可通過(guò)將本發(fā)明的化合物與合適的非刺激性賦形劑或載體混合而制備，所述賦形劑或載體例如是可可脂、聚乙二醇或栓劑蠟，它們?cè)诔叵率枪腆w，但在體溫下是液體，所以在直腸中熔化而釋放活性組分。
適合腸胃外注射的組合物可包括生理上可接受的無(wú)菌水溶液或非水溶液、分散液、懸浮液或乳液、以及供重新溶解配成無(wú)菌注射液或分散液的無(wú)菌粉末。合適的液態(tài)載體、稀釋劑、溶劑或介質(zhì)的實(shí)例包括水，乙醇，多元醇(丙二醇、聚乙二醇、甘油等)，及其合適的混合物。
這些組合物還可包含佐劑，例如防腐劑、濕潤(rùn)劑、乳化劑和分散劑。微生物作用的預(yù)防可通過(guò)各種抗細(xì)菌劑和抗真菌劑來(lái)保障，例如對(duì)羥基苯甲酸酯類(lèi)、氯代丁醇、苯酚、山梨酸等。還可能需要包含等滲劑，例如糖、氯化鈉等。
優(yōu)選地，所述藥物制劑呈單元?jiǎng)┬?。在這種劑型中，制劑被分配成含適當(dāng)量的[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸的單元?jiǎng)┝?。單元?jiǎng)┬涂梢允前b的制劑，包裝中含離散量的制劑，例如，小包的片，膠囊，以及盛在小瓶或安瓿中的粉末。所述單元?jiǎng)┬瓦€可以是膠囊、扁囊劑或片劑自身，或者它可以是適當(dāng)數(shù)量的任意這些包裝形式。單元?jiǎng)┬偷囊恍?shí)例是片劑、膠囊、丸劑、粉末、栓劑、水性或非水口服溶液和懸浮液、以及包裝在容器中的腸胃外溶液(含一個(gè)劑量單元或更大數(shù)量的劑量單元，并且可被細(xì)分成單個(gè)的劑量)。
上述組合物中活性組分的百分?jǐn)?shù)可在寬范圍內(nèi)變動(dòng)，但實(shí)際上它優(yōu)選以至少10％(在固體組合物中)和至少2％(在原始的液體組合物中)的濃度存在。最令人滿(mǎn)意的組合物是那些其中，活性組分以高得多的比例存在，例如10～90wt％。
施用[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸或其鹽的途徑有腸胃外或(優(yōu)選地)經(jīng)口。例如，有效的口服劑量是20～800mg，而有效的靜脈內(nèi)劑量是5～50mg。該劑量處于用于治療內(nèi)臟痛和GI障礙(例如FBD或IBD)的給藥范圍內(nèi)，或者應(yīng)當(dāng)由醫(yī)師描述的根據(jù)患者的需要來(lái)決定。
用于本發(fā)明的[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸的單元?jiǎng)┬瓦€可包含適用于治療內(nèi)臟痛和GI障礙的其它化合物。
在本發(fā)明中應(yīng)用[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸的優(yōu)點(diǎn)包括該化合物對(duì)內(nèi)臟痛的選擇活性，該化合物的相對(duì)無(wú)毒性，容易制備，該化合物可被良好地耐受，以及容易靜脈內(nèi)(特別是經(jīng)口)施用該化合物。
藥理數(shù)據(jù)開(kāi)始，在軀體疼痛和癲癇的動(dòng)物模型中證明了[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸具有與加巴噴丁相似的活性或更小的活性。但是，就內(nèi)臟痛來(lái)說(shuō)，按照本發(fā)明，在異常性疼痛的兩個(gè)動(dòng)物模型中確定了[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸選擇性地治療GI障礙的能力。
軀體疼痛角叉菜膠在大鼠中誘導(dǎo)的痛覺(jué)過(guò)敏加巴噴丁知[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸的效果在大鼠爪壓力試驗(yàn)中應(yīng)用鎮(zhèn)痛儀(analgesymeter)測(cè)定了感覺(jué)傷害的壓力閾[Randall L.O.和Sellitto J.J.(1957)，國(guó)際藥效學(xué)文獻(xiàn)(Arch.Int.Pharmacodyn.)4409～419]。在測(cè)試日以前用這個(gè)裝置訓(xùn)練雄性Sprague Dawley大鼠(70～90g)。逐漸對(duì)每只大鼠的后爪施加壓力，作為引起爪收縮所需的壓力(g)測(cè)定感覺(jué)傷害的閾值。利用250g的截止點(diǎn)以防對(duì)爪的任何組織損傷。在測(cè)試日，在通過(guò)右后爪的足底內(nèi)注射對(duì)動(dòng)物施用100μl 2％角叉菜膠之前進(jìn)行2～3次基線(xiàn)測(cè)定。注射角叉菜膠3h后再次測(cè)定感覺(jué)傷害的閾值以確定動(dòng)物表現(xiàn)痛覺(jué)過(guò)敏。注射角叉菜膠3.5h后對(duì)動(dòng)物施用加巴噴丁、[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸或鹽水，并在注射角叉菜膠4、4.5和5h后測(cè)定感覺(jué)傷害的閾值。
結(jié)果加巴噴丁的效果 -(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸的效果
癲癇氨基脲在小鼠中誘導(dǎo)的緊張性癲癇發(fā)作加巴噴丁和[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸的效果通過(guò)皮下施用氨基脲(750mg/kg)誘導(dǎo)小鼠緊張性癲癇發(fā)作。注意到前爪處于緊張性癲癇發(fā)作的潛伏狀態(tài)。在施用氨基脲后2h內(nèi)沒(méi)有痙攣的任何小鼠被認(rèn)為受到了保護(hù)并且被給予120min的最大潛伏記分。
在30mg/kg(經(jīng)口)的相同劑量下，加巴噴丁保護(hù)100％的動(dòng)物，而[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸保護(hù)40％。
內(nèi)臟痛在人體中，GI障礙通常與內(nèi)臟痛相關(guān)。在這些病理中，內(nèi)臟痛覺(jué)閾的減小表明內(nèi)臟過(guò)敏性。利用兩個(gè)內(nèi)臟痛的試驗(yàn)?zāi)Ｐ蛠?lái)評(píng)估[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸(經(jīng)口)的效果在醒著的大鼠中TNBS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎和敗血癥性休克引起的直腸異常性疼痛。在每一個(gè)模型中，將所述效果與加巴噴丁(經(jīng)口)的效果相比。
1°)TNBS在大鼠中誘導(dǎo)的慢性?xún)?nèi)臟異常性疼痛加巴噴丁知[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸的效果發(fā)現(xiàn)了將三硝基苯磺酸(TNBS)注射入大鼠結(jié)腸壁可誘導(dǎo)慢性結(jié)腸炎。在醒著的大鼠中結(jié)腸膨脹的該試驗(yàn)?zāi)Ｐ椭校A(yù)先將TNBS注射入近端結(jié)腸降低了內(nèi)臟痛覺(jué)閾。
原料和方法應(yīng)用了體重為340～400g的雄性Sprague-Dawley大鼠。將動(dòng)物每籠3只關(guān)在調(diào)節(jié)的環(huán)境(20±1℃，50±5％濕度，800am～800pm光照)中。在第0天，在麻醉(氯胺酮80mg/kg(腹膜內(nèi))；乙酰丙嗪12mg/kg(腹膜內(nèi)))下，給對(duì)比大鼠注射TNBS(50mg/kg于30％乙醇中)或鹽水(1.5ml/kg)，注入近端結(jié)腸壁(離盲腸端1cm)。手術(shù)后的7天中，將動(dòng)物單只地關(guān)在聚丙烯籠中并保持在調(diào)節(jié)的環(huán)境(20℃，50％濕度，800am～800pm光照)中。在施用TNBS 7天后，經(jīng)肛門(mén)插入一個(gè)氣囊(5～6cm長(zhǎng))，通過(guò)輕拍通到尾根部的導(dǎo)管將氣囊保持在適當(dāng)位置(氣囊末端離肛門(mén)5cm)。在進(jìn)行下列結(jié)腸膨脹循環(huán)之前1h經(jīng)口施用加巴噴丁或[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸，通過(guò)分幾步[每步5mmHg(0.667kPa)]從0到75mmHg漸進(jìn)地使氣囊膨脹(每步膨脹持續(xù)30s)。用標(biāo)準(zhǔn)氣壓計(jì)控制結(jié)腸膨脹的每次循環(huán)。閾值(mmHg)相當(dāng)于產(chǎn)生第一次腹部收縮時(shí)的壓力，然后停止膨脹循環(huán)。對(duì)同一只動(dòng)物進(jìn)行了4次膨脹循環(huán)之后測(cè)定結(jié)腸閾值。
通過(guò)將試驗(yàn)化合物處理的組與只用TNBS處理的組和對(duì)比組比較而分析數(shù)據(jù)。對(duì)每個(gè)組計(jì)算平均值和SEM。按下式計(jì)算試驗(yàn)化合物每個(gè)經(jīng)口劑量的抗異常性疼痛活性活性＝(A－T)/(C－T)其中，A＝試驗(yàn)化合物處理組的平均閾值，
T＝只用TNBS處理的組的平均閾值，C＝對(duì)比組的平均閾值。在試驗(yàn)化合物處理組中測(cè)定的結(jié)果以TNBS-誘導(dǎo)的痛覺(jué)閾值減小的％抑制表示。
每個(gè)組之間的統(tǒng)計(jì)顯著性是應(yīng)用單向ANOVA、接著應(yīng)用Student′s不成對(duì)的t-檢驗(yàn)進(jìn)行測(cè)定；p＜0.05下，差量被認(rèn)為是統(tǒng)計(jì)有效的。
結(jié)果加巴噴丁的效果
*p＜0.05**p＜0.01***p＜0.001加巴噴丁的平均有效劑量(ED50)是321mg/kg(經(jīng)口)。[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸的效果 -(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸的ED50是22.9mg/kg(經(jīng)口)。
通過(guò)皮下(s.c.)途徑，已知加巴噴丁不修飾對(duì)比條件中的結(jié)腸閾值；比較而言，在相同條件中嗎啡(s.c.)增大TNBS處理的動(dòng)物和對(duì)比動(dòng)物中的結(jié)腸閾值，這啟示作用的不同機(jī)制。[Diop L.等(1998)，神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)文摘，24639]。-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸在大鼠的內(nèi)臟痛模型中產(chǎn)生有效的抗異常性疼痛活性，所述化合物比相同條件中加巴噴丁的活性高10倍以上。加巴噴丁和[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸的ED50值分別是321mg/kg(經(jīng)口)和23mg/kg(經(jīng)口)。此外，這種效果不涉及麻醉機(jī)制。
2°)LPS在大鼠中誘導(dǎo)的直腸過(guò)敏性證實(shí)了腹膜內(nèi)注射細(xì)菌的脂多糖(LPS)可在醒著的大鼠中誘導(dǎo)直腸痛覺(jué)過(guò)敏。
原料和方法將動(dòng)物進(jìn)行外科手術(shù)供肌電圖描記通過(guò)腹膜內(nèi)注射乙酰丙嗪(0.6mg/kg)和氯胺酮(120mg/kg)麻醉大鼠。將三個(gè)一組的三組電極植入腹外斜肌肌肉系統(tǒng)(就在腹股溝韌帶上方)。將電極外置于頸背部并通過(guò)附著在皮膚上的玻璃管保護(hù)。將動(dòng)物逐只關(guān)在聚丙烯籠中并保持在控制溫度的房間(21℃)里。不限量地提供食物(UAR丸，Epinay，F(xiàn)rance)和水。
手術(shù)5天后開(kāi)始肌電圖掃描記錄。用腦電掃描器(Mini VIII Alvar，Paris，F(xiàn)rance)記錄腹橫紋肌的電活性，應(yīng)用短時(shí)間常數(shù)(0.03s)消除低頻信號(hào)(＜3Hz)，走紙速度為3.6cm/min。記錄尖峰脈沖作為腹部收縮的標(biāo)志。
膨脹方法將大鼠置于塑料地道(6cm直徑×25cm長(zhǎng))中，在地道中它們不能活動(dòng)、逃跑或轉(zhuǎn)身，以免損壞氣囊。在直腸膨脹前使動(dòng)物習(xí)慣于該處置達(dá)4天以便將試驗(yàn)期間的應(yīng)力反應(yīng)減到最小。用于膨脹的氣囊是動(dòng)脈栓子切除術(shù)導(dǎo)管(Fogarty，Edwards LaboratoriesInc.)。通過(guò)這樣進(jìn)行直腸膨脹將氣囊(2mm直徑×2cm長(zhǎng))插入直腸(離肛門(mén)1cm)，將導(dǎo)管固定在尾根部。用溫?zé)岬乃謳撞?每步0.4ml)從0到1.2ml逐漸使它膨脹，每步膨脹持續(xù)5min。為了檢測(cè)可能的滲漏，通過(guò)用注射器在膨脹期結(jié)束時(shí)將水全部抽出而檢查通入氣囊的水容積。
試驗(yàn)方案用LPS[1mg/kg大腸埃希氏菌(Escherichia coli，血清型為O111B4)Sigma-Aldrich Chemical Co.，St Louis，MO]或其介質(zhì)腹膜內(nèi)注射大鼠，在該給藥后9和12h進(jìn)行直腸膨脹，同時(shí)用肌電圖描記法記錄腹部收縮。為了測(cè)定加巴噴丁和[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸在痛覺(jué)過(guò)敏條件下的抗感受傷害性質(zhì)，在直腸膨脹前1h，但在注射LPS(1mg/kg(腹膜內(nèi)))之后(12h)，經(jīng)口施用加巴噴丁(10和30mg/kg)、[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸(3、10和30mg/kg)或介質(zhì)(NaCl 0.9％0.3ml/大鼠)。藥物恰在使用前將所有化合物溶于無(wú)菌NaCl(0.9％等滲鹽水)。統(tǒng)計(jì)通過(guò)單向ANOVA、接著應(yīng)用參數(shù)Student′s不成對(duì)t-檢驗(yàn)對(duì)直腸膨脹的每個(gè)階段中出現(xiàn)的腹部收縮次數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
結(jié)果加巴噴丁的效果以30mg/kg(經(jīng)口)施用的加巴噴丁顯著抑制了(85.3％，p＜0.001)在LPS處理的大鼠中在0.4ml時(shí)的直腸膨脹誘導(dǎo)的腹部收縮次數(shù)。在10mg/kg(經(jīng)口)時(shí)，加巴噴丁不引起顯著的抗痛覺(jué)過(guò)敏活性(24.9％)。-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸的效果口服后，[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸(3、10、30mg/kg經(jīng)口)以劑量相關(guān)的方式抑制LPS處理后在0.4ml時(shí)的直腸膨脹誘導(dǎo)的腹部收縮次數(shù)。ED50是3.81mg/kg(經(jīng)口)。
總之，這些結(jié)果表明，加巴噴丁和[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸對(duì)LPS誘導(dǎo)的直腸過(guò)敏性(大鼠中的內(nèi)臟痛模型)產(chǎn)生抗痛覺(jué)過(guò)敏活性。[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸表現(xiàn)出比加巴噴丁更有效的抗痛覺(jué)過(guò)敏活性；活性劑量的比較表明，在該內(nèi)臟痛模型中，[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸的效果大約比加巴噴丁大5倍。
前述數(shù)據(jù)證實(shí)了，[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸可有效地預(yù)防和治療內(nèi)臟痛，特別是GI障礙，例如功能性腸障礙(FBD)和炎性腸病(IBD)。此外，還在經(jīng)口施用所述化合物后觀察到了[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸這樣的效果。
另外，該化合物(已在軀體疼痛和癲癇的動(dòng)物模型中證實(shí)了它具有與加巴噴丁相似的或更小的活性)意外地在內(nèi)臟痛模型中效果比加巴噴丁大5～10倍。
權(quán)利要求
1.一種預(yù)防內(nèi)臟痛的方法，它包括，對(duì)需要治療的患者施用有效量的[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸或其藥物上可接受的鹽。
2.一種治療內(nèi)臟痛的方法，它包括，對(duì)需要治療的患者施用有效量的[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸或其藥物上可接受的鹽。
3.一種預(yù)防胃腸障礙的方法，它包括，對(duì)需要治療的患者施用有效量的[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸或其藥物上可接受的鹽。
4.一種治療胃腸障礙的方法，它包括，對(duì)需要治療的患者施用有效量的[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸或其藥物上可接受的鹽。
5.權(quán)利要求3或4的方法，其中，所述胃腸障礙稱(chēng)為功能性腸障礙或炎性腸病。
6.權(quán)利要求3或4的方法，其中，所述胃腸障礙是功能性腸障礙。
7.權(quán)利要求3或4的方法，其中，所述胃腸障礙是胃食管反流疾病。
8.權(quán)利要求3或4的方法，其中，所述胃腸障礙是消化不良。
9.權(quán)利要求3或4的方法，其中，所述胃腸障礙是過(guò)敏性腸綜合征。
10.權(quán)利要求3或4的方法，其中，治療的病況選自局限性回腸炎、回腸炎和潰瘍性結(jié)腸炎。
11.權(quán)利要求3或4的方法，其中，[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸或其藥物上可接受的鹽是通過(guò)經(jīng)口途徑施用的。
12.[1S-(1α，3β)]-(1-氨甲基-3-甲基-環(huán)己基)乙酸或其藥物上可接受的鹽在制備適用于預(yù)防或治療內(nèi)臟痛的藥物中的應(yīng)用。
13.權(quán)利要求12的應(yīng)用，其中，所述藥物是經(jīng)口施藥的制劑。
全文摘要
[1S－(1α,3β)]－(1－氨甲基－3－甲基－環(huán)己基)乙酸適用于預(yù)防和治療內(nèi)臟痛。
文檔編號(hào)A61P1/14GK1341018SQ00804123
公開(kāi)日2002年3月20日 申請(qǐng)日期2000年2月3日 優(yōu)先權(quán)日1999年2月23日
發(fā)明者J·S·布萊恩斯, L·迪歐普 申請(qǐng)人:沃尼爾·朗伯公司