專利名稱：噬菌體相關(guān)裂解酶對(duì)各種疾病的預(yù)防性和治療性處理的用途的制作方法
下面的申請(qǐng)是1999年9月14日提交的美國專利申請(qǐng)09/395,636的延續(xù)部分。
2.現(xiàn)有技術(shù)的描述過去，抗生素被用于治療各種感染。Selman Waksman引入和生產(chǎn)鏈霉素的工作，F(xiàn)leming博士對(duì)青霉素的發(fā)現(xiàn)，與抗生素領(lǐng)域中的許多其它工作一樣知名。許多年來，對(duì)“基本的”抗生素進(jìn)行了加成和化學(xué)修飾，試圖使它們的作用更強(qiáng)，或治療對(duì)這些抗生素過敏的人。
其它人發(fā)現(xiàn)了這些抗生素的新用途。美國專利5,260,292(Robinson et al.)公開了用氨基青霉素局部治療痤瘡。用于局部治療痤瘡和痤瘡形式的真皮疾病的方法和組合物包括應(yīng)用一定量的選自氨芐青霉素、阿莫西林、其它氨基青霉素、以及頭孢菌素及其衍生物和類似物的，有效治療痤瘡和痤瘡形式的真皮疾病的抗生素。美國專利5,409,917(Robinson et al.)公開了用頭孢菌素局部治療痤瘡。
然而，由于為治療各種疾病而以不斷增加的速率配方或使用更多抗生素，越來越多的細(xì)菌建立了對(duì)抗生素的耐藥性?，F(xiàn)在正使用大劑量的更強(qiáng)的抗生素治療更耐藥的菌株。因此已經(jīng)發(fā)展出多種耐抗生素的細(xì)菌。更多抗生素的使用和表現(xiàn)出耐藥性的細(xì)菌的數(shù)目導(dǎo)致了需要使用抗生素的時(shí)間延長?，F(xiàn)在更經(jīng)常使用廣譜的非特異性抗生素，它們中的一些對(duì)病人有害。同樣，抗生素不容易通過粘膜表層。另外，對(duì)抗生素過敏的人表現(xiàn)得越來越多。
因此，為首先識(shí)別然后殺滅細(xì)菌尋求了其它努力。
為通過使用噬菌體治療細(xì)菌疾病進(jìn)行了嘗試。美國專利5,688,501(Merril，et al.)公開了用特定細(xì)菌的特異性裂解或非裂解噬菌體治療動(dòng)物體內(nèi)由細(xì)菌導(dǎo)致的感染性疾病的方法。
美國專利4,957,686(Norris)公開了改善口腔衛(wèi)生的程序，它包含將具有容易粘附唾液腺膜特性的寄生于細(xì)菌的噬菌體引入口腔。
注意直接將噬菌體引入動(dòng)物而預(yù)防或治療疾病有一些缺陷。具體說，細(xì)菌必需在恰當(dāng)?shù)纳L階段以便噬菌體附著。細(xì)菌和噬菌體都必須處于正確的和同步的生長循環(huán)。另外，必須有恰當(dāng)數(shù)目的噬菌體附著于細(xì)菌；如果噬菌體太多或太少，則會(huì)沒有附著或不產(chǎn)生裂解酶。噬菌體也必需是有足夠活性的。噬菌體也受許多事物的抑制，包括它將攻擊的生物體的細(xì)菌碎片。進(jìn)一步使直接使用噬菌體治療細(xì)菌感染復(fù)雜化的是免疫反應(yīng)的可能性，它使噬菌體無功能。
所以，其他人探尋了使用更安全和更有效的方法治療和預(yù)防細(xì)菌感染。
美國專利(申請(qǐng)?zhí)?8/962,523)(Fischetti，et.al.)和美國專利(申請(qǐng)?zhí)?9/257,026)(Fischetti et al.)公開了為一般稱作鏈球菌喉的鏈球菌A咽喉感染的預(yù)防和治療性處理而使用口服運(yùn)送方式，如含有由C1噬菌體感染的C族鏈球菌產(chǎn)生的裂解酶的糖果、口香糖、錠劑、含片、片劑、粉末、氣溶膠、液體或液體噴霧。
美國專利09/395,636(Fischetti et al.)公開了用于細(xì)菌感染的預(yù)防或治療性處理的方法和組合物，包括給予感染部位有效量的至少一種由感染了細(xì)菌特異性噬菌體的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶。裂解酶優(yōu)選包含適于運(yùn)送裂解酶到感染位點(diǎn)的載體。此方法和處理可以用于治療上呼吸道感染、局部感染、陰道感染、眼感染、耳感染，用于腸外治療，以及用于大多數(shù)其它細(xì)菌感染。
然而，除了本發(fā)明者，還沒有人探究這些裂解酶對(duì)細(xì)菌性疾病的預(yù)防和治療性處理的用途。因此，本發(fā)明公開了用于治療多種由細(xì)菌感染導(dǎo)致的疾病的多種與噬菌體相關(guān)的裂解酶、打孔酶、嵌合酶、以及混排酶的提取和用途。
使用由細(xì)菌特異性噬菌體感染細(xì)菌產(chǎn)生的噬菌體相關(guān)裂解酶對(duì)治療疾病有許多益處。由于噬菌體定向于特定細(xì)菌，裂解酶不干擾正常菌群。裂解噬菌體也主要攻擊不受質(zhì)粒變異影響的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)。裂解酶的作用很快并不依賴于細(xì)菌生長。
裂解酶可以定向于粘膜表層，在其中它們可以殺滅克隆的細(xì)菌。
混排酶是這樣一些酶，通常一個(gè)以上特定酶的一個(gè)以上序列在一個(gè)或更多位置被切開，并以特定或隨機(jī)順序重構(gòu)而增加它們的活性。
在本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，混排酶被用于治療細(xì)菌感染，因此增加了殺滅細(xì)菌的速度和效率。
嵌合酶是有兩個(gè)或更多活性位點(diǎn)的兩個(gè)或更多酶的組合的酶，這樣嵌合酶可以獨(dú)立作用于相同或不同分子。這將允許同時(shí)治療兩種或更多不同細(xì)菌感染。嵌合酶也用于通過在一個(gè)以上位置剪切細(xì)胞壁而治療細(xì)菌感染。
已經(jīng)生成和研究了許多嵌合裂解酶。E-L基因、由噬菌體phi X174和MS2裂解蛋白E和L構(gòu)建的嵌合裂解酶分別接受內(nèi)部缺失而創(chuàng)建一系列裂解或殺滅特性改變的新E-L克隆。在本實(shí)驗(yàn)中研究了親代基因E，L，E-L和E-L的內(nèi)部截短形式的裂解活性，以不同跨膜結(jié)構(gòu)域的不同結(jié)構(gòu)為基礎(chǔ)鑒定不同的裂解機(jī)制。電子顯微鏡和細(xì)胞質(zhì)及質(zhì)周間隙的標(biāo)記酶釋放揭示了可以根據(jù)穿透大腸桿菌內(nèi)膜蛋白或內(nèi)膜和外膜蛋白而區(qū)分兩種不同的裂解機(jī)制。FEMS Microbiol.Lett.1998 Jul 1，164(1)；159-67。
在另一實(shí)驗(yàn)中，通過融合編碼乳球菌噬菌體Tuc2009溶素N端部分的區(qū)域和編碼主要肺炎球菌自溶素C端結(jié)構(gòu)域的區(qū)域構(gòu)建活性嵌合細(xì)胞壁裂解酶(TSL)。此嵌合酶顯示出可以水解含膽堿的肺炎球菌細(xì)胞壁的糖苷酶的活性。
本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方案公開了用嵌合裂解酶同時(shí)治療兩種感染性細(xì)菌，或在兩個(gè)不同位置切開細(xì)菌細(xì)胞壁。
打孔酶在細(xì)胞膜產(chǎn)生孔。更具體地說，打孔酶形成終止呼吸的致死性膜損害。與裂解酶相似，打孔酶由噬菌體編碼并攜帶。實(shí)際上，經(jīng)常發(fā)現(xiàn)打孔酶的遺傳密碼在噬菌體中鄰接裂解酶的遺傳代碼或甚至在其內(nèi)部。大多數(shù)打孔酶序列很短，并總體上具有疏水性，有高度親水的羧基端結(jié)構(gòu)域。在許多情況下，公認(rèn)打孔酶在噬菌體酶活性結(jié)構(gòu)域內(nèi)的不同閱讀框架編碼。在其它情況下，在編碼噬菌體的DNA的鄰接或附近的DNA上編碼。打孔酶通常在噬菌體感染晚期合成并出現(xiàn)在漿膜中，在此導(dǎo)致膜損害。
可以根據(jù)初級(jí)結(jié)構(gòu)分析將打孔酶分為兩個(gè)主要類型。I型打孔酶通常為95個(gè)殘基或更長并可以有三個(gè)潛在的跨膜區(qū)。II型打孔酶通常較小，約65-95個(gè)殘基，帶電和疏水殘基的分布提示有兩個(gè)TM結(jié)構(gòu)域(Young，et al.Trends in Microbiology v.8，No.4，March2000)。然而至少對(duì)于宿主為革蘭氏陽性菌的噬菌體，雙成分的裂解系統(tǒng)可能不是普遍的。盡管一些噬菌體表示或提示打孔酶的存在，還沒有發(fā)現(xiàn)編碼所有噬菌體的公認(rèn)打孔酶的基因。已經(jīng)表明打孔酶存在于或提示存在于乳球菌噬菌體Tuc2009，乳球菌ΦLC3，肺炎球菌噬菌體EJ-1，加氏乳桿菌噬菌體Φadh，金黃色葡萄球菌噬菌體Twort，單核細(xì)胞增生利斯特氏菌噬菌體，肺炎球菌噬菌體Cp-I，枯草桿菌噬菌體Φ29，德氏乳桿菌噬菌體LL-H溶素，以及金黃色葡萄球菌噬菌體Φ11。(Loessner，et al.，Journal of Bacteriology，Aug.1999，p.4452-4460)。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，將打孔酶與裂解酶結(jié)合使用而增加殺滅細(xì)菌的速度和效率。打孔酶也可以以嵌合和/或混排酶的形式存在。打孔酶也可以在細(xì)菌感染的治療中單獨(dú)使用。
本發(fā)明的一個(gè)目的是將噬菌體相關(guān)裂解酶與嵌合或混排裂解酶結(jié)合使用而預(yù)防性和治療性處理細(xì)菌感染。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，用嵌合裂解酶預(yù)防性和治療性處理細(xì)菌感染。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，用混排裂解酶預(yù)防性和治療性處理細(xì)菌感染。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，將打孔酶與噬菌體相關(guān)裂解酶結(jié)合使用而預(yù)防性和治療性處理細(xì)菌感染。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，單獨(dú)用打孔酶預(yù)防性和治療性處理細(xì)菌感染。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，打孔酶為混排打孔酶或嵌合打孔酶，與裂解酶結(jié)合或獨(dú)立于裂解酶。
本發(fā)明(引入美國專利5,604,109的全部內(nèi)容作為參考)使用感染了特定噬菌體的細(xì)菌生物體產(chǎn)生的裂解酶作為防止暴露于其他有感染癥狀的人的人群產(chǎn)生疾病的預(yù)防性處理，或作為已經(jīng)由此感染導(dǎo)致患病的人群的治療性處理。本發(fā)明是以感染特定噬菌體的細(xì)菌的特異性噬菌體裂解酶可以有效破壞導(dǎo)致問題的細(xì)菌細(xì)胞壁的發(fā)現(xiàn)為基礎(chǔ)的。同時(shí)，半純化酶缺乏蛋白溶解酶活性因此當(dāng)存在于細(xì)菌細(xì)胞壁消化中時(shí)對(duì)哺乳動(dòng)物蛋白和組織無破壞性。如前面所討論的，裂解酶可以是嵌合的、混排的或“天然的”，并可以與至少一種打孔酶結(jié)合，打孔酶也可以是嵌合的、混排的或“天然的”。
在本分明的一種實(shí)施方案中，公開了由肺炎鏈球菌、fasciae鏈球菌和流感嗜血桿菌導(dǎo)致的各種疾病的預(yù)防性和治療性處理。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，通過使用裂解酶治療了由利斯特氏菌、沙門氏菌、大腸桿菌和彎曲桿菌導(dǎo)致的革蘭氏陰性細(xì)菌感染?？梢酝ㄟ^將裂解酶摻入栓劑灌腸劑、糖漿或其它載體而直接進(jìn)入感染位點(diǎn)從而治療這些和其它可以感染消化系統(tǒng)的細(xì)菌。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，將裂解酶摻入繃帶而預(yù)防或治療燒傷和創(chuàng)傷感染。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，將葡萄球菌和假單孢菌相關(guān)噬菌體裂解酶摻入繃帶，從而預(yù)防或治療燒傷和創(chuàng)傷感染。
由B族鏈球菌導(dǎo)致的陰道感染可以導(dǎo)致早產(chǎn)和合并癥，導(dǎo)致產(chǎn)生新生兒膿毒癥。摻入棉塞的B族鏈球菌特異性溶素可以防止出生過程中的新生兒感染而不干擾正常陰道菌群，因此使女性不會(huì)由于抗菌素治療導(dǎo)致酵母菌感染。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，含嗜血桿菌、假單孢菌和/或葡萄球菌裂解酶的眼藥水可以用于直接治療眼感染。用裂解酶治療比抗生素更快和更有利。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，將噬菌體相關(guān)裂解酶加入載體中置于吸入器而治療或預(yù)防局限在口腔和肺粘膜表層的疾病的擴(kuò)散。可以分離和使用結(jié)核的特異性裂解酶。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，為預(yù)防和治療與上呼吸道疾病相關(guān)的細(xì)菌感染，以糖果、口香糖、錠劑、含片、片劑、粉末、氣溶膠、液體、液體噴霧或牙膏的形式給予裂解酶。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，種特異性裂解酶可以用于治療與局部或皮膚感染相關(guān)的細(xì)菌感染，以局部藥膏或霜?jiǎng)┑男问浇o藥。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，可以以液體形式給予裂解酶。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，可以將溶葡萄球菌素，即溶解金黃色葡萄球菌的酶包括在治療劑中。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，可以將常規(guī)抗生素與裂解酶一起包括在治療劑中，可以有或沒有溶葡萄球菌素。也可以在預(yù)防或治療劑中包括一種以上的裂解酶。發(fā)明詳述治療細(xì)菌感染的方法包括用包含有效量的至少一種由細(xì)菌特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶修飾譯本的治療劑治療感染，其中裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶及其組合。裂解酶優(yōu)選處于具有允許該裂解酶活性的pH的環(huán)境。打孔酶可以與修飾裂解酶給藥結(jié)合使用。打孔酶可以處于“天然”狀態(tài)，可以是混排打孔酶或可以是嵌合裂解酶。
混排和嵌合酶可以酶促或通過重組DNA方法產(chǎn)生。可以用任何方法產(chǎn)生這些酶。
裂解酶可以用于治療或預(yù)防流感嗜血桿菌、假單孢菌、肺炎鏈球菌、fasciae鏈球菌、B組鏈球菌、利斯特氏菌、沙門氏菌、大腸桿菌、彎曲桿菌和其它細(xì)菌，以及其結(jié)合。這種裂解酶可以由嵌合和/或混排裂解酶補(bǔ)充，或者可以自身為嵌合和/或混排裂解酶。同樣，可以包括打孔酶，它也可以是嵌合和/或混排裂解酶。
例如，如果存在上呼吸道細(xì)菌感染，可以用包含有效量的至少一種由感染了細(xì)菌特異性噬菌體的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶，以及一種將裂解酶運(yùn)送到口腔、咽喉或鼻通道的載體的組合物預(yù)防性或治療性處理感染。裂解酶優(yōu)選處于具有允許該裂解酶活性的pH的環(huán)境。如果個(gè)體暴露于有上呼吸道疾病的人，裂解酶將停留在粘膜表層并防止感染性細(xì)菌的集群。
感染上呼吸道系統(tǒng)的細(xì)菌的兩個(gè)例子是肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌。近年來，越來越多的人，特別是兒童和老人感染或攜帶耐青霉素的肺炎鏈球菌和嗜血桿菌。盡管這些細(xì)菌通常是無害寄居在宿主中，它們是機(jī)會(huì)生物體，當(dāng)宿主的抵抗力下降時(shí)會(huì)導(dǎo)致感染。通過去除或減少上呼吸道中這些生物體的數(shù)目，可以相當(dāng)?shù)販p少由這些細(xì)菌導(dǎo)致的感染。
由噬菌體HP1(類P2噬菌體族的成員之一，與大腸桿菌噬菌體P2和186非常相似，與逆轉(zhuǎn)錄子噬菌體Ec67有一定的相似性)導(dǎo)致的嗜血桿菌感染產(chǎn)生可以裂解細(xì)菌的裂解酶。以前鑒定為N-乙酰-胞壁酰-L-丙氨酸酰胺酶的肺炎鏈球菌裂解酶由Pal噬菌體感染肺炎鏈球菌產(chǎn)生。治療劑可以含這兩種細(xì)菌產(chǎn)生的任意一種或全部兩種裂解酶，并可以含其它細(xì)菌的其它裂解酶?？梢杂糜陬A(yù)防性和治療性處理鏈球菌感染的組合物包括溶素酶和應(yīng)用于口腔和鼻腔的粘膜表層的方法(如載體系統(tǒng)或口腔運(yùn)送方式)，使得置于載體系統(tǒng)或口腔運(yùn)送方式的酶到達(dá)粘膜表層。另一種可以預(yù)防性處理的感染是A族鏈球菌，它可以產(chǎn)生通常所說的“鏈球菌”喉。當(dāng)用C1噬菌體感染C族鏈球菌時(shí)，產(chǎn)生特異性裂解A族鏈球菌的溶素酶。
在將溶素酶置于載體系統(tǒng)或口腔運(yùn)送方式之前或同時(shí)，酶優(yōu)選處于穩(wěn)定緩沖液的環(huán)境中，從而保持約4.0到約9.0，更優(yōu)選約5.5到約7.5，最優(yōu)選約6.1的pH范圍。
穩(wěn)定緩沖液應(yīng)該允許溶素酶的最佳活性。緩沖液可以是還原劑，如二硫蘇糖醇。穩(wěn)定緩沖液也可以是或包括金屬螯合劑，如乙二胺四乙酸二鈉鹽，或者它也可以包含磷酸或檸檬酸-磷酸緩沖液。
應(yīng)用的方式包括，但不限于直接、間接、載體和特殊方式或這些方式的任意結(jié)合。裂解酶的直接應(yīng)用可以通過鼻噴霧、滴鼻液、鼻藥膏、鼻洗液、鼻注射液、鼻填塞材料、支氣管噴霧和吸入器，或通過使用喉錠劑，或通過使用漱口液或含漱劑，或通過使用藥膏間接應(yīng)用于鼻孔、鼻梁或面部或通過這些和相似應(yīng)用方法的結(jié)合?？梢越o藥的溶素酶形式包括但不限于錠劑、含片、糖果、注射劑、口香糖、片劑、粉末、噴霧、液體、藥膏和氣溶膠。
加入裂解酶的錠劑、片劑或口香糖可以含糖、玉米漿、各種顏料、無糖增甜劑、調(diào)味品；任何粘合劑或其結(jié)合。同樣，基于口香糖的產(chǎn)物可以含阿拉伯樹膠、巴西棕櫚臘、檸檬酸、玉米淀粉、食物色素、調(diào)味品、無糖增甜劑、明膠、葡萄糖、甘油、樹膠基團(tuán)、蟲膠、糖精鈉、糖、水、白蠟、纖維素、其它粘合劑及其結(jié)合。
錠劑可以進(jìn)一步包含蔗糖、玉米淀粉、阿拉伯樹膠、黃蓍膠、茴香腦、亞麻子、油性樹脂、礦物油和纖維素、其它粘合劑及其結(jié)合。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，使用糖替代物取代葡萄糖、蔗糖或其它糖。
也可以將酶置于鼻噴霧中，其中鼻噴霧為載體。鼻噴霧可以是長效或控釋噴霧，可以通過本領(lǐng)域公知的方法生產(chǎn)。也可以使用吸入劑，使得噬菌體酶可以到達(dá)支氣管腔更下部，包括進(jìn)入肺。
裂解酶的任何載體都可以通過常規(guī)方法生產(chǎn)。然而，優(yōu)選漱口液或類似產(chǎn)品中不含醇，從而避免酶變性。同樣，當(dāng)在生產(chǎn)過程中將裂解酶置于止咳藥水、口香糖、糖果或錠劑中時(shí)，這種放置應(yīng)該在錠劑或糖果變硬之前但在止咳片劑或糖果稍微冷卻之后進(jìn)行，以避免酶的熱變性。
可以將酶以液態(tài)或凍干狀態(tài)加入這些物質(zhì)，于是當(dāng)它遇到體液如唾液時(shí)可以被增溶。酶也可以以微團(tuán)或脂質(zhì)體存在。
治療感染的裂解酶有效劑量比或量將部分取決于裂解酶是治療性還是預(yù)防性使用，接受者暴露于感染性細(xì)菌的持續(xù)時(shí)間、個(gè)體的大小和體重等。使用含酶組合物的持續(xù)時(shí)間也取決于是否用于預(yù)防目的，其中可以是每小時(shí)、每天或每周，短期使用，或者是否用于治療目的，其中將需要更強(qiáng)的使用組合物的方案，使作用可以持續(xù)數(shù)小時(shí)、天或周，和/或以日為基礎(chǔ)，或在每日中的定時(shí)間隔中。使用的任何劑型應(yīng)該在最少時(shí)間提供最小數(shù)目的單位。確信可以提供有效量或劑量酶的酶活性單位的濃度在鼻和口通道濕性或潮濕環(huán)境液體中可以為約100單位/ml到約100,000單位/ml，并可能為約100單位/ml到約10,000單位/ml。更具體地說，暴露于活性酶單位的時(shí)間可能影響所需每毫升活性酶單位的濃度。應(yīng)該注意分類為“長”或“慢”釋放載體(如，例如，某些鼻噴霧或錠劑)的載體可以具有或提供低濃度的每毫升活性(酶)單位，但持續(xù)時(shí)間長，而“短”或“快”釋放載體(如，例如，含漱劑)可以具有或提供高濃度的每毫升活性(酶)單位，但持續(xù)時(shí)間短。每毫升的活性單位量和暴露持續(xù)時(shí)間取決于感染的性質(zhì)，處理為預(yù)防性還是治療性，以及其它變量。
盡管此處理可以用于任何哺乳動(dòng)物種，本產(chǎn)物優(yōu)選用于人。
此組合物和方法也可以用于治療呼吸道鏈球菌A感染。當(dāng)將此組合物用于鏈球菌A感染時(shí)，溶素噬菌體酶應(yīng)該用于預(yù)防鏈球菌感染。同樣，在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，此方法可以用于治療，并優(yōu)選用于結(jié)核的預(yù)防性處理。在本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，將結(jié)核桿菌噬菌體相關(guān)裂解酶置于吸入器中的載體。載體可以是無菌水或水基質(zhì)，或任何其它用于吸入器中將藥物分散到支氣管腔中的載體。結(jié)核的特異性噬菌體相關(guān)裂解酶接受與其它裂解酶的噬菌體相關(guān)裂解酶相同的條件。具體說，在將酶置于載體系統(tǒng)或口腔運(yùn)送方式之前或同時(shí)，優(yōu)選使酶處于穩(wěn)定緩沖液環(huán)境，從而保持約4.0到約9.0的pH范圍。
穩(wěn)定緩沖液應(yīng)該允許裂解酶的最佳活性。緩沖液可以是還原劑，如二硫蘇糖醇。穩(wěn)定緩沖液也可以是或包括金屬螯合劑，如乙二胺四乙酸二鈉鹽，或者它也可以包含磷酸或檸檬酸-磷酸緩沖液。
為用于結(jié)核的預(yù)防性和治療性處理，結(jié)核相關(guān)的噬菌體相關(guān)裂解酶可以通過直接、間接、載體和特殊方式或這些方式的任意結(jié)合而應(yīng)用。裂解酶的直接應(yīng)用可以通過鼻噴霧、滴鼻液、鼻藥膏、鼻洗液、鼻注射液、鼻填塞材料、支氣管噴霧和吸入器，或通過使用喉錠劑，或通過使用漱口液或含漱劑，或通過使用藥膏間接應(yīng)用于鼻孔、鼻梁或面部或通過這些和相似應(yīng)用方法的結(jié)合。可以給藥的溶素酶形式包括但不限于錠劑、含片、糖果、注射劑、口香糖、片劑、粉末、噴霧、液體、藥膏和氣溶膠。對(duì)于結(jié)核的治療性處理，支氣管噴霧和氣溶膠是最有益的，因?yàn)檫@些載體，或分散組合物的方法，允許裂解酶到達(dá)支氣管和肺。適當(dāng)?shù)倪\(yùn)輸載體可以附著于酶，將酶跨膜運(yùn)送到細(xì)菌位點(diǎn)。
加入裂解酶的錠劑、片劑或口香糖可以含糖、玉米漿、各種顏料、無糖增甜劑、調(diào)味品，任何粘合劑或其結(jié)合。同樣，基于口香糖的產(chǎn)物可以含阿拉伯樹膠、巴西棕櫚臘、檸檬酸、玉米淀粉、食物色素、調(diào)味品、無糖增甜劑、明膠、葡萄糖、甘油、樹膠基團(tuán)、蟲膠、糖精鈉、糖、水、白蠟、纖維素、其它粘合劑及其結(jié)合。
錠劑可以進(jìn)一步包含蔗糖、玉米淀粉、阿拉伯樹膠、黃蓍膠、茴香腦、亞麻子、油性樹脂、礦物油和纖維素、其它粘合劑及其結(jié)合。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，使用糖替代物取代葡萄糖、蔗糖或其它糖。然而，為處理肺部細(xì)菌感染，優(yōu)選使用載體中有裂解酶的吸入器載體。
裂解酶的另一種用途是治療消化道細(xì)菌感染。治療消化道細(xì)菌感染的方法包含用含有效量的至少一種由細(xì)菌特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶，以及一種運(yùn)送該裂解酶到消化道的載體的組合物處理細(xì)菌。在本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，被治療的細(xì)菌感染是由選自利斯特氏菌、沙門氏菌、大腸桿菌和彎曲桿菌的革蘭氏陰性菌導(dǎo)致的。然而，當(dāng)使用適當(dāng)裂解酶時(shí)，此方法和組合物將有效處理其它細(xì)菌。用于消化道的裂解酶可以由嵌合和/或混排裂解酶補(bǔ)充，或者可以自身為嵌合和/或混排裂解酶。同樣，可以包括打孔酶，它也可以是嵌合和/或混排裂解酶。
在一種優(yōu)選實(shí)施方案中，載體選自栓劑灌腸劑、糖漿或腸衣片。這些建議的載體可以用常規(guī)方法制作。然而，它們的生產(chǎn)過程中的唯一不同就是置于載體中的酶必須不能變性。因此，酶應(yīng)該被摻入不含醇，并且被降溫到不導(dǎo)致酶變性的溫度的載體。酶可以在置于栓劑、糖漿或腸衣片之前以凍干狀態(tài)摻入，或可以以脂質(zhì)體形式摻入。置于組合物或載體中的酶應(yīng)該處于具有允許裂解酶活性的pH的環(huán)境中。因此，此組合物的pH優(yōu)選保持在約2到約11的范圍，更優(yōu)選在約4.0到約9.0的范圍，甚至更優(yōu)選在約5.5到約7.5的范圍。如前面所描述的另一種裂解酶一樣，可以使用緩沖液調(diào)節(jié)pH。緩沖液可以含還原劑，更具體說是二硫蘇糖醇。緩沖液也可以是金屬螯合劑，如乙二胺四乙酸二鈉鹽，或者緩沖液可以包含檸檬酸-磷酸緩沖液。對(duì)于本專利描述的所有組合，組合物可以進(jìn)一步包括殺菌劑或抑菌劑作為防腐劑。
裂解酶優(yōu)選以胃腸道濕性環(huán)境中每毫升液體約100到約500,000活性酶單位的濃度存在，優(yōu)選為每毫升液體約100到約100,000活性酶單位，優(yōu)選以胃腸道濕性環(huán)境中每毫升液體約100到約10,000活性酶單位的濃度存在。
栓劑是本領(lǐng)域中公知的，由甘油、脂肪酸和在體溫下溶解的相似類型的物質(zhì)制作。當(dāng)栓劑溶解時(shí)，噬菌體相關(guān)裂解酶將被釋放。
裂解酶的另一種組合物和用途是用于皮膚燒傷和創(chuàng)傷處細(xì)菌感染的治療性或預(yù)防性處理。此組合物包含有效量的至少一種由感染了細(xì)菌特異性噬菌體的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶和運(yùn)送至少一種裂解酶到創(chuàng)傷皮膚的載體。用于局部治療燒傷的裂解酶可以由嵌合和/或混排裂解酶補(bǔ)充，或者可以自身為嵌合和/或混排裂解酶。同樣，可以包括打孔酶，它也可以是嵌合和/或混排裂解酶。應(yīng)用裂解酶的方式包括許多不同類型的載體及其結(jié)合，包括但不限于水成液、醇基液、水溶性凝膠、洗液、藥膏、非水成基質(zhì)、礦物油基質(zhì)、礦物油和礦脂混合物、羊毛脂、脂質(zhì)體、蛋白載體如血清白蛋白或明膠、粉末狀纖維素carmel，及其結(jié)合。含治療劑的載體的運(yùn)送方式包括但不限于涂劑、噴霧、控釋貼劑、吸收液體的擦布，及其結(jié)合。裂解酶可以直接或在其它載體之一中應(yīng)用于繃帶?？噹Э梢允菨竦幕蚋稍锏?，其中酶在繃帶上以凍干形式存在。此應(yīng)用方法對(duì)治療燒傷最有效。
本發(fā)明組合物的載體可以含包括聚合物增稠劑、水、防腐劑、活性表面活性劑或乳化劑、抗氧化劑、防曬劑和溶劑或混合溶劑系統(tǒng)的半固體和類凝膠的載體。美國專利5,863,560(Osborne)討論了可以幫助皮膚暴露于藥物的許多不同載體的結(jié)合。
可以使用的聚合物增稠劑包括本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的，如常用于化妝品和制藥行業(yè)的親水和水醇膠凝劑。親水或水醇膠凝劑優(yōu)選包含″CARBOPOL.RTM.″(B.F.Goodrich，Cleveland，Ohio)，″HYPAN.RTM.″(Kingston Technologies，Dayton，N.J.)，″NATROSOL.RTM″(Aqualon，Wilmington，Del.)，″KLUCEL.RTM.″(Aqualon，Wilmington，Del.)，或″STABILEZE.RTM.″(ISPTechnologies，Wayne，N.J.)。膠凝劑優(yōu)選包含組合物重量的約0.2％到約4％。更具體說，″CARBOPOL.RTM″的優(yōu)選組合物重量百分比為約0.5％到2％，″NATROSOL.RTM″和″KLUCEL.RTM.″的優(yōu)選組合物重量百分比為約0.5％到4％?！錒YPAN.RTM.″和″STABILEZE.RTM.″的優(yōu)選組合物重量百分比為約0.5％到4％?！錍ARBOPOL.RTM.″是通用名為卡波姆(carbomer)的多種交聯(lián)丙烯酸聚合物之一。這些聚合物溶解于水并在用腐蝕性物質(zhì)如氫氧化鈉、氫氧化鉀、三乙醇胺、或胺堿中和后形成透明或略模糊的凝膠。″KLUCEL.RTM.″是一種分散于水并在完全水化后形成均一凝膠的纖維素聚合物。其它優(yōu)選的凝膠聚合物包括羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、MVE/MA癸二烯交聯(lián)聚合物、PVM/MA共聚物，或其結(jié)合。
防腐劑也可以用于本發(fā)明并優(yōu)選包含總組合物約0.05％到約0.5％wt％。防腐劑的使用保證如果產(chǎn)物被微生物污染，配方將防止或減少微生物生長。本發(fā)明中的一些有用的防腐劑包括對(duì)羥苯甲酸甲酯、對(duì)羥苯甲酸丙酯、對(duì)羥苯甲酸丁酯、氯二甲苯酚、苯甲酸鈉、DMDM乙內(nèi)酰脲、3-碘-2-丙基丁基氨基甲酸酯，山梨酸鉀、雙氯苯雙胍己烷二葡萄糖酸，或其結(jié)合。
二氧化鈦可以用作防曬劑作為對(duì)光過敏的預(yù)防。其它的防曬劑包括肉桂酸甲酯。另外，BHA可以用作抗氧化劑，以及防止乙氧基二甘醇和/或氨苯砜由于氧化而變色。另一種抗氧化劑為BHT。
用于本發(fā)明所有實(shí)施方案中的藥物包括抗微生物劑、抗炎劑、抗病毒劑、局部麻醉劑、皮質(zhì)類固醇、破壞性治療劑、抗真菌劑和抗雄激素物質(zhì)。在痤瘡的治療中，可以使用的活性藥物包括抗微生物劑，特別是有抗炎特性的抗微生物劑，如氨苯砜、紅霉素、二甲胺四環(huán)素、四環(huán)素、克林霉素和其它抗生素?？股氐膬?yōu)選重量百分比為0.5％～10％。
局部麻醉劑包括丁卡因、鹽酸丁卡因、利多卡因、鹽酸利多卡因、達(dá)克羅寧、鹽酸達(dá)克羅寧、鹽酸二甲異喹、待布卡因、鹽酸待布卡因、布坦本、和鹽酸普拉莫星。局部麻醉劑的優(yōu)選濃度為總組合物的約0.025～5％wt％。麻醉劑如苯坐卡因也可以以優(yōu)選濃度約2～25wt％使用。
可以使用的皮質(zhì)類固醇包括二丙酸倍他米松、膚輕松、戊酸倍他米松、去炎松、丙酸氯倍他索、去氧米松、二乙酸二氟松、醋酸環(huán)戊酮縮去炎松、丙酮縮氟氫羥龍、戊酸氫化可的松、丁酸氫化可的松和丙酮縮羥強(qiáng)的松龍，推薦濃度為約0.01wt％到約1.0wt％。優(yōu)選皮質(zhì)類固醇如氫化可的松或乙酸甲基強(qiáng)的松龍濃度為約0.2wt％到約5.0wt％。
也可以使用破壞性治療劑如水楊酸或乳酸。優(yōu)選濃度為約2wt％到約40wt％。斑蝥素優(yōu)選以約5wt％到約30wt％的濃度使用?？梢杂糜诒景l(fā)明的典型抗真菌劑及它們的優(yōu)選重量濃度包括硝酸奧昔康唑(0.1％到5.0％)，環(huán)吡酮胺(0.1％到5.0％)，酮康唑(0.1％到5.0％)，硝酸咪康唑(0.1％到5.0％)，硝酸布托康唑(0.1％到5.0％)。對(duì)于脂溢性皮炎、多毛癥、痤瘡和脫發(fā)的局部治療，活性藥物可以包括優(yōu)選重量百分比為約0.5％到10％的抗雄激素藥物如氟利坦或非那甾胺。
一般說來，用幾種藥物的結(jié)合包括抗生素與局部麻醉劑結(jié)合，如硫酸多鏈絲霉素B和硫酸新霉素與丁卡因結(jié)合為局部抗生素凝膠，以便提供抗感染的預(yù)防和減輕疼痛。另一個(gè)例子是使用長壓定與皮質(zhì)類固醇如二丙酸倍他米松結(jié)合治療脫發(fā)?？寡姿幦缈傻乃膳c抗真菌劑如酮康唑結(jié)合治療癬感染也是一個(gè)例子。
在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明包含一種皮膚病學(xué)組合物，它包含約0.5％-10％的卡波姆和約0.5％-10％的溶解狀態(tài)和微粒狀態(tài)的藥物。溶解的藥物具有跨過角質(zhì)層的能力，而微粒狀藥物不能。加入胺堿、鉀、氫氧化物溶液或氫氧化鈉溶液完成凝膠的形成。更具體說，藥物可以包括一種有抗炎特性的抗菌劑氨苯砜。微粒與溶解氨苯砜的優(yōu)選比例為5或更小。
在另一種實(shí)施方案中，本發(fā)明包含約1％的卡波姆，約80-90％的水，約10％的乙氧基二甘醇，約0.2％的對(duì)羥基苯甲酸甲酯，約0.3％到3.0％的氨苯砜，包括微粒氨苯砜和溶解氨苯砜，以及約2％的腐蝕性物質(zhì)。更具體說，卡波姆可以包括″CARBOPOL.RTM.980″，腐蝕性物質(zhì)可以包括氫氧化鈉溶液。
在一種優(yōu)選實(shí)施方案中，此組合物包含氨苯砜和乙氧基二甘醇，允許微粒藥物與溶解藥物的最優(yōu)比例。此比例決定了與保持在角質(zhì)層內(nèi)或在其上面的藥物量相比運(yùn)送的在角質(zhì)層上區(qū)域作用藥物的量。氨苯砜和乙氧基二甘醇系統(tǒng)可以包括與″CARBOPOL.RTM.″凝膠聚合物、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯、二氧化鈦、BHA和中和″CARBOPOL.RTM.″的腐蝕性物質(zhì)結(jié)合的純凈水。
裂解酶的任何載體可以通過常規(guī)方法生產(chǎn)。然而，如果醇用于載體，酶應(yīng)該以微團(tuán)、脂質(zhì)體或“反”脂質(zhì)體存在，預(yù)防酶變性。同樣，當(dāng)裂解酶置于載體，并且載體正在或已被加熱，這種放置應(yīng)在載體稍微冷卻之后進(jìn)行，以避免酶熱變性。在本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，載體為無菌的。
酶可以以液體形式或以凍干狀態(tài)加入這些物質(zhì)，于是它遇到液體時(shí)將被溶解。
治療感染的裂解酶的有效劑量比或數(shù)量，以及治療持續(xù)時(shí)間將部分取決于感染的嚴(yán)重程度、接受者暴露于感染性細(xì)菌的持續(xù)時(shí)間、感染皮膚或組織的平方厘米數(shù)、感染深度、感染的嚴(yán)重程度、以及各種其它變量?？梢詫⒔M合物應(yīng)用于任何部位，從每日一次到幾次，并可以短期或長期應(yīng)用。使用可以持續(xù)數(shù)日或數(shù)周。使用的任何劑型應(yīng)該在最少時(shí)間提供最小數(shù)目的單位。確信可以提供有效數(shù)量或劑量酶的酶活性單位的濃度可以為約100單位/ml組合物到約500,000單位/ml組合物，優(yōu)選為約1000單位/ml組合物到約100,000單位/ml組合物，最優(yōu)選為約10,000單位/ml組合物到約100,000單位/ml組合物。每毫升的活性單位的量和暴露持續(xù)時(shí)間取決于感染性質(zhì)，以及載體允許裂解酶具有的接觸量。應(yīng)該記得酶在液體環(huán)境中時(shí)作用最強(qiáng)。所以，酶的效率部分與載體收集的水分相關(guān)。在另一種優(yōu)選實(shí)施方案中，一種溫和的表面活性劑以有效量加強(qiáng)裂解酶的治療效果。適當(dāng)?shù)臏睾捅砻婊钚詣┌?，但不限于，聚氧乙烯山梨醇和脂肪?Tween系列)的酯，辛基苯氧基聚乙氧基乙醇(Triton-X系列)，n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷，n-辛基-β-D-硫吡喃葡萄糖苷，n-癸基-β-D-吡喃葡萄糖苷，n-癸基-β-D-吡喃葡萄糖苷，以及生物學(xué)上存在的表面活性劑，如脂肪酸、甘油酯、單甘油酯、脫氧膽酸鹽和脫氧膽酸酯。
為促進(jìn)感染的治療，治療劑可以進(jìn)一步包括至少一種也可以加強(qiáng)裂解酶殺菌活性的補(bǔ)充劑。補(bǔ)充劑可以是以有效協(xié)同增強(qiáng)裂解酶治療作用的量存在的青霉素、合成青霉素桿菌肽、甲氧苯青霉素、頭孢菌素、多粘菌素、氯頭孢菌素、頭孢羥氨芐、頭孢孟多酯鈉、頭孢唑啉、頭孢克肟、頭孢美唑、頭孢尼西、頭孢哌酮、頭孢雷特、頭孢噻肟、頭孢氨噻、頭孢替坦、頭孢西丁、頭孢泊肟丙酯、頭孢他定、頭孢去甲噻肟、頭孢曲松、cefriaxone moxalactam、頭孢氨呋肟、頭孢氨芐、頭孢菌素C、頭孢菌素C鈉鹽、頭孢噻酚、頭孢噻酚鈉鹽、頭孢吡硫、頭孢拉定、頭孢呋肟酯、二水合頭孢噻酚、羥羧氧酰胺菌素、loracarbef mafate，螯合劑、及其任何結(jié)合。
另外，治療劑可以進(jìn)一步包含用于治療金黃色葡萄球菌的溶葡萄球菌素。粘液溶解肽，如溶葡萄球菌素被認(rèn)為在治療人金黃色葡萄球菌感染(Schaffner et al.，Yale J.Biol.& Med.，39230(1967))和由金黃色葡萄球菌導(dǎo)致的牛乳腺炎(Sears et al.，J.Dairy Science，71(Suppi.1)244(1988))中有效。一種溶血性葡萄球菌的基因產(chǎn)物溶葡萄球菌素，通過酶促降解細(xì)胞壁的聚甘氨酸交聯(lián)對(duì)金黃色葡萄球菌發(fā)揮抑菌和殺菌作用(Browder et al.，Res.Comn.，19393400(1965))。美國專利3,278,378描述了從葡萄球菌溶解性葡萄球菌(S.Staphylolyticus)，后來命名為溶血性葡萄球菌的培養(yǎng)基中產(chǎn)生溶葡萄球菌素的發(fā)酵方法。其它產(chǎn)生溶葡萄球菌素的方法進(jìn)一步描述于美國專利3,398,056和3,594,284。后來對(duì)溶葡萄球菌素的基因進(jìn)行了克隆和測(cè)序(Recsei et al.，Proc.Natl.Acad.Sc.USA，841127-1131(1987))。重組粘液溶解殺菌蛋白，如r溶葡萄球菌素可以潛在解決與當(dāng)前抗生素治療相關(guān)的問題，這是由于它的靶特異性、低毒性和可能的生物活性基團(tuán)還原。另外，溶葡萄球菌素對(duì)非分裂細(xì)胞也是有活性的，而大多數(shù)抗生素要求活躍分裂的細(xì)胞介導(dǎo)它們的作用(Dixon et al.，Yale J.Biology and Medicine，4162-68(1968))。溶葡萄球菌素和溶素酶的結(jié)合可以在列出的抗生素存在或不存在時(shí)使用。在同一治療劑中同時(shí)使用溶葡萄球菌素和溶素酶有一定程度增加的意義。通常，當(dāng)機(jī)體有細(xì)菌感染時(shí)，一種細(xì)菌導(dǎo)致的感染使機(jī)體變?nèi)趸蚋淖儥C(jī)體的菌群，允許其它潛在病原菌感染機(jī)體。有時(shí)共同感染機(jī)體的細(xì)菌之一是金黃色葡萄球菌。許多金黃色葡萄球菌株產(chǎn)生青霉素酶，使得葡萄球菌、鏈球菌和其它革蘭氏陽性細(xì)菌不被常規(guī)抗生素殺滅。因此，溶素和溶葡萄球菌素的使用，可能與抗生素結(jié)合，可以作為細(xì)菌感染的最迅速和有效的處理。在另一種優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明可以包括變?nèi)芫睾腿芫浮?br> 在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，假單孢菌、葡萄球菌和鏈球菌的裂解酶可以一起或單獨(dú)摻入載體或用于燒傷病人的繃帶，或用于溶液或霜載體。
裂解酶的另一種用途是用于陰道感染的預(yù)防或治療性處理。此處理包含用有效量的至少一種由細(xì)菌特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶治療陰道感染，其中裂解酶被摻入載體放置于陰道。用于治療陰道感染的裂解酶可以由嵌合和/或混排裂解酶補(bǔ)充，或者可以自身為嵌合和/或混排裂解酶。同樣，可以包括打孔酶，它也可以是嵌合和/或混排裂解酶。優(yōu)選載體為棉塞或陰道灌洗液。盡管不夠有效，墊也可用作載體。盡管可以用此組合物和方法治療任何數(shù)目的細(xì)菌，認(rèn)為此治療組合物和方法的最優(yōu)用途是治療大腸桿菌和鏈球菌B感染。由B族鏈球菌導(dǎo)致的陰道感染可以引起新生兒腦膜炎，導(dǎo)致腦損傷和早產(chǎn)死亡。摻入棉塞的B族鏈球菌的特異性裂解酶將去除B族生物體而不干擾正常菌群，使婦女在抗生素治療后不會(huì)被酵母菌感染。盡管治療性使用也是可行的，裂解酶在陰道中的使用最好提供預(yù)防性作用。
為產(chǎn)生含酶的墊或棉塞，裂解酶可以在溶液中應(yīng)用于棉塞并允許干燥?？梢杂帽绢I(lǐng)域公知的其它方法將裂解酶摻入墊或棉塞，包括凍干或噴霧。也可以使棉塞或墊保持略微潮濕，并置于密封包裝材料中直到準(zhǔn)備使用。在這種情況下，殺菌和抑菌化合物和抑制劑應(yīng)該存在于棉塞和墊中。用于將裂解酶摻入墊或棉塞的方法可以是藥品摻入領(lǐng)域中公知的方法之一。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，插入裂解酶的陰道栓可以是標(biāo)準(zhǔn)陰道栓，由甘油酯、藻酸鹽、淀粉、其它標(biāo)準(zhǔn)粘合劑及其任意結(jié)合。
當(dāng)用棉塞作為載體時(shí)，最好將棉塞插入陰道并使其留在其中最多到12小時(shí)，從而使酶在陰道中分布。
對(duì)于其它裂解酶，pH優(yōu)選保持在約4.0到約9.0的范圍，更優(yōu)選保持在約5.5到約7.5的范圍。象前面描述的另一種裂解酶一樣，可以通過使用緩沖液調(diào)節(jié)pH。緩沖液可以含還原劑，更具體說是二硫蘇糖醇。緩沖液也可以含金屬螯合劑，如乙二胺四乙酸二鈉鹽或緩沖液可以是檸檬酸-磷酸緩沖液。對(duì)于本專利描述的所有組合物，組合可以進(jìn)一步包括殺菌劑或抑菌劑作為防腐劑。
裂解酶優(yōu)選以陰道濕性環(huán)境中每毫升液體約100到約500,000活性酶單位的濃度存在，優(yōu)選每毫升液體約100到約100,000活性酶單位，優(yōu)選以陰道濕性環(huán)境中每毫升液體約100到約10,000活性酶單位的濃度存在。
本發(fā)明的另一種用途是用于眼感染的預(yù)防和治療性處理。治療的方法包括給予含有效量的至少一種由細(xì)菌特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶和可以安全應(yīng)用于眼的載體的眼藥水，其中載體含裂解酶。在本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方案中，治療的細(xì)菌為嗜血桿菌或葡萄球菌。眼藥水以等滲溶液的形式存在。應(yīng)該調(diào)節(jié)溶液的pH，使得沒有眼刺激，眼刺激會(huì)導(dǎo)致其它生物體感染的可能性，并可能損害眼。盡管pH范圍應(yīng)該與其它裂解酶的pH范圍相同，最適pH應(yīng)該是6.0到7.5。同樣，用該也使用前面描述的用于其它裂解酶的緩沖液類型。可以將其它適用于眼藥水的抗生素加入含裂解酶的組合物。也可以加入殺菌和抑菌化合物。如前面所敘述的，裂解酶可以由嵌合和/或混排裂解酶補(bǔ)充，或者可以自身為嵌合和/或混排裂解酶。同樣，可以包括打孔酶，它也可以是嵌合和/或混排裂解酶。
應(yīng)記住所有酶都可用于酶的特異性細(xì)菌的預(yù)防和治療性處理。
也應(yīng)該記住載體可以有一種以上裂解酶。例如，咽喉錠劑可以僅含一種裂解酶(裂解導(dǎo)致“鏈球菌”喉的鏈球菌A株)，或者它也可以包括嗜血桿菌的裂解酶。同樣，治療燒傷和創(chuàng)傷，或皮膚感染的載體可以僅含一種裂解酶，或治療假單孢菌、鏈球菌、葡萄球菌或其它一些細(xì)菌的裂解酶的結(jié)合。
裂解酶也可以用于抗齲齒。具體地說，可以將突變鏈球菌的特異性裂解酶摻入牙膏或漱口液。同樣，也可將裂解酶摻入口香糖或錠劑。可以使用任何其它使口腔、牙床和牙齒暴露于裂解酶的載體。
也可以在牙粉中以凍干或干燥形式摻入裂解酶。如果裂解酶將用于漱口液，漱口液優(yōu)選不含醇，以免酶變性。當(dāng)與牙膏或漱口液混合時(shí)，酶也可以以脂質(zhì)體的形式存在。每毫升牙膏或漱口液中的酶單位濃度可以為100單位/毫升組合物到約500,000單位/毫升組合物，優(yōu)選為1000單位/毫升組合物到約100,000單位/毫升組合物，最優(yōu)選為10,000單位/毫升組合物到約100,000單位/毫升組合物。牙膏和漱口液的pH應(yīng)該在允許酶的最優(yōu)作用的范圍，并且不使牙膏或漱口液的使用者感到不適。同樣，與裂解酶的其它用途一樣，用于治療齲齒的裂解酶可以由嵌合和/或混排裂解酶補(bǔ)充，或者可以自身為嵌合和/或混排裂解酶。同樣，可以包括打孔酶，它也可以是嵌合和/或混排裂解酶。
根據(jù)上述教導(dǎo)，本發(fā)明的許多修飾和變化都是可能的。所以，應(yīng)該理解，在從屬權(quán)利要求的范圍內(nèi)，應(yīng)該保護(hù)本發(fā)明，而不需要特別描述。
權(quán)利要求
1.一種用于細(xì)菌感染的預(yù)防性或治療性處理的方法，包含給予感染部位有效量的至少一種由細(xì)菌的特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶的修飾譯本，其中所述至少一種裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶及其結(jié)合。
2.權(quán)利要求1的方法，進(jìn)一步包含給予至少一種打孔酶和至少一種裂解酶。
3.權(quán)利要求2的方法，其中所述至少一種打孔酶為混排打孔酶。
4.權(quán)利要求2的方法，其中打孔酶為嵌合打孔酶。
5.權(quán)利要求1的方法，進(jìn)一步包含至少一種既不是混排裂解酶也不是嵌合裂解酶的裂解酶。
6.權(quán)利要求1的方法，進(jìn)一步包含在適于運(yùn)送裂解酶到感染部位的載體中運(yùn)送修飾裂解酶。
7.權(quán)利要求1的方法，其中至少一種修飾裂解酶用于流感嗜血桿菌的治療。
8.權(quán)利要求1的方法，其中至少一種修飾裂解酶用于假單孢菌的治療。
9.權(quán)利要求1的方法，其中至少一種修飾裂解酶用于肺炎鏈球菌的治療。
10.權(quán)利要求1的方法，其中至少一種修飾裂解酶用于fasciae鏈球菌的治療。
11.權(quán)利要求1的方法，其中至少一種修飾裂解酶用于利斯特氏菌的治療。
12.權(quán)利要求1的方法，其中至少一種修飾裂解酶用于沙門氏菌的治療。
13.權(quán)利要求1的方法，其中至少一種修飾裂解酶用于大腸桿菌的治療。
14.權(quán)利要求1的方法，其中至少一種修飾裂解酶用于彎曲桿菌的治療。
15.權(quán)利要求1的方法，其中至少一種修飾裂解酶用于假單孢菌的治療。
16.權(quán)利要求1的方法，其中至少一種修飾裂解酶用于突變鏈球菌的治療。
17.權(quán)利要求1的方法，其中至少一種修飾裂解酶用于結(jié)核桿菌的治療。
18.權(quán)利要求1的方法，其中至少一種修飾裂解酶用于鏈球菌的治療。
19.權(quán)利要求6的方法，其中載體為吸入劑。
20.權(quán)利要求6的方法，其中載體為局部霜?jiǎng)?br> 21.權(quán)利要求6的方法，其中載體為鼻噴霧。
22.權(quán)利要求6的方法，其中載體為糖漿。
23.權(quán)利要求6的方法，其中載體為片劑。
24.權(quán)利要求6的方法，其中載體為棉塞。
25.權(quán)利要求6的方法，其中載體為栓劑。
26.權(quán)利要求6的方法，其中載體為眼藥水。
27.權(quán)利要求6的方法，其中載體為糖果。
28.權(quán)利要求6的方法，其中載體為口香糖。
29.權(quán)利要求6的方法，其中載體為錠劑。
30.權(quán)利要求6的方法，其中載體為含片。
31.權(quán)利要求6的方法，其中載體為粉末。
32.權(quán)利要求6的方法，其中載體為氣溶膠。
33.權(quán)利要求6的方法，其中載體為液體。
34.權(quán)利要求6的方法，其中載體為液體噴霧。
35.權(quán)利要求6的方法，其中載體為繃帶。
36.權(quán)利要求6的方法，其中載體為牙膏。
37.權(quán)利要求6的方法，其中載體為漱口液。
38.一種用于上呼吸道細(xì)菌感染的預(yù)防性或治療性處理的方法，包含給予含有效量的由細(xì)菌的特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶的修飾譯本的組合物，其中所述至少一種裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶及其結(jié)合。
39.權(quán)利要求38的方法，進(jìn)一步包含給予一種打孔酶和所述的修飾裂解酶。
40.權(quán)利要求39的方法，其中打孔酶為混排打孔酶。
41.權(quán)利要求39的方法，其中打孔酶為嵌合打孔酶。
42.權(quán)利要求38的方法，進(jìn)一步包含至少一種既不是混排裂解酶也不是嵌合裂解酶的裂解酶。
43.權(quán)利要求38的方法，進(jìn)一步包含在適于運(yùn)送裂解酶到口腔、咽喉或鼻通道的載體中運(yùn)送修飾裂解酶。
44.權(quán)利要求38的方法，其中被治療的細(xì)菌為肺炎鏈球菌。
45.權(quán)利要求38的方法，其中被治療的細(xì)菌為流感嗜血桿菌。
46.權(quán)利要求43的方法，其中載體為糖果、口香糖、錠劑、含片、片劑、粉末、氣溶膠、液體或液體噴霧。
47.權(quán)利要求38的方法，其中組合物進(jìn)一步包含使組合物pH保持在約4.0～約9.0的緩沖液。
48.權(quán)利要求48的方法，其中緩沖液使組合物pH保持在約5.5～約7.5。
49.權(quán)利要求47的方法，其中緩沖液包含還原劑。
50.權(quán)利要求49的方法，其中還原劑為二硫蘇糖醇。
51.權(quán)利要求47的方法，其中緩沖液包含金屬螯合劑。
52.權(quán)利要求51的方法，其中金屬螯合劑為乙二胺四乙酸二鈉鹽。
53.權(quán)利要求47的方法，其中緩沖液為檸檬酸-磷酸緩沖液。
54.權(quán)利要求38的方法，其中所述至少一種修飾裂解酶為凍干的。
55.權(quán)利要求43的方法，其中載體進(jìn)一步包含增甜劑。
56.權(quán)利要求38的方法，進(jìn)一步包含給予鼻或口通道濕性環(huán)境中每毫升液體約100到約100,000活性酶單位的濃度。
57.權(quán)利要求56的方法，進(jìn)一步包含給予鼻或口通道濕性環(huán)境中每毫升液體約100到約10,000活性酶單位的濃度。
58.權(quán)利要求38的方法，進(jìn)一步包含將組合物用于鏈球菌感染的治療性處理。
59.權(quán)利要求38的方法，進(jìn)一步包含將組合物用于鏈球菌感染的預(yù)防性處理。
60.權(quán)利要求38的方法，進(jìn)一步包含將組合物用于嗜血桿菌感染的預(yù)防性處理。
61.權(quán)利要求38的方法，進(jìn)一步包含將組合物用于嗜血桿菌感染的治療性處理。
62.一種用于上呼吸道細(xì)菌感染的預(yù)防性或治療性處理的組合物，包含有效量的由細(xì)菌的特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶的修飾譯本，其中所述至少一種裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶及其結(jié)合；以及一種運(yùn)送所述至少一種裂解酶到口腔、咽喉或鼻通道的載體。
63.權(quán)利要求62的組合物，進(jìn)一步包含一種打孔酶。
64.權(quán)利要求63的組合物，其中打孔酶為混排打孔酶。
65.權(quán)利要求63的組合物，其中打孔酶為嵌合打孔酶。
66.權(quán)利要求62的組合物，其中被治療的細(xì)菌為肺炎鏈球菌。
67.權(quán)利要求62的組合物，其中被治療的細(xì)菌為流感嗜血桿菌。
68.權(quán)利要求62的組合物，其中載體選自糖果、口香糖、錠劑、含片、片劑、粉末、氣溶膠、液體或液體噴霧。
69.權(quán)利要求62的組合物，其中組合物進(jìn)一步包含使組合物pH保持在約4.0～約9.0的緩沖液。
70.權(quán)利要求62的組合物，其中緩沖液使組合物pH保持在約5.5～約7.5。
71.權(quán)利要求62的組合物，進(jìn)一步包含殺菌或抑菌劑作為防腐劑。
72.權(quán)利要求62的組合物，其中修飾裂解酶為凍干的。
73.權(quán)利要求62的組合物，其中所述至少一種裂解酶以鼻或口通道濕性環(huán)境中每毫升液體約100到約100,000活性酶單位的濃度存在。
74.權(quán)利要求71的組合物，其中所述至少一種裂解酶以鼻或口通道濕性環(huán)境中每毫升液體約100到約10,000活性酶單位的濃度存在。
75.一種用于消化道細(xì)菌感染的治療的方法，包含給予消化道含有效量的由細(xì)菌的特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶的修飾譯本的組合物，其中所述至少一種裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶及其結(jié)合。
76.權(quán)利要求75的方法，進(jìn)一步包含給予一種打孔酶和所述修飾裂解酶。
77.權(quán)利要求76的方法，其中打孔酶為混排打孔酶。
78.權(quán)利要求76的方法，其中打孔酶為嵌合打孔酶。
79.權(quán)利要求75的方法，進(jìn)一步包含在適于運(yùn)送裂解酶到消化道的載體中運(yùn)送所述裂解酶。
80.權(quán)利要求75的方法，其中細(xì)菌感染由選自利斯特氏菌、沙門氏菌、大腸桿菌和彎曲桿菌的革蘭氏陰性細(xì)菌導(dǎo)致。
81.權(quán)利要求73的方法，其中載體選自栓劑灌腸劑、糖漿和腸衣片。
82.一種用于治療消化道細(xì)菌感染的組合物，包含有效量的由細(xì)菌的特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶的修飾譯本，其中所述至少一種裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶及其結(jié)合；以及一種運(yùn)送裂解酶到消化道的載體。
83.權(quán)利要求82的組合物，進(jìn)一步包含一種打孔酶。
84.權(quán)利要求83的組合物，其中打孔酶為混排打孔酶。
85.權(quán)利要求84的組合物，其中打孔酶為嵌合打孔酶。
86.權(quán)利要求82的組合物，其中治療的細(xì)菌選自利斯特氏菌、沙門氏菌、大腸桿菌和彎曲桿菌。
87.權(quán)利要求82的組合物，其中運(yùn)送所述至少一種修飾裂解酶到消化道的載體選自栓劑灌腸劑、糖漿和腸衣片。
88.權(quán)利要求82的組合物，其中組合物進(jìn)一步包含使組合物pH保持在約4.0～約9.0的緩沖液。
89.權(quán)利要求82的組合物，其中所述至少一種修飾裂解酶以消化道濕性環(huán)境中每毫升液體約100到約100,000活性酶單位的濃度存在。
90.權(quán)利要求89的組合物，其中所述至少一種修飾裂解酶以消化道濕性環(huán)境中每毫升液體約100到約10,000活性酶單位的濃度存在。
91.一種用于皮膚燒傷或創(chuàng)傷細(xì)菌感染的治療性或預(yù)防性處理的組合物，包含有效量的由細(xì)菌的特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶的修飾譯本，其中所述至少一種裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶及其結(jié)合；以及一種運(yùn)送所述至少一種裂解酶到皮膚的載體。
92.權(quán)利要求91的組合物，進(jìn)一步包含一種打孔酶。
93.權(quán)利要求92的組合物，其中打孔酶為混排打孔酶。
94.權(quán)利要求92的組合物，其中打孔酶為嵌合打孔酶。
95.權(quán)利要求91的組合物，其中載體為繃帶。
96.權(quán)利要求91的組合物，進(jìn)一步包含將此組合物用于細(xì)菌感染的預(yù)防性處理。
97.權(quán)利要求91的組合物，進(jìn)一步包含將此組合物用于細(xì)菌感染的治療性處理。
98.權(quán)利要求91的組合物，其中治療的細(xì)菌為假單孢菌。
99.權(quán)利要求91的組合物，其中治療的細(xì)菌為葡萄球菌。
100.權(quán)利要求91的組合物，其中治療的細(xì)菌為葡萄球菌和假單孢菌。
101.一種治療性或預(yù)防性處理皮膚燒傷或創(chuàng)傷細(xì)菌感染的方法，包含給予皮膚感染區(qū)含有效量的由細(xì)菌的特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶的修飾譯本的組合物，其中所述至少一種裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶及其結(jié)合。
102.權(quán)利要求101的組合物，進(jìn)一步包含一種打孔酶。
103.權(quán)利要求102的組合物，其中打孔酶為混排打孔酶。
104.權(quán)利要求102的組合物，其中打孔酶為嵌合打孔酶。
105.權(quán)利要求101的方法，進(jìn)一步包含在適于運(yùn)送裂解酶到皮膚的載體中運(yùn)送所述至少一種修飾裂解酶。
106.權(quán)利要求105的方法，其中載體為繃帶。
107.權(quán)利要求101的方法，進(jìn)一步包含將此組合物用于細(xì)菌感染的預(yù)防性處理。
108.權(quán)利要求101的方法，進(jìn)一步包含將此組合物用于細(xì)菌感染的治療性處理。
109.權(quán)利要求101的方法，其中治療的細(xì)菌為假單孢菌。
110.權(quán)利要求101的方法，其中治療的細(xì)菌為葡萄球菌。
111.權(quán)利要求101的方法，其中治療的細(xì)菌為葡萄球菌和假單孢菌。
112.一種預(yù)防性或治療性處理陰道感染的方法，包含給予陰道含有效量的由細(xì)菌的特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶的修飾譯本的組合物，其中所述至少一種裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶及其結(jié)合。
113.權(quán)利要求112的方法，進(jìn)一步包含給予一種打孔酶和所述修飾裂解酶。
114.權(quán)利要求11 3的方法，其中打孔酶為混排打孔酶。
115.權(quán)利要求113的方法，其中打孔酶為嵌合打孔酶。
116.權(quán)利要求111的方法，進(jìn)一步包含在適于運(yùn)送裂解酶到陰道的載體中運(yùn)送修飾裂解酶。
117.權(quán)利要求115的方法，其中載體被放置于陰道。
118.權(quán)利要求116的方法，其中載體為棉塞。
119.權(quán)利要求116的方法，其中載體為墊。
120.權(quán)利要求116的方法，其中載體為灌洗液。
121.權(quán)利要求112的方法，其中裂解酶特異性針對(duì)B族鏈球菌。
122.一種用于陰道感染的預(yù)防性或治療性處理的組合物，包含有效量的由細(xì)菌的特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶的修飾譯本的組合物，其中所述至少一種裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶及其結(jié)合，以及一種運(yùn)送裂解酶到陰道的載體。
123.權(quán)利要求112的方法，進(jìn)一步包含給予一種打孔酶和所述修飾裂解酶。
124.權(quán)利要求123的方法，其中打孔酶為混排打孔酶。
125.權(quán)利要求122的方法，其中打孔酶為嵌合打孔酶。
126.權(quán)利要求122的組合物，其中載體為棉塞。
127.權(quán)利要求122的組合物，其中載體為灌洗液。
128.權(quán)利要求122的組合物，其中載體為墊。
129.權(quán)利要求122的組合物，其中裂解酶特異性針對(duì)B族鏈球菌。
130.一種預(yù)防性或治療性處理眼感染的方法，包含給予眼含有效量的由細(xì)菌的特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶的修飾譯本的組合物，其中所述至少一種裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶及其結(jié)合。
131.權(quán)利要求130的方法，進(jìn)一步包含給予一種打孔酶和所述修飾裂解酶。
132.權(quán)利要求131的方法，其中打孔酶為混排打孔酶。
133.權(quán)利要求131的方法，其中打孔酶為嵌合打孔酶。
134.權(quán)利要求130的方法，進(jìn)一步包含在適于運(yùn)送裂解酶到眼的載體中運(yùn)送修飾裂解酶。
135.權(quán)利要求130的方法，其中治療的細(xì)菌為嗜血桿菌。
136.權(quán)利要求130的方法，其中治療的細(xì)菌為葡萄球菌。
137.權(quán)利要求134的方法，其中載體為眼藥水。
138.權(quán)利要求134的方法，其中載體為洗眼液。
139.權(quán)利要求138的方法，其中該溶液為等滲溶液。
140.一種用于眼感染的預(yù)防性或治療性處理的組合物，包含有效量的由細(xì)菌的特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶的修飾譯本的組合物，其中所述至少一種裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶及其結(jié)合，以及一種運(yùn)送裂解酶到眼的載體。
141.權(quán)利要求140的組合物，進(jìn)一步包含給予一種打孔酶和所述修飾裂解酶。
142.權(quán)利要求141的組合物，其中打孔酶為混排打孔酶。
143.權(quán)利要求141的組合物，其中打孔酶為嵌合打孔酶。
144.權(quán)利要求140的組合物，其中治療的細(xì)菌為嗜血桿菌。
145.權(quán)利要求140的組合物，其中治療的細(xì)菌為葡萄球菌。
146.權(quán)利要求140的組合物，其中載體為等滲溶液。
147.權(quán)利要求146的組合物，其中等滲溶液在眼藥水分配器中。
148.一種預(yù)防性或治療性處理皮膚感染的方法，包含將含有效量的由細(xì)菌的特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶的修飾譯本的組合物局部給予皮膚感染區(qū)，其中所述至少一種裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶及其結(jié)合。
149.權(quán)利要求148的方法，進(jìn)一步包含給予一種打孔酶和所述修飾裂解酶。
150.權(quán)利要求149的方法，其中打孔酶為混排打孔酶。
151.權(quán)利要求149的方法，其中打孔酶為嵌合打孔酶。
152.權(quán)利要求148的方法，進(jìn)一步包含在可藥用載體中運(yùn)送組合物。
153.權(quán)利要求152的方法，其中載體選自水成液、醇基質(zhì)、水溶性凝膠、洗液、藥膏、非水成基質(zhì)、礦物油基質(zhì)、礦物油和礦脂的混合物、羊毛脂、脂質(zhì)體、親水膠凝劑、交聯(lián)丙烯酸聚合物(卡波姆)、纖維素聚合物、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、MVE/MA癸二烯交聯(lián)聚合物、PVM/MA共聚物，及其任意結(jié)合。
154.權(quán)利要求152的方法，其中組合物的運(yùn)送形式選自噴霧、涂劑、控釋貼劑、吸收液體的擦布及其任意結(jié)合。
155.權(quán)利要求148的方法，其中裂解酶處于具有允許溶素酶活性的pH的環(huán)境。
156.權(quán)利要求155的方法，其中進(jìn)一步包含使組合物pH保持在約4.0～約9.0的緩沖液。
157.權(quán)利要求148的方法，其中組合物進(jìn)一步包含以有效加強(qiáng)裂解酶作用的量存在的溫和表面活性劑。
158.權(quán)利要求148的方法，其中組合物進(jìn)一步包含至少一種加強(qiáng)裂解酶殺菌活性的補(bǔ)充劑，該補(bǔ)充劑選自以有效協(xié)同增強(qiáng)裂解酶作用的量存在的青霉素、合成青霉素桿菌肽、甲氧苯青霉素、頭孢菌素、多粘菌素、氯頭孢菌素、頭孢羥氨芐、頭孢孟多酯鈉、頭孢唑啉、頭孢克肟、頭孢美唑、頭孢尼西、頭孢哌酮、頭孢雷特、頭孢塞肟、頭孢氨塞、頭孢替坦、頭孢西丁、頭孢泊肟丙酯、頭孢他定、頭孢去甲噻肟、頭孢曲松、cefriaxone moxalactam、頭孢氨呋肟、頭孢氨芐、頭孢菌素C、頭孢菌素C鈉鹽、頭孢噻酚、頭孢噻酚鈉鹽、頭孢吡硫、頭孢拉定、頭孢呋肟酯、二水合頭孢噻酚、羥羧氧酰胺菌素、loracarbef.mafate，螯合劑。
159.權(quán)利要求148的方法，其中組合物進(jìn)一步包含治療金黃色葡萄球菌的溶葡萄球菌素。
160.權(quán)利要求148的方法，其中裂解酶以每毫升約100到約500,000單位的量存在。
161.一種治療皮膚感染的組合物，包含有效量的由細(xì)菌的特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶的修飾譯本，其中所述至少一種裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶及其結(jié)合；及載體。
162.權(quán)利要求161的組合物，其中載體選自水成液、醇基質(zhì)、水溶性凝膠、洗液、藥膏、非水成基質(zhì)、礦物油基質(zhì)、礦物油和礦脂的混合物、羊毛脂、脂質(zhì)體、親水膠凝劑、交聯(lián)丙烯酸聚合物(卡波姆)、纖維素聚合物、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、MVE/MA癸二烯交聯(lián)聚合物、PVM/MA共聚物，及其任意結(jié)合。
163.權(quán)利要求161的組合物，其中組合物以選自噴霧、涂劑、控釋貼劑、吸收液體的擦布及其任意結(jié)合的形式存在。
164.權(quán)利要求161的組合物，其中至少一種裂解酶處于具有允許裂解酶活性的pH的環(huán)境。
165.權(quán)利要求164的組合物，其中組合物進(jìn)一步包含使組合物pH保持在約4.0～約9.0的緩沖液。
166.權(quán)利要求165的組合物，其中緩沖液使組合物的pH保持在約5.5到約7.5。
167.權(quán)利要求166的組合物，進(jìn)一步包含殺菌或抑菌劑作為防腐劑。
168.權(quán)利要求167的組合物，進(jìn)一步包含以有效加強(qiáng)組合物治療作用的量存在的表面活性劑。
169.權(quán)利要求161的組合物，其中組合物進(jìn)一步包含至少一種加強(qiáng)裂解酶殺菌活性的補(bǔ)充劑，該補(bǔ)充劑選自以有效協(xié)同增強(qiáng)裂解酶作用的量存在的青霉素、合成青霉素桿菌肽、甲氧苯青霉素、頭孢菌素、多粘菌素、氯頭孢菌素、頭孢羥氨芐、頭孢孟多酯鈉、頭孢唑啉、頭孢克肟、頭孢美唑、頭孢尼西、頭孢哌酮、頭孢雷特、頭孢塞肟、頭孢氨塞、頭孢替坦、頭孢西丁、頭孢泊肟丙酯、頭孢他定、頭孢去甲噻肟、頭孢曲松、cefriaxone moxalactam、頭孢氨呋肟、頭孢氨芐、頭孢菌素C、頭孢菌素C鈉鹽、頭孢噻酚、頭孢噻酚鈉鹽、頭孢吡硫、頭孢拉定、頭孢呋肟酯、二水合頭孢噻酚、羥羧氧酰胺菌素、loracarbef.mafate，螯合劑，及其結(jié)合。
170.權(quán)利要求161的組合物，其中組合物進(jìn)一步包含治療金黃色葡萄球菌的溶葡萄球菌素。
171.權(quán)利要求161的組合物，其中組合物進(jìn)一步包含溶菌酶。
172.權(quán)利要求161的組合物，進(jìn)一步包含至少一種乳化劑。
173.權(quán)利要求161的組合物，進(jìn)一步包含至少一種抗氧化劑。
174.權(quán)利要求161的組合物，進(jìn)一步包含至少一種防曬劑。
175.權(quán)利要求161的組合物，進(jìn)一步包含至少一種抗炎劑。
176.一種用于上呼吸道細(xì)菌感染的治療性或預(yù)防性處理的組合物，包含有效量的由細(xì)菌的特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶的修飾譯本，其中所述至少一種裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶及其結(jié)合，以及吸入器中的可藥用載體，允許給予支氣管和肺至少一種裂解酶。
177.權(quán)利要求176的方法，進(jìn)一步包含給予一種打孔酶和所述修飾裂解酶。
178.權(quán)利要求177的方法，其中打孔酶為混排打孔酶。
179.權(quán)利要求177的方法，其中打孔酶為嵌合打孔酶。
180.權(quán)利要求176組合物，其中組合物用于上呼吸道系統(tǒng)細(xì)菌感染的治療性處理。
181.權(quán)利要求176組合物，其中組合物用于上呼吸道系統(tǒng)細(xì)菌感染的預(yù)防性處理。
182.一種用于口腔或牙齒細(xì)菌感染的治療性或預(yù)防性處理的組合物，包含有效量的由細(xì)菌的特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶的修飾譯本，其中所述至少一種裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶及其結(jié)合，以及用于至少一種裂解酶的局部應(yīng)用的可藥用載體。
183.權(quán)利要求182組合物，進(jìn)一步包含給予一種打孔酶和所述修飾裂解酶。
184.權(quán)利要求183的方法，其中打孔酶為混排打孔酶。
185.權(quán)利要求183的方法，其中打孔酶為嵌合打孔酶。
186.權(quán)利要求182組合物，其中組合物用于齲齒的預(yù)防性處理。
187.權(quán)利要求182組合物，其中組合物用于齲齒的治療性處理。
188.權(quán)利要求182組合物，其中載體為牙膏。
189.權(quán)利要求182組合物，其中載體為漱口液。
190.權(quán)利要求182組合物，其中載體為口香糖。
191.權(quán)利要求182組合物，其中載體為錠劑。
192.權(quán)利要求182組合物，其中治療的細(xì)菌為突變鏈球菌。
193.權(quán)利要求182組合物，其中所述裂解酶以每毫升約100到約500,000單位的量存在。
194.權(quán)利要求193組合物，其中所述裂解酶以每毫升約10,000到約100,000單位的量存在。
全文摘要
公開了一種用于細(xì)菌感染的預(yù)防性和治療性處理的方法,包含用有效量的由細(xì)菌的特異性噬菌體感染的細(xì)菌產(chǎn)生的裂解酶的修飾譯本,其中所述至少一種裂解酶的修飾譯本選自混排裂解酶、嵌合裂解酶,其中裂解酶處于具有允許裂解酶活性的pH的環(huán)境;以及運(yùn)送裂解酶的載體處理個(gè)體。另外,用于將膜打孔的打孔酶也可以包括在組合物中。此方法和組合物可以用于處理上呼吸道感染、皮膚感染、創(chuàng)傷、以及燒傷、陰道感染、眼感染、腸道疾病和牙齒問題。
文檔編號(hào)A61P31/04GK1390134SQ00815660
公開日2003年1月8日 申請(qǐng)日期2000年9月14日 優(yōu)先權(quán)日1999年9月14日
發(fā)明者V·菲舍蒂, L·洛米斯 申請(qǐng)人:新眼界診斷公司