專利名稱：海貍獺醫(yī)藥胸腺素注射液及其制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于含來自哺育動物胸腺的醫(yī)藥用品技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種海貍獺醫(yī)藥胸腺素注射液。
胸腺素又名胸腺肽是哺育動物胸腺產(chǎn)生的一簇多肽類物質(zhì)，具有控制和調(diào)節(jié)動物免疫反應(yīng)的作用，目前已被用于治療免疫缺陷病以及多種免疫功能紊亂性疾病。常用的提取胸腺素的原料為小牛胸腺和仔豬胸腺，由于原料有限，導(dǎo)致成本極高，使胸腺素成為臨床應(yīng)用上的緊俏藥物。中國發(fā)明專利公報1993年9月臺22日公開了一篇“人胎胸腺素的制備方法”(公開號CN1076361A)專利申請，該專利申請介紹了用5-8個月齡的正常胎兒的胸腺組織制備胸腺素的方法。很顯然采用此種方法制備胸腺素，其原料來源更加有限，其制造成本更加高昂，其推廣應(yīng)用是很困難的。
本發(fā)明的目的是要提供一種具有資源豐富、制備的注射液活性高、無毒性、臨床應(yīng)用安全有效的海貍獺醫(yī)藥胸腺素注射液及其制造方法。
海貍獺又名海貍鼠、海貍、河貍，系草食哺育動物。海貍獺易人工養(yǎng)殖，繁殖率高，人工養(yǎng)殖成本低，目前，全國各地如山東省、黑龍江省、河北省、湖南省等地都有大量人工養(yǎng)殖，主要用于肉食。因此，用海貍獺胸腺提取胸腺素，資源十分豐富。
本發(fā)明的目的是用以下方式來實現(xiàn)的。海貍獺醫(yī)藥胸腺素注射液是從海貍獺胸腺提取的一簇多肽類物質(zhì)，其胸腺素透析物活性高，其分子量小于10000，主要成分分子量小于6000。該注射液胸腺素多肽含量7-10毫克/毫升，活性測定E-玫瑰花結(jié)平均值25-28％，收率7-10克胸腺素/千克。
本發(fā)明制造海貍獺醫(yī)藥胸腺素注射液的方法包括以下工藝過程1、提取胸腺在宰殺后的海貍獺身上提取新鮮胸腺，2、勻漿將新鮮胸腺除去脂肪，切成碎塊置于高速組織搗碎機內(nèi)，按每公斤胸腺加2-4升生理鹽水，搗碎3-7分鐘使成勻漿，冷凍離心機離心2000-4000轉(zhuǎn)/分、7-13分鐘得提取液，3、加熱去雜蛋白將提取液于水浴中迅速加熱至80-90℃，保持12-18分鐘，迅速冷卻至10℃以下，離心除去沉淀，收集清液，4、丙酮沉淀清液冷至4℃，加入4-6倍體積的-8--12℃丙酮于-8--12℃放置3-5小時，過濾收集沉淀，真空干燥得丙酮粉，5、分段鹽析將丙酮粉溶于PH6.8-7.2磷酸鹽緩沖液，使每毫升含蛋白質(zhì)23-28毫克，加入PH6.8-7.2的飽和硫酸銨溶液使達23-28％飽和度，離心除去沉淀，上清液調(diào)PH3.8-4.2，加硫酸銨使飽和度達48-52％，離心收集鹽析物，6、脫鹽、干燥鹽析物用冷含水丙酮反復(fù)重結(jié)晶脫鹽，至檢查無硫酸鹽后，冷丙酮洗1-3次，次乙醚洗1-3次，抽干，真空干燥，
7、超濾將脫鹽干粉溶于生理鹽水并調(diào)PH7.0-7.5超濾，得超濾液，8、制劑將超濾液無菌灌裝于安瓿瓶中，熔封得所需成品。
本發(fā)明的制造方法操作簡單，適于大批量生產(chǎn)，采用加熱去蛋白工序使蛋白凝固較完全，易于除去；利用冷含丙酮對鹽析物進行重結(jié)晶脫鹽，大大縮短時間，減少了污染機會。因而用本發(fā)明方法制造的海貍獺醫(yī)藥胸腺素注射液活性高，無毒性，無熱源，臨床應(yīng)用安全有效。
下面是本發(fā)明的非限定性實施例在宰殺后的海貍獺身上提取新鮮胸腺，將新鮮胸腺除去脂肪，切成碎塊置于高速組織搗碎機內(nèi)，按每公斤胸腺加3升生理鹽水，搗碎5分鐘使成勻漿，冷凍離心機離心3000轉(zhuǎn)/分、10分鐘得提取液，將提取液于水浴中迅速加熱至85℃，保持15分鐘，迅速冷卻至10℃以下，離心除去沉淀，收集清液，清液冷至4℃，加入5倍體積的-10℃丙酮于-10℃放置4小時，過濾收集沉淀，真空干燥得丙酮粉，將丙酮粉溶于PH7.0磷酸鹽緩沖液，使每毫升含蛋白質(zhì)25毫克，加入PH7.0的飽和硫酸銨溶液使達25％飽和度，離心除去沉淀，上清液調(diào)PH4.0，加硫酸銨使飽和度達50％，離心收集鹽析物，鹽析物用冷含水丙酮反復(fù)重結(jié)晶脫鹽，至檢查無硫酸鹽后，冷丙酮洗2次，次乙醚洗2次，抽干，真空干燥，將脫鹽干粉溶于生理鹽水并調(diào)PH7.2超濾，得超濾液，將超濾液無菌灌裝于2毫升安瓿瓶中，熔封得所需的海貍獺醫(yī)藥胸腺素注射液成品。
用本發(fā)明制得的海貍獺醫(yī)藥胸腺素注射液對25位病人臨床試驗，對不同病種肌注或皮下注射5-10毫升，每周兩次，類風濕關(guān)節(jié)炎有效率79％，重癥肌無力為75％。對慢性乙型肝炎患者，隔日1次注射，每次注射10毫克持續(xù)現(xiàn)兩個月，肝功能恢復(fù)正常，常見癥狀消失，對病毒性肝炎的總有效率80％以上。
權(quán)利要求
1.一種海貍獺醫(yī)藥胸腺素注射液，其特征在于是從海貍獺胸腺提取的一簇多肽類物質(zhì)，其胸腺素透析物活性高，其分子量小于10000，主要成分分子量小于6000。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海貍獺醫(yī)藥胸腺素注射液，其特征在于該注射液胸腺素多肽含量7-10毫克/毫升，活性測定E-玫瑰花結(jié)平均值25-28％，收率7-10克胸腺素/千克。
3.一種制造權(quán)利要求1所述的海貍獺醫(yī)藥胸腺素注射液的方法包括以下工藝過程(1)提取胸腺在宰殺后的海貍獺身上提取新鮮胸腺，(2)勻漿將新鮮胸腺除脂肪，切成碎塊置于高速組織搗碎機內(nèi)，按每公斤胸腺加2-4升生理鹽水，搗碎3-7分鐘使成勻漿，冷凍離心機離心2000-4000轉(zhuǎn)/分、7-13分鐘得提取液，(3)加熱去雜蛋白將提取液于水浴中迅速加熱至8-90℃，保持12-18分鐘，迅速冷卻至10℃以下，離心除去沉淀，收集清液，(4)丙酮沉淀清液冷至4℃，加入4-6倍體積的-8--12℃丙酮于-8--12℃放置3-5小時，過濾收集沉淀，真空干燥得丙酮粉，(5)分段鹽析將丙酮粉溶于PH6.8-7.2磷酸鹽緩沖液，使每毫升含蛋白質(zhì)23-28毫克，加入PH6.8-7.2的飽和硫酸銨溶液使達23-28％飽和度，離心除去沉淀，上清液調(diào)PH3.8-4.2，加硫酸銨使飽和度達48-52％，離心收集鹽析物，(6)脫鹽、干燥鹽析物用冷含水丙酮反復(fù)重結(jié)晶脫鹽，至檢查無硫酸鹽后，冷丙酮洗1-3次，次乙醚洗1-3次，抽干，真空干燥，(7)超濾將脫鹽干粉溶于生理鹽水并調(diào)PH7.0-7.5超濾，得超濾液，(8)制劑將超濾液無菌灌裝于安瓿瓶中，熔封得所需成品。
全文摘要
本發(fā)明屬于含來自哺育動物胸腺的醫(yī)藥用品技術(shù)領(lǐng)域,涉及一種海貍獺醫(yī)藥胸腺素注射液。海貍獺醫(yī)藥胸腺素注射液,是從海貍獺胸腺提取的一簇多肽類物質(zhì),其胸腺素透析物活性高,其分子量小于10000,主要成分分子量小于6000。胸腺素多肽含量7－10毫克/毫升,活性測定E－玫瑰花結(jié)平均值25－28%,收率7－10克胸腺素/千克。其制造方法包括提取胸腺、勻漿、加熱去雜蛋白、丙酮沉淀、分段鹽析、脫鹽、干燥、超濾、制劑。
文檔編號A61K38/32GK1362262SQ0110680
公開日2002年8月7日 申請日期2001年1月3日 優(yōu)先權(quán)日2001年1月3日
發(fā)明者康夢松, 郭賽容 申請人:徐禮貴