專利名稱：鏈球菌感染的局部治療的制作方法
背景技術(shù)：
1.發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明公開了一種通過(guò)使用與適合真皮組織局部應(yīng)用的載體相混合的溶素酶局部治療鏈球菌感染的方法和組合物。
2.現(xiàn)有技術(shù)的描述鏈球菌屬包括廣泛的致病的及共生的革蘭氏陽(yáng)性菌，后者被發(fā)現(xiàn)棲生于廣泛的宿主，包括人類，馬，豬以及牛。在宿主內(nèi)，鏈球菌通常被發(fā)現(xiàn)在口腔黏膜表面，鼻孔以及咽部集群。然而，在一定的環(huán)境中，它們也能居住于皮膚，心臟或肌肉組織。
人類的致病鏈球菌包括釀膿鏈球菌，肺炎鏈球菌以及糞鏈球菌。盡管A組鏈球菌可以存在于咽喉中或皮膚上而不引起疾病癥狀，它們也可以引起輕到重度，甚至威脅到生命的感染。在致病溶血性鏈球菌中，釀膿鏈球菌，或A組鏈球菌已被暗示為急性咽炎(“鏈球菌咽喉”)，膿庖病，風(fēng)濕熱，猩紅熱，腎小球腎炎，以及侵襲筋膜炎的致病劑。壞死性筋膜炎(有時(shí)被傳媒描述為“食肉細(xì)菌”)是一種肌肉和脂肪組織破壞性的感染。當(dāng)細(xì)菌通過(guò)被感染個(gè)體的屏障時(shí)發(fā)生侵襲性A組鏈球菌感染。每年在美國(guó)大約有10,000到15,000例的侵襲性GAS疾病發(fā)生，導(dǎo)致超過(guò)2,000人死亡。CDC估計(jì)在美國(guó)每年有500到1,500例壞死性筋膜炎以及2,000到3,000例鏈球菌中毒性休克綜合征發(fā)生。大約20％的壞死性筋膜炎患者死亡，60％的鏈球菌中毒性休克綜合征患者死亡。大約10到15％的其他形式的侵襲性A組鏈球菌疾病的患者死亡。
此外，C組鏈球菌能在皮膚破潰處引起蜂窩織炎，雖然蜂窩織炎通常情況下與金黃色葡萄球菌相關(guān)。蜂窩織炎能導(dǎo)致死亡，特別是在老年人或身體已經(jīng)很虛弱的個(gè)體。
第一個(gè)證實(shí)鏈球菌血清學(xué)和免疫學(xué)分組的人是RebeccaLancefield博士，(Lancefield，R.C.，“人類和其他組的溶血性鏈球菌的血清學(xué)區(qū)別”，J.EXP.Med.，Vol.57，pp571-5951933)，其后分組體系被命名。A組鏈球菌的鑒定是以被發(fā)現(xiàn)作為生物體細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)一部分的重復(fù)鼠李糖主鏈上的B-1，4 N-乙酰氨基葡萄糖末端糖部分為基礎(chǔ)的?？笰組鏈球菌以及其后經(jīng)吸附除去交叉反應(yīng)的抗血清顯示特異性地與這些生物的細(xì)胞壁成分反應(yīng)，成為A組鏈球菌的分組抗血清。已經(jīng)設(shè)計(jì)大量方法用于分割A(yù)組鏈球菌細(xì)胞壁的碳水化合物。這些方法包括在pH2.0下煮沸，高壓滅菌，三氯乙酸提取，熱甲酰胺消化，亞硝酸提取以及由源于土壤鏈霉菌種微生物的酶以及噬菌體相關(guān)的溶素酶進(jìn)行消化。這些方法每種均有不同的優(yōu)點(diǎn)及缺點(diǎn)。
通過(guò)將要求最少24到72小時(shí)來(lái)鑒定A組鏈球菌存在的消耗時(shí)間的培養(yǎng)方法取代為一種快速的能夠在不足1小時(shí)內(nèi)實(shí)施和計(jì)讀的抗原-抗體檢測(cè)方法，A組鏈球菌咽炎的快速診斷對(duì)內(nèi)科醫(yī)生和臨床實(shí)驗(yàn)室都已經(jīng)成為更易獲得的。培養(yǎng)方法在檢測(cè)敏感度方面不同。在一種情況，可以用一個(gè)5％綿羊血瓊脂板與桿菌肽圓盤連接，37℃有氧培養(yǎng)24小時(shí)，來(lái)鑒定A組鏈球菌。另一方面，選擇的培養(yǎng)基和有氧的條件可用于抑制其他生物過(guò)度生長(zhǎng)，在35℃孵育至少48小時(shí)。此外，依賴于轉(zhuǎn)運(yùn)媒介，檢測(cè)延遲，以及病人已采用的某些抗菌劑，結(jié)果可能是雖然A組鏈球菌確實(shí)在病人體內(nèi)集群，但培養(yǎng)產(chǎn)生了不能在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的非存活生物。在后一種情況，一種敏感的A組鏈球菌抗原的免疫測(cè)定能夠檢測(cè)這些非存活生物。
過(guò)去，抗生素被用于治療鏈球菌感染。美國(guó)專利5,260,292(Robinson等)公開了以氨基青霉素局部治療痤瘡。局部治療痤瘡和痤瘡樣皮膚疾病的方法和組合物包括應(yīng)用一定量的選自氨芐青霉素，羥氨芐青霉素，其他的氨基青霉素，以及頭孢菌素及其衍生物和類似物，能夠有效治療痤瘡和痤瘡樣皮膚疾病的抗生素。
美國(guó)專利5,409,917(Robinson等)公開了以頭孢菌素局部治療痤瘡。
這些申請(qǐng)既沒(méi)有特別地針對(duì)鏈球菌感染的治療，也沒(méi)有解決鏈球菌蜂窩織炎或壞死性筋膜炎的問(wèn)題。此外，這些抗生素的使用產(chǎn)生新的問(wèn)題。具體地說(shuō)，越來(lái)越多的人對(duì)用于治療鏈球菌感染的最主要的抗生素之一青霉素過(guò)敏。甚至當(dāng)可以使用青霉素時(shí)，可能存在于生物體中的金黃色葡萄球菌耐青霉素菌株能產(chǎn)生青霉素酶，它在青霉素對(duì)鏈球菌起效前破壞青霉素。紅霉素能用于治療鏈球菌感染；然而，20-30％的鏈球菌對(duì)紅霉素耐藥。而且，有人推斷一些鏈球菌能處于休眠期超過(guò)10天；不繁殖的細(xì)胞不會(huì)被傳統(tǒng)的抗生素殺死。
因此，已經(jīng)尋求其他的努力，以便首先鑒定，然后殺死鏈球菌。
Maxted，(Maxted，W.R.，“在鏈球菌的初期噬菌體溶解中的活性試劑“，J.Gen Micro，vo116，pp585-595 1957)，Krause，(Krause，R.M.“溶血性鏈球菌的噬菌體研究”，J.Exp Med，vol106，pp803-821，1958)，和Fischetti，(Fischetti，V.A.等，“C組鏈球菌的噬菌體相關(guān)溶素的純化和物理特性”，J.Exp Med，Vol 133，pp1105-11171971)，已報(bào)道一種由C組鏈球菌微生物在被一種特殊的鑒定為C1噬菌體感染后產(chǎn)生的酶的特性。這種酶被命名為溶素，發(fā)現(xiàn)可特異性地切割A(yù)組，C組以及E組鏈球菌的細(xì)胞壁。這些研究者提供了有關(guān)這種酶溶解A組鏈球菌和釋放細(xì)胞壁碳水化合物的特點(diǎn)和活性的信息。他們從來(lái)沒(méi)有報(bào)道關(guān)于這種酶在檢測(cè)來(lái)源于病人咽拭子的A組鏈球菌的免疫學(xué)診斷實(shí)驗(yàn)上的實(shí)用性。使用這種酶進(jìn)行臨床診斷實(shí)驗(yàn)的失敗是由于與酶相關(guān)的大量問(wèn)題，例如在C組鏈球菌中生長(zhǎng)大量噬菌體的困難，當(dāng)試圖獲得噬菌體原種時(shí)滅活殘存酶的時(shí)間延遲，酶自身對(duì)氧化狀態(tài)和加熱的不穩(wěn)定性，以及樣品中存在其他微生物和生物成分導(dǎo)致所進(jìn)行的免疫測(cè)定中的非特異性反應(yīng)。
美國(guó)專利5,604,109(Fischetti等)教導(dǎo)了通過(guò)一個(gè)診斷檢測(cè)試劑盒快速和敏感的檢驗(yàn)A組鏈球菌抗原，該試劑盒利用一種由合成或天然纖維如達(dá)克龍或人造絲，以及某種支撐纖維的柄制造的咽拭子組成的取樣設(shè)備，該柄的長(zhǎng)度足夠?qū)⒗w維將放置在扁桃體區(qū)并且能夠用于擦拭該區(qū)以除去足夠數(shù)量的集群或感染生物。拭子能被放置在酶提取試劑內(nèi)，然后用于免疫分析。發(fā)明能包含一個(gè)檢測(cè)試劑盒來(lái)檢測(cè)A組鏈球菌，包括釋放A組鏈球菌成分的溶素酶，以及一個(gè)能夠結(jié)合A組鏈球菌的某個(gè)成分的配體。
美國(guó)專利(申請(qǐng)?zhí)?8/962,523)(Fischetti等)以及美國(guó)專利(申請(qǐng)?zhí)?9/257,026)(Fischetti等)公開了包括一種被C1噬菌體感染的C組鏈球菌產(chǎn)生的溶素酶的口服運(yùn)送方式如糖果，口香糖，錠劑，含片，片劑，藥粉，氣溶膠，液體或液體噴霧劑，在預(yù)防和治療性處理通常被稱為鏈球菌咽喉的A組鏈球菌感染中的用途。
現(xiàn)有技術(shù)沒(méi)有提議使用溶素酶來(lái)治療局部或皮膚感染。
本發(fā)明(在此引入美國(guó)專利5,604,109和美國(guó)專利申請(qǐng)09/257,026(Fischetti等)以及美國(guó)專利申請(qǐng)08/926,523(Fischetti)的完整內(nèi)容作為參考)是一種組合物，包括一種治療劑的使用，該治療劑包括由C組鏈球菌微生物被一種特殊的噬菌體(被證實(shí)為C1)感染后產(chǎn)生的溶素酶，應(yīng)用于鏈球菌感染的機(jī)體的皮膚病的部分，作為一種方法來(lái)抵抗鏈球菌感染，特別是導(dǎo)致侵襲性筋膜炎，壞死性筋膜炎，以及鏈球菌形式的蜂窩織炎的膿皰病等感染。噬菌體溶素能夠有效并高效地破壞A組鏈球菌細(xì)胞壁，產(chǎn)生的抗原片段可與A組鏈球菌碳水化合物的特異性抗體反應(yīng)，建立在這個(gè)發(fā)現(xiàn)的基礎(chǔ)上，組合物作為一種治療鏈球菌皮膚感染的方法是特別有用的。半純化酶缺少蛋白水解酶活性，因此在細(xì)菌細(xì)胞壁消化過(guò)程中的存在對(duì)特異性抗體沒(méi)有破壞性。以稀釋的溶素樣品治療A組鏈球菌導(dǎo)致微生物的保護(hù)性細(xì)胞壁被酶除去，因此殺死鏈球菌微生物。體內(nèi)生物學(xué)流體中鏈球菌的治療有同樣的效果。
在本發(fā)明的一種實(shí)施方案中，溶素酶以局部軟膏或乳膏的形式給藥。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，溶素酶以含水形式給藥。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中，溶葡萄球菌素，即一種溶解金黃色葡萄球菌的酶，能夠包括在治療劑中。在發(fā)明的另外一種實(shí)施方案中，常規(guī)抗生素可以和溶素酶一起被包含在治療劑中，有或沒(méi)有溶葡萄球菌素的存在。其他的細(xì)菌裂解酶也可以包括在治療劑內(nèi)。發(fā)明詳述以稀釋的溶素樣品治療A組鏈球菌導(dǎo)致微生物的保護(hù)性細(xì)胞壁被酶除去，因此殺死鏈球菌微生物。當(dāng)鏈球菌存在時(shí)在皮膚病組織上細(xì)胞溶素的存在導(dǎo)致鏈球菌被殺死，因此縮減了侵襲進(jìn)行和進(jìn)一步的皮膚和組織破壞。溶素酶的這種對(duì)鏈球菌的快速和特異的(致命的)活性通過(guò)甚至殺死“休眠的”細(xì)胞將會(huì)有極深的有益的效果，該細(xì)胞不被依靠細(xì)胞繁殖來(lái)殺死細(xì)菌的常規(guī)抗生素殺死。
按照美國(guó)專利申請(qǐng)5,604,109中的描述分離和收獲由C組鏈球菌微生物被一種特殊的噬菌體(鑒別為C1)感染后產(chǎn)生的酰胺酶胞壁溶解(溶素)酶。這種C組鏈球菌酶，(也稱作溶素酶)，對(duì)A組，C組，以及E組鏈球菌細(xì)胞壁有獨(dú)特的特異性，可以選擇通過(guò)一些其他已知的方法分離和收獲。
可以用于治療鏈球菌皮膚感染的組合物包括溶素酶和，優(yōu)選地，一種對(duì)皮膚或組織應(yīng)用的方式(比如一個(gè)載體)，由此酶被放置在載體系統(tǒng)內(nèi)，使其保持酶在皮膚上。
在酶被放置在載體系統(tǒng)前或同時(shí)，優(yōu)選使其存在于穩(wěn)定緩沖環(huán)境中，從而使pH保持為大約4.0到大約8.0，更優(yōu)選為大約5.5到大約7.5，最優(yōu)選為大約6.1。
穩(wěn)定緩沖液應(yīng)考慮溶素酶的最優(yōu)活性。緩沖液可以是還原劑，如二硫蘇糖醇。穩(wěn)定緩沖液也可以是或包括金屬螯合劑，如乙二胺四乙酸二鈉鹽，或者也可以包含磷酸鹽或檸檬酸-磷酸緩沖液。
為阻止酸敗，穩(wěn)定緩沖液可以另外包括殺菌或抑菌劑作為防腐劑，如小量的苯甲酸鹽。
溶素酶的應(yīng)用方式包括大量的不同類型和載體的組合，載體包括，但不僅限于水成液，醇基液體，水溶的凝膠，洗劑，軟膏，非水成液基質(zhì)，礦物油基質(zhì)，礦物油和礦脂混合物，羊毛脂，脂質(zhì)體，蛋白載體如血漿白蛋白或球蛋白，粉末狀的纖維素carmel，以及其組合。含有治療劑的載體的運(yùn)送方式包括但不限于涂劑，噴霧，控釋貼劑，吸收液體的擦布，以及其組合。
更具體地，本發(fā)明的組合物的載體包括半固體和凝膠樣媒介物，包括聚合物增稠劑，水，防腐劑，活性的表面活性劑或乳化劑，抗氧化劑，防曬劑，和溶劑或混合溶劑體系。美國(guó)專利5,863,560(Osborne)討論了大量不同的載體組合，它有助于皮膚暴露于藥劑?？梢允褂玫木酆衔镌龀韯┌切┍绢I(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的，如化妝品和制藥工業(yè)常用的親水的和水醇膠凝劑。優(yōu)選地，親水的或水醇膠凝劑包括“CARBOPOL.RTM.”(B.F.Goodrich，Cleveland，Ohio)，“HYPAN.RTM.”(Kingston Technologies，Dayton，N.J.)，“NATROSOL.RTM.“(Aqualon，Wilmington，DeL.)，“KLUCEL.RTM”，(Aqualon，Wilmington，DeL.)，或“STABILEZE.RTM.”(ISPTechnologies，Wayne，N.J.)。優(yōu)選地，膠凝劑占組合物重量的大約0.2％到大約4％。更具體地，“CARBOPOL.RTM.”的優(yōu)選組合物重量百分比是大約0.5％到大約2％，而優(yōu)選的“NATROSOL.RTM.”和“KLUCEL.RTM”的優(yōu)選組合物重量百分比是大約0.5％到大約4％?！癏YPAN.RTM.”和“STABILEZE.RTM.”的優(yōu)選組合物重量百分比都是大約0.5％到大約4％。“CARBOPOL.RTM.”是眾多的交聯(lián)丙烯酸聚合物之一，該聚合物的通用名為卡波姆。這些聚合物在水中溶解，與一種腐蝕性物質(zhì)如氫氧化鈉，氫氧化鉀，三乙醇胺，或其他胺堿中和反應(yīng)形成一種澄清的或略渾濁的凝膠?！癒LUCEL.RTM”是一種纖維素聚合物，它在水中擴(kuò)散，完全水合反應(yīng)形成一種均一的凝膠。其他優(yōu)選的凝膠聚合物包括羥乙基纖維素，羧甲基纖維素，MVE/MA癸二烯交聯(lián)聚合物，PVM/MA共聚物，或者其組合。此發(fā)明中也可以使用防腐劑，優(yōu)選占總組合物重量的大約0.05％到0.5％。防腐劑的使用確保如果產(chǎn)品被微生物污染，此配方將阻止或減少微生物生長(zhǎng)。在本發(fā)明中一些有用的防腐劑包括對(duì)羥基苯甲酸甲酯，對(duì)羥基苯甲酸丙酯，對(duì)羥基苯甲酸丁酯，氯二甲苯酚，苯甲酸鈉，DMDM乙內(nèi)酰脲，氨基甲酸3-碘-2-丙基丁酯，山梨酸鉀，二葡糖洗必泰(chlorhexidine digluconate)，或其組合。二氧化鈦可以作為一種防曬劑用來(lái)防止光敏作用。可選擇的防曬劑包括肉桂酸甲酯。而且，BHA可以用作一種抗氧化劑，以及保護(hù)乙氧基二甘醇和/或氨苯砜避免由于氧化而變色。另一種抗氧化劑是BHT。在本發(fā)明的所有實(shí)施方案中使用的藥物包括抗微生物劑，抗炎劑，抗病毒劑，局部麻醉劑，皮質(zhì)類固醇，破壞性治療劑，抗真菌劑，以及抗雄激素劑。痤瘡的治療中，可以使用的活性藥物包括抗微生物劑，特別是那些有抗炎特性的抗微生物劑，如氨苯砜，紅霉素，二甲胺四環(huán)素，四環(huán)素，克林霉素，以及其他的抗菌劑。優(yōu)選的抗菌劑重量百分比是0.5％到10％。局部麻醉藥包括丁卡因，鹽酸丁卡因，利多卡因，鹽酸利多卡因，達(dá)克羅寧，鹽酸達(dá)克羅寧，鹽酸二甲異喹，待布卡因，鹽酸待布卡因，布坦本，以及鹽酸普拉莫星。局部麻醉藥的優(yōu)選濃度為總組合物的約0.025-5wt％。也可以使用麻醉藥如苯佐卡因，優(yōu)選濃度為2-25wt％?？梢允褂玫钠べ|(zhì)類固醇包括二丙酸倍他米松，膚輕松，戊酸倍他米松，去炎松，丙酸氯倍他索，去氧米松，雙乙酸二氟松，醋酸環(huán)戊酮縮去炎松，丙酮縮氟氫羥龍，戊酸氫化可的松，丁酸氫化可的松，以及丙酮縮羥強(qiáng)的松龍，他們的推薦濃度為約0.01％-1.0wt％。皮質(zhì)類固醇如氫化可的松或醋酸甲基強(qiáng)的松龍優(yōu)選的濃度是約0.2％-5.0wt％。破壞性治療劑如水楊酸或乳酸也可以使用。優(yōu)選的濃度是約2％-40wt％。斑螯素優(yōu)選以約5％-30wt％的濃度使用。可以用于本發(fā)明的典型抗真菌藥及它們的優(yōu)選重量比例包括硝酸奧昔康唑(0.1％到5.0％)，環(huán)吡酮胺(0.1％到5.0％)，酮康唑(0.1％到5.0％)，硝酸咪康唑(0.1％到5.0％)，以及硝酸布托康唑(0.1％到5.0％)。用于脂溢性皮炎，多毛癥、痤瘡，以及脫發(fā)的局部治療的活性的藥物可以包括抗雄激素劑如氟利胺或非那甾胺，其優(yōu)選的重量百分比為約0.5％到10％。一般說(shuō)來(lái)，用幾種藥物的結(jié)合包括抗生素與局部麻醉劑結(jié)合，如硫酸多鏈絲霉素B和硫酸新霉素與丁卡因結(jié)合為局部抗生素凝膠，以便提供抗感染的預(yù)防和減輕疼痛。另一個(gè)例子是使用長(zhǎng)壓定聯(lián)合皮質(zhì)類固醇如二丙酸倍他米松治療脫發(fā)?？寡姿幦缈傻乃珊涂拐婢幦缤颠蚵?lián)合治療癬感染也是一個(gè)例子。在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明包含一種皮膚病學(xué)組合物，它具有大約0.5％到10％的卡波姆和大約0.5％到10％的以溶解狀態(tài)和微粒狀態(tài)存在的藥物。溶解的藥物有能力通過(guò)角質(zhì)層，然而微粒狀藥物不能。添加胺堿，鉀，氫氧化物溶液，或氫氧化鈉溶液完成凝膠的形成。更具體而言，藥物可以包括有抗炎特性的抗菌劑氨苯砜。微粒狀與溶解的氨苯砜的優(yōu)選比例是5或更低。
在另一種實(shí)施方案中，本發(fā)明包括大約1％的卡波姆，大約80-90％的水，大約10％的乙氧基二甘醇，大約0.2％的對(duì)羥基苯甲酸甲酯，大約0.3％到3.0％的氨苯砜，包括微粒和溶解氨苯砜，以及大約2％的腐蝕性物質(zhì)。更具體而言，卡波姆可以包括“CARBOPOL.RTM.980”，腐蝕性物質(zhì)可以包括氫氧化鈉溶液。在一種優(yōu)選的實(shí)施方案中，組合物包括氨苯砜和乙氧基二甘醇，它考慮到微粒藥物和溶解藥物的最佳的比率。此比率決定了與保留在角質(zhì)層內(nèi)或在角質(zhì)層上方從而在角質(zhì)層上區(qū)域起作用的藥物的劑量相比，所運(yùn)送藥物的劑量。氨苯砜和乙氧基二甘醇體系包括純凈水，聯(lián)合“CARBOPOL.RTM.”凝膠聚合物、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯、二氧化鈦、BHA和中和″CARBOPOL.RTM.″的腐蝕性物質(zhì)任何溶素酶載體可以通過(guò)常規(guī)方法制造。然而，如果在載體中使用了醇，酶應(yīng)處于微團(tuán)，脂質(zhì)體，或一種“反向”脂質(zhì)體內(nèi)以便阻止酶的變性。類似地，當(dāng)溶素酶放置于載體中時(shí)，且載體正在或已經(jīng)被加熱，這種放置應(yīng)在載體冷卻一定程度后進(jìn)行，從而避免酶的熱變性。在發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案中，載體是無(wú)菌的。
酶可以以液體形式或凍干狀態(tài)加入到這些物質(zhì)中，當(dāng)它遇到液體時(shí)將被溶解。
溶素酶治療感染的有效劑量比率或數(shù)量以及治療持續(xù)時(shí)間部分依賴于感染的嚴(yán)重性，接受者對(duì)鏈球菌暴露的持續(xù)時(shí)間，被感染的皮膚或組織的平方厘米數(shù)，感染的深度，感染的嚴(yán)重性，以及多樣的大量其他變量。組合物可以應(yīng)用在任何地方，一天一次到多次，可以短期或長(zhǎng)期應(yīng)用。使用可以持續(xù)數(shù)天或數(shù)周。使用的任何劑量形式應(yīng)提供最少時(shí)間內(nèi)的最小單位數(shù)。被認(rèn)為提供有效酶數(shù)量或劑量的酶活性單位濃度可以為大約100單位/ml到大約500,000單位/ml，優(yōu)選為大約1000單位/ml到大約100,000單位/ml，最優(yōu)選為大約10,000到100,000單位/ml。每毫升的活性單位量以及暴露的持續(xù)時(shí)間取決于感染的性質(zhì)，載體允許溶素酶接觸的量。應(yīng)該記住酶在液體環(huán)境中最好地起效。因此，酶的效力與載體所捕集的水分量部分相關(guān)。在另一種優(yōu)選的實(shí)施方案中，一種溫和的表面活性物質(zhì)的量可有效的增強(qiáng)溶素酶的治療效果。適當(dāng)?shù)臏睾捅砻婊钚晕镔|(zhì)包括，但不限于，聚氧乙烯山梨糖醇和脂肪酸(Tween系列)的酯，辛基苯氧基聚乙氧基乙醇(Triton-X系列)，n-辛基-β-D-吡喃葡糖苷，n-辛基-B-β-硫吡喃葡糖苷，n-癸基-β-D-吡喃葡糖苷，n-十二烷基-β-D-吡喃葡糖苷，以及生物學(xué)上存在的表面活性物質(zhì)，如，脂肪酸，甘油酯，單甘油酯，脫氧膽酸鹽以及脫氧膽酸鹽酯。為了加強(qiáng)感染的治療，以及治療任何非鏈球菌細(xì)菌，治療劑可進(jìn)一步包括至少一種補(bǔ)充劑，該試劑能增強(qiáng)溶素酶的殺菌活性。補(bǔ)充劑可以是以有效協(xié)同增強(qiáng)溶素酶治療效果的量存在的青霉素，合成青霉素桿菌肽，甲氧苯青酶素，頭孢菌素，多粘菌素，頭孢克洛，頭孢羥氨芐，頭孢孟多酯鈉，頭孢唑啉，頭孢克肟，頭孢美唑，頭孢尼西，頭孢哌酮，頭孢雷特，頭孢噻肟，頭孢氨噻，頭孢替坦，頭孢西丁，頭孢泊肟丙酯，頭孢他啶，頭孢去甲噻肟，頭孢曲松，cefriaxone moxalactam，頭孢氨呋肟，頭孢氨芐，頭孢菌素C，頭孢菌素C鈉鹽，頭孢噻酚，頭孢噻酚鈉鹽，頭孢匹林，頭孢拉定，頭孢呋肟酯，二水合頭孢噻酚、羥羧氧酰胺菌素、loracarbef.mafate，螯合劑以及其組合物。
另外，治療劑可以進(jìn)一步包含用于治療金黃色葡萄球菌的溶葡萄球菌素。粘液溶解肽，如溶葡萄球菌素被認(rèn)為在治療人金黃色葡萄球菌感染(Schaffner et al.，Yale J.Biol.& Med.，39230(1967))和由金黃色葡萄球菌導(dǎo)致的牛乳腺炎(Sears et al.，J.Dairy Science，71(Suppi.1)244(1988))中有效。一種溶血性葡萄球菌的基因產(chǎn)物溶葡萄球菌素，通過(guò)酶促降解細(xì)胞壁的聚甘氨酸交聯(lián)對(duì)金黃色葡萄球菌發(fā)揮抑菌和殺菌作用(Browder et al.，Res.Comm.，19393400(1965))。美國(guó)專利3,278,378描述了從葡萄球菌溶解性葡萄球菌(S.Staphylolyticus)，后來(lái)命名為溶血性葡萄球菌的培養(yǎng)基中產(chǎn)生溶葡萄球菌素的發(fā)酵方法。其它產(chǎn)生溶葡萄球菌素的方法進(jìn)一步描述于美國(guó)專利3,398,056和3,594,284。后來(lái)對(duì)溶葡萄球菌素的基因進(jìn)行了克隆和測(cè)序(Recseiet al.，Proc.Natl.Acad.Sc.USA，841127-1131(1987))。重組粘液溶解殺菌蛋白，如r溶葡萄球菌素可以潛在解決與當(dāng)前抗生素治療相關(guān)的問(wèn)題，這是由于它的靶特異性、低毒性和可能的生物活性基團(tuán)還原。另外，溶葡萄球菌素對(duì)非分裂細(xì)胞也是有活性的，而大多數(shù)抗生素要求活躍分裂的細(xì)胞介導(dǎo)它們的作用(Dixon et al.，Yale J.Biology and Medicine，4162-68(1968))。溶葡萄球菌素和溶素酶的結(jié)合可以在列出的抗生素存在或不存在時(shí)使用。在同一治療劑中同時(shí)使用溶葡萄球菌素和溶素酶有一定程度增加的重要性。通常，當(dāng)機(jī)體有細(xì)菌感染時(shí)，一種細(xì)菌導(dǎo)致的感染使機(jī)體變?nèi)趸蚋淖儥C(jī)體的菌群，允許其它潛在病原菌感染機(jī)體。有時(shí)共同感染機(jī)體的細(xì)菌之一是金黃色葡萄球菌。許多金黃色葡萄球菌株產(chǎn)生青霉素酶，使得葡萄球菌、鏈球菌和其它革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌不被常規(guī)抗生素殺滅。因此，溶素和溶葡萄球菌素的使用，可能與抗生素結(jié)合，可以作為細(xì)菌感染的最迅速和有效的處理。在另一種優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明可以包括變?nèi)芫睾腿芫浮?br> 盡管這種療法可用于任何哺乳動(dòng)物，該產(chǎn)品優(yōu)選用于人類。
根據(jù)上述教導(dǎo)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行許多修飾和改變是可能的。因此，應(yīng)該理解，可以在所附權(quán)利要求的范圍內(nèi)保護(hù)本發(fā)明，而不需要具體描述。
權(quán)利要求
1.一種治療皮膚鏈球菌感染的方法，包含給予機(jī)體的感染區(qū)一種包含有效量治療劑的組合物，所述治療劑包括由被C1噬菌體感染的C組鏈球菌產(chǎn)生的溶素酶。
2.權(quán)利要求1的方法，進(jìn)一步包含在可藥用載體中運(yùn)送所述治療劑。
3.權(quán)利要求2的方法，其中該載體選自水成液，醇基質(zhì)，水溶性凝膠，洗劑，軟膏，非水成液基質(zhì)，礦物油基質(zhì)，礦物油和礦脂混合物，羊毛脂，脂質(zhì)體，親水膠凝劑，交聯(lián)的丙烯酸聚合物(卡波姆)，纖維素聚合物，羥乙基纖維素，羧甲基纖維素，MVE/MA癸二烯交聯(lián)聚合物，PVM/MA共聚物，以及其任意組合。
4.權(quán)利要求1的方法，其中組合物的運(yùn)送形式選自噴霧，涂劑，控釋貼劑，吸收液體的擦布，以及其任意組合。
5.權(quán)利要求1的方法，其中溶素酶處于具有允許該溶素酶活性的pH值的環(huán)境內(nèi)。
6.權(quán)利要求5的方法，其中該組合物進(jìn)一步包含一種使組合物的pH值保持在大約4.0到大約9.0的緩沖液。
7.權(quán)利要求6的方法，其中該緩沖液使組合物的pH值保持在大約5.5到大約7.5。
8.權(quán)利要求6的方法，其中該緩沖液包含一種還原劑。
9.權(quán)利要求8的方法，其中該還原劑是二硫蘇糖醇。
10.權(quán)利要求6的方法，其中該緩沖液包含一種金屬螯合劑。
11.權(quán)利要求10的方法，其中該金屬螯合劑是乙二胺四乙酸二鈉鹽。
12.權(quán)利要求6的方法，其中該緩沖液是檸檬酸-磷酸緩沖液。
13.權(quán)利要求6的方法，另外包含一種殺菌或抑菌劑作為防腐劑。
14.權(quán)利要求1的方法，其中治療劑另外包含一種以有效增強(qiáng)溶素酶治療效果的劑量存在的溫和表面活性劑。
15.權(quán)利要求1的方法，其中治療劑另外包含至少一種加強(qiáng)溶素酶殺菌活性的補(bǔ)充劑，該補(bǔ)充劑選自以有效協(xié)同增強(qiáng)溶素酶治療效果的量存在的青霉素，合成青霉素桿菌肽，甲氧苯青酶素，頭孢菌素，多粘菌素，頭孢克洛，頭孢羥氨芐，頭孢孟多酯鈉，頭孢唑啉，頭孢克肟，頭孢美唑，頭孢尼西，頭孢哌酮，頭孢雷特，頭孢噻肟，頭孢氨噻，頭孢替坦，頭孢西丁，頭孢泊肟丙酯，頭孢他啶，頭孢去甲噻肟，頭孢曲松，cefriaxone moxalactam，頭孢氨呋肟，頭孢氨芐，頭孢菌素C，頭孢菌素C鈉鹽，頭孢噻酚，頭孢噻酚鈉鹽，頭孢匹林，頭孢拉定，頭孢呋肟酯，二水合頭孢噻酚、羥羧氧酰胺菌素、loracarbef.mafate及螯合劑。
16.權(quán)利要求1的方法，其中治療劑另外包含治療金黃色葡萄球菌的溶葡萄球菌素。
17.權(quán)利要求1的方法，其中治療劑另外包含變?nèi)芫亍?br> 18.權(quán)利要求1的方法，其中治療劑另外包含溶菌酶。
19.權(quán)利要求1的方法，其中該溶素酶以大約100到大約500,000單位/毫升的量存在。
20.權(quán)利要求19的方法，其中該溶素酶以大約1,000到大約100,000單位/毫升的量存在。
21.權(quán)利要求20的方法，其中該溶素酶以大約10,000到大約100,000單位/毫升的量存在。
22.一種治療皮膚鏈球菌感染的組合物，包含有效量的治療劑，該治療劑包含一種由被C1噬菌體感染的C組鏈球菌產(chǎn)生的溶素酶以及一種可藥用的用于溶素酶局部應(yīng)用的載體。
23.權(quán)利要求22的組合物，其中該載體選自水成液，醇基質(zhì)，水溶性凝膠，洗劑，軟膏，非水成液基質(zhì)，礦物油基質(zhì)，礦物油和礦脂混合物，羊毛脂，脂質(zhì)體，親水膠凝劑，交聯(lián)的丙烯酸聚合物(卡波姆)，纖維素聚合物，羥乙基纖維素，羧甲基纖維素，MVE/MA癸二烯交聯(lián)聚合物，PVM/MA共聚物，以及其任意組合。
24.權(quán)利要求22的組合物，其中組合物的形式選自噴霧，涂劑，控釋貼劑，吸收液體的擦布，以及其任意組合。
25.權(quán)利要求22的組合物，其中溶素酶處于具有允許該溶素酶活性的pH值的環(huán)境內(nèi)。
26.權(quán)利要求20的組合物，其中該組合物進(jìn)一步包含一種使組合物的pH值保持在大約4.0到大約9.0的緩沖液。
27.權(quán)利要求26的組合物，其中該緩沖液使組合物的pH值保持在大約5.5到大約7.5。
28.權(quán)利要求26的組合物，其中該緩沖液包含一種還原劑。
29.權(quán)利要求28的組合物，其中該還原劑是二硫蘇糖醇。
30.權(quán)利要求26的組合物，其中該緩沖液包含一種金屬螯合劑。
31.權(quán)利要求30的組合物，其中該金屬絡(luò)合劑是乙二胺四乙酸二鈉鹽。
32.權(quán)利要求26的組合物，其中該緩沖液是檸檬酸-磷酸緩沖液。
33.權(quán)利要求22的組合物，另外包含一種殺菌或抑菌劑作為防腐劑。
34.權(quán)利要求22的組合物，其中治療劑另外包含一種以有效增強(qiáng)溶素酶的治療效果的劑量存在的溫和表面活性劑。
35.權(quán)利要求22的組合物，其中治療劑另外包含至少一種加強(qiáng)溶素酶殺菌活性的補(bǔ)充劑，該補(bǔ)充劑選自以有效協(xié)同增強(qiáng)溶素酶治療效果的量存在的青霉素，合成青霉素桿菌肽，甲氧苯青酶素，頭孢菌素，多粘菌素，頭孢克洛，頭孢羥氨芐，頭孢孟多酯鈉，頭孢唑啉，頭孢克肟，頭孢美唑，頭孢尼西，頭孢哌酮，頭孢雷特，頭孢噻肟，頭孢氨噻，頭孢替坦，頭孢西丁，頭孢泊肟丙酯，頭孢他啶，頭孢去甲噻肟，頭孢曲松，cefriaxone moxalactam，頭孢氨呋肟，頭孢氨芐，頭孢菌素C，頭孢菌素C鈉鹽，頭孢噻酚，頭孢噻酚鈉鹽，頭孢匹林，頭孢拉定，頭孢呋肟酯，二水合頭孢噻酚、羥羧氧酰胺菌素、loracarbef.mafate及螯合劑。
36.權(quán)利要求22的組合物，其中治療劑另外包含治療金黃色葡萄球菌的溶葡萄球菌素。
37.權(quán)利要求22的組合物，其中治療劑另外包含變?nèi)芫亍?br> 38.權(quán)利要求22的組合物，其中治療劑另外包含溶菌酶。
39.權(quán)利要求22的組合物，其中該溶素酶以大約100到大約500,000單位/毫升的量存在。
40.權(quán)利要求22的組合物，其中該溶素酶以大約1,000到大約100,000單位/毫升的量存在。
41.權(quán)利要求22的組合物，其中該溶素酶以大約10,000到大約100,000單位/毫升的量存在。
42.權(quán)利要求22的組合物，另外包含至少一種乳化劑。
43.權(quán)利要求22的組合物，另外包含至少一種抗氧化劑。
44.權(quán)利要求22的組合物，另外包含至少一種防曬劑。
45.權(quán)利要求22的組合物，另外包含至少一種防腐劑。
46.權(quán)利要求22的組合物，另外包含至少一種抗炎劑。
47.權(quán)利要求22的組合物，另外包含至少一種局部麻醉劑。
48.權(quán)利要求22的組合物，另外包含至少一種皮質(zhì)類固醇。
49.權(quán)利要求22的組合物，另外包含至少一種破壞性治療劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種通過(guò)使用與適合皮膚組織局部應(yīng)用的載體相混合的溶素酶局部治療鏈球菌感染的方法和組合物。治療皮膚鏈球菌感染的方法包含給予一種包含有效量治療劑的組合物,該治療劑包含由C1噬菌體感染的C組鏈球菌所產(chǎn)生的溶素酶。治療劑可以處于一種可藥用載體內(nèi)。
文檔編號(hào)A61K47/02GK1390135SQ00815668
公開日2003年1月8日 申請(qǐng)日期2000年1月20日 優(yōu)先權(quán)日1999年9月14日
發(fā)明者V·菲舍蒂, L·洛米斯 申請(qǐng)人:新眼界診斷公司