專利名稱：菲洛啉－7－酮衍生物以及它們的治療用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及特別作為抗腫瘤藥物的多環(huán)芳香化合物的藥物組合物。
1999年，結(jié)合化學(xué)物質(zhì)的細(xì)胞毒素治療(化學(xué)治療)用于減少癌性腫瘤的大小，抑制腫瘤的發(fā)展或甚至，在仍然太少的情況下，消除癌細(xì)胞的腫塊和轉(zhuǎn)移的危險(xiǎn)，最近這些化學(xué)物質(zhì)與其它已經(jīng)使用數(shù)十年的其他物質(zhì)最近已經(jīng)被引入。例如，5-氟尿嘧啶，(5-FU)，幾乎40年來作為結(jié)腸癌最有效的化學(xué)物質(zhì)被人認(rèn)識，當(dāng)腫瘤對5-FU不再敏感時(shí)，可被或者這個(gè)或者那個(gè)的特定的拓?fù)洚悩?gòu)酶I(irinotecan或topotecan)抑制劑替代。一般說來，有效治療結(jié)腸腫瘤的治療的砷(arsenal)也具有oxaliplatin，新的5-FU的原位“給體”或者選擇性的胸苷酸合成酶抑制劑的效果。這種共存不局限于結(jié)腸癌的治療，因?yàn)榇送庾仙纪檠苌?paclitaxel，docetaxel)現(xiàn)在廣泛地用于乳腺癌，卵巢癌和肺癌的化學(xué)治療。目前仍然迫切需要更有效和相容性更好的治療，由此提高幸存者的比例和延長患者的壽命，因?yàn)榻Y(jié)腸腫瘤的病例仍在增加，估計(jì)1997年僅在美國被診斷的新病例達(dá)131 000，其中54 000例患者導(dǎo)致死亡(S.L.Parker，T.Tong，S.Bolden et al.，CA Cancer J.Clin.，1997)。這種情況提示發(fā)明家把他們的注意力集中在其中還沒有大范圍研究過的，在溫暖的海域的海鞘屬中確定的多環(huán)芳香化合物上，以便研制新的化學(xué)藥物，選擇合成由化學(xué)的設(shè)計(jì)/調(diào)和產(chǎn)生的具有治療水平的顯著的細(xì)胞毒素活性的化合物。
海域和海洋覆蓋了超過70％的地球表面，生長著海洋植物和海綿，經(jīng)過逐漸的有系統(tǒng)的生藥學(xué)研究，其中某些種類已經(jīng)被證明包含具有有益的藥理學(xué)性質(zhì)的復(fù)雜的生物堿。例如，海綿Cryptotheca crypta和Halichondia okadai已經(jīng)成為深入研究的主題，因?yàn)樵谒麄兊募?xì)胞中發(fā)現(xiàn)存在阿糖胞苷或halichondrin B。被囊動(dòng)物也同樣，因?yàn)橐呀?jīng)從balearic島(西班牙)生活的被囊動(dòng)物Aplidium albicans中分離出了aplidine。具有四氫異喹啉結(jié)構(gòu)的生物堿已經(jīng)從海鞘類動(dòng)物Ecteinascidiaturbinata中分離。其中，海鞘素-743已經(jīng)成為定義它作為抗癌藥物的治療潛能的深入的臨床前研究(E.Igbicka et al.，NCI-EORTCsymposium，1998；.130，p.34)和臨床試驗(yàn)(A.Bowman et al.，NCI-EORTC symposium，1998；Abst.452，p.118；M.Villanova-Caleroet al.，NCI-EORTC symposium，1998；Abst.453，p.118；M.J.X.Hillebrand et al.，NCIEORTC symposium；1998；Abst.455，p.119；E.Citkovic et al.，NCI-EORTC symposium，1998；Abst.456，p.119)的主題。新的五環(huán)吖啶衍生物也已經(jīng)成為藥物化學(xué)研究的主題(D.J.Hagan et al.，J.Chem.Soc.，Perkin Transf.，1997；12739-2746)。
另外的海洋天然生物堿，ascididemin，已經(jīng)從被囊動(dòng)物Didemnumsp.中提取(J.Kobayashi et al.，Tetrahedron Lett.，1988；291177-80)和從海鞘類動(dòng)物Cystodytes dellechiajei中提取(I.Bonnard et al.，Anti-cancer Drug Design，1995；10333-46)。由F.J.Schmitz et al.(J.Org.Chem.1991；56804-8)，B.Lindsay et al.(Bioorg.Med.Chem.Lett.，1995；5739-42)和J.Kobayashi et al.(Tetrahedron Lett.，1988；291177-80)公開的鼠科動(dòng)物白血病(P388或L1210細(xì)胞系)模型和由I.Bonnard et al.(Anti-cancer Drug Design，1995；10-46)公開的人白血病模型證明Ascididemin具有抗增殖的性質(zhì)。同時(shí)可提到的還有由S.J.Bloor et al.(J.Am.Chem.Soc.，1987；1096134-6)從海鞘類動(dòng)物L(fēng)eptoclinides sp.分離的以及由F.Bracheret al.(Heterocycles，1989；292093-95)然后由M.E.Jung etal.(Heterocycles，1994；39；2767-778)合成的2-bromoleptoclinidone。2-bromoleptoclinidone對白血病細(xì)胞模型顯示的細(xì)胞毒性為0.4μg/ml的ED50值。細(xì)胞毒素的性質(zhì)被F.Bracher(Pharmazie，1997；5257-60)證實(shí)，體外實(shí)驗(yàn)在培養(yǎng)物中的六十腫瘤細(xì)胞系上進(jìn)行，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)在植入小鼠的人腫瘤細(xì)胞系的異種移植模型(結(jié)腸腫瘤SW-620和HTC116，腎腫瘤A498以及黑素瘤LOX IM VI)上進(jìn)行。
其他源自ascididemin的化合物，如11-hydroxyascididemin，11-methoxyascididemin，11-phenylascididemin，11-nitrophenylascididemin，1-nitroascididemin，3nitroascididemin和neocalliactine，已經(jīng)由各團(tuán)體公開其化學(xué)研究，如F.J.Schmitz(J.Org.Chem.，1991；56804-8)和Y.Kitaharaet al.(Heterocycles，1993；36943-46；Tetrahedron Lett.，1997；53，17029-38)，G.Gellerman et al.(Tetrahedron Lett.，1993；341827-30)，S.Nakahara et al.，(Heterocycles，1993；361139-44)和I.Spector et al.(US-A 5 432 172)的研究。
meridine是另一個(gè)從海鞘類動(dòng)物Amphicarpa merldiana或從海綿Corticum sp.提取的天然的生物堿。meridine由F.J.Schmifcz etal.(J.Org.Chem.，1991；56804-808)分離，然后由Patent USA 5 182 287(Gunawardana et al.23 January 1993)公開它在鼠科動(dòng)物白血病(P388)模型上的抗增殖性質(zhì)和它的抗真菌性質(zhì)。它對兩種人類細(xì)胞系，結(jié)腸癌細(xì)胞(HT-29)和肺癌細(xì)胞(A549)的細(xì)胞毒素的性質(zhì)由R.E.Longley et al.(J.of Nat.Products，1993；56915-920)報(bào)到。
這些化合物當(dāng)中還可提到的是cystodamine，由N.Bontemps et al.(Tetrahedron Lett.，1994；357023-7026)，從海鞘類動(dòng)物Cystodykes dellechiajei中分離的五環(huán)生物堿，它對于人類白血病淋巴母細(xì)胞顯示細(xì)胞毒素活性。
本發(fā)明的主要物質(zhì)是通式I和Ia化合物和這些化合物與藥學(xué)上可接受的酸的加成鹽 其中R1，R2，R3，R4和R5選自氫，鹵素，C1-C6烷基，羥基，-CHO，-OR8，-COOH，-CN，-CO2R8，-CONHR8，-CONR8R9，-NH2，-NHR8，N(R8)2，-NH-CH2-CH2-N(CH3)2，-NH-CH2-CH2-Cl，-NHCOR8，嗎啉代基，硝基，SO3H， R8和R9選自C1-C6烷基和苯基(C1-C4)烷基而Ar是C6-C14芳基，-R6選自氫，鹵素，C1-C6烷基或其中R10選自鹵素或-OH，(C1-C6)烷氧基或-O-CO-(C1-C6)烷基而n在1和6之間的-(CH2)nR10基團(tuán)，-CN，-CO2Et或其中R11選自C1-C6烷基和苯基(C1-C4)烷基的-COR11基團(tuán)，具有其中R12和R13彼此獨(dú)立地選自氫或C1-C6烷基，苯基(C1-C4)烷基的NR12R13或-其中R14選自鹵素或(C1-C6)烷氧基和N(CH3)2基團(tuán)而n在1和6之間的-(CH2)nR14基團(tuán)，-R7選自氫，(C1-C6)烷基，苯基(C1-C4)烷基，其中R15和R16彼此獨(dú)立地選自氫，C1-C6烷基和苯基(C1-C4)烷基的NR15R16以及其中R17選自氫，鹵素或OH或(C1-C6)烷氧基而n在1和6之間的(CH2)nR17基團(tuán)。
特定的式I和/或1a化合物為其中基團(tuán)定義如下的化合物和這些化合物與藥學(xué)上可接受的酸的加成鹽
R1，R2，R3，R4和R5選自氫，鹵素，C1-C6烷基，羥基，-CHO，-OR8，-COOH，-CN，-CO2R8，-CONHR8，-CONR8R9，-NH2，-NHR8，N(R8)2，-NH-CH2-CH2-N(CH3)2，-NHCOR8，嗎啉代基，硝基，SO3H， R8和R9選自C1-C6烷基而Ar為C6-C14芳基。
更特別的本發(fā)明物質(zhì)選自其中基團(tuán)定義如下的式(I)和式(Ia)化合物和這些化合物的藥學(xué)上可接受的酸的加成鹽其中R1，R2，R3，R4和R5選自氫，鹵素，C1-C6烷基，羥基，-OR8，-NO2，-NH2，-NHR8，-N(R8)2，-NH-CH2-CH2-N(CH3)2，-NH-CH2-CH2-Cl，NHCOR8，R8選自C1-C6烷基，-R6選自氫，其中R10選自鹵素，-O-CO-CH3，C1-C6烷基的-(CH2)nR10基團(tuán)以及其中R12和R13彼此獨(dú)立地選自氫，C1-C6烷基，芐基的N(R12R13)基團(tuán)或其中R14選自鹵素或(C1-C6)烷氧基和N(CH3)2基團(tuán)而n在1和6之間的-(CH2)nR14基團(tuán)，-R7選自氫，(C1-C6)烷基，芐基，其中R15和R16選自氫，C1-C6烷基和芐基的N(R15R16)基團(tuán)以及其中R17選自氫，鹵素或OH或(C1-C6)烷氧基而n在1和6之間的(CH2)nR17基團(tuán)。
優(yōu)選的化合物為其中至少一個(gè)R1，R2，R3，R4和R5為OR8基團(tuán)的式I和Ia化合物。
“與藥學(xué)上可接受的酸的加成鹽”表示給定不具有不良作用的游離堿的生物學(xué)特性的鹽。這些鹽特別為與如下酸形成的鹽無機(jī)酸，如鹽酸，氫溴酸，硫酸，硝酸或磷酸；金屬酸性鹽，如磷酸二鈉鹽和硫酸一鉀鹽，和有機(jī)酸。
一般地，式(I)和(Ia)化合物可以通過下列方法得到a)按照異狄爾斯-阿爾德反應(yīng)，由下式喹啉二酮 和下式疊氮二烯 其中X＝CH3反應(yīng)，得到下列化合物的混合物 b)選擇性地分離式II和IIa化合物，c1)隨后使式II和/或IIa化合物與二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛反應(yīng)，得到下式烯胺 然后將該烯胺官能化，引入R6和/或R7取代基，環(huán)化，得到I和/或Ia化合物，或c2)官能化和環(huán)化的同時(shí)，得到式I和/或Ia化合物，d)選擇性地分離式I和Ia化合物。
在代替方式中，可以通過下列方法得到其中R6和R7為氫的式I或Ia化合物a)使下式化合物 和下式疊氮二烯 其中X＝CH2-CH2-NHBoc，反應(yīng)，得到下列化合物的混合物 b)選擇性地分離式II和IIa化合物，c)環(huán)化式II和/或IIa化合物，得到式I和/或Ia化合物，d)選擇性地分離式I或Ia化合物。
在氯化銨的存在下，在合適的溶劑中，在加熱條件下，可以環(huán)化式III和IIIa化合物。
當(dāng)X＝CH2-CH2-NHBoc時(shí)，在碳酸氫鈉的存在下在三氟乙酸媒介中，由式II和IIa化合物直接得到式I和Ia化合物。
引入R6取代基的官能化可通過衍生反應(yīng)物完成，如R-COCl，ClCN，ClCO2Et，ClCH2OR，F(xiàn)ClO3或CH2＝N+(CH3)2I-(在乙酸中)。
通過使用式R7-CHO醛的Mannich反應(yīng)可以實(shí)現(xiàn)引入R7取代基的官能化。
在這種情況下，在過量氯化銨的存在下，在乙酸中，可以同時(shí)發(fā)生環(huán)化。
按照下列流程可以制備實(shí)施例中的取代的疊氮二烯
TEMPO＝四甲基-1-哌啶基氧基，自由基TBACl＝四丁銨氯化物FMTP＝甲酰基亞甲基三苯基正膦下列實(shí)施例說明式(I)和(Ia)的化合物的制備。
A-疊氮二烯(化合物4)的制備A-1N-BOC-1-氨基-2-羥基丙烷(化合物1)的合成在0℃下將4.2g(29.7mmol)二-叔丁基二碳酸酯加入2ml(27mmol)3-氨基-1-丙醇在60ml二氧六環(huán)，30ml水和30ml 1N NaOH的混合物中的溶液中。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度保持?jǐn)嚢柽^夜，然后使用濃HCl酸化到pH1。用乙酸乙酯(AcOEt)萃取幾次(50ml 3次)后，將有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮，得到4g黃色油狀預(yù)期的產(chǎn)品。
·產(chǎn)率85％·1H NMR(CDCl3)1.25(s，9H)；2.50(m，2H)；3.05(m，2H)；3.45(m，2H)；5.40(broad s，1H).
A-2N-BOC-3-氨基丙醛(化合物2)的合成將18g(103mmol)化合物1，1.62g(10.4mmol)TEMPO(四甲基-1-哌啶基氧基，自由基)，2.9g(10.45mmol)四丁基銨氯化物和21g(75.5mmol)N-氯琥珀酰亞胺懸浮在351ml碳酸氫鈉/K2CO3中。將該反應(yīng)混合物有力地?cái)嚢?小時(shí)。通過沉降分離有機(jī)相，用硫酸鎂干燥，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮，得到淡橙色油狀預(yù)期的醛。
·產(chǎn)率100％·1H NMR(CDCl3)1.35(s，9H)；2.44(d，2H，J＝6.8Hz)；3.21(m，2H)；4.90(broad s，1H)；6.04(dd，1H，J＝8and 15.6 Hz)；6.74(td，1H，J＝6.8 and 15.6 Hz)；9.39(d，1H，J＝8 Hz)。
A-3N-BOC-5-氨基-2-戊烯-1-醛(化合物3)的合成將11g(66.7mmol)化合物2和24.3g(80mmol)甲?；鶃喖谆交?FMTP)溶于350ml苯，然后將該反應(yīng)混合物回流9小時(shí)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑后，首先通過硅膠[(1/1三氯甲烷/庚烷)然后三氯甲烷]過濾殘余物，除去三苯基膦。第二次通過硅膠(8/2AcOEt/庚烷)過濾，得到3.88g橙黃色油狀化合物3。
·產(chǎn)率29％·1H NMR(CDCl3)1.47(s，9H)；2.60(m，2H)3.38(m，2H)；4.82(broad s，1H)；6.18(dd，1H)；6.88(td，1H)；9.55(d，1H).
A-4 N-BOC-5-氨基-2-戊烯-1-醛二甲基腙(化合物4)的合成在0℃下，在1.47ml(19.5mmol)二甲基阱中加入3.88g(19.5mmol)化合物3和8滴30ml乙醚中的乙酸。將該反應(yīng)混合物攪拌10分鐘，通過沉降分離有機(jī)相并首先用1N HCl然后用飽和NaCl溶液洗滌。用MgSO4干燥后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸發(fā)，得到橙黃色油狀4.4g腙(化合物4)。
·產(chǎn)率94％·1H NMR(CDCl3)2.30(s，9H)；2.3(m，2H)；2.82(m，2H)；4.52(broad s，1H)；5.70(td，1H，J＝6.8 and 15.6 Hz)；6.22(ddd，1H，J＝0.8 and 8.8 and 15.6 Hz)；6.96(d，1H，J＝8.8 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)28.15；33.05；39.58；42.51；78.77；130.84；130.95；135；54；155.68。
B-式II和IIa化合物的制備B-14-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-1b)和4甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-1b)的合成將0.5g(3.14mmol)喹啉-5，8-二酮，0.35g(3.14mmol)巴豆醛二甲基腙和0.45ml(4.76mmol)乙酸酐在20ml三氯甲烷中的混合物超聲波浴處理1小時(shí)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑后，將反應(yīng)混合物用硅膠濾過(三氯甲烷)，得到0.428g紫色粉末狀的兩種異構(gòu)體I-1a和II-1a的混合物。將該粉末和1.6g(18.4mmol)二氧化錳懸浮在20ml三氯甲烷中，并將該混合物回流2小時(shí)。通過硅藻土過濾后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮濾液，然后通過硅膠柱閃式層析純化(98/2二氯甲烷/MeOH)，得到中間體(I-1b)4-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5/10-二酮·40mg(產(chǎn)率6％)棕色粉末狀。
·熔點(diǎn)220℃.
·1H NMR(CDCl3)2.91(s，3H)；7.54(d，1H，J＝4.8Hz)；7.75(dd，1H，J＝4 and 7.6 Hz)；8.67(dd，1H，J＝2 and7.6 Hz)；8.91(d，1H，J＝4.8 Hz)；9.12(dd，1H，J＝2 and4 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)；22.75；127.93；128.04；129.32；131.50；135.50；148.73；149.26；152.11；153.68；155.47；181.46；182.87.
·IR(三氯甲烷)1689cm-1.
中間體(II-1b)4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5/10-二酮·160mg(產(chǎn)率23％)棕色粉末狀。
·熔點(diǎn)270℃.
·1H NMR(CDCl3)2.94(s，3H)；7.52(d，1H，J＝4.8 Hz)；7.76(dd，1H，J＝4.8 and 8.4 Hz)；8.59-(dd，1H，-J＝2and 8.4 Hz)；8.92(d，1H，J＝4.8 Hz)；9.11(dd，1H，J＝2and 4.8 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)22.81；128.30；128.39；130.84；131.55；135.52；147.90；149.95；151.74；153.94；155.35；180.42；184.02。
·IR(三氯甲烷)1672；1700.
B-29-甲氧基-4-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-2b)和6-甲氧基-4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-2b)的合成將0.5g(2.8mmol)4-甲氧基喹啉-5，8-二酮，0.32g(2.87mmol)巴豆醛二甲基腙和0.4ml(4.23mmol)乙酸酐在8ml三氯甲烷中的混合物回流1小時(shí)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑后，將反應(yīng)混合物用硅膠濾過(98/2二氯甲烷/甲醇)，得到0.48g紫色粉末狀的兩種異構(gòu)體I-2a和II-2a的混合物。將該粉末和2.3g(26.45mmol)二氧化錳懸浮在26ml三氯甲烷中，并將該混合物回流2小時(shí)。通過硅藻土過濾后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮濾液，然后通過硅膠柱閃式層析法純化(98/2二氯甲烷/MeOH)，得到中間體I-2b9-甲氧基-4-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮·57mg(產(chǎn)率8％)紅色粉末狀。
·1H NMR(CDCl3)2.84(s，3H)；4.06(s，3H)；7.18(d，1H，J＝6 Hz)；7.46(d，1H，ss，1H，J＝4.4 Hz)；8.87(d，1H，J＝6 Hz)；8.87(d，1H，J＝4.4 Hz)。
中間體II-2b6-甲氧基-4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮·293mg(產(chǎn)率40％)一橙色粉末狀。
·1H NMR(CDCl3)2.80(s，3H)；4.05(s，3H)；7.2(d，1H，J＝6 Hz)；7.48(d，1H，J＝4.8 Hz)；8.85(d，1H，J＝6Hz)；8.88(d，1H，J＝4.8 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)21.75；43.41；112.74；119.72；130.93；131.04；148.32；149.22；150.26；151.60；152.80；155.11；181.44；184.53。
·IR(三氯甲烷)1675；1700cm-1。
B-39-硝基-4-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-5b)和6-硝基-4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-5b)的合成將0.8g(3.92mmol)4-硝基喹啉-5，8-二酮，0.65g(5.8mmol)巴豆醛二甲基腙和0.55ml(5.8mmol)乙酸酐在10.5ml三氯甲烷中的混合物超聲波浴處理30分鐘。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑后，將反應(yīng)混合物用硅膠濾過(98/2二氯甲烷/甲醇)，得到0.7g紫色粉末狀的兩種異構(gòu)體I-5a和II-5a的混合物。將該粉末和2.9g(33.4mmol)二氧化錳懸浮在29ml三氯甲烷中，并將該混合物回流2小時(shí)。通過硅藻土過濾后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮濾液，然后通過硅膠柱閃式層析法純化(98/2二氯甲烷/MeOH)，得到中間體I-5b9-硝基-4-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮·110mg(產(chǎn)率11％)粉末狀。
·1H NMR(CDCl3)2.98(s，3H)；7.19(d，1H，J＝5.6 Hz)；7.54(d，1H，J＝4.8 Hz)；8.79(d，1H，J＝5.6 Hz)；8.94(d，1H，J＝4.8 Hz)。
·IR(三氯甲烷)1703cm-1。
中間體II-5b6-硝基-4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮·165mg(產(chǎn)率16％)黃棕色粉末狀。
·1H NMR(CDCl3)2.85(s，3H)；7.6(d，1H，J＝4.8 Hz)；7.74(d，1H，J＝4.8 Hz)；8.99(d，1H，J＝4.8 Hz)；9.33(d，1H，J＝4.8 Hz)。
B-49-二甲氨基-4-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-3b)和6-二甲氨基-4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-3b)的合成將150mg(0.558mmol)硝化的三環(huán)化合物I-5a或II-5a和0.4ml(1.95mmol)N，N-二甲基甲酰胺二乙基乙縮醛溶于2.1mlDMF，并將反應(yīng)混合物在130℃加熱1小時(shí)。用真空泵蒸發(fā)溶劑后，得到140mg中間體化合物II-3a或II-3b，它們用于下列步驟
中間體II-3b6-二甲氨基-4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮·產(chǎn)率94％.
·1H NMR(CDCl3)2.77(s，3H)；3.05(s，6H)；6.89(d，1H，J＝6 Hz)；7.39(d，1H，J＝4.8 Hz)；8.42(d，1H，J＝6Hz)；8.74(d，1H，J＝4.8 Hz)。
·B-59-氯-4-(N-BOC-1-氨基乙烷)-5，10-二氫吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-7b)和6-氯-4-(N-BOC-1-氨基乙烷)-5，10-二氫吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-7b)的合成將0.6g(3.1mmol)4-氯喹啉-5，8-二酮，0.75g(3.1mmol)二甲基腙和0.45ml(4.76mmol)乙酸酐在8.5ml三氯甲烷中的混合物超聲波浴處理30分鐘。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑后，將2.7g(31.1mmol)二氧化錳和22ml三氯甲烷加入該反應(yīng)混合物，將其回流2小時(shí)。通過硅藻土過濾后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮濾液，然后通過硅膠柱閃式層析法純化(99/1二氯甲烷/甲醇)得到中間體I-7b9-氯4-(N-BOC-1-氨基乙烷)-5，10-二氫吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮·70mg(產(chǎn)率6％)棕色粉末狀。
·1H NMR(CDCl3)1.35(s，9H)；3.45-(m，4H)；4.86(broad s，1H)；7.56(d，1H，J＝4.0 Hz)；7.74(d，1H，J＝5.2 Hz)；8.90(d，1H，J＝5.2 Hz)；8.94(d，1H，J＝4 Hz)·13C NMR(CDCl3)28.37；35.32；40.30；79.47；126.84；128.04；130.88；131.17；145.78；150.34；150.98；152.29；154.05；154.36；155.88；179.76；182.32。
·IR(三氯甲烷)1695cm-1。
中間體II-7b6-氯4-(N-BOC-1-氨基乙烷)-5，10-二氫吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮·200mg(產(chǎn)率17％)棕色粉末狀。
·13C NMR(CDCl3)28.24；34.96；40.33；79.47；128.46；130.15；131.06；131.59；145.20；148.76；149.71；151.74；153.88；1 53.92；155.84；179.76；183.20。
·IR(三氯甲烷)1705cm-1。
·B-63-甲氧基-4-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-8b)和3-甲氧基-4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-8b)的合成將1g(6.28mmol)喹啉-5，8-二酮和1.78g(12.57mmol)2-甲氧基-2-丁烯醛二甲基腙在25ml三氯甲烷中的混合物在環(huán)境溫度攪拌5小時(shí)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑后，將反應(yīng)混合物用硅膠濾過(95/2二氯甲烷/甲醇)，得到1.55g紫色粉末狀的兩種異構(gòu)體I-8a和II-8a的混合物。將該粉末和1g(11.5mmol)MnO1懸浮在30ml三氯甲烷中，并將該混合物攪拌在環(huán)境溫度1小時(shí)。通過硅藻土過濾后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮濾液，然后通過硅膠柱閃式層析法純化(99/1二氯甲烷/甲醇)得到中間體I-8b3-甲氧基4-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮·110mg(產(chǎn)率7％)棕色粉末狀。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(CDCl3)2.79(s，3H)；4.11(s，3H)；7.72(dd，1H，J＝4.8 and 8,1 Hz)；8.66(s，1H)；8.67(dd，1H，J＝8.1and 1.9 Hz)；9.10(dd，1H，J＝4.8 and 1.9 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)13.03；56.87；127.88；129.50；129.95；135.50；136.64；139.26；142.56；149.33；155.11；157.24；180.63；183.56。
·IR(三氯甲烷)1684cm-1。
中間體II-8b3-甲氧基4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮·190mg(產(chǎn)率12％)棕色粉末狀。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(CDCl3)2.77(s，3H)；4.12(s，3H)；7.74(dd，1H，J＝4.6 and 8,0 Hz)；8.60(dd，1H，J＝8.0 and 1.6 Hz)；8.68(s，1H)；9.12(dd，1H，J＝4.6 and 1.6 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)12.98；56.93；127.99；129.06；131.27；135.53；136.84；138.81；143.27；148.16；155.20；157.16；179.69；184.59。
·IR(三氯甲烷)1670；1692cm-1。
B-73，9-二甲氧基-4-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-9b)和3，6-二甲氧基-4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-9b)的合成將2-甲氧基-2-丁烯醛二甲基腙(1g，7.1mmol)在15ml氯仿中的溶液滴入4-甲氧基喹啉二酮(1.33g，7mmol)在30ml氯仿中的溶液中。在氮?dú)夥障?，將該反?yīng)混合物在環(huán)境溫度下避光攪拌5小時(shí)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑后，將粗產(chǎn)品通過硅膠閃式層析法純化(三氯甲烷，然后98/2三氯甲烷/MeOH，然后95/5三氯甲烷/MeOH)，得到包含非芳香性產(chǎn)品的第一流分F1和包含預(yù)期產(chǎn)品的第二流分。將1g二氧化錳加入流分F1和30ml氯仿。將該混合物攪拌90分鐘。通過硅藻土過濾后，先用三氯甲烷然后用MeOH洗滌沉淀，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮濾液，得到流分F1’。合并流分F1’和F2，然后通過硅膠閃式層析法純化(三氯甲烷然后97/3三氯甲烷/MeOH)得到棕色粉末狀兩種預(yù)期的化合物I9a和II-9b的混合物中間體(II-9b)3，6-二甲氧基4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮·產(chǎn)率11％(210mg)。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(CDCl3)2.68(s，3H)；4.09(s，3H)；4.10(s，3H)；7.18(d，1H，J＝5.5 Hz)；8.60(s，1H)；8.88(d，1H，J＝5.5 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)12.85；56.81；56.84；111.14；121.32；130.95；136，43；137.79；141.95；150.31；155.44 157.33；165.97；180.13；184.24。
·IR(三氯甲烷)1678，1692cm-1。
B-8-3-甲氧基-4-甲基-9-氯吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-10b)和3-甲氧基-4-甲基-6-氯吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-10b)的合成將2-甲氧基-2-丁烯醛二甲基腙(1g，7.1mmol)在15ml氯仿中的溶液滴入4-氯喹啉二酮(1.37.1g，7.1mmol)在30ml氯仿中的溶液中。在氮?dú)夥障?，將該反?yīng)混合物在環(huán)境溫度下避光攪拌5小時(shí)30分鐘。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑后，將粗產(chǎn)品通過硅膠閃式層析法純化(三氯甲烷，然后98/2三氯甲烷/MeOH)，得到包含非芳香性產(chǎn)品的第一流分F1。將1g二氧化錳加入流分F1和30ml氯仿中。將該混合物在環(huán)境溫度下攪拌60分鐘。通過硅藻土過濾后，先用三氯甲烷然后用MeOH洗滌沉淀，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮該混合物。將得到的粗產(chǎn)品通過硅膠閃式層析法純化(97/3[Iacuna])得到黃色粉末狀化合物I-10b和II-10b。
中間體II-10b3-甲氧基4-甲基-6-氯吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮·產(chǎn)率5％(100mg)。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(CDCl3)2.68(s，3H)；4.11(s，3H)；7.71(d，1H，J＝5.2 Hz)；8.64(s，1H)；8.90(d，1H，J＝5.2 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)12.96；56.97；128.92；130.72；130.98；136.95；138.12；141.93；145.06；150.21；153.85；157.55；179.31；183.67。
·IR(三氯甲烷)1696；1684cm-1。
B-B-93-甲氧基-4-甲基-9-二甲基氨基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-11b)和3-甲氧基-4-甲基-6-二甲氨基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-11b)的合成將I-10b或II-10b(90mg，0.31mmol)，二甲基銨氯化物(127mg，1.56mmol)和NaOH(63mg，1.56mmol)在THF/水(4ml/2ml)混合物中的溶液回流1小時(shí)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑后，將得到的粗產(chǎn)品轉(zhuǎn)入95/5二氯甲烷/MeOH的混合物(50ml)中。回收有機(jī)相，用硫酸鎂干燥。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮后，將得到的粗產(chǎn)品通過硅膠閃式層析法純化(95/5二氯甲烷/MeOH)，得到黃色粉末狀預(yù)期的化合物I-11b或II-11b。
中間體II-11b3-甲氧基4-甲基-6-二甲基氨基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮·產(chǎn)率87％(80mg)。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(CDCl3)2.64(s，3H)；3.06(s，6H)；4.08(s，3H)；6.95(d，1H，J＝5.9 Hz)；8.53(d，1H，，J＝5.9 Hz)；8.56(s，1H)。
·13C NMR(CDCl3)12.62；43.40；56.80；112.39；120.50；132.23；135.90；136.08；141.86；150.53；151.70；155.04；157.19；180.67；185.45。
·IR(三氯甲烷)1693；1654cm-1。
B-B-103，7-二甲氧基-4-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-12b)和3，8-二甲氧基-4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-12b)的合成1-2-甲氧基喹啉-5，8-二酮在環(huán)境溫度下，將5，8-二氧代喹諾酮(3.1g，17.7mmol)，碳酸銀(10.2g，37mmol)和甲基碘(31ml，498mmol)在1.2升三氯甲烷中的懸浮液在黑暗中攪拌90小時(shí)。過濾除去沉淀，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮濾液。將得到的粗產(chǎn)品通過硅膠過濾純化(三氯甲烷)，得到黃色固體狀預(yù)期的醌(2.2g)。
·產(chǎn)率(66％)。
·熔點(diǎn)196℃。
·1H NMR(CDCl3)4.14(s，3H)；6.95(d，1H，J＝10.3Hz)；7.02(d，1H，J＝10.3 Hz)；7.06(d，1H，J＝8.8 Hz)；8.25(d，1H，J＝8.8 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)54.70；116.68；124.32；136.83；137.54；138.21；146.58；167.14；183.48；184.31。
2-3，7-二甲氧基-4-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-12b)和3，8-二甲氧基-4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-12b)的合成將2-甲氧基-2-丁醛二甲基腙(0.75g，5.3mmol)在10ml四氫呋喃中的溶液滴入甲氧基喹啉二酮(1.0g，5.3mmol)在60ml四氫呋喃中的溶液中。在氮?dú)夥障?，將該反?yīng)混合物在環(huán)境溫度下避光攪拌40小時(shí)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑后，將得到的粗產(chǎn)品溶于80ml三氯甲烷，加入85％二氧化錳(5.4g，53mmol)。將該反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)，然后通過硅藻土過濾。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮后，將得到的粗產(chǎn)品通過硅膠閃式層析法純化(三氯甲烷)，得到棕色粉末狀化合物I-12b或II-12b。
中間體(II-12b3，8-二甲氧基4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮·產(chǎn)率8％(120mg)。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(CDCl3)2.74(s，)；4.09(s，3H)；4.20(s，3H)；7.09(d，1H，J＝8.4 Hz)；8.41(d，1H，J＝8.4 Hz)；8.63(s，1H)。
·13C NMR(CDCl3)·IR(三氯甲烷)1667，1693cm-1。B-118-乙氧羰基-8-(2’-N-BOC-氨基乙基)吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-13b)和7-乙基羰基-6-(2’-N-BOC-氨基乙基)吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-13b)的合成將N-BOC-5-氨基-2-戊烯-1-醛二甲基腙(1.1g，4.56mmol)在15ml乙腈中的溶液滴入3-乙基喹啉羧酸酯-5，8-二酮(1.05g，4.54mmol)和乙酸酐(4.6ml)在75ml乙腈中的溶液。在氮?dú)夥障?，將該反?yīng)混合物在環(huán)境溫度下避光攪拌24小時(shí)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑后，將5g二氧化錳和150ml氯仿加入得到的粗產(chǎn)品中。將該混合物在環(huán)境溫度下攪拌30分鐘。通過硅藻土過濾后，先用三氯甲烷然后用MeOH洗滌沉淀，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮該混合物。將得到的粗產(chǎn)品首先通過硅膠過濾純化(99/1然后97/3二氯甲烷/MeOH)，然后通過硅膠閃式層析法純化(99/1)，得到棕色粉末狀化合物I-13b和II-13b。
中間體II-13b7-乙氧羰基-6-(2’-N-BOC氨基乙基)吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮·產(chǎn)率3％(60mg)。
·熔點(diǎn)170℃。
·1H NMR(CDCl3)1.36(s，9H)；1.47(t，3H，J＝7.4Hz)；3.52(m，4H)；4.51(q，2H，J＝7.4 Hz)；4.78(broad s，1H)；7.57(d，1H，J＝5.2 Hz)；8.99(d，1H，J＝5.2)；9.17(d，1H，J＝2.2 Hz)；9.64(d，1H，J＝2.2 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)14.33；28.40；35.74；40.22；62.62；79.63；128.65；130.33；130.49；131.83；137.30；149.60；150.23；152.72；154.23；155.72；155.98；163.52；179.69；183.38。
·IR(三氯甲烷)3457；1726；1705；1677cm-1。
B-127-羥基-4-(2’N-BOC-氨基乙基)吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-14b)和8-羥基-4-(2’-N-BOC-氨基乙基)吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-14b)的合成將N-BOC-5-氨基-2-戊烯-1-醛二甲基腙(1.49g，6.15mmol)在30ml乙腈中的溶液滴入5，8-二氧代喹諾酮(0.98g，5.59mmol)和乙酸酐(5.8ml)在100ml乙腈中的溶液。在氮?dú)夥障?，將該反?yīng)混合物在環(huán)境溫度下避光攪拌16小時(shí)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑后，將7g(80.5mmol)二氧化錳和180ml氯仿加入得到的粗產(chǎn)品中。將該混合物在環(huán)境溫度下攪拌30分鐘。通過硅藻土過濾后，先用三氯甲烷然后用MeOH洗滌沉淀，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮該混合物。將得到的粗產(chǎn)品通過硅膠過濾純化(98/2然后95/5二氯甲烷/MeOH)，得到棕色粉末狀預(yù)期的化合物I-14b或II-14b。
中間體II-14b8-乙羥基-4-(2’-N-BOC氨基乙基)吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮·產(chǎn)率12％(230mg)。
·熔點(diǎn)252℃。
·1H NMR(CDCl3)1.56(s，9H)；3.49(m，4H)；4.73(broads，1H)；6.94(d，1H，J＝9.6 Hz)；7.54(d，1H，J＝4.8 Hz)；8.10(d，1H，J＝9.6 Hz)；8.89(d，1H，J＝4.8 Hz)；9.66(broads，1H)。
·13C NMR(CDCl3)28.29；35.53；40.24；117.01；127.87；128.62；132.29；136.18；138.04；148.25；152.26；153.33；155.86；176.36；181.35。
·IR(三氯甲烷)3457；3340；1693；1663cm-1。
B-137-羥基-4-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-15b)和8-羥基-4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-15b)的合成將2-丁烯醛二甲基腙(0.703g，6.28mmol)在20ml乙腈中的溶液滴入5，8-二氧代喹諾酮(1g，5.71mmol)和乙酸酐(6.2ml)在220ml乙腈中的溶液中。在氮?dú)夥障拢瑢⒃摲磻?yīng)混合物在環(huán)境溫度下避光攪拌16小時(shí)然后加熱回流6小時(shí)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑后，將粗產(chǎn)品通過硅膠過濾純化(三氯甲烷2然后98/2二氯甲烷/MeOH)，得到包含非芳香性產(chǎn)品和預(yù)期的產(chǎn)品的第一流分。在混合物中加入3g二氧化錳和75ml氯仿，將其在環(huán)境溫度下攪拌過夜。通過硅藻土過濾后，先用三氯甲烷然后用MeOH洗滌沉淀，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮該混合物。將得到的粗產(chǎn)品通過硅膠閃式層析法純化(99/1)得到米色粉末狀預(yù)期化合物I-15b和II-15b。
中間體II-15b8-羥基4-甲基吡咯并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮·產(chǎn)率12％。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(CDCl3)2.79(s，3H)；6.82(d，1H，J＝9.5Hz)；7.73(d，1H，J＝5.2 Hz)；8.05(d，1H，J＝9.5 Hz)；8.85(d，1H，J＝5.2 Hz)；12.27(broad s，1H)。
·13CNMR(d6-DMSO)21.92；114.30；122.66；127.30；131.52；135.94；148.60；149.80；152.48(2C)；176.41；182.13(2C)。
·IR(三氯甲烷)1684；1664cm-1。
B-147-甲氧基-4-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-16b)和8-甲氧基-4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-16b)的合成將化合物I-15b或II-15b(70mg，0.29mmol)，甲基碘(1ml，15.9mmol)和Ag2CO3(170mg，0.62mmol)在100ml三氯甲烷中的混合物在環(huán)境溫度下避光攪拌14小時(shí)，然后在56℃加熱5小時(shí)。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮后，將得到的粗產(chǎn)品通過硅膠閃式層析法純化(99.0.5/0.5二氯甲烷/MeOH)，得到淡棕色粉末狀預(yù)期的化合物I-16b或II-16b。
中間體II-16b8-甲氧基4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮·產(chǎn)率41％(30mg)。
·熔點(diǎn)128℃。
·1H NMR(CDCl3)4.14(s，3H)；7.07(d，1H，J＝8.8Hz)；7.44(d，1H，J＝4.8 Hz)；8.37(d，1H，J＝8.8 Hz)；8.85(d，1H，J＝4.8 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)54.92；117.58；126.24；128.09；131.30；137.73；147.31；150.00；151.34；153.38；167.39；180.44；183.70。
·IR(三氯甲烷)1765；1698；1667；1603cm-1。
B-157，9-二氯-4-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-17b)和6，8-二氯-4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-17b)的合成1. 2，4-二氯喹啉-5，8-二酮的合成將硝酸銨鈰(CAN 21.4g，39.03mmol)分批加入2，4-二氯-5，8-二甲氧基喹啉(2.85g，11.04mmol)在CH3CN/水混合物(150ml/75ml)中的溶液中。將該反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌40分鐘。隨后蒸發(fā)乙腈，加入50ml水和200ml碳酸氫鈉飽和溶液。用二氯甲烷(5次200ml)萃取水相。用硫酸鎂干燥后，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑，得到棕色粉末狀預(yù)期的化合物(1.9g)。
·產(chǎn)率75％。
·熔點(diǎn)161℃。
·1H NMR(CDCl3)7.03(d，1H，J＝10.6 Hz)；7.11(d，1H，J＝10.6 Hz)；7.74(s，1H)。
·13C NMR(CDCl3)124.43；131.10；136.91；139.52；146.69；148.96；156.16；180.53；182.01。
·IR(三氯甲烷)1687；1676cm-1。
27，9-二氯-4-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-17b)和6，8-二氯-4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-17b)的合成將2-丁烯醛二甲基腙(0.325g，2.89mmol)在20ml乙腈中的溶液滴入2，4-二氯喹啉-5，8-二酮(0.6g，2.63mmol)和乙酸酐(5ml)在100ml乙腈中的溶液中。在氮?dú)夥障拢瑢⒃摲磻?yīng)混合物在環(huán)境溫度下避光攪拌20小時(shí)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)后，將得到的粗產(chǎn)品轉(zhuǎn)入140ml三氯甲烷。隨后加入3.65g二氧化錳，然后將該混合物在環(huán)境溫度攪拌56小時(shí)。通過硅藻土過濾后，先用三氯甲烷然后用MeOH洗滌沉淀，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮該溶液。將得到的粗產(chǎn)品通過硅膠閃式層析法純化(二氯甲烷)得到棕色粉末狀預(yù)期化合物I-17b和II-17b。
中間體II-17b6，8-二氯4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮·產(chǎn)率41％(314mg)·熔點(diǎn)177℃。
·1H NMR(CDCl3)(s，3)；7.56(d，1H，J＝4.8 Hz)；7.79(s，1H)；8.93(d，1H，J＝4.8 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)；22.41；125.44；127.84；131.13；131.30；147.44；149.81；150.62；151.90；154.30；156.58；179.12；180.66。
·IR(三氯甲烷)1706；1683cm-1。
B-167，9-二甲氧基-4-甲基吡啶并[2，3-g]喹啉-5，10-二酮(中間體I-18b)和6，8-二甲氧基-4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮(中間體II-18b)的合成將化合物I-17b或化合物II-17b(80mg，0.27mmol)和甲醇鈉(300mg Na，在40ml甲醇中，13.04mmol)在40ml甲醇中的混合物回流17小時(shí)。將該反應(yīng)混合物濃縮至干然后加入50ml水。用25％ HCl中和后，用二氯甲烷(3次50ml)萃取該溶液。用硫酸鎂干燥后，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)該溶劑，定量地得到預(yù)期的化合物1-18b或II-18b[Iacuna]。
中間體II-18b6，8-二甲氧基4-甲基吡啶并[3，2-g]喹啉-5，10-二酮·熔點(diǎn)219℃。
·1H NMR(CDCl3)2.88(s，1H)；4.03(s，3H)；4.07(s，3H)；6.53(s，1H)；7.45(d，1H，J＝4.8 Hz)；8.83(d，1H，J＝4.8 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)22.64；54.73；56.80；97.79；117.61；129.55；131.46；148.67；149.41；150.73；152.96；167.95；168.00；180.91；183.41。
·IR(三氯甲烷)1701；1668cm-1實(shí)施例17H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8293)和7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8294)在氮?dú)夥障?，?3mg(2.81mmol)化合物I-b和1.7ml(9.84mmol)二甲基甲酰胺二乙基乙縮醛在4.5ml DMF中的混合物在120℃放置1小時(shí)。用真空泵蒸發(fā)溶劑后，加入3.5g(65mmol)氯化銨和60ml無水乙醇。將該反應(yīng)混合物回流30分鐘。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)乙醇后，在殘余物中加入50ml水，用二氯甲烷(3次50ml)萃取。用硫酸鎂干燥有機(jī)相后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑，得到0.6g淺綠色的粉末狀CRL 8294。
7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7--酮(CRL 8293)·產(chǎn)率90％。
·熔點(diǎn)240℃。
·1H NMR(CDCl3)7.68(dd，1H，J＝4.4和8 Hz)；7.87(d，1H，J＝5.6 Hz)；8.02(d，1H，J＝5.2 Hz)；8.77(dd，1H，J＝1.6和8 Hz)；9.11(d，1H，J＝5.2 Hz)；9.16(dd，1H，J＝1.6和4.4 Hz)；9.19(d，1H，J＝5.6 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)120.95；124.40；126.14；129.32；136.78；139.09；147.45；148.58；148.82；148.96；150.66；152.00；155.73；181.96。7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8294)按照上面描述的方法，從中間體II-Ib開始，得到72mg黃色粉末狀化合物CRL 8294。
·產(chǎn)率80％。
·1H NMR(CDCl3)7.76(dd，1H，J＝4.4 and 8 Hz)，7.80(d，1H，J＝5.2 Hz)；7.99(d，1H，J＝5.6 Hz)；8.93(d，，J＝5.6 Hz)；9.05(dd，1H，J＝1.6 and 4.4 Hz)；9.17(dd，1H，J＝1.6 and 8 Hz)；9.19(d，1H，J＝5.2 Hz)。
·13CNMR(CDCl3)119.39；120.01；123.85；128.15；132.87；133.80；138.65；147.54；147.74；148.93；149.49；149.99；152.97；180.73。
實(shí)施例28-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL8363)和11-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8364)在氮?dú)夥障?，?4mg(2.92mmol)化合物I-2b和2ml(11.8mmol)二甲基甲酰胺二乙基乙縮醛在5.2ml DMF中的混合物在120℃放置1小時(shí)。用真空泵蒸發(fā)溶劑后，加入4.5g(83.6mmol)氯化銨和67ml無水乙醇。將該反應(yīng)混合物回流30分鐘。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)乙醇后，在殘余物中加入50ml水，用二氯甲烷(3次50ml)萃取。用硫酸鎂干燥有機(jī)相后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑，將殘余物通過硅膠柱閃式層析法純化(98/2三氯甲烷/MeOH)，得到0.28g橙色粉末狀化合物CRL 8363。
8-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7--酮(CRL8363)·產(chǎn)率37％。
·1H NMR(CDCl3)4.20(s，3H)，7.13(d，1H，J＝5.6 Hz)；7.82(d，1H，J＝5.2 Hz)；7.94(d，1H，J＝6 Hz)；8.92(d，1H，J＝5.6 Hz)；9.07(d，1H，J＝6 Hz)；9.13(d，1H，J＝5.2Hz)；9.19(d，1H，J＝5.2Hz)。
·13C NMR(CDCl3)56.77；109.26；119.70；120.47；123.09；138.50；147.85；148.25；148.69；150.66；154.08；155.68；167.54；180.40。
11-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL8364)按照上面描述的方法，從1.14g中間體II-Ib開始，得到0.59黃色粉末狀化合物CRL 8364。
·產(chǎn)率50％。
·1H NMR(CDCl3)4.15(s，3H)；7.26(d，1H，J＝6 Hz)；7.70(d，1H，J＝6 Hz)；7.96(d，1H，J＝5.6 Hz)；8.85(d，1H，J＝6 Hz)；8.97(d，1H，J＝6 Hz)；9.15(d，1H，J＝5.6Hz)。
·13C NMR(CDCl3)57.05；111.33；118.72；119.61；122.12；124.29；138.56；146.71；147.10；148.69；149.81；150.96；153.13；165.83180.82。
實(shí)施例38-(二甲氨基)-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8800)和11-(二甲氨基)-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8367)在氮?dú)夥障?，?0mg(0.3mmol)三環(huán)化合物I-3b或三環(huán)化合物II-3b和0.21ml(1.05mmol)二甲基甲酰胺二乙基乙縮醛在1.2ml DMF中的混合物在120℃放置1小時(shí)。用真空泵蒸發(fā)溶劑后，加入0.5g(9.3mmol)氯化銨和80ml無水乙醇。將該反應(yīng)混合物回流40分鐘。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)乙醇后，在殘余物中加入5ml水，用二氯甲烷(3次5ml)萃取。用硫酸鎂干燥有機(jī)相后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑，定量地得到兩種紅色粉末狀四環(huán)化合物。
11-(二甲氨基)-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8367)·1H NMR(CDCl3)3.00(s，6H)，7.09(d，1H，J＝5.2 Hz)；(d，1H，J＝5.6 Hz)；7.90(d，1H，J＝5.2 Hz)；8.54(d，1H，J＝5.2 Hz)；8.89(d，1H，J＝5.2 Hz)；9.11(d，1H，J＝5.6Hz)。
實(shí)施例48-羥基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL8802)和11-羥基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL8388)將50mg(0.126mmol)三環(huán)化合物I-7b或三環(huán)化合物II-7b溶于0.5ml TFA，然后將該反應(yīng)混合物攪拌24小時(shí)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)三氟乙酸，然后加入飽和碳酸氫鈉溶液直到pH達(dá)到9-10。用二氯甲烷(3次3ml)萃取該混合物。用硫酸鎂干燥后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑，得到20mg黃色粉末狀四環(huán)化合物。
11-羥基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7--酮(CRL8388)·產(chǎn)率62％。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(CDCl3)7.20(d，1H，J＝5.6 Hz)；7.83(d，1H，J＝6 Hz)；8.00(d，1H，J＝6 Hz)；8.72(d，1H，J＝6 Hz)；8.76(d，1H，J＝6 Hz)；9.24(d，1H，J＝5.6 Hz)，14.65(s，1H)。
·13CNMR(d6-DMSO)116.22；116.35；118.61；120.24；124.06；138.09；143.61；148.04；148.99；149.41；152.61；153.01；165.80；179.55。
實(shí)施例58-氯-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL8396)和11-氯-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL8801)將260mg(0.67mmol)三環(huán)化合物I-7b或三環(huán)化合物II-7b溶于2.6ml TFA，然后將該反應(yīng)混合物攪拌64小時(shí)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)TFA，然后加入200ml 95/5二氯甲烷/MeOH，接著加入碳酸氫鈉飽和溶液直到pH達(dá)到10?；厥沼袡C(jī)相，用水洗滌。用硫酸鎂干燥后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑，得到40mg棕色粉末狀四環(huán)化合物，用乙醚洗滌。
8-氯-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8396)·產(chǎn)率28％。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(CDCl3)7.68(s，1H，J＝5.2 Hz)；7.89(d，1H，J＝5.5 Hz)；8.01(d，1H，J＝5.5 Hz)；8.96(d，1H，J＝5.2 Hz)；9.14(d，1H，J＝5.5 Hz)9.19(d，1H，J＝5.5 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)119.87；120.88；123.61；126.31；129.01；138.56；146.87；147.37；148.46；148.94；149.76；153.85；153.96；179.87。
實(shí)施例68-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL8400)和4-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL8401)在氮?dú)夥障?，?00mg(0.39mmol)三環(huán)化合物I-8b或三環(huán)化合物II-8b和0.27ml(1.37mmol)二甲基甲酰胺二乙基乙縮醛在0.7ml DMF中的混合物在120℃放置1小時(shí)。用真空泵蒸發(fā)溶劑后，加入0.6g(11.7mmol)氯化銨和90ml無水乙醇。將該反應(yīng)混合物回流30分鐘。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)乙醇后，在殘余物中加入10ml水，用二氯甲烷(3次10ml)萃取。用硫酸鎂干燥有機(jī)相后，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑，通過硅膠過濾純化(95/5二氯甲烷/MeOH)，得到棕色粉末狀化合物CRL 8400和CRL 8401。
4-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL8400)·產(chǎn)率83％(85mg)。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(CDCl3)4.27(s，3H)；7.65(dd，1H，J＝4.8和8 Hz)；8.15(d，1H，J＝6 Hz)；8.70(s，1H)；8.78(dd，1H，J＝8 and 1.9 Hz)；9.10(d，1H，J＝6 Hz)；9.13(dd，1H，J＝1.9 and 4.8 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)56.97；115.63；120.81；125.52；129.02；129.16；130.22；136.24；139.81；147.37；149.31；151.65；153.07；154.81；180.34。
·IR(三氯甲烷)1674cm-1。
4-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL8401)·產(chǎn)率59％。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(CDCl3)4.27(s，3H)；7.74(dd，1H，J＝4.4and 8.1 Hz)；8.08(d，1H，J＝5.6 Hz)；8.72(s，1H)；8.93(d，1H，J＝5.6 Hz)；9.05(dd，1H，J＝1.9 and 4.4 Hz)；9.19(dd，1H，J＝1.9 and 8.1 Hz)。
·13CNMR(d6-DMSO)57.03；115.16；119.70；127.69；129.48；130.15；132.86；133.74；140.82；146.80；147.98；148.63；152.81；152.98；179.84。
·IR(三氯甲烷)1679cm-1。
實(shí)施例74，8-二甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8803)和4，11-二甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8440)將化合物I-9b或化合物II-9b(100mg，0.35mmol)和N，N-二甲基甲酰胺二乙基乙縮醛(0.24ml，1.23mmol)在1ml DMF中的溶液在120℃放置90分鐘。在高真空下濃縮反應(yīng)混合物除去DMF，殘余物在100ml無水EtOH中稀釋。加入0.6g氯化銨后，將該混合物回流30分鐘。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮后，加入30ml水，并且用三氯甲烷(3次75ml)萃取該混合物。將有機(jī)相用硫酸鎂干燥并且濃縮。將得到的粗產(chǎn)品通過硅膠閃式層析法純化(95/5三氯甲烷/MeOH)，得到黃色粉末狀化合物。4，11-二甲氧基-7H吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8440)·產(chǎn)率26％(27mg)。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(d6-DMSO)4.08(s，3H)；4.26(s，3H)；7.54(d，1H，J＝5.9 Hz)；7.98(d，1H，5.9 Hz)；8.77(d，1H，J＝5.9 Hz)；8.83(s，1H)；8.94(d，1H，J＝5.9 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)57.41；58.07；112.43；113.75；119.84；122.13；129.60；130.54；140.17；146.81；150.17；150.62；153.03；153.35；166.06；179.30。
·IR(三氯甲烷)1682；1608；1572cm-1。
·MSm/z 293(34)；292(42)；220(19)；192(30165(22)。
實(shí)施例84-甲氧基-8-二甲氨基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8804)和4-甲氧基-11二甲氨基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8441)將化合物I-11b或化合物II-11b(80mg，0.27mmol)和N，N-二甲基甲酰胺二乙基乙縮醛(0.18ml，0.94mmol)在2ml DMF中的溶液在120℃放置3小時(shí)鐘。在高真空下濃縮反應(yīng)混合物除去DMF，殘余物在90ml無水EtOH中稀釋。加入0.4g氯化銨后，將該混合物回流30分鐘。加入30ml水，然后用二氯甲烷(3次50ml)萃取該溶液。將有機(jī)相用硫酸鎂干燥并且濃縮。將得到的粗產(chǎn)品通過硅膠閃式層析法純化(95/5二氯甲烷/MeOH)，得到紅棕色粉末狀四環(huán)化合物。
4-甲氧基-11-二甲氨基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8441)·產(chǎn)率40％(33mg)。
·熔點(diǎn)分解。
·1H NMR(CDCl3)3.02(s，6H)；4.23(s，3H)；7.08(d，1H，J＝5.9 Hz)；7.87(d，1H，J＝5.5 Hz)；8.54(d，1H，J＝5.9 Hz)；8.65(s，1H)；8.90(d，1H，J＝5.5 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)44.28；56.94；112.14；113.63；119.38；119.73；129.31；129.99；140.20；145.81；150.31；150.63；151.41；152.99；156.77；180.57。
·IR(三氯甲烷)1682cm-1。
·MSm/z 306(52)；305(32)；291(100)；290(66)；276(24)；248(9)；220(13)；193(21)。
實(shí)施例94，10-二甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8805)和4，9-二甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8479)將化合物I-12b或化合物II-12b(100mg，0.35mmol)和N，N-二甲基甲酰胺二乙基乙縮醛(0.24ml，1.23mmol)在1ml DMF中的溶液在120℃放置1小時(shí)。在高真空下濃縮反應(yīng)混合物除去DMF，殘余物在100ml無水EtOH中稀釋。加入0.54g氯化銨后，將該混合物回流30分鐘。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮后，加入20ml水，并且用三氯甲烷(3次30ml)萃取該溶液。將有機(jī)相用硫酸鎂干燥并且濃縮。將得到的粗產(chǎn)品通過硅膠閃式層析法純化(三氯甲烷)，得到綠色粉末狀四環(huán)化合物。
4，9-二甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL8479)·產(chǎn)率36％(37mg)。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(d6-DMSO)4.21(s，3H)；4.24(s，3H)；7.16(d，1H，J＝8.8 Hz)；7.98(d，1H，5.6 Hz)；8.69(s，1H)；8.85(d，1H，J＝5.6 Hz)；9.00(d，1H，J＝8.8 Hz)。
·13CNMR(d6-DMSO)54.44；56.92；114.04；117.17；118.86；127.74；129.43；129.99；136.29；141.16；146.36；146.72；149.38；152.94；165.80；179.70。
·IR(三氯甲烷)1679cm-1。
·MSm/z 293(44)；248(100)；220(12)。
實(shí)施例109-乙氧羰基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8805)和10-乙氧羰基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8482)將化合物I-13b或化合物II-13b(30mg，0.07mmol)和三氟乙酸(0.27ml，3.5mmol)在15ml二氯甲烷中的溶液攪拌64小時(shí)鐘。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮后，加入10ml碳酸氫鈉飽和溶液堿化，并且用三氯甲烷(2次30ml)萃取該溶液。將有機(jī)相用硫酸鎂干燥然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮。將得到的殘余物通過硅膠過濾純化，得到黃色粉末狀四環(huán)化合物。
10-乙氧羰基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8482)·產(chǎn)率53％(11.3mg)。
·熔點(diǎn)246℃。
·1H NMR(CDCl3)1.49(t，3H，J＝7.3 Hz)；4.53(q，2H，J＝7.3 Hz)；7.85(d，1H J＝5.9 Hz)；8.03(d，1H，J＝5.5 Hz)；8.98(d，1H，J＝5.9 Hz)；9.22(d，1H，J＝5.5 Hz)；9.56(d，1H，J＝1.9 Hz)；9.73(d，1H，J＝1.9 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)14.32；62.29；119.61；120.39；124.04；129.94；132.60；135.46；138.77；147.78；149.17；149.46；153.23；164.15；180.20(1C未觀察到)。
·IR(三氯甲烷)1726；1694cm-1。
·MSm/z 305(92)；260(7)；232(93)；204(25)。
實(shí)施例1110-羥基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL8809)和9-羥基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL8483)將化合物I-14b或化合物11-14b(三環(huán)化合物56)(50mg，0.135mmol)和三氟乙酸(0.54ml，7mmol)在30ml二氯甲烷中的溶液攪拌48小時(shí)。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮后，加入13ml碳酸氫鈉飽和溶液堿化反應(yīng)混合物，并且用二氯甲烷(7次30ml)萃取。將有機(jī)相用硫酸鎂干燥然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮。將得到的殘余物通過硅膠閃式層析法純化(97/2二氯甲烷/MeOH)，得到一橙色粉末狀四環(huán)化合物。
9-羥基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL8483)·產(chǎn)率50％(16.8mg)。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(CDCl3)7.06(d，1H，J＝9.5 Hz)；7.72(d，1H，J＝5.9 Hz)；8.02(d，1H，J＝5.2 Hz)；8.70(d，1H，J＝9.5 Hz)；8.87(d，1H，J＝5.9 Hz)；9.19(d，1H，J＝5.5Hz)。
·IR(三氯甲烷)1690；1667；1602cm-1。
·MSm/z 249(100)；221(77.6)；193(99.2)。
實(shí)施例1210-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8810)和9-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8484)將化合物I-16b或化合物11-16b(200mg，0.786mmol)和N，N-二甲基甲酰胺二乙基乙縮醛(0.47ml，2.73mmol)在3.2ml DMF中的溶液回流2小時(shí)。在高真空下濃縮反應(yīng)混合物除去DMF，殘余物在200ml無水EtOH中稀釋。加入1.4g氯化銨后，將該溶液回流30分鐘。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮后，加入50ml水，然后用二氯甲烷(5次40ml)萃取該溶液。將有機(jī)相用硫酸鎂干燥并且濃縮。將得到的粗產(chǎn)品通過硅膠閃式層析法純化(99/1二氯甲烷/MeOH)，得到棕色粉末狀四環(huán)化合物。
9-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL8484)·產(chǎn)率10％(20mg)。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(CDCl3)4.14(s，3H)；7.11(d，1H，J＝8.8Hz)；7.63(d，1H，J＝5.5 Hz)；7.87(d，1H，J＝5.5 Hz)；8.77(d，1H，J＝5.5 Hz)；8.91(d，1H，J＝8.8 Hz)；9.09(d，1H，J＝5.5 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)53.41；117.66；118.54；118.93；123.70；127.73；136.29；138.52；145.95；147.45；148.03；148.83；150.19；165.86；180.55。
·IR(三氯甲烷)1686cm-1。
·MSm/z 263(8.2)；233(25.1)；1204(35.4)。
實(shí)施例138，10-二甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8811)和9，11-二甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8485)將化合物I-18b或化合物II-18b(105mg，0.37mmol)和N，N-二甲基甲酰胺二乙基乙縮醛(0.22ml，1.29mmol)在1.5ml DMF中的溶液回流30鐘。在高真空下濃縮反應(yīng)混合物除去DMF，殘余物在95ml無水EtOH中稀釋。加入0.7g氯化銨后，將該溶液回流30分鐘。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮后，加入50ml水。用二氯甲烷(5次40ml)萃取該溶液。將有機(jī)相用硫酸鎂干燥并且濃縮。將得到的粗產(chǎn)品通過硅膠閃式層析純化(99/1二氯甲烷/MeOH)，得到橙黃色粉末狀四環(huán)化合物。
9，11-二甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8485)
·Yield9％(10mg).
·熔點(diǎn)＞260℃.
·1H NMR(CDCl3)4.12(s，3H)；4.18(s，3H)；6.65(s，1H)；7.64(d，1H；＝5.5 Hz)；7.92(d，1H，J＝5.5 Hz)；8.93(d，1H，J＝5.5 Hz)；9.14(d，1H，J＝5.5 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)54.39；57.02；98.26；117.89；118.64；118.86；124.16；138.50；146.93；147.09；148.29；148.62；151.50；166.32；167.73；180.65。
·IR(三氯甲烷)1688cm-1。
·MSm/z 293(15)；292(28)；233(24)；204(13)；165(10)。
實(shí)施例148-二甲氨基-10-氯-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8812)和9-氯-11-二甲氨基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8485)將化合物I-17b或化合物II-17b(110mg，0.375mmol)和N，N-二甲基甲酰胺二乙基乙縮醛(0.23ml，1.31mmol)在1.1mlDMF中的溶液回流30鐘。在高真空下濃縮反應(yīng)混合物除去DMF，殘余物在95ml無水EtOH中稀釋。加入0.7g氯化銨后，將該混合物回流30分鐘，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮。加入50ml水，然后用二氯甲烷(5次40ml)萃取該溶液。將有機(jī)相用硫酸鎂干燥并且濃縮。得到的粗產(chǎn)品通過硅膠閃式層析法純化(99/1二氯甲烷/MeOH)，得到紫色-紅色粉末狀四環(huán)化合物。
9-氯-11-二甲氨基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8486)·產(chǎn)率3％(3.3mg)。
·熔點(diǎn)246℃。
·1H NMR(CDCl3)3.04(s，6H)；7.11(s，1H)；7.61(d，1H，J＝5.5 Hz)；7.92(d，1H，J＝5.5 Hz)；8.90(d，1H，J＝5.5 Hz)；9.14(d，1H，J＝5.5 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)44.39；113.57；117.60；119.00；119.37；123.99；138.50；146.51；146.77；148.83；150.68；150.89；153.68；158.21；180.05。
·IR(三氯甲烷)1698cm-1。
·MSm/z 311(19)；309(11)；296(89)；294(100)；269(4)；267(1)；204(66)。
實(shí)施例154-羥基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮二氫碘酸鹽(CRL 8813)和4-羥基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮二氫碘酸鹽(CRL 8487)將氫碘酸(57％，水中10ml，44.6mmol)加入化合物CRL 8400或化合物CRL 8401(50mg，0.19mmol)在乙酸(4ml)中的懸浮液。將該混合物在100℃加熱21小時(shí)。冷卻后過濾，分離紫色粉末狀預(yù)期化合物二氫碘化物。
4-羥基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮二氫碘酸鹽(CRL 8487)·產(chǎn)率85％(82mg)。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(d6-DMSO)6.75(d，1H，J＝5.8 Hz)；7.42(broads，1H)；7.63(dd，1H，J＝8.4 and 4.4 Hz)；8.20(d，1H，J＝5.8 Hz)；9.07(m，2H)。
·IR(三氯甲烷)3037；1647；1635；1617；1604cm-1。
實(shí)施例164-氯-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL8806)和4-氯-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL8480)將化合物CRL 8813或化合物CRL 8487(45mg，0.14mmol)在POCl3(3.5ml)中的溶液回流2小時(shí)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)后，將該混合物用1N碳酸氫鈉溶液(10ml)堿化至pH8，然后用5％ MeOH/三氯甲烷混合物(2×20ml)萃取。將有機(jī)相用硫酸鎂干燥然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮。將得到的殘余物通過閃式層析法純化(99/1二氯甲烷/MeOH)，得到棕色粉末狀四環(huán)化合物。
4-氯-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8480)·產(chǎn)率4％(2mg)。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(CDCl3)7.78(dd，1H，J＝4.4 and 8.1 Hz)；8.08(d，1H，5.9 Hz)；9.03(d，1H，J＝5.9 Hz)；9.07(dd，1H，J＝4.4 and 1.8 Hz)；9.18(s，1H)；9.19(dd，1H，J＝1.8 and8.1 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)116.63；119.80；128.25；132.64；134.05；137.03；145.92；147.56；147.78(2C)；148.47；149.93；153.31；180.08。
·IR(三氯甲烷)1692；1608cm-1。
·MSm/z 269(34)；267(100)；232(60)；204(29)。
實(shí)施例174-二甲氨基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8807)和4-二甲氨基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8481)將化合物CRL 8806或化合物CRL 8480(14mg，0.052mmol)，二甲基銨氯化物(24mg，0.29mmol)和氫氧化鈉(13mg，0.32mmol)在THF/水(4ml/2ml)混合物中的溶液回流1小時(shí)30分鐘。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮后，加入15ml水。用三氯甲烷(3×20ml)萃取后，將有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮。將得到的殘余物通過閃式層析法純化(95/5三氯甲烷/MeOH)，得到紅色粉末狀預(yù)期的化合物。
4-二甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL8481)
·產(chǎn)率63％(9mg)。
·熔點(diǎn)＞260℃。
·1H NMR(CDCl3)3.34(s，6H)；7.71(dd，1H，J＝4.4and 8.1 Hz)；7.96(d，1H，6.0 Hz)；8.62(s，1H)；8.83(d，1H，J＝6.0 Hz)；9.04(dd，1H，J＝1.5 and 4.4 Hz)；9.19(dd，1H，J＝1.5 and 8.1 Hz)。
·13C NMR(CDCl3)44.06(2C)；117.89；120.40；127.22；129.69；132.59；133.68；135.30；138.51；144.67；146.98；148.14；149.16；152.66；179.55。
·IR(三氯甲烷)1666cm-1。
·MSm/z 276(100)；249(11)；204(1)。
實(shí)施例183-乙酰氧基甲基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8825)和3-乙酰氧基甲基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8824)在氮?dú)夥障?，將化合物I-1b或化合物II-1b(0.11g，0.5mmol)和二甲基甲酰胺二乙基乙縮醛(1.5mmol)在DMF(3ml)中的溶液在120℃加熱1小時(shí)。冷卻后，真空濃縮該混合物，得到固態(tài)預(yù)期的衍生物。將固體衍生物(125mg，0.45mmol)轉(zhuǎn)入DMF中，加入13mg(0.7mmol)Eschenmoser’s鹽。在氮?dú)夥障拢瑢⒃摶旌衔镌?15℃加熱30分鐘。冷卻后，將氯化銨(10mmol)和乙酸(75ml)加入該混合物，將其在115℃放置30分鐘。冷卻后，將反應(yīng)混合物倒入冰中，用10％KOH堿化并且用三氯甲烷萃取。將有機(jī)相用硫酸鎂干燥然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮。將殘余物通過硅膠閃式層析法純化。
按照上面描述的方法制備3-乙縮醛-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8815)和3-乙縮醛-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8814)3-氰基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL8817)和3-氰基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL8816)3-乙氧羰基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8819)和3-乙氧羰基-7H7-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8818)3-甲氧基甲基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8821)和3-甲氧基甲基-7H7-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8820)3-氟-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8823)和3-氟-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8822)3-乙酰氧基甲基-9-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8825)和3-乙酰氧基甲基甲基-9-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8824)實(shí)施例192-甲基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL8827)和2-甲基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL8826)將化合物I-1b和化合物II-b(80mg，0.4mmol)的混合物溶于含有氯化銨(64mg，12mmol)的乙酸(10ml)，并且在保持?jǐn)嚢璧耐瑫r(shí)，將該溶液加熱至70℃。滴入乙酸(10ml)中的乙醛(88mg，2mmol)。在氮?dú)夥障聦⒃摶旌衔锛訜峄亓?5分鐘然后冷卻。攙水后，用NH4OH堿化該溶液并且用二氯甲烷萃取。用硫酸鎂干燥并且蒸發(fā)后，將得到的殘余物通過硅膠閃式層析法純化。
按照上面描述的方法制備2-芐基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL8829)和2-芐基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL8828)2-(2’-氯乙基)-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8831)和2-(2’-氯乙基)-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8830)2-(2’-甲氧基甲基)-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮(CRL 8833)和2-(2’-甲氧基甲基)-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮(CRL 8832)下文中的體外和體內(nèi)藥理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果證明了式(I)和(Ia)化合物的細(xì)胞毒素性質(zhì)以及極限耐受劑量(MTD)。
1-培養(yǎng)基腫瘤細(xì)胞系上的細(xì)胞毒素活性(MTT試驗(yàn))使用MTT比色試驗(yàn)(T.Mosman，J.Immunol.Methods，1983；6555-63，J.Carmichael et al.，Cancer Res.1987；47936-942)評價(jià)式(I)和(Ia)化合物對腫瘤細(xì)胞的影響。
MTT試驗(yàn)的原則基于將黃色產(chǎn)品MTT(3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑溴化物)代謝為藍(lán)色產(chǎn)品，三苯基甲脂的代謝活性的活細(xì)胞的線粒體還原。由此得到的三苯基甲脂的量與存在于培養(yǎng)基孔中的活細(xì)胞的量成正比。三苯基甲脂的量通過分光光度測定法測量。
細(xì)胞系在包含25MM HEPES MEM(Minimum Essential Medium)堿基介質(zhì)的37℃的被塞住的培養(yǎng)皿中保持單層培養(yǎng)。該介質(zhì)非常適于大范圍變化的二倍體或初級哺乳動(dòng)物細(xì)胞的生長。該介質(zhì)隨后由下列物質(zhì)補(bǔ)充-用在56℃去補(bǔ)體1小時(shí)的5％FCS(胎牛血清)，-用0.6mg/ml L-谷氨酰胺，-用200lU/ml青霉素，-用200(J-g/ml鏈霉素，-用0.1mg/ml慶大霉素。
所使用的12人類癌細(xì)胞細(xì)胞系從AmeRlcan Type CultureCollection(ATCC，Rockyille，MD，USA)中獲得。該12細(xì)胞系為-兩種惡性膠質(zhì)瘤U-373MG(ATCC codeHTB-17)和U-87MG(ATCC codeHTB-14)，
一種星形細(xì)胞瘤SW1088(ATCC codeHTB-12)，-兩種非小細(xì)胞肺癌A549(ATCC codeCCL-185)和A-427(ATCC codeHTB-53)，-兩種結(jié)腸癌HCT-15(ATCC codeCCL-225)和LoVo(ATCCcodeCCL-229)，-兩種乳腺癌T-47D(ATCC codeHTB-133)和MCF7(ATCCcodeHTB-22)，-兩種膀胱癌J82(ATCC codeHTB-1)和T24(ATCC codeHPB-4)，-前列腺癌，PC-3(ATCC codeCRL-1435)。
實(shí)驗(yàn)方法將包含20 000到50 000(取決于使用的細(xì)胞類型)細(xì)胞/ml培養(yǎng)基的100μl細(xì)胞懸液在96-孔平底多孔板中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為37℃，包括5％ CO2的氣氛和70％濕度。培養(yǎng)24小時(shí)后，培養(yǎng)基代替為100μl包含濃度為10-5到10-10M各種試驗(yàn)化合物或用于溶解試驗(yàn)產(chǎn)品的溶劑(對照條件)的新介質(zhì)。在上述條件下培養(yǎng)72小時(shí)后，培養(yǎng)基替換為100μl RPMI 1640中的比例為1mg/ml的溶解MTT的淺黃色溶液。將該微量培養(yǎng)板在37℃再培養(yǎng)3小時(shí)，然后以400g離心10分鐘。淺黃色MTT溶液被除去，細(xì)胞水平形成的藍(lán)色三苯基甲脂晶體溶于100μl DMSO。隨后將該微量培養(yǎng)板搖動(dòng)5分鐘。通過實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)仍活著的細(xì)胞將黃色MTT產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為藍(lán)色三苯基甲脂，通過使用DYNATECH IMMUNOASSAY SYSTEM type裝置的分光光度測定法，在分別對應(yīng)三苯基甲脂極限吸收波長和本底噪聲的570nm和630nm波長測定所得藍(lán)色的強(qiáng)度及相應(yīng)轉(zhuǎn)化度。使用分光光度計(jì)上的軟件計(jì)算平均光密度值和標(biāo)準(zhǔn)偏差(Std.Dev.)和標(biāo)準(zhǔn)誤差平均值(SEM)。
通過比較天然產(chǎn)物測量式(I)和(Ia)化合物對各種腫瘤細(xì)胞細(xì)胞系生長的抑制活性。例如，涉及各化合物得到的50％抑制濃度(IC50)的濃度值列于下文表I研究的全部化合物對12人類腫瘤細(xì)胞系U-87MG，U-373MG，SW 1088，T24，J82，HCT-15，LoVo，MCF7，T-47D，A549，A-427和PC-3顯示顯著的抑制活性，IC50可在10-5到10-9M之間，取決于試驗(yàn)的化合物和腫瘤細(xì)胞系。
2-極限耐藥量測定(MTD)使用4到6周齡B6D2F1/Jico小鼠進(jìn)行耐藥量評價(jià)。將該化合物以2.5到160mg/kg的增長的劑量腹膜下給藥。通過觀察被研究的產(chǎn)物單獨(dú)給藥后14天內(nèi)動(dòng)物的生存率測定MTD值(用mg/kg表示)。同時(shí)監(jiān)控該周期內(nèi)動(dòng)物重量的變化。當(dāng)MTD值大于160mg/kg時(shí)，該MTD值默認(rèn)為160mg/kg加以類別。
評定的極限耐藥量(MTD)的結(jié)果整理于下列表II表II極限耐藥劑量
該類產(chǎn)物要么具有直接毒性，要么缺乏直接毒性，可以高組織濃度也就是以高劑量用于體內(nèi)。
3-體內(nèi)抗腫瘤活性進(jìn)行試驗(yàn)的模型為-激素-不敏感的小鼠乳腺癌MXT(HI-MXT)，
-激素-敏感的小鼠乳腺癌MXT(HI-MXT)，-淋巴瘤L 1210。
將源自于乳腺輸乳管的小鼠乳腺癌MXT模型(Watson等CancerRes.，1977；373344-48)移殖于4到6周齡B6D2F1/Jico小鼠。開始激素-敏感的(HS-MXT模型)的，區(qū)別的腫瘤朝無差別的激素-不敏感的腫瘤(HI-MXT模型)方向生長。將具有臨床上已經(jīng)證明可以延長動(dòng)物幸存者的抗腫瘤活性的試劑傳送到HI-MXT腫瘤和HS-MXT腫瘤。這種試劑為，例如，環(huán)磷酰胺，鬼臼亞乙苷或阿霉素。
lymophoma L 1210模型為小鼠皮下移植來源的小鼠L 1210白血病細(xì)胞的模型。在100％的情況下，它們引起迅速生長的皮下實(shí)體腫瘤(L 1210 s.c.)。
當(dāng)測定產(chǎn)物MTD值時(shí)，在MTD/2，MTD/4和MTD 8劑量的源自HS-MXT的小鼠乳腺癌模型和小鼠乳腺癌HI-MXT模型以及皮下的lymphoma L 1210模型中鑒定其體內(nèi)抗腫瘤活性。
在所有下文實(shí)施例中，無論什么模型，對照條件都為，以每周3次給藥的速率(星期一，星期三和星期五)，試驗(yàn)0.2ml包含用于溶解各種式(I)和(Ia)化合物的溶劑的生理鹽水，連續(xù)3周給藥的9或15只小鼠。
在這些試驗(yàn)期間，測定腫瘤的生長或小鼠的存活率i)-通過測量每周二次(星期-和星期五)移植HS-MXT，HI-MXT或L 1210腫瘤的區(qū)域評價(jià)腫瘤的生長。這些區(qū)域通過腫瘤的兩個(gè)最大的垂直軸的值的增加計(jì)算。使用卡尺測量這些軸的值。
II)-以T/C形式或比率計(jì)算小鼠的存活率，其中T＝被處理的小鼠的中位值小鼠的存活天數(shù)+(被處理的中位值小鼠數(shù)量-先于被處理的中位值小鼠死亡的小鼠的數(shù)量)/被處理的中位值小鼠死亡時(shí)死亡小鼠的數(shù)量C＝被處理的小鼠的中位值小鼠的存活天數(shù)+(被處理的中位值小鼠數(shù)量-先于被處理的中位值小鼠死亡的小鼠的數(shù)量)/中位值小鼠死亡時(shí)死亡小鼠的數(shù)量該比率表示相對于對照組小鼠中位值平均生存期的被處理的小鼠的平均生存期。因此，當(dāng)T/C指數(shù)超過130％時(shí)，分子誘導(dǎo)顯著地(P＜0.05)增加了動(dòng)物的存活。另一方面，當(dāng)T/C值小于70％時(shí)，它具有毒性效應(yīng)。
3.1.-小鼠乳腺癌(HI-MXT)兩個(gè)產(chǎn)物CRL 8293和CRL 8294對HI-MXT腫瘤生長的影響將在下文以實(shí)施例的方式介紹。每批移植與給定的試驗(yàn)條件有關(guān)的HI-MXT腫瘤的小鼠包括15只動(dòng)物。
處理1產(chǎn)物CRL 8293腹膜下給藥。第一次注射產(chǎn)物在移植后第七天(D7)進(jìn)行，移植后第七天(D7)起以每周3次的速率(星期一，星期三和星期五)連續(xù)注射3星期，劑量為5mg/kg。
處理2產(chǎn)物CRL 8294腹膜下給藥。第一次注射產(chǎn)物在移植后第七天(D7)進(jìn)行，移植后第七天(D7)起以每周3次的速率(星期一，星期三和星期五)連續(xù)注射3星期，劑量為5mg/kg。
腫瘤移植21天，即產(chǎn)物CRL 8293或產(chǎn)物CRL 8294 6次給藥后，相對于對照條件處理1和2誘導(dǎo)HI-MXT腫瘤區(qū)域的降低(-)或增加(+)以百分?jǐn)?shù)顯示于下列表II中。移植后21天，100％對照動(dòng)物仍還活著。
表III
這些結(jié)果顯示這兩個(gè)產(chǎn)物CRL 8293和CRL 8294誘導(dǎo)HI-MXT腫瘤生長的顯著的減少。這些結(jié)果顯示，在體內(nèi)和在該模型中，式I和Ia產(chǎn)物具有有益的抗腫瘤活性。
3.2.-小鼠乳腺癌(HS-MXT)兩個(gè)產(chǎn)物CRL 8293和CRL 8294對HS-MXT腫瘤生長的影響將在下文以實(shí)施例的方式介紹。每批移植與給定的試驗(yàn)條件有關(guān)的HS-MXT腫瘤的小鼠包括9只動(dòng)物。
處理10產(chǎn)物CRL 8293腹膜下給藥。第一次注射產(chǎn)物在移植后第七天(D7)進(jìn)行，移植后第七天(D7)起以每周3次的速率(星期一，星期三和星期五)連續(xù)注射3星期，劑量為5mg/kg。
處理20產(chǎn)物CRL 8294單獨(dú)由腹腔途徑給藥。第一次注射產(chǎn)物在移植后第七天(D7)進(jìn)行，移植后第七天(D7)起以每周3次的速率(星期一，星期三和星期五)連續(xù)注射3星期，劑量為5mg/kg。
腫瘤移植31天，即產(chǎn)物CRL 8293或產(chǎn)物CRL 8294 9次給藥后，相對于對照條件處理10和20誘導(dǎo)HS-MXT腫瘤區(qū)域的降低(-)或增加(+)以百分?jǐn)?shù)顯示于下列表IV中。移植后31天，100％對照動(dòng)物仍還活著。
表IV
這些結(jié)果顯示這兩個(gè)產(chǎn)物CRL 8293和CRL 8294誘導(dǎo)HS-MXT腫瘤生長的非常顯著地減少。如HI-MXT模型，這些結(jié)果顯示式I和Ia產(chǎn)物對HS-MXT也具有高有益的抗腫瘤活性。
3.3.-淋巴瘤L 1210。
CRL 8294小鼠存活時(shí)間的影響將在下文以實(shí)施例的形式介紹(表V)。每批移植與給定的試驗(yàn)條件有關(guān)的HS-MXT腫瘤的小鼠包括9只動(dòng)物。
處理100產(chǎn)物CRL 8294腹膜下單獨(dú)給藥。第一次注射產(chǎn)物在移植后第七天(D7)進(jìn)行，移植后第七天(D7)起以每周3次的速率(星期一，星期三和星期五)連續(xù)注射3星期，劑量為1.25mg/kg。
表V
式(I)化合物CRL 8294對皮下淋巴瘤L 1210模型顯示抗腫瘤活性。該活性的特征為，與對照組小鼠的中位值小鼠平均生存期相比，處理組小鼠的中位值小鼠的平均生存期顯著延長。
4-耐受/細(xì)胞毒素活性比平均IC50值(in nM)(由對12種腫瘤細(xì)胞系研究得到個(gè)體細(xì)胞毒素活性計(jì)算)和MTD/IC50比率，通過MTD值與IC50值的比率得到，的結(jié)果列于以下表VI中。MTD/IC50比率用無量綱數(shù)來表示。
表VI
*通過以CRL 8388的比率等于1作為參考獲得各種化合物的MTD/IC50比率。
在上面描述的實(shí)驗(yàn)條件下，式(I)和(Ia)化合物顯示顯著的體外和體內(nèi)抗腫瘤活性。MTT比色試驗(yàn)結(jié)果顯示，它們在體外抑制腫瘤細(xì)胞的生長。在體內(nèi)，它們顯著地和大大地抑制HI-MXT和HS-MXT腫瘤的生長，相對于對照組小鼠中位值小鼠的平均生存期，顯著地增加了處理并且移植淋巴瘤L 1210組小鼠的中位值小鼠的平均生存期。
根據(jù)它們的細(xì)胞毒素性質(zhì)，上述公開的式(I)和(Ia)化合物或其藥物可接受的鹽或溶劑化物，能被用作治療癌性腫瘤及其轉(zhuǎn)移的藥物的有效成分。
式(I)和(Ia)化合物一般地以根據(jù)每m2體表面積或者每kg體重制定的劑量單位給藥。上述劑量單位優(yōu)選地在藥物組合物中配制，其中有效成分與一種(或更多)藥物賦形劑混合。
根據(jù)被治療的患者的癌癥病狀，所使用的式(I)和(Ia)化合物的劑量在0.05到350mg/m2體表面積之間，急性期藥物治療時(shí)優(yōu)選的劑量為0.5到50mg/m2/天，與各治療周期的數(shù)目有關(guān)。根據(jù)治療周期的數(shù)目，維持治療中所使用的式(I)和(Ia)化合物的劑量為0.05到25mg/m2/day，優(yōu)選的劑量為0.1到1.5mg/m2/天。它們可以用于與抗腫瘤藥物結(jié)合，用于增強(qiáng)的綜合化學(xué)療法有效的療程。
在用于口服或靜脈內(nèi)給藥的本本發(fā)明藥物組合物中，有效成分可以以單位給藥形式給藥，如與適用于人類治療學(xué)的常規(guī)制劑輔料的混合物。合適的單位給藥形式包括口服給藥形式，如片劑，可以選擇性地被刻痕，或膠囊，植入和靜脈內(nèi)給藥形式。
用于腸胃外給藥(以恒定流速注入靜脈)藥劑包括滅菌水懸浮液，無菌等滲壓鹽溶液或無菌的和可注射的溶液，其中包括藥理學(xué)兼容的分散劑和/或增溶劑，例如丙二醇，聚乙二醇或R-環(huán)糊精。
因此，制備為進(jìn)行1到24h輸注設(shè)計(jì)的靜脈注射的水溶液時(shí)使用共溶劑醇，如乙醇，或乙二醇，如聚乙二醇或丙二醇，和親水的表面活性劑，如吐溫80。
制備片劑形式的固體組合物時(shí)，可以將潤濕劑，十二烷硫酸鈉，加入微?；蚍俏⒘；挠行С煞?，完全結(jié)合后與藥物載體，如硅膠，凝膠，淀粉，乳糖，硬脂酸鎂，滑石，阿拉伯樹膠等等混合。片劑可以涂敷蔗糖，各種聚合物或其他合適的原料，當(dāng)它們選擇性地被處理時(shí)，它們具有持續(xù)或延遲的特性，因此它們可以連續(xù)地釋放預(yù)定量的有效成分。
膠囊制劑通過將有效成分與稀釋劑，如乙二醇或甘油酯混合，并將得到的混合物裝入軟或硬膠囊而得到。
有效成分還可以選擇性地與一種或多種載體或添加劑配制成微膠囊或微球體。
有效成分還可以與環(huán)糊精，例如α-，β-或γ-環(huán)糊精，2-羥丙基-β-環(huán)糊精或甲基-β-環(huán)糊精形成配合物。
由于它們的強(qiáng)大的細(xì)胞毒素活性，式(I)和(Ia)化合物可用于治療大多數(shù)實(shí)體腫瘤，特別用于治療大腦瘤，肺癌，卵巢和乳腺腫瘤，子宮內(nèi)膜癌，結(jié)腸癌，前列腺癌和睪丸腫瘤。
權(quán)利要求
1.通式I和Ia化合物和這些化合物與藥學(xué)上可接受的酸的加成鹽 其中R1，R2，R3，R4和R5選自氫，鹵素，C1-C6烷基，羥基，-CHO，-OR8，-COOH，-CN，-CO2R8，-CONHR8，-CONR8R9，-NH2，-NHR8，N(R8)2，-NH-CH2-CH2-N(CH3)2，-NH-CH2-CH2-Cl，-NHCOR8，嗎啉代基，硝基，SO3H， R8和R9選自C1-C6烷基和苯基(C1-C4)烷基而Ar是C6-C14芳基，-R6選自氫，鹵素，C1-C6烷基或其中R10選自鹵素或-OH，(C1-C6)烷氧基或-O-CO-(C1-C6)烷基而n在1和6之間的-(CH2)nR10基團(tuán)，-CN，-CO2Et或其中R11選自C1-C6烷基和苯基(C1-C4)烷基的-COR11基團(tuán)，具有其中R12和R13彼此獨(dú)立地選自氫或C1-C6烷基，苯基(C1-C4)烷基的NR12R13或-其中R14選自鹵素，(C1-C6)烷氧基和N(CH3)2基團(tuán)而n在1和6之間的-(CH2)nR14基團(tuán)，-R7選自氫，(C1-C6)烷基，苯基(C1-C4)烷基，其中R15和R16彼此獨(dú)立地選自氫，C1-C6烷基和苯基(C1-C4)烷基的NR15R16以及其中R17選自氫，鹵素或OH或(C1-C6)烷氧基而n在1和6之間的(CH2)nR17基團(tuán)。
2.權(quán)利要求1的式I和/或1a化合物，其中R1，R2，R3，R4和R5選自氫，鹵素，C1-C6烷基，羥基，-CHO，-OR8，-COOH，-CN，-CO2R8，-CONHR8，-CONR8R9，-NH2，-NHR8，N(R8)2，-NH-CH2-CH2-N(CH3)2，-NHCOR8，嗎啉代基，硝基，SO3H， R8和R9選自C1-C6烷基而Ar為C6-C14芳基。
3.權(quán)利要求1式(I)和式(Ia)化合物及其可藥用酸加成鹽，其中R1，R2，R3，R4和R5選自氫，鹵素，C1-C6烷基，羥基，-OR8，-NO2，-NH2，-NHR8，-N(R8)2，-NH-CH2-CH2-N(CH3)2，-NH-CH2-CH2-Cl，NHCOR8，R8選自C1-C6烷基，-R6選自氫，其中R10選自鹵素，-O-CO-CH3，C1-C6烷基的-(CH2)nR10基團(tuán)以及其中R12和R13彼此獨(dú)立地選自氫，C1-C6烷基，芐基的N(R12R13)基團(tuán)或其中R14選自鹵素或(C1-C6)烷氧基和N(CH3)2基團(tuán)而n在1和6之間的-(CH2)nR14基團(tuán)，-R7選自氫，(C1-C6)烷基，芐基，其中R15和R16選自氫，C1-C6烷基和芐基的N(R15R16)基團(tuán)以及其中R17選自氫，鹵素或OH或(C1-C6)烷氧基而n在1和6之間的(CH2)nR17基團(tuán)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中式I或Ia化合物中至少一個(gè)R1，R2，R3，R4或R5為OR8基團(tuán)。
5.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中式I和/或Ia化合物為其中基團(tuán)定義如下的化合物和這些化合物與藥學(xué)上可接受的酸的加成鹽R1選自氫，鹵素或羥基，甲氧基，硝基，-NH2，-NHCH3，-NH-CH2-CH2-N(CH3)2，-NH-CH2-CH2-Cl或NHCOCH基團(tuán)，R2為氫，R3和R5選自氫或羥基或甲氧基。
6.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中式(I)化合物為如下化合物和這些化合物與藥學(xué)上可接受的酸的加成鹽11-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮，11-氯-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮，4-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮，4，11-二甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮，4，9-二甲氧基基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮，9-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮，9，11-二甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮，3-乙酰氧基甲基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮，3-乙酰氧基甲基-9-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7-酮，2-(2-氯乙基)-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，7]菲咯啉-7酮。
7.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中式(Ia)化合物為如下化合物和這些化合物與藥學(xué)上可接受的酸的加成鹽8-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮，8-氯-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮，4-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮，4，8-二甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮，4，10-二甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮，10-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮，8，10-二甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮，3-乙酰氧基甲基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮，3-乙酰氧基甲基-9-甲氧基-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7-酮，2-(2-氯乙基)-7H-吡啶并[4，3，2-de][1，10]菲咯啉-7酮。
8.包含有效量的選自權(quán)利要求1到7中任何一項(xiàng)的化合物的藥物組合物，根據(jù)其細(xì)胞毒素性質(zhì)，用于治療癌性腫瘤和它們的轉(zhuǎn)移。
9.權(quán)利要求1到7中任何一項(xiàng)的化合物在制造抗癌藥物中的用途。
10.制備權(quán)利要求1化合物的方法，其中包括a)按照異狄爾斯-阿爾德反應(yīng)，由下式喹啉二酮 和下式疊氮二烯 其中X＝CH3反應(yīng)，得到下列化合物的混合物 b)選擇性地分離式II和IIa化合物，c1)隨后使式II和/或IIa化合物與二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛反應(yīng)，得到下式烯胺 然后將該烯胺官能化，引入R6和/或R7取代基，環(huán)化，得到I和/或Ia化合物，或c2)官能化和環(huán)化的同時(shí)，得到式I和/或Ia化合物，d)選擇性地分離式I和Ia化合物。
11.制備其中R6和R7為氫的權(quán)利要求1的式I或Ia化合物的方法，其中包括a)按照異狄爾斯-阿爾德反應(yīng)，由下式喹啉二酮 和下式疊氮二烯 其中X＝CH2-CH2-NHBoc，反應(yīng)，得到下列化合物的混合物 b)選擇性地分離式II和IIa化合物，c)環(huán)化式II和/或IIa化合物，得到式I和/或Ia化合物，d)選擇性地分離式I或Ia化合物。
12.用于治療癌性腫瘤患者的方法，其中包括給該患者使用有效量的權(quán)利要求1定義的化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及包含有效量的選自式(I)或(Ia)化合物的藥物組合物,其中:R
文檔編號A61P35/04GK1373761SQ0081265
公開日2002年10月9日 申請日期2000年8月11日 優(yōu)先權(quán)日1999年8月13日
發(fā)明者E·德爾福那, F·達(dá)羅, J·巴斯提德, R·基斯, A·福里德曼 申請人:L·拉峰試驗(yàn)公司