專利名稱：表皮特異性轉移因子的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及生物技術。
自1995年Lawrence首次用溶解的白細胞提取物，注射于敏感的受體，證明有傳遞遲發(fā)性超敏反應，定名為“轉移因子”，轉移因子是一種小分子量(＜5000D)的多肽及核苷酸，其活性不被胰蛋白酶、核糖核酸酶所破壞，可口服。其很小劑量0.01單位就可使正常的受體產生局部或全身反應，在較短時間內即可使受體致敏，致敏性一旦轉移至受體以后，保持時間可達一年左右，其本身不含球蛋白，又不具有免疫原性，長期反復注射，也不致引起過敏反應。轉移因子主要是傳遞細胞免疫功能，因此，選擇具有選擇性免疫的供體，提供其白細胞中有效成分，作用于受體，利用特異的主動免疫組織提供更為有效的轉移因子作為組織細胞免疫之用。近年來經過廣泛研究，發(fā)現(xiàn)有些不同種屬動物之間，有的也可以傳遞超敏反應，自從發(fā)現(xiàn)以動物制備轉移因子能使人體致敏以來，利用動物轉移因子治療人類疾病已有不少成功的報道，如Viza用特異性牛轉移因子治療人皰疹感染特別是特異性轉移因子在抗癌上的研究，如已有抗肺癌、胃癌等多種抗癌特異性轉移因子治療有效的報道。但國內外均未見有關角蛋白免疫制備特異性轉移因子治療皮肽病的報道。
本發(fā)明的目的是利用生物技術，從經免疫的羊白細胞內用透析方法提取特異性轉移因子，因選用經角蛋白特異免疫的組織，具有傳遞特異性細胞免疫效應。能特異性增強及調節(jié)機體細胞免疫功能，可用于各種免疫功能紊亂皮膚病的治療。
本發(fā)明的優(yōu)點；本發(fā)明表皮特異性轉移因子，主要成分為多種游離氨基酸，核苷酸及小分子多肽等成分，其活性不被胰蛋白酶、核糖核酸所破壞，很小的劑量就可向受體傳遞細胞免疫功能，且持續(xù)時間可達1年左右，其本身不含球蛋白，又不具免疫原性，長期反復注射，也不致引起過敏反應，其免疫性質屬繼承性免疫。臨床應用治療尋常型銀屑病126例，痊愈34例(26.98％)，總顯效率(66.7％)取得滿意療效，無毒副反應。
本發(fā)明的目的是通過以下方式實現(xiàn)的取純化特異性抗原，免疫動物，無菌條件下取動物脾臟、淋巴結，洗滌絞碎，低溫透析，濾膜過濾除菌，無菌分裝，可制成注射液、口服液、粉劑等各種劑型的藥物。
具體實施例方式1．動物免疫1.1選擇符合《實驗動物管理規(guī)程》山羊，每只20kg，免疫用角蛋白1mg/kg。分三次進行。
1.2首次免疫7mg角蛋白抗原加等量不完全福速氏佐劑。選擇腹股溝、頸背等多點皮下注射，共8～12點，每點約0.5ml。
1.3再次免疫7mg角蛋白抗原加等量不完全福氏佐劑同上注射。(首次免疫1周后)1.4第三次免疫6mg角蛋白皮下注射同上。(首次免疫2周后)2．特異性轉移因子制備2.1無菌條件下取羊脾臟、淋巴結，剪除包膜、脂肪、纖維組織、用滅菌生理鹽水反復洗滌后絞碎，細胞10×108個/ml。
2.2離速分散器打碎成勻漿，-70℃(至30℃反復凍融5次。鏡檢破碎細胞達90％以上，離心棄沉淀取上清液。
2.3 4℃生理鹽水透析30～40小時，10×108細胞上清液對100ml生理鹽水。透析袋要求分子量5000D以下。
2.4過濾除菌，濾臘孔徑0.22μ，加入滅菌薄膜過濾器內加壓過濾。
2.5按生物制品分裝規(guī)程分裝，每支2ml。
3．特異性轉移因子檢測、檢定按生物制品檢定規(guī)程有關規(guī)定進行無菌試驗、熱原質試驗、安全試驗、過敏試驗、異常毒性試驗、活力測定及化學測定(PH、紫外吸收度、多肽含量、核糖含量、蛋白質反應)。
權利要求
1．表皮特異性轉移因子，其特征是取純化特異性抗原，免疫動物，無菌條件下取動物脾臟、淋巴結，洗滌絞碎，低溫透析，濾膜過濾除菌，無菌分裝。
2．根據(jù)權利要求1所述的表皮特異性轉移因子，其特征是含有表皮特異性轉移因子的各種劑的藥物。
全文摘要
表皮特異性轉移因子,涉及生物技術,用動物轉移因子治療人類疾病,其特征是選用經角蛋白特異免疫的羊白細胞內用秀析方法提取的特異性轉移因子,能特異性增強及調節(jié)一細胞免疫功能,可用于各種免疫功能紊亂皮膚病的治療。
文檔編號A61K35/28GK1319400SQ0110677
公開日2001年10月31日 申請日期2001年2月28日 優(yōu)先權日2001年2月28日
發(fā)明者劉玉峰, 馬翠玲, 李承新, 高天文, 李巍, 王曉娟 申請人:中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學第一附屬醫(yī)院