專(zhuān)利名稱(chēng)：作為甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑的螺(2h－1－苯并吡喃－2,4’－哌啶)衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物，涉及含有它的藥物組合物，涉及這些螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物的治療用途。
最簡(jiǎn)單的α-氨基酸甘氨酸在哺乳動(dòng)物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中起著許多非常重要的作用。甘氨酸是脊髓索和腦干中主要的突觸后抑制性遞質(zhì)，其與γ-氨基丁酸(GABA)一起通過(guò)配體門(mén)控離子通道發(fā)揮作用。甘氨酸和這些受體的相互作用可以被生物堿馬錢(qián)子堿拮抗，因此這些受體被稱(chēng)為‘馬錢(qián)子堿敏感的’甘氨酸受體。甘氨酸能神經(jīng)傳遞在視覺(jué)、聽(tīng)覺(jué)和運(yùn)動(dòng)信號(hào)的處理和控制中非常重要。甘氨酸和谷氨酸一起是的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體的專(zhuān)性的共激動(dòng)劑。通過(guò)調(diào)整作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)的主要興奮神經(jīng)遞質(zhì)的谷氨酸的作用，甘氨酸因此發(fā)揮其在興奮傳遞中的功能。另外氨基酸在肽和蛋白質(zhì)的代謝過(guò)程中起著重要的作用，包括一碳單位的交換。
為了上述任何目的而控制甘氨酸的利用度將會(huì)潛在地影響它們的功能和提供多種疾病的治療方法。除代謝作用之外，在敏感馬錢(qián)子堿和不敏感馬錢(qián)子堿的甘氨酸受體近端控制游離甘氨酸濃度的主要方法之一是提高選擇性高親合力的甘氨酸運(yùn)載蛋白的作用。這些蛋白質(zhì)可以主動(dòng)限制甘氨酸向受體的鄰近擴(kuò)散，因此保持受體活性在空間和時(shí)間上的真實(shí)性。通過(guò)運(yùn)載蛋白將遞質(zhì)迅速匯集進(jìn)入神經(jīng)元或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞也保存了甘氨酸用于未來(lái)的釋放。
已經(jīng)克隆出兩類(lèi)主要的甘氨酸運(yùn)載蛋白，GlyT-1和GlyT-2，GlyT-1存在于整個(gè)腦部，在尾區(qū)檢測(cè)到較高水平的mRNA并且其細(xì)胞定位主要在神經(jīng)膠質(zhì)。Kim等根據(jù)分化的拼接和編碼序列鑒定出有三種同種型的GlyT-1，1a、1b和1c(Molecular Pharm(分子藥理學(xué))1994，45，608-617)。最近歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)EP 951543(Allelix Neuroscience公司)公開(kāi)了其它的人的同種型GlyT-1d的克隆和表達(dá)。
正如免疫化學(xué)研究所指出的，GlyT-2的分布和抑制性‘馬錢(qián)子堿敏感的’的甘氨酸受體的分布密切相關(guān)，特別是在脊髓索中。
通過(guò)調(diào)節(jié)甘氨酸的突觸水平，預(yù)期甘氨酸運(yùn)載蛋白GlyT-1和GlyT-2可以選擇性地分別影響NMDA受體和馬錢(qián)子堿-敏感性甘氨酸受體的活性。
能夠改變甘氨酸運(yùn)載蛋白功能活性的化合物可以導(dǎo)致組織中甘氨酸水平的變化，從而可以用于治療多種疾病，這些疾病包括與NMDA受體功能減弱或增強(qiáng)有關(guān)的疾病，即精神病、抑郁癥、癡呆和其它認(rèn)知障礙，例如注意力不集中。NMDA受體進(jìn)一步與神經(jīng)元細(xì)胞死亡和神經(jīng)變性有關(guān)，例如，中風(fēng)(頭部外傷)、阿爾茨海默氏、帕金森氏和享廷頓氏疾病。通過(guò)抑制GlyT-2或GlyT-1活性從而增強(qiáng)抑制性的甘氨酸能傳遞可以用于治療與痙攣、肌陣攣和癲癇有關(guān)的肌肉機(jī)能亢進(jìn)。能夠提高脊椎甘氨酸的化合物也具有止痛性質(zhì)。
通過(guò)Gly-T1或Gly-T2運(yùn)載蛋白抑制甘氨酸轉(zhuǎn)移的化合物已經(jīng)在下述文獻(xiàn)中公開(kāi)，WO 97/45115(TROPHIX PHARM.公司)，WO 97/45423(TROPHIX PHARM.公司)，WO 99/34790(ALLELIX NEUROSCIENCE公司)和WO 00/07978(AKZO NOBEL N.V.)，這些化合物可用于治療如上所述的神經(jīng)病學(xué)和神經(jīng)精神病學(xué)的病癥。
有必要尋找另外的適于治療精神病學(xué)和神經(jīng)病學(xué)病癥的化合物，特別是具有選擇性藥理學(xué)特性的化合物。
現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)式I螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物或它們藥學(xué)上可接受的鹽， 式I其中虛線代表任意的鍵；Y代表1-4個(gè)取代基，它們獨(dú)立地選自氫、鹵素、(C1-6)烷基(任選地被一個(gè)或多個(gè)鹵素取代)、(C1-6)烷氧基(任選被一個(gè)或多個(gè)鹵素或(C3-6)環(huán)烷基取代)、(C2-6)鏈烯氧基、(C2-6)鏈炔氧基、(C3-6)環(huán)烷氧基、(C6-12)芳氧基、(C7-16)芳烷氧基、雜芳氧基、雜芳烷氧基、SR3、NR3R4、OSO2R5和NR3SO2R4；兩個(gè)Y取代基可以共同形成O-(CH2)n-O或O-(CF2)n-O，其中n為1或2；或Y代表稠合(C5-6)芳基；X代表1到3個(gè)取代基，它們獨(dú)立地選自氫、鹵素、羥基、(C1-4)烷氧基、SR3、NR3SO2R4和任選被鹵素取代的(C1-4)烷基；R1為氫、(C1-4)烷基或(C6-12)芳基；R2，R3和R4獨(dú)立地為氫或(C1-4)烷基；R5為(C1-4)烷基(任選被一個(gè)或多個(gè)鹵素取代)或(C6-12)芳基(任選由(C1-4)烷基取代)，和人的GlyT-2運(yùn)載蛋白相比，可以通過(guò)人的GlyT-1運(yùn)載蛋白選擇性地抑制甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)，并可用于治療或預(yù)防精神分裂癥、抑郁癥、癡呆及其它形式的認(rèn)知障礙，或治療或預(yù)防阿爾茨海默氏、帕金森氏和享廷頓氏疾病樣的神經(jīng)變性疾病，與痙攣、肌陣攣和癲癇有關(guān)的肌肉機(jī)能亢進(jìn)。
式1定義的術(shù)語(yǔ)(C1-6)烷基，意思是具有1-6個(gè)碳原子的支鏈或直鏈烷基，例如己基、戊基、新戊基(2，2-二甲丙基)、丁基、異丁基、叔丁基、丙基、異丙基、乙基和甲基。同樣地，術(shù)語(yǔ)(C1-4)烷基指具有1-4個(gè)碳原子的烷基。
術(shù)語(yǔ)(C1-6)烷氧基、(C1-6)烷基意思是如上定義的分支的或未分支的烷基。(C1-6)烷氧基可以被1-3個(gè)鹵素或(C3-6)環(huán)烷基取代，(C3-6)環(huán)烷基意思是具有3-6個(gè)碳原子的環(huán)，像環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基。這種取代的(C1-6)烷氧基的實(shí)例為三氟甲氧基和環(huán)丙基甲氧基。
術(shù)語(yǔ)鹵素意思是氟、氯、溴或碘，當(dāng)鹵素為烷基取代基時(shí)，優(yōu)選氟。優(yōu)選鹵素取代烷基為三氟甲基。
在例如術(shù)語(yǔ)(C2-6)鏈烯氧基中的術(shù)語(yǔ)(C2-6)鏈烯基意思是，具有2到6個(gè)碳原子的分支的或直鏈的鏈烯基，例如乙烯基、2-丙烯基(烯丙基)、異丙烯基和2-丁烯基。
在例如術(shù)語(yǔ)(C2-6)炔氧基中的術(shù)語(yǔ)(C2-6)炔基意思是具有2到6個(gè)碳原子的分支的或直鏈鏈炔基，例如炔丙基。
在例如式1定義中的術(shù)語(yǔ)(C6-12)芳氧基，其中的(C6-12)芳基意思是具有6到12個(gè)碳原子的芳烴，例如苯基、萘基、四氫萘基、茚基或聯(lián)苯基。這些芳族基團(tuán)可能被鹵素或(C1-4)烷基或(C1-4)烷氧基取代，其中(C1-4)烷基和上述的定義相同，并可以被鹵素或(C1-4)烷氧基取代。
在例如在式I定義中使用的術(shù)語(yǔ)(C7-15)芳基烷基，意思是具有7到15個(gè)碳原子的芳基烷基，其中烷基為(C1-6)烷基并且芳基為如上定義的(C6-12)芳基。優(yōu)選的芳基烷基為苯基(C1-6)烷基，例如芐基。
在例如在術(shù)語(yǔ)雜芳氧基中使用的術(shù)語(yǔ)雜芳基意思是取代或未被取代的、包括至少一個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的、具有6到12個(gè)碳原子的芳基，例如咪唑基、噻吩基、苯并噻吩基、喹啉基和吲哚基，雜芳基可以帶有芳基所列的取代基。
雜芳烷基為(7-15)芳基烷基類(lèi)似物，包括至少一個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子。
在式I定義中，Y可以代表稠和的(C5-6)芳基，意思是Y為稠合到苯環(huán)上的5或6元芳環(huán)，其中X與苯環(huán)上連接形成(C11-12)芳環(huán)體系，像萘或茚環(huán)。
除R1定義之外，在式I中，O-R1中的R1可以是任何可以(在體內(nèi))產(chǎn)生游離酸(R1為氫)的其它基團(tuán)。這些例如酯或酰胺衍生物的酸前體或前藥是本領(lǐng)域已知的，它們也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
式I的螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物和它們的鹽可以包含一個(gè)或多個(gè)手性中心，因此存在立體異構(gòu)體。本發(fā)明包括這些的立體異構(gòu)體和式I化合物的對(duì)映異構(gòu)體和它們的鹽，基本上不含另一個(gè)對(duì)映異構(gòu)體即小于5％、優(yōu)選小于2％、特別小于1％，任意比例的立體異構(gòu)體的混合物，包括含有基本上等量的兩個(gè)對(duì)映異構(gòu)體形成的外消旋混合物。
優(yōu)選的是式I螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物，其中虛線代表一個(gè)鍵，另外更加優(yōu)選R1和R2兩個(gè)都為氫的化合物。
特別優(yōu)選的本發(fā)明的螺(2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶)衍生物和它們的鹽相應(yīng)于式I化合物，其中虛線為鍵，R1和R2為氫，并且其中Y代表對(duì)位取代基，選自氯、溴、(C1-4)烷氧基、(C1-4)鏈烯氧基、(C1-4)鏈炔氧基和NR3R4，并且1或2間位取代基，選自鹵素，優(yōu)選氟。特別優(yōu)選的Y取代基實(shí)例為，3-氟代-4-甲基、3-氟代-4-氯代、3-氟代-4-二甲基氨基和3，5-二氟-4-二甲基氨基。特別優(yōu)選的化合物為，在式I中Y代表3-氟代-4-烷氧基，特別是3-氟代-4-正丙氧基和3-氟代-4-正丁氧基，以及3，5-二氟-4-烷氧基。
使用容易購(gòu)買(mǎi)得到或使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的合成法可以得到的式II的2’-羥苯乙酮衍生物作為起始原料，其中X的定義如上，通過(guò)一系列反應(yīng)可以來(lái)制備式I的螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物。如方案A所示，在甲醇溶液中，在吡咯烷存在下，將2’-羥苯乙酮衍生物II和1-甲基-4-哌啶酮[R為甲基；也可使用1-芐基-4-哌啶酮(R為芐基)作為替代物，芐基比甲基更容易移除(見(jiàn)C方案)]縮合，得到式III N-甲基-螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-4(3H)-酮衍生物。 方案A如方案B所示，接著在像四氫呋喃的適當(dāng)?shù)娜軇┲校檬絀V的格氏試劑處理式III螺酮衍生物，其中Y的定義如上，再用酸處理后，得到式V的4-芳基-N-甲基-或N-芐基-螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物。 方案B另外，可以將其中R為氫、甲基或芐基的式III的螺酮衍生物轉(zhuǎn)化為烯醇三氟甲磺酸(enoltriflate)衍化物III″，然后和苯基硼酸酸衍生物IV″發(fā)生Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)(方案B″)，從而制備式V化合物。 方案B″如方案C所示，在例如1，3-二氯丙烷或二氯甲烷的氯化溶劑中，使用1-氯乙基氯代甲酸酯將式V化合物N-脫烷基化，得到式VI中間體4-芳基-螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物，接著用HalCH2R2-COOR1進(jìn)行烷基化，其中R1為(C1-4)烷基或(C6-12)芳基并且R2的定義同上，Hal為鹵素，優(yōu)選溴，得到式I的4-芳基-螺(2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶)衍生物，可以將酯官能團(tuán)水解得到R1為氫的式I化合物。 方案C式IV中需要的格氏試劑不是市場(chǎng)上可買(mǎi)到的，其可通過(guò)使用標(biāo)準(zhǔn)程序(格氏試劑手冊(cè)，G.S.Silverman and P.E.Rakita編輯，1996，MarcelDekker，New York)從相應(yīng)的溴代芳烴制備得到。
本發(fā)明化合物可以治療精神分裂癥、抑郁癥、癡呆及其它形式的認(rèn)知障礙，用于治療或預(yù)防由中風(fēng)或頭部外傷引起的神經(jīng)變性，用于治療阿爾茨海默氏、帕金森氏和享廷頓氏疾病樣的神經(jīng)變性疾病，用于治療與痙攣、肌陣攣和癲癇有關(guān)的肌肉機(jī)能亢進(jìn)，用于治療或預(yù)防疼痛、情緒異?；?qū)W習(xí)障礙。
本發(fā)明化合物可以具有一個(gè)或多個(gè)手性中心，因此可以得到純的立體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體的混合物。得到純的立體異構(gòu)體的不對(duì)稱(chēng)合成方法是已知的，例如用手性誘導(dǎo)合成、立體選擇性酶促酯水解、從旋光活性的酸和外消旋混合物得到的鹽的結(jié)晶，使用手性介質(zhì)或正相或反相色譜介質(zhì)經(jīng)色譜法分離立體異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)體。這樣的方法在手性工業(yè)(A.N.Collins，G.N.Sheldrake和J.Crosby編輯，1992；John Wiley)這本書(shū)中有描述。
通過(guò)用無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸處理式I化合物的游離堿，得到式I化合物藥物上可接受的鹽，其中無(wú)機(jī)酸例如鹽酸、磷酸、硫酸，優(yōu)選鹽酸，有機(jī)酸例如抗壞血酸、檸檬酸、酒石酸、乳酸、馬來(lái)酸、丙二酸、富馬酸、羥基乙酸、琥珀酸、丙酸、乙酸、甲基磺酸及其類(lèi)似物。
可以用有機(jī)堿或像鈉、鉀或鋰氫氧化物的無(wú)機(jī)堿處理酸或這些化合物的兩性離子形式，得到R1為氫的式I化合物藥物上可接受的鹽。
本發(fā)明進(jìn)一步提供了藥物組合物，其包括通式1的螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物或其藥物上可接受的鹽以及藥物上可接受的助劑。
根據(jù)本發(fā)明使用的藥物組合物包括通式I的螺(2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶)衍生物或其藥物上可接受的鹽以及藥物上可接受的助劑，任選含有其它的治療劑。術(shù)語(yǔ)“可接受的”意思是與組合物的其它成分相容，并且對(duì)被治療者是無(wú)害的?？梢园凑諛?biāo)準(zhǔn)技術(shù)制備組合物，例如在標(biāo)準(zhǔn)參考書(shū)Gennaro等的Remington’s Pharmaceutical Sciences(第十八版本，Mack出版公司，1990，特別是第8部分，藥物制劑和它們的制備)中描述的方法。
組合物的劑型包括例如適于口服、舌下、鼻內(nèi)、皮下、靜脈內(nèi)、肌肉、局部或直腸等給藥的劑型，所有的都以單位劑型給藥。
為了口服給藥，活性成分可以分散的單位提出，例如片劑、膠囊、粉末劑、顆粒、溶液和懸浮液。
為了腸胃外給藥，本發(fā)明組合物可以單位劑量或多劑量容器的形式提供，例如在密封的小瓶和安瓿瓶中的預(yù)定量的注射液劑，也可以凍干儲(chǔ)存，當(dāng)需要時(shí)，僅需在使用前加入無(wú)菌的液體載體例如水的。
本發(fā)明化合物可以施用于人的劑量為每公斤體重0.001-50mg，優(yōu)選每公斤體重0.01-20mg。
本發(fā)明進(jìn)一步包括與所述的藥物組合物相適合的包裝材料結(jié)合的上述藥物組合物，所述的包裝材料包括用于以上描述用途的組合物的說(shuō)明。
用以下實(shí)施例來(lái)說(shuō)明本發(fā)明。
概要所有的質(zhì)譜在PE SCIEX API 150EX或PE SCIEX API 365機(jī)器上進(jìn)行。熔點(diǎn)為未校正的，使用Leica Galen III儀器或Leica VMHBSystem Kofler測(cè)定。
在干燥的氮?dú)夥障?，邊攪拌邊?-羥基-4-甲氧基苯乙酮(4.08g，24.58mmol)的無(wú)水甲醇(60cm3)溶液中加入1-甲基-4-哌啶酮(3cm3，24.58 mmol)，接著加入吡咯烷(4cm3，47.92mmol)，并加熱回流。7小時(shí)后，加入另外一部分1-甲基-4-哌啶酮(0.6cm3，4.76mmol)，再加熱回流4.5小時(shí)。然后冷卻到室溫，減壓去除揮發(fā)性餾分。用二氯甲烷(100cm3)處理得到的油，用水(5×100cm3)洗滌，用無(wú)水硫酸鈉干燥，得到暗色粘性油(6.33g，24.25mmol)，長(zhǎng)時(shí)間靜置后部分結(jié)晶。步驟B7-甲氧基-N-甲基-4-苯基-螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]在干燥的氮?dú)夥障?，邊攪拌邊?-甲氧基-N-甲基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-4(3H)-酮(6.19g，23.72mmol)的無(wú)水四氫呋喃(80cm3)溶液中逐滴加入苯基溴化鎂的四氫呋喃(40cm3，1.0M，40mmol)溶液，保持反應(yīng)溫度低于30℃，滴加完成后，繼續(xù)在室溫下攪拌2.5小時(shí)，反應(yīng)還沒(méi)有結(jié)束，但已經(jīng)不存在格氏試劑。繼續(xù)小心地將苯基溴化鎂(13.3cm3)加入到反應(yīng)體系中，并攪拌過(guò)夜。接著加入水(30cm3)和飽和氯化銨水溶液(30cm3)。真空去除揮發(fā)物，接著用乙醚(100cm3)和水(100cm3)處理產(chǎn)物。分離有機(jī)層，進(jìn)一步用乙醚(2×100cm3)萃取水溶液部分，用水洗滌(3×100cm3)洗滌合并的萃取物，用硫酸鈉干燥，并真空下去除乙醚，將殘余物和少許乙醚研磨，抽真空過(guò)濾分離得到結(jié)晶(4.57g，12.15mmol，51％)。將固體溶于乙醇(75cm3)并用鹽酸(75cm3，2N)處理，然后加熱回流1.5小時(shí)，減壓濃縮溶液直到有固體結(jié)晶出來(lái)，然后冷卻混合物，并真空過(guò)濾分離固體，然后用水(300cm3)、飽和碳酸氫鉀水溶液(50cm3)和乙醚(650cm3)的混合物來(lái)處理。分離水層，并用乙醚(2×100cm3)萃取，用水洗滌(3×250cm3)合并的萃取物，用硫酸鈉干燥，并真空下去除揮發(fā)物，得到目標(biāo)化合物(3.91g，12.18mmol，從酮起始51％轉(zhuǎn)化)。步驟C7-甲氧基-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]邊攪拌邊向7-甲氧基-N-甲基-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶](3.76g，11.71mmol)的無(wú)水1，2-二氯丙烷(150cm3)溶液中加入碳酸鉀(4.04g，29.23mmol)，冰浴冷卻得到的懸浮液，然后逐滴加入1-氯乙基氯代甲酸酯(1.58cm3，14.64mmol)。將反應(yīng)混合物加熱回流過(guò)夜，進(jìn)一步加入1-氯乙基氯代甲酸酯(0.8cm3，7.4mmol)，然后再加熱回流24小時(shí)。經(jīng)冷卻，通過(guò)棉絨過(guò)濾反應(yīng)混合物，接著用二氯甲烷(50cm3)洗滌，并真空去除揮發(fā)物，用甲醇(200cm3)處理得到的中間體，并將混合物加熱回流過(guò)夜，冷卻后，真空去除揮發(fā)物，接著將得到的固體溶于二氯甲烷(150cm3)和碳酸鈉水溶液(5％，30cm3)的混合物中，分離有機(jī)層，用水洗滌(2×50cm3)洗滌，并用硫酸鈉干燥，并真空下去除溶劑，得到樹(shù)膠樣目標(biāo)化合物(3.93g)。步驟D7-甲氧基-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸乙酯向7-甲氧基-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶](3.85g，12.54mmol)的無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺(75cm3)溶液中加入碳酸鉀(4.32g，31.30mmol)，接著加入溴代乙酸乙酯(1.39cm3，12.53mmol)，并將混合物在氮?dú)夥障录訜岬?00℃，持續(xù)2小時(shí)。將合成的混合物傾倒入水(600cm3)中，用乙酸乙酯(3×150cm3)萃取，用水洗滌(3×300cm3)合并的有機(jī)萃取物，用硫酸鈉干燥，并真空下去除揮發(fā)物，用柱色譜法(二氧化硅，用二氯甲烷-乙酸乙酯從9∶1到4∶1的混合溶劑洗脫)純化粗品，得到純的乙酯(3.51g，71％)。步驟E將7-甲氧基-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸乙酯(3.38g，8.60mmol)、乙醇(250cm3)和氫氧化鋰水溶液(2N，6.44cm3，12.88mmol)的混合物加熱回流3.5小時(shí)，經(jīng)冷卻，用鹽酸(5N，70cm3)處理混合物，并去除一些乙醇直到開(kāi)始沉淀，然后將混合物冷卻到4℃，直到結(jié)晶完全，真空過(guò)濾固體，得到白色固體的目標(biāo)產(chǎn)物，m.p.195-230℃，陽(yáng)離子ESI(M+H)+366.4。
使用合適的式II2’-羥苯乙酮衍生物(方案A)和式IV的格氏試劑(方案B)，用類(lèi)似的方法制備以下化合物實(shí)施例21’-羧甲基-4-(4-氯代苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’哌啶]鹽酸鹽m.p.259-265℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+370.0。實(shí)施例34-(4-氟代苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’哌啶]-1’-乙酸鋰用類(lèi)似于實(shí)施例1(步驟E)描述的方法制備此鋰鹽，除了使用1.02摩爾當(dāng)量的氫氧化鋰水溶液(2.0N)進(jìn)行乙酯的水解，當(dāng)反應(yīng)完成后，真空去除揮發(fā)物。m.p.285-291℃(分解)；陽(yáng)離子ESI(M+H)+354.2。實(shí)施例41’-羧甲基-4-(4-甲基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；m.p.247-249℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)-352.2。實(shí)施例56-氟代-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸鋰p.293-298℃(分解)；陰離子ESI(M+H)+354.2。實(shí)施例61’-羧甲基-6-甲基-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.240-244℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+350.2。實(shí)施例71’-羧甲基-7-氟代-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.237-242℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+354.2。實(shí)施例81’-羧甲基-4-(4-氯代-3-氟代苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.263-274℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+388.2。實(shí)施例91’-羧甲基-4-(1-萘基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.237-252℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+385.9。實(shí)施例101’-羧甲基-4-(2-萘基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.253-264℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+386.2。實(shí)施例111’-羧甲基-4-(3-氟代-4-甲氧基苯基)螺[2H-l-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.252-261℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+384.2.實(shí)施例121’-羧甲基-4-(4-叔丁基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；陽(yáng)離子ESI(M+H)+392.2。實(shí)施例131’-羧甲基-4-(3-氟代苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；陽(yáng)離子ESI(M+H)+354.4。實(shí)施例144-(1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯(dioxolo))-1’-羧甲基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.260-265℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+380.4。實(shí)施例151’-羧甲基-4-(3，4-二甲基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.224-234℃；陽(yáng)離子ESI(M-H)-361.9。實(shí)施例161’-羧甲基-4-(3，4-二氯苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+404.0。實(shí)施例171’-羧甲基-4-(3，4-二甲氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+396.2。實(shí)施例181’-羧甲基-4-(3，4，5-三氟苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.242-250℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+390.1。實(shí)施例191’-羧甲基-7-氟代-4-(4-甲基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.153-163℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+368.0。實(shí)施例201’-羧甲基-4-(4-甲氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M-H)-399.6。實(shí)施例211’-羧甲基-4-(3-氯代苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；陽(yáng)離子ESI(M+H)+370.2。實(shí)施例221’-羧甲基-4-(3-甲氧苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+366.4。實(shí)施例231’-羧甲基-4-(3-甲基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+350.0。實(shí)施例241’-羧甲基-4-[4-(N，N-二甲基氨基)苯基]螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽。
根據(jù)實(shí)施例1描述的方法制備該化合物，除了在最后一步E中，用1.5當(dāng)量的氫氧化鈉水溶液(1M)進(jìn)行水解反應(yīng)，當(dāng)反應(yīng)完成后，去除大部分乙醇，過(guò)濾收集得到的結(jié)晶。在室溫下用過(guò)量的甲醇性氯化氫處理固體1小時(shí)，真空去除甲醇，并用2-丙醇-甲醇(1∶1)處理產(chǎn)物，逐滴加入乙醚直到產(chǎn)生沉淀，過(guò)濾分離并干燥，m.p.238-250℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+379.4。實(shí)施例251’-羧甲基-4-(4-乙基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+364.4。實(shí)施例264-(4-聯(lián)苯基)-1’-羧甲基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；陽(yáng)離子ESI(M+H)+412.2。實(shí)施例271’-羧甲基-4-(4-苯氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；陽(yáng)離子ESI(M+H)+428.2。實(shí)施例281’-羧甲基-4-(3-氟代-4-甲基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+368.2。實(shí)施例291’-羧甲基-7-氯代-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+370.2。實(shí)施例301’-羧甲基-6-氯代-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+370.2。實(shí)施例311’-羧甲基-7-氯代-4-(4-乙基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+398.2。實(shí)施例321’-羧甲基-7-氯代-4-(4-丙基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+412.2。實(shí)施例331’-羧甲基-4-(2，2-二氟-1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.248-250℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+416.2。實(shí)施例341’-羧甲基-4-(2，3，5-三氟苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.206-210℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+390.4。實(shí)施例351’-羧甲基-7-氯代-4-(3-氟代-4-甲基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+402.3。實(shí)施例361’-羧甲基-4-(3，5-二氟-4-甲氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+402.2。
從4-溴代-2，6-二氟苯酚來(lái)制備4-溴代-2，6-二氟苯甲醚，它是制備式IV(方案B)的格氏試劑的原料。向苯酚(49.0g，234mmol)的無(wú)水丙酮(980cm3)溶液中，加入甲基碘(29.4cm3，468mmol)，然后加入碳酸鉀(80.85g，585mmol)。攪拌混合物并加熱回流2小時(shí)，然后冷卻，然后濾出固體，并真空蒸發(fā)濾液，將殘余物溶于乙醚(1000cm3)中，用水(3×300cm3)洗滌，硫酸鈉干燥，并真空下去除乙醚，得到粗制品，其可用于制備所需的格氏試劑，不需要進(jìn)一步地提純(49.4g 222mmol，95％)。實(shí)施例371’-羧甲基-4-(4-二甲基氨基-3-氟代苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.231-239℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+397.4。實(shí)施例381’-羧甲基-4-(3，5-二氟-4-二甲基氨基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.231-242℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+415.0。實(shí)施例394-(4-溴代-3-氟代苯基)-1’-羧甲基-螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+432.5。實(shí)施例40；1’-羧甲基-4-(3-溴代4-甲氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；陽(yáng)離子ESI(M+H)+444.1。實(shí)施例411’-羧甲基-4-(3，5-二氟代苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.230-264℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+372.2。
向(3，5-二氟-4-羥苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸乙酯(350mg)、碳酸銫(412mg)和碘化鈉(13mg)中加入N，N-二甲基甲酰胺(9cm3)接著加入碘乙烷(1.7摩爾當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物加熱到65℃，并攪拌3小時(shí)，經(jīng)冷卻，用乙酸乙酯(90cm3)稀釋反應(yīng)體系，然后用水(5×35cm3)洗滌，硫酸鈉干燥，通過(guò)二氧化硅板過(guò)濾粗品，并真空下去除溶劑，得到均勻的目標(biāo)化合物步驟D根據(jù)實(shí)施例1描述的步驟，從(3，5-二氟-4-乙氧苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸乙酯來(lái)制備1’-羧甲基-4-(3，5-二氟-4-乙氧苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+416.5。
用此方法還可制備實(shí)施例43；1’-羧甲基-4-(3，5-二氟-4-正丙氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’哌啶]鹽酸鹽；陽(yáng)離子ESI(M+H)+430.3。實(shí)施例44；1’-羧甲基-4-(3，5-二氟-4-正丁氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；陽(yáng)離子ESI(M+H)+444.4。實(shí)施例451’-羧甲基-4-(4-芐氧基-3，5-二氟苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；陽(yáng)離子ESI(M+H)+478.0。實(shí)施例461’-羧甲基-4-(3，5-二氟-4-異戊氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.211-215℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+458.5。實(shí)施例471’-羧甲基-4-(4-乙氧基-3-氟代苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+398.2。實(shí)施例481’-羧甲基-4-(3-氟代-4-正丙氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；陽(yáng)離子ESI(M+H)+412.0。實(shí)施例491’-羧甲基-4-(3-氟代-4-正丁氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+426.1。實(shí)施例501’-羧甲基-4-(4-芐氧基-3-氟代苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；陽(yáng)離子ESI(M+H)+460.3。實(shí)施例511’-羧甲基-4-(3-氟代-4-異戊氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；陽(yáng)離子ESI(M+H)+440.2。實(shí)施例521’-羧甲基-4-(3-氟代-4-甲氧基乙氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；陽(yáng)離子ESI(M+H)+428.2。實(shí)施例531’-羧甲基-4-(3-氟代-4-異丁氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；陽(yáng)離子ESI(M+H)+425.8實(shí)施例541’-羧甲基-4-(3-氟代-4-甲氧基芐氧基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；陽(yáng)離子ESI(M+H)+490.0。實(shí)施例554-(4-烯丙氧基-3，5-二氟代苯基)-1’-羧甲基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽步驟AN-芐基-4-(3，5-二氟-4-烯丙氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4-哌啶]向N-芐基-4-(3，5-二氟-4-羥苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶](750mg，1.79mmol；根據(jù)實(shí)施例1和42所述方法制備)、碳酸銫(1.1摩爾當(dāng)量)和無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺(15cm3)的混合物中，逐滴加入烯丙基溴(1.1摩爾當(dāng)量)，在室溫下攪拌2小時(shí)后，不再有起始物質(zhì)殘留，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(50cm3)稀釋?zhuān)缓笥盟?100cm3)處理，分離水層，并用乙酸乙酯再萃取(2×25cm3)。用水(4×100cm3)洗滌合并的有機(jī)萃取物，然后用硫酸鈉干燥，真空去除揮發(fā)性物質(zhì)，得到所需的高純度的產(chǎn)物(60％)。步驟B4-(3，5-二氟-4-烯丙氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4-哌啶]根據(jù)實(shí)施例1步驟C來(lái)進(jìn)行脫芐基化，除了以下的例外用二氯甲烷作溶劑(它不一定必須無(wú)水)，反應(yīng)不在惰性氣氛下進(jìn)行。當(dāng)在甲醇存在下加熱回流時(shí)，在某些實(shí)施例中中間體氨基甲酸酯的斷裂不很有效。在這種情況下，需要加入過(guò)量的10N氫氧化鉀水溶液，并加熱回流過(guò)夜。
根據(jù)實(shí)施例1所描述的方法，由此胺被轉(zhuǎn)換成了最終的化合物m.p.221-225℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+428.2。實(shí)施例561’-羧甲基-4-(3，5-二氟-4-異丙氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.241-243℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+430.3。實(shí)施例571’-羧甲基-4-(3，5-二氟-4-炔丙基氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.211-217℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+426.1。實(shí)施例581’-羧甲基-4-(3，5-二氟-4-環(huán)丙基甲氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.225-231℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+442.0。實(shí)施例591’-羧甲基-4-(3，5-二氟-4-三氟乙氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.244-251℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+470.2。實(shí)施例601’-羧甲基-4-(3-氟代-4-異丙氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；m.p.＞260℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+412.4。實(shí)施例611’-羧甲基-4-(3-氟代-4-三氟乙氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽；m.p.230-235℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+452.2。實(shí)施例621’-羧甲基-4-(3-氟代-4-苯氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽m.p.160-180℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+446.0。實(shí)施例634-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’哌啶]-1’-乙酸鋰m.p.280-281℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+336.2。實(shí)施例644-(4-三氟甲基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]乙酸鋰陽(yáng)離子ESI(M-Li+2H)+404.4。實(shí)施例654-(4-乙基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸乙酯m.p.119-121℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+392.3。實(shí)施例664-(4-乙基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸苯基酯m.p.104-105℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+440.3。實(shí)施例671’-羧甲基-4-(4-異戊氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽陽(yáng)離子ESI(M+H)+422.0。實(shí)施例68根據(jù)實(shí)施例42的方法，用2-吡啶甲基氯化物鹽酸鹽來(lái)制備[4-(2-吡啶并甲氧基)苯基]螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸鈉。根據(jù)實(shí)施例1的方法進(jìn)行水解，除了使用氫氧化鈉；陽(yáng)離子ESI(M+H)+443.4。實(shí)施例691’-羧甲基-4-[4-(4-甲基苯基磺酰氧基)苯基]螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽。步驟A1’-羧甲基-4-[4-(4-甲基苯基磺酰氧基)苯基]螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]乙基酯。
在-5℃下，邊攪拌邊向(4-羥苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸乙酯(182mg，0.5mmol；根據(jù)實(shí)施例42制備)、二氯甲烷(13cm3)和吡啶(158mg，2.0cm3)的混合物中小心加入對(duì)甲苯磺酰氯(288mg，1.5mmol)的二氯甲烷(13cm3)溶液，然后將反應(yīng)溫度升到室溫，進(jìn)一步攪拌2小時(shí)，然后將溶液放置過(guò)夜。將水(7cm3)加入到混合物中，之后攪拌10分鐘，蒸發(fā)溶劑得到樹(shù)膠樣的產(chǎn)物，靜置固化，用小勺破碎，過(guò)濾，并用水(20cm3)洗滌，吸干濾餅至幾乎干燥，然后在65℃下真空干燥，得到產(chǎn)物(300mg)，(M+H)+＝534.2m/z。
根據(jù)實(shí)施例1描述的步驟水解得到的酯，除了在正丁醇中進(jìn)行水解陽(yáng)離子ESI(M+H)+506.2。實(shí)施例701’-羧甲基-8-氟代-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽。
當(dāng)不能從市場(chǎng)上購(gòu)買(mǎi)得到所需要的起始物2’-羥苯乙酮時(shí)，可以用以下所述的方法制備步驟A(2-氟代苯基)乙酸酯在0℃下，將乙酸酐(81cm3，856mmol)逐滴加入到攪拌著的2-氟代苯酚(60.0g，535mmol)和含水的氫氧化鈉(4N，214cm3，856mmol)的混合物中，攪拌反應(yīng)30分鐘后，從有機(jī)部分中分離水層，用二氯甲烷(150cm3)洗滌，用氫氧化鈉水溶液(4N，150cm3)和鹽水(100cm3)洗滌合并的有機(jī)萃取物，干燥(Na2SO4)有機(jī)相，并真空蒸發(fā)溶劑，得到目標(biāo)化合物(84.9g，＞100％)。步驟B2’-羥基-3’-氟代苯乙酮將三氯化鋁(32.0g，239mmol)細(xì)粉加入到(2-氟代苯基)乙酸酯(23.0g，149mmol)中，并將混合物加熱到180℃，持續(xù)1小時(shí)，冷卻到室溫，將反應(yīng)混合物小心地傾倒入冰/水混合物中，經(jīng)二氯甲烷(150cm3)萃取產(chǎn)物，分離有機(jī)層，用鹽水洗滌(150cm3)，用硫酸鈉干燥，并真空下去除溶劑，用柱色譜法(硅膠，用二氯甲烷-甲醇99∶1作洗脫液)純化反應(yīng)粗品，得到目標(biāo)化合物(3.1g，14％)。
根據(jù)實(shí)施例1所描述的方法，由此將苯乙酮轉(zhuǎn)換成最終化合物m.p.180-182℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+354.0。
依據(jù)這種途徑還可以制備實(shí)施例711’-羧甲基-7-氯代-6-氟代-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽。p.275-293 C；陽(yáng)離子ESI(M+H)+387.7.實(shí)施例721’-羧甲基-5-氟代-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽。
不能從市場(chǎng)上買(mǎi)到的起始原料2’-羥苯乙酮可用如下所述方法制備步驟A2’-氟代-6’-甲氧基苯乙酮將2-氟代-6-甲氧基苯基腈(15.94g，105.5mmol)和甲基碘化鎂的乙醚溶液(3M，46.0cm3，137mmol)的混合物加熱到100℃，持續(xù)18小時(shí)，冷卻到室溫，加入含水的鹽酸(3M，94cm3)，并加熱混合物回流4小時(shí)，當(dāng)反應(yīng)冷卻到室溫后，分離有機(jī)層，并用乙酸乙酯(100cm3)萃取水相。用鹽水(100cm3)洗滌合并的有機(jī)萃取物，然后用硫酸鈉干燥，并真空下去除溶劑，得到油狀目標(biāo)化合物(117.7g，100％)。步驟B2’-氟代-6’-羥基苯乙酮在-78℃下，在25分鐘內(nèi)，將三溴化硼的二氯甲烷溶液(69.0cm3，69.6mmol)逐滴加入到2’-氟代-6’-甲氧基苯乙酮(17.72g，105.5mmol)的二氯甲烷(150cm3)溶液中，將溶液溫?zé)岬?℃，用水(100cm3)淬冷反應(yīng)，并用二氯甲烷(100cm3)萃取產(chǎn)物，用水(100cm3)和鹽水(150cm3)洗滌有機(jī)溶液，然后用硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)溶劑，其不需要提純即可供下一步使用。
根據(jù)實(shí)施例1所描述的方法，由此將苯乙酮轉(zhuǎn)換成最終化合物m.p.252-254℃；陽(yáng)離子ESI(M+H)+354.2。實(shí)施例731’-羧甲基-4-[4-(2-乙氧基嗎啉代)苯基]螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽。根據(jù)實(shí)施例42描述的方法，通過(guò)用4-(2-氯代-乙基)嗎啉鹽酸鹽烷基化合適的苯酚來(lái)制備；陽(yáng)離子ESI(M+2H)+465.2。實(shí)施例741’-羧甲基-6-羥基-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽。根據(jù)實(shí)施例1和42描述的方法制備；陽(yáng)離子ESI(M+H)+352.2。實(shí)施例751’-羧甲基-7-甲硫基-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽。步驟A7-氟代-N-甲基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-4(3H)-酮在氮?dú)夥障?，將攪拌著?’-氟代-2’-羥苯乙酮(15.97g)、1-甲基-4-哌啶酮(12.74cm3)和吡咯烷(4.325cm3)的甲醇(250cm3)溶液加熱回流，0.5小時(shí)后，再加入吡咯烷(4.33cm3)，再經(jīng)過(guò)0.5小時(shí)后，將溶液冷卻，減壓蒸發(fā)反應(yīng)混合物，得到油狀物，將其溶于二氯甲烷(400cm3)，用水洗滌(3×400cm3)上述溶液，用硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)得到油狀物(25.7g)，在二氧化硅上進(jìn)行閃式層析(用二氯甲烷∶甲醇∶33％氨水＝380∶20∶1的混合液洗脫)，得到油狀純化產(chǎn)物(14.41g)。步驟B7-甲硫基-N-甲基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-4(3H)酮在氮?dú)夥障?，邊攪拌邊?-氟代-N-甲基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-4(3H)-酮(4.54g)的二甲基甲酰胺(20cm3)溶液中加入硫代甲醇鈉(1.40g)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?.25小時(shí)，在60℃攪拌4.5小時(shí)，然后冷卻，并在室溫下放置過(guò)夜。攪拌并加熱到130℃，持續(xù)2.5小時(shí)，然后冷卻，并在室溫下放置過(guò)夜，然后攪拌傾入攪拌著的水(140cm3)中。濾出固態(tài)產(chǎn)物，用水洗滌，并溶于二氯甲烷中，用硫酸鈉干燥溶液，蒸發(fā)得到樹(shù)膠樣產(chǎn)物(4.44g)。
除了以下的例外，根據(jù)實(shí)施例1描述的方法，將7-甲硫基-N-甲基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-4(3H)-酮轉(zhuǎn)化為最終產(chǎn)物在脫甲基過(guò)程中，需要的仲胺出人意料地轉(zhuǎn)化成了極性較小的化合物，用回流下的含水的氫氧化鉀(10N)甲醇溶液對(duì)其進(jìn)行處理，重新生成所需要的胺；(M+H)+＝382.0。實(shí)施例761’-羧甲基-4-(4-三氟甲氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽步驟A三氟甲基磺酸-4-[1’-苯基甲基-螺(2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶)]酯在約5分鐘內(nèi)，向冷卻(-78℃)并攪拌著的N-芐基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-4(3H)-酮(1.54g，5mmol；如實(shí)施例1制備)的無(wú)水四氫呋喃(40cm3)溶液中逐滴加入六甲基二硅雜疊氮化鋰(lithiumhexamethyldisilazide)(1M己烷溶液，7.5cm3，7.5mmol)，在此溫度下攪拌1小時(shí)后，一次性加入N-苯基三氟甲基磺酰胺(2.68g，7.5mmol)，攪拌得到的反應(yīng)混合物并緩慢溫?zé)徇^(guò)夜，用水(10cm3)淬冷反應(yīng)，并用乙酸乙酯(2×50cm3)萃取，用飽和氯化銨水溶液(50cm3)、飽和氯化鈉水溶液(50cm3)和水(50cm3)洗滌有機(jī)層，用硫酸鈉干燥并濃縮，用柱色譜在二氧化硅上提純產(chǎn)物(3∶1庚烷和乙酸乙酯洗脫)，得到所需的物質(zhì)(1.75g，80％)，其既可以立即使用也可在-20℃下惰性氣氛中儲(chǔ)存。步驟BN-芐基-(4-三氟甲氧基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-4(3H)-酮將{N-芐基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]}-4-(苯基-4-三氟甲磺酸酯)(1.69g，3.86mmol)、4-三氟甲氧基苯硼酸(1.25當(dāng)量)、二甲氧基乙烷(40cm3)、氯化鋰(2.5當(dāng)量)、四(三苯基膦)鈀(O)(2.5mol％)和2 N碳酸鈉水溶液(2當(dāng)量)的混合物加熱回流12小時(shí)，冷卻后，用水(75cm3)和乙酸乙酯(75cm3)處理混合物，振動(dòng)之后，分離有機(jī)層，用水(2×100cm3)洗滌，并用硫酸鈉干燥，去除溶劑，得到所需產(chǎn)物(96％)，其不需要進(jìn)一步提純即可用于下一步反應(yīng)。
根據(jù)實(shí)施例1描述的方法，由此將N-芐基-4-(4-三氟甲氧基苯基)螺[2H-1苯并吡喃-2，4’-哌啶]-(3H)-酮轉(zhuǎn)化為最終產(chǎn)物；m.p.233-237℃；(M+H)+＝420.2。實(shí)施例77根據(jù)實(shí)施例76描述的方法制備1’-羧甲基-4-(4-甲基硫代苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽。；陽(yáng)離子ESI(M+H)+352.2.實(shí)施例781’-羧甲基-4-[4-(N-甲基-N-甲基亞磺酰氨基)苯基]螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽。步驟A4-(4-羥苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸乙酯向1’-羧甲基-4-(4-羥苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸酯(432mg，1mmol；根據(jù)實(shí)施例42制備)和碳酸氫鈉(176mg，2.1mmol)的干燥N，N-二甲基甲酰胺(25cm3)混合溶液中加入乙基碘(0.088cm3，1.1mmol)，并將混合物加熱到80℃，保持2小時(shí)，經(jīng)冷卻，用乙酸乙酯(100cm3)稀釋?zhuān)缓笥盟?5×100cm3)洗滌，然后用硫酸鈉干燥有機(jī)溶液，并真空下去除溶劑，通過(guò)二氧化硅短墊板過(guò)濾粗品，首先用二氯甲烷(它被清除掉)然后用乙酸乙酯洗滌，去掉溶劑，得到要求的產(chǎn)物(194mg，51％)。步驟B三氟甲基磺酸-{1’-羧甲基-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]乙基酯}在惰性氣氛下，向冷卻的(-20℃)并攪拌的4-(4-羥苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸乙酯(158mg，4.16×10-4mol)的無(wú)水二氯甲烷(10cm3)溶液中加入三乙基胺(0.065cm3，4.6×10-4mol)，10分鐘后，在約5分鐘內(nèi)，逐滴加入三氟甲基磺酸酐(0.077cm3，4.6×10-4mol)的二氯甲烷(7.7cm3)溶液，在接下來(lái)的20分鐘內(nèi)，固體物料消失，然而經(jīng)薄層色譜分析后，顯示反應(yīng)不完全，所以再次加入一份三氟甲基磺酸酐(0.25當(dāng)量)。再進(jìn)行約20分鐘后，用乙酸乙酯(60cm3)稀釋反應(yīng)混合物，然后用水(3×60cm3)洗滌，硫酸鈉干燥，并真空下去除溶劑，用二氧化硅柱色譜(二氯甲烷∶乙酸乙酯為3∶1的混合液洗脫)純化粗品，得到要求的產(chǎn)物(154mg，75％)。步驟C4-[4-(二苯基亞氨基)苯基]螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸乙酯通過(guò)修飾的Buchwald等在Tetrahedron Letters，1997，38，6367.中描述的方法，制備目標(biāo)化合物。
在室溫下，在干燥的氮?dú)夥障?，邊攪拌邊向三氟甲基磺?{1’-羧甲基-4-苯基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]乙基酯}(421mg，8.43×10-4mol)的干燥無(wú)水四氫呋喃(25cm3)溶液中加入二苯甲酮亞胺(1.2當(dāng)量，0.283cm3)，接著加入乙酸鈀鹽(1.25mol％)，(R)-(+)-2，2’-雙(二苯基膦基)-1，1’-聯(lián)萘(3.75mol％)和碳酸銫(1.40當(dāng)量，385mg)，加熱回流混合物24小時(shí)，然后冷卻到室溫，然后用乙醚(非干燥的，250cm3)稀釋?zhuān)ㄟ^(guò)助濾劑墊板過(guò)濾，真空去除揮發(fā)物。用二氧化硅柱色譜(庚烷-乙酸乙酯1∶1的混合液作洗脫液)純化殘余物，得到需要的產(chǎn)物(547mg；被二苯甲酮亞胺污染)。步驟D4-(4-氨基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸乙酯通過(guò)Buchwald等在Tetrahedron Letters，1997，38，6367中描述的方法制備目標(biāo)化合物，邊攪拌邊向4-(4-二苯甲酮亞氨基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸乙酯(542mg，1mmol)的甲醇(25cm3)溶液中加入乙酸鈉(198mg，2.4mmol)，接著加入鹽酸羥胺(125mg，1.8當(dāng)量)。在室溫下攪拌反應(yīng)物30分鐘，真空去除甲醇，然后在二氯甲烷(25cm3)和氫氧化鈉水溶液(0.1M，25cm3)中分配殘余物，分離有機(jī)層，真空去除揮發(fā)物，用柱色譜法(二氧化硅，用乙酸乙酯洗脫)純化粗品(220mg，從三氟甲磺酸酯(triflate)計(jì)69％轉(zhuǎn)化)。步驟E4-(甲基4-苯基氨磺酰(sulfonamide))螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸乙酯通過(guò)R.J.Sundberg等在Journal of Organic chemistry，1984，49，249中描述的方法制備目標(biāo)化合物。
將含有4-(4-氨基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸乙酯(214mg，0.566mmol)、吡啶(3當(dāng)量，0.137cm3)和無(wú)水二氯甲烷(10cm3)混合物的燒瓶在冰/甲醇浴下攪拌，保持此溫度10分鐘后，在約5分鐘內(nèi)，逐滴加入甲磺酰氯(1.5當(dāng)量，0.066cm3)的干燥二氯甲烷(0.66cm3)溶液，攪拌2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物傾倒入飽和碳酸氫鉀水溶液中(10cm3)，用水(3×50cm3)洗滌有機(jī)層，并真空下去除溶劑，加入甲苯(30cm3)，然后真空下去除(重復(fù)此操作，直到?jīng)]有吡啶的味道)，然后加入甲醇(30cm3)，再去除，殘留物為均質(zhì)的(234mg，91％)。步驟F4-(甲基4-苯基-N-甲基氨磺酰)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸乙酯向4-(甲基4-苯基氨磺酰)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-1’-乙酸乙酯(108mg，0.236mmol)的甲醇(10cm3)溶液中加入三甲代甲硅烷基重氮基甲烷(2M己烷中，5cm3)，不需要攪拌，立刻可以觀察到有氮?dú)夥懦鰜?lái)，在室溫下放置1小時(shí)后，真空去除揮發(fā)物，用柱色譜法(二氧化硅，用乙酸乙酯洗脫)純化粗品，得到均質(zhì)產(chǎn)品(74mg，67％)。
1’-羧甲基-4-(N-甲基4-苯基-N-甲基氨磺酰)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽從這點(diǎn)出發(fā)，根據(jù)實(shí)施例1描述的方法進(jìn)行合成；陽(yáng)離子ESI(M+H)+＝443.2。實(shí)施例801’-羧甲基-4-(4-氨基-3，5-二氟苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’哌啶]二鹽酸鹽。
根據(jù)Bruekelmann等，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1，1984，2801描述的方法，制備(4-溴代-2，5-二氟苯基)-2，5-二甲基吡咯。
根據(jù)實(shí)施例1的方法，將上述化合物變?yōu)橄鄳?yīng)的格氏試劑，并與N-甲基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]-4(3H)-酮反應(yīng)，除了得到吡咯和脫保護(hù)的苯胺的未解析的混合物，如實(shí)施例1描述的方法將此混合物N-脫烷基化(伴隨有苯胺官能團(tuán)的脫保護(hù))，得到4-(4-氨基-3，5-二氟苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]。然后將得到的胺用溴代乙酸乙酯烷基化，根據(jù)實(shí)施例1水解得到的酯；陽(yáng)離子ESI(M+H)+387.1。實(shí)施例811’-羧甲基-3，4-二氫-4-(4-甲基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]鹽酸鹽。步驟A3，4-二氫-4-(4-甲基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’哌啶]-1’-乙酸乙酯。
向4-(4-甲基苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]乙酸乙酯(730mg，0.194mmol)的乙醇(125cm3)溶液中加入10％鈀/炭，在氫氣氛下(4bar)，將混合物加熱到40℃，并保持7小時(shí)，然后趁熱過(guò)濾，并用熱乙醇(3×50cm3)沖洗濾餅，真空下去除溶劑，在乙醇中重結(jié)晶得到的化合物(67％)。根據(jù)實(shí)施例1的方法水解得到的酯；m.p.247-249℃；(M+H)+＝352.2.
還可用此方法制備實(shí)施例823，4-二氫-4-(4-氟代苯基)螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]乙酸鋰p.274-278℃(分解)；陰離子ESI(M-Li)-354.40。實(shí)施例83測(cè)定在異源表達(dá)人的GlyT-1b運(yùn)載蛋白的CHO細(xì)胞中甘氨酸攝取的方法。
A克隆根據(jù)Kim，K.-M.等在Mol.Pharmacol.1994，45，608-617中描述的方法，通過(guò)PCR產(chǎn)生cDNA，使用ALF DNA序列測(cè)定儀(Pharmacia)通過(guò)雙脫氧測(cè)序法確定序列，并克隆到表達(dá)構(gòu)建物pcDNA3(Invitrogen)中。
B轉(zhuǎn)染使用Sambrook，J.等(1989)在Molecular Cloning分子克隆)實(shí)驗(yàn)手冊(cè)，Cold Spring Harbor Laboratory，Cold Spring Harbor，NY中描述的標(biāo)準(zhǔn)磷酸鈣技術(shù)，將hGlyT-1b轉(zhuǎn)染到CHO細(xì)胞中。
C篩選在包含1mg.cm-3Geneticin的生長(zhǎng)培養(yǎng)基中篩選穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染細(xì)胞一周，挑出單獨(dú)的克隆體進(jìn)行進(jìn)一步的分析，按照如下所述將陽(yáng)性的進(jìn)行常規(guī)傳代培養(yǎng)。
D培養(yǎng)條件能穩(wěn)定表達(dá)hGlyT-1 b基因的細(xì)胞在37℃、5％CO2氣氛的在含有Glutamax-1(Gibco)和Geneticin(0.5mg.cm-3，Gibco)的DMEM-NUT.MIX F12培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并補(bǔ)充以10％Fetalclone II(Hyclone)。在標(biāo)準(zhǔn)80cm2裝備有通風(fēng)設(shè)備的燒瓶(2×10-6m過(guò)濾器，Nunc)中進(jìn)行維持培養(yǎng)，當(dāng)融合時(shí)，通過(guò)胰蛋白酶消化(Sigma)傳代培養(yǎng)細(xì)胞。
E分析程序先在無(wú)Geneticin的情況下將用于攝取研究的細(xì)胞加到96孔(每個(gè)孔17000個(gè)細(xì)胞)板上，使用前培養(yǎng)48小時(shí)。為了檢測(cè)甘氨酸的轉(zhuǎn)移，先用預(yù)溫?zé)嶂?7℃的Hanks平衡鹽溶液(HBSS)洗滌細(xì)胞兩次，除去多余的液體，加入溶于0.200cm3HBSS中的測(cè)試化合物，在37℃下，將平板孵化5分鐘，然后加入[3H]甘氨酸(0.050cm3，150×10-6M，248Bq.nmol-1.NEN)，并繼續(xù)孵化10分鐘，通過(guò)用冰冷的HBSS洗滌細(xì)胞來(lái)終止攝取，然后除去過(guò)量的液體，再在各孔中加入0.200cm3閃爍混合物。用粘膜密封培養(yǎng)板，搖動(dòng)確保樣品為勻質(zhì)的，然后用培養(yǎng)板計(jì)數(shù)器進(jìn)行閃爍計(jì)數(shù)。
F數(shù)據(jù)分析使用標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合程序分析數(shù)據(jù)，得到活性化合物的pIC50值(其中pIC50為導(dǎo)致50％攝取抑制的試驗(yàn)化合物濃度的負(fù)對(duì)數(shù))。
G結(jié)果與人的GlyT-2運(yùn)載蛋白(Morrow J.A.等在FEBS letters1998，439，334-340描述了人GlyT-2運(yùn)載蛋白的分子克隆和功能性表達(dá))相比，本發(fā)明化合物通過(guò)人的GlyT-1b運(yùn)載蛋白選擇地抑制甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)。
許多本發(fā)明化合物的plC50值列于表I。
表1通過(guò)hGlyT-1的甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)的抑制
權(quán)利要求
1.通式I的螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物，或它們藥學(xué)上可接受的鹽， 式I其中虛線代表任意的鍵；Y代表1-4個(gè)取代基，它們獨(dú)立地選自氫、鹵素、(C1-6)烷基(任選地被一個(gè)或多個(gè)鹵素取代)、(C1-6)烷氧基(任選地被一個(gè)或多個(gè)鹵素或(C3-6)環(huán)烷基取代)、(C2-6)鏈烯氧基、(C2-6)鏈炔氧基、(C3-6)環(huán)烷氧基、(C6-12)芳氧基、芳烷氧基、雜芳氧基、雜芳烷氧基、SR3、NR3R4、OSO2R5和NR3SO2R4；兩個(gè)Y取代基可以共同形成O-(CH2)n-O或O-(CF2)n-O，其中n為1或2；或Y代表稠合(C5-6)芳基；X代表1到3個(gè)取代基，它們獨(dú)立地選自氫、鹵素、羥基、(C1-4)烷氧基、SR3、NR3SO2R4和任選被鹵素取代的(C1-4)烷基；R1為氫、(C1-4)烷基或(C6-12)芳基；R2，R3和R4獨(dú)立地為氫或(C1-4)烷基；R5為(C1-4)烷基(任選被一個(gè)或多個(gè)鹵素取代)或(C6-12)芳基(任選由(C1-4)烷基取代)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的通式I螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物，其中虛線代表一個(gè)鍵。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物，其中R1和R2為氫。
4.權(quán)利要求3的螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物，其中Y代表選自氯、溴、(C1-4)烷氧基、(C1-4)鏈烯氧基、(C1-4)鏈炔氧基和NR3R4的對(duì)位取代基，和選自鹵素的1或2間位取代基。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物，其中間位取代基為氟代。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物，其中X為氫。
7.權(quán)利要求1-6的任一項(xiàng)中所述的螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物用于治療的用途。
8.藥物組合物，其包括通式1的螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽以及藥學(xué)上可接受的助劑。
9.通式I的螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽用于制備具有CNS活性的藥物的用途。
10.通式I的螺[2H-1-苯并吡喃-2，4’-哌啶]衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽用于制備藥物的用途，其中的藥物用于治療或預(yù)防精神分裂癥、抑郁癥、癡呆及其它形式的認(rèn)知障礙，或治療或預(yù)防阿爾茨海默氏、帕金森氏和享廷頓氏疾病樣的神經(jīng)變性疾病，與或痙攣、肌陣攣和癲癇有關(guān)的肌肉機(jī)能亢進(jìn)。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式I的螺[2H－1－苯并吡喃－2,4’－哌啶]衍生物,或它們藥學(xué)上可接受的鹽,其中取代基R
文檔編號(hào)A61P25/14GK1390221SQ00815790
公開(kāi)日2003年1月8日 申請(qǐng)日期2000年11月13日 優(yōu)先權(quán)日1999年11月17日
發(fā)明者S·G·吉布森, D·J·米勒 申請(qǐng)人:阿克佐諾貝爾公司